Karakterisasi Eksperimental Langsung Kation Glikosil Dengan

Spektroskopi Ion Infra Merah

Abstrak :
Kation glikosil adalah zat perantara yang penting terbentuk selama glikosilasi enzimatik
dan kimia. Reaktivitas tinggi intrinsik dan masa pakai yang singkat dari kation glikosil,
membuatnya sangat menantang untuk dikarakterisasi dengan teknik spektroskopi. Pada jurnal ini
dilaporkan penggunaan tumbukan disosiasi tandem massa spektrometri untuk menghasilkan
kation glikosil dalam fase gas, diikuti oleh spektroskopi ion infra merah menggunakan laser
elektron bebas infra merah FELIX. Spektrum IR yang diamati secara eksperimental
dibandingkan dengan spektra penghitungan DFT yang memungkinkan penjelasan struktur terinci
dari ion glikosil oksokarbenium dan dioksolenium yang sulit dipahami.

Pembahasan :
Tantangan utama dalam sintesis oligosakarida kimia adalah sintesis stereoselektif dari
ikatan glikosidik. Ikatan glikosidik yang menghubungkan monosakarida dapat ada sebagai
diastereomer α atau β. Pendekatan yang paling umum untuk menyiapkan ikatan glikosidik secara
kimia adalah melalui reaksi substitusi nukleofilik antara donor glikosil yang membawa gugus
anomerik dan akseptor glikosil yang mengandung alkohol nukleofilik. Mekanisme glikosilasi
paling baik digambarkan sebagai kontinum antara jalur reaksi SN1 dan SN2.

Penggunaan disosiasi tumbukan untuk menghasilkan kation glikosil diikuti oleh

karakterisasi menggunakan spektroskopi ion infra merah (IR). Electrospray ionization (ESI) dari
empat donor glikosil digunakan untuk membentuk ion induk yang terfragmentasi menggunakan
collision induced dissociation (CID). Spektra IR menunjukkan pita getaran diagnostik tertentu
yang memungkinkan penugasan ion oksokarbenium dan dioksolenium.

Pada jurnal ini, disebutkan bahwa mereka mensintesis donor mannosil 1-4 sebagai
substrat, dan eter benzil yang umum digunakan digantikan oleh metil eter untuk menghilangkan
sinyal IR yang dihasilkan dari sistem aromatik. Thioglikosida dipilih karena sering digunakan
untuk studi pembentukan dan fragmentasi kation glikosil menggunakan CID.

Ionisasi donor mannosil 1 dicapai dengan menggunakan ESI yang menghasilkan ion
induk [M+NH4]+ dengan rasio m/z 458. Isolasi berikutnya dan CID menghasilkan rasio m/z 331
lalu dikarakterisasi dengan spektroskopi ion IR menggunakan laser FELIX yang beroperasi pada
kisaran 700-1850 cm–1. Untuk mengeksplorasi sifat umum dari pendekatan ini, donor gluko dan
galaktosida juga disiapkan, difragmentasi, dan dikarakterisasi dengan spektroskopi ion IR yang
menghasilkan spektra IR yang serupa namun berbeda. Untuk memperoleh informasi struktural
tentang ion yang terbentuk, spektroskopi ion IR dikombinasikan dengan perhitungan ab initio
tingkat tinggi. Spektrum IR yang dihitung dari struktur berenergi rendah terpilih dibandingkan
dengan spektra IR eksperimental structural.

Optimalisasi awal perhitungan DFT pada tingkat B3LYP/6-31++G (d,p), dengan energi
relatif ditentukan menggunakan MP2/6-311++G (2d, 2p), terbukti memberikan spektrum yang
paling representatif. Donor yang dilindungi asetil menghasilkan ion dioksolenium. Spektrum IR
eksperimental dibandingkan dengan spektrum IR yang dihitung dari isomer energi terendah dari
empat struktur yang berbeda (C-2, C-3, C-4, atau C-6 asetil ester dipertimbangkan bersama
dengan ion oksokarbenium yang tidak distabilkan) dengan m/z = 331. Struktur energi terendah
dihasilkan dari C-2 diikuti oleh C-3 (5,8 kJ/mol) sedangkan C-4/C-6 menunjukkan signifikan
energy yang lebih tinggi (34,2-40,3 kJ/mol). Berdasarkan energi itu sendiri, tiga struktur terakhir
tidak mungkin ada. Peregangan C=O+ yang dihitung dari ion oksokarbenium akan muncul pada
1616 cm-1 , namun sinyal ini tidak ada dalam spektrum yang diukur. Partisipasi asetil ester dapat
ditetapkan dengan mode peregangan O-C=O+ yang dihitung (~1540 cm-1) dan mode peregangan
C-C (~1495 cm-1) dari ion dioksolenium, sedangkan getaran peregangan C=O dari nonpartisipasi
ester asetil ditemukan pada 1725-1800 cm-1 . Peregangan C-6 asetil C=O (1725 cm-1) berbeda
dari ester lain dan terlihat jelas dalam spektrum IR yang diukur. Perhitungan menunjukkan
bahwa tanda tangan ini hilang pada partisipasi asetil C-6 sehingga tidak termasuk. Ion
dioksolenium yang dihasilkan dari partisipasi ester C-2 (1a) atau C-3 (1b) keduanya
menghasilkan struktur energi rendah. Namun, ketika membandingkan puncak yang dihitung
yang berasal dari peregangan O–C=O + dan peregangan C-C dari ion dioksolenium (1538 dan
1496 cm-1), jelas bahwa partisipasi C-2 jauh lebih baik dengan eksperimen. Aktivasi 1 mengarah
ke ion C-2-dioksolenium.

