International Journal of

Ilmu molekuler

Laporan kasus

HPV Virus transkripsi Status Assessment dalam Kasus

sinonasal Carcinoma

Gennaro Ilardi 1, † ID . