Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE

Carrera de Ingeniería en Biotecnología

Informe de laboratorio Práctica N 12

Integrantes: Leonardo Barragán, Melany Ruiz, Paul Márquez, Gabriela Sánchez

Fecha: 02/07/2018

Título: Control microbiano por métodos físicos

Palabras clave: Desinfección y esterilización microbiana.

Resumen:

En la práctica lo que se busca es demostrar el accionar de los distintos agentes físicos

utilizados en microbiología para el control de microorganismos. Es importante dicho
control debido a que estos contaminantes pueden alterar los resultados de una
investigación o aun mas drástico pueden ser patógenos y causar terribles enfermedades
a las personas que trabajan en el laboratorio. Para esta práctica se inocularon
microorganismos en cajas Petri y en tubos de ensayo para las distintas pruebas de
control físico donde se recalcó en la efectividad de dichos agentes en el control
microbiano como por ejemplo el uso de la temperatura y la filtración. Para concluir, el
conocer el microorganismo contaminante me facilita el aplicar un correcto método
físico de control claro esta de que se debe conocer previamente dichos agentes físicos.

Introducción

Antecedentes

La capacidad de controlar las poblaciones microbianas en objetos inanimados,

como utensilios de alimentación o instrumentos quirúrgicos tiene una
importancia práctica considerable (Prescott, 2009). Un ejemplo de esto es el
control de microorganismos en frutas y hortalizas, Para asegurar la calidad e
inocuidad de las frutas y hortalizas es necesario minimizar la contaminación de
los productos con microorganismos patógenos que puedan afectar la salud del
consumidor (Garmendia, 2006).

Existen varios métodos para reducir la flora superficial de frutas y hortalizas.

Cada método tiene ventajas y desventajas dependiendo del tipo de producto y
del proceso, entre los métodos físicos podemos mencionar la remoción
mecánica, los tratamientos térmicos, y la irradiación (Garmendia, 2006).
Justificación del problema de estudio

La seguridad de los trabajadores debe ser una preocupación principal en todos

los laboratorios de microbiología. A veces, es necesario eliminar todos los
microorganismos de un objeto, mientras que en otras situaciones puede ser
necesario sólo destruir parcialmente la población microbiana (Prescott, 2009).

Marco teórico

La esterilización es el proceso por el que todas las células vivas, esporas viables,
virus y viroides son destruidos o eliminados de un objeto o hábitat. Por el
contrario, la desinfección consiste en la destrucción, inhibición o eliminación de
por lo menos los microorganismos que pueden causar enfermedad (Prescott,
2009).
Los cuatro agentes empleados con más frecuencia como agentes físicos son:
calor, bajas temperaturas, filtración y radiación.

Calor
El calor húmedo destruye rápidamente los virus, las bacterias y los hongos, este
método se usa para desinfectar agua potable y objetos que no se dañen por el
agua, pero no esteriliza (Prescott, 2009).

Muchos objetos se esterilizan mejor en ausencia de agua mediante esterilización

por calor seco. La destrucción de microorganismos se produce debido a la
oxidación de los constituyentes celulares y la desnaturalización de proteínas
(Prescott, 2009).

Bajas temperaturas
La congelación es un buen proceso para la conservación de microorganismos
por largos períodos de tiempo si se realiza apropiadamente, por otro lado la
refrigeración disminuye de gran manera el crecimiento microbiano pero no lo
detiene en su totalidad (Prescott, 2009).

Filtración

Sirve para reducir y a veces esterilizar la población microbiana en soluciones

termo sensibles. El filtro no elimina a los microorganismos tan solo los retiene;
existen filtros de profundidad y filtros de membrana (Prescott, 2009).

Radiación
La radiación ultravioleta (UV) de aproximadamente 260 nm es bastante letal,
pero no atraviesa eficazmente el cristal, las películas de suciedad, el agua ni
otras sustancias. Por otra parte, la radiación ionizante es un agente esterilizante
excelente y penetra en los objetos. Destruirá endosporas bacterianas y células
vegetativas, aunque, la radiación ionizante no es siempre tan efectiva frente a
virus (Prescott, 2009).
 Objetivos

General:
Demostrar la acción de los distintos agentes físicos utilizados para el control
microbiano.

Específico:
Determinar las ventajas y desventajas de cada método empleado.
Evaluar los resultados obtenidos de crecimiento microbiano.

Hipótesis
La incineración es un método de control microbiano eficiente.