Selanjutnya, karakterisasi ion oksokarbenium menggunakan donor mannosil 2. ESI lalu

diikuti oleh CID menghasilkan ion fragmen dengan m/z = 219. Perhitungan DFT untuk ion
oksokarbenium menghasilkan dua keluarga struktural utama yang berbeda dalam energy
sebesar ~13 kJ/mol. Hal ini di konformasi dari cincin piranosa 3E (2a) and 4H3 (2b). Peregangan
C=O sesuai dengan ion oksokarbenium C-1 (1609 cm-1) diamati pada 1585 cm-1. Spektrum yang
dihitung dari konformer 3E (2a) dan 4 H 3 (2b) sangat mirip, tetapi sinyal tambahan pada 1058
cm-1 (C-3 - C-4 dan C-2 - O-2) diprediksi untuk konformer 4 H 3 tidak ada dalam spektrum yang
diukur. Dalam konformasi 3E yang dihitung, interaksi C-3 - C-4 dan C-2 - O-2 yang sama
dihitung pada bilangan gelombang rendah (991 cm-1) dan lebih sesuai dengan spektrum yang
diukur. 4 H 3 memiliki energi yang lebih tinggi, ini menunjukkan bahwa 3E adalah konformer
yang disukai. Data ini menunjukkan bahwa ion oxocarbenium dapat dihasilkan dan
dikarakterisasi pada tingkat menggunakan puncak diagnostik yang menunjukkan konformasi
piranosa.

Donor ester asam mannuronat 4 yang mengandung ester C-4 dianalisis. Spektrum IR dari
ion terisolasi dari 4 diperoleh dan menghasilkan spektrum yang baik. Perhitungan DFT awal
menunjuk ke arah struktur 4a yang dihasilkan dari partisipasi ester C-6 sebagaimana diamati
dengan 3. Semua puncak perhitungan utama seperti pembengkokan C-H, C-6 O-C=O+, dan 4-Ac
C=O dapat ditetapkan dengan baik antara spektrum IR eksperimental dan teoritis. Namun,
puncak yang berbeda dalam spektrum yang diukur diamati pada 1557 dan 1267 cm-1 tidak
diperhitungkan dengan perhitungan. Spektrum yang dihitung dari isomer 4b dengan partisipasi
asetil C-4 menunjukkan aktivitas yang jelas pada frekuensi getaran ini. Puncak karakteristik
paling banyak dihitung pada 1554 cm-1 (peregangan 4-Ac, O-C=O+) sangat diagnostik untuk
partisipasi asetil C-4, sedangkan puncak pada 1261 cm-1 (peregangan C-6 - OMe) termasuk
dalam metil ester yang tidak berpartisipasi. Pencampuran dari dua spektrum ini milik dua mode
partisipasi (4a dan 4b) cocok dengan spektrum yang diamati. Hasil ini menyoroti kemungkinan
untuk mengkarakterisasi campuran isomer menggunakan spektroskopi ion IR sehingga
memberikan wawasan penting dalam dinamika kation glikosil.

Kesimpulan :
Penggunaan spektrometri massa digabungkan dengan spektroskopi ion IR dan perhitungan kimia
kuantum adalah metode yang ringan dan serbaguna untuk menghasilkan dan secara struktural
mengkarakterisasi kation glikosil yang sulit dipahami dalam fase gas. Percobaan fase gas tidak
mungkin sepenuhnya mewakili struktur kation glikosil dalam larutan. Spektrum IR
menghasilkan banyak puncak diagnostic yang dapat digunakan untuk menjelaskan preferensi
konformasi serta campuran ion diokselenium isomer.