Materiales y métodos

La práctica de desarrolló en el laboratorio de microbiología de la Universidad de

las Fuerzas Armadas y estuvo a cargo de la profesora Alma Koch el 19 de julio
del 2018.
Para la primera actividad se inoculó el microorganismo en tubos de ensayo con
caldo nutriente, después de eso se colocó cada tubo a una distinta temperatura
para si incubación. Las temperaturas fueron de 4C, 21C, 35C, 50C. Para la
segunda actividad se hizo referencia al punto termal de muerte del
microorganismo en donde se inoculó en cajas Petri después de intervalos de 10
minutos a una temperatura constante. Para la tercera actividad se utilizo un filtro
milipore acoplado a una jeringuilla donde se recogió el filtrado y se lo esparció
en una caja Petri. La cuarta actividad es la de incineración donde se esteriliza el
asa antes de una segunda siembre bacteriana demostrando así la eficacia de este
método.

Resultados

En la imagen no se observa crecimiento de forma

macroscópica.

Figura 1. Cultivo de bacteria a 4C

En la imagen se observa crecimiento
bacteriano ya que el caldo nutriente está mas
turbio.

Figura 2. Cultivo de bacteria a 21C

Se observa de igual forma crecimiento

bacteriano ya que la solución esta turbia.

Figura 3. Cultivo de bacteria a 35C

Se observa crecimiento bacteriano en toda

la superficie del medio de cultivo en
forma de colonias

Figura 4. Cultivo de bacteria después de

10 min

Se observa crecimiento masivo en la

superficie de todo el medio de cultivo

Figura 5. Cultivo de bacteria después de

20 min
Se observa crecimiento bacteriano en
colonias y crecimiento masivo en la parte
central superior de la caja.

Figura 6. Cultivo bacteriano previo a la

filtración

No se observa crecimiento alguno después

de la filtración

Figura 7. Cultivo bacteriano después de la

filtración con un filtro milipore.

Se observa crecimiento bacteriano en la mitad

izquierda de la caja Petri y no se observa
crecimiento al lado derecho donde se utilizó el
asa bacteriana después de la incineración.

Figura 7. Cultico bacteriano

(incineración del asa bacteriana)
Discusión

Con los resultados obtenidos podemos afirmar que los métodos de control microbiano
físicos son eficientes y esta claro que cada condición puede cambiar de acuerdo al
microorganismo contaminante.
Cuando se evalúa la acción de un método desinfectante en general se determina la
reducción de la carga microbiana alcanzada con el tratamiento. Esta reducción se puede
expresar en porcentaje, en órdenes o unidades logarítmicas (log) (Garmendia, 2006).

En cuestión a lo relacionado con material de laboratorio la esterilización de dichos

materiales debe ser correcta ya que al momento de trabajar en alguna investigación los
resultados pueden verse alterados siendo erróneas y para nada confiables. Así se lo
afirma en “Metodología de esterilización en el laboratorio microbiológico” el trabajo de
laboratorio en microbiología requiere siempre ciertos mecanismos de control de las
poblaciones microbianas. La esterilización es uno de los mecanismos más utilizados y
las técnicas de esterilización aplicables dependen directamente de las características del
material de trabajo o de los medios que se vayan a tratar (Pérez, 2010).

Por otro lado, se da correctamente el control microbiano en materiales o superficies

capaces de soportar un incremento de la temperatura, pero en productos destinados al
consumo humano el control de microorganismos aumenta en su complejidad. Así lo
menciona Gabriela Garmendia haciendo referencia a que la mejor forma de lograr un
producto con baja carga microbiana es evitar que el mismo se contamine, siguiendo
buenas prácticas agrícolas previo y posterior a la cosecha y no depender de medidas
correctivas de descontaminación (2006).

Conclusiones
En esta práctica se consolidaron los conocimiento en relación al control microbiano por
métodos físicos y la eficiencia de los mismo al momento de trabajar en el laboratorio.

Se logró demostrar y reproducir los diferentes métodos físicos de control microbiano

aunque el la segunda actividad seguía existiendo crecimiento bacteriano, es posible que
haya faltado dejar la muestra unos 10 minutos mas para determinar su punto termal de
muerte.

La incineración es un método de calor seco de gran utilidad y sobre todo altamente

efectivo, el cual es utilizado el momento de sembrar bacterias en los distintos medios de
cultivo.

Bibliografía

Garmendia, G., & Vero, S. (2006). Métodos para la desinfección de frutas y

hortalizas. Horticultura, 197, 18-27.

Pérez-Uz, B., de Silóniz, M. I., Torralba, B., & Vázquez, C. (2011). Metodología de
esterilización en el laboratorio microbiológico. Reduca (Biología), 3(5).

Prescott, H. (2009). Microbiología (7ma ed.). Mc Graw Hill.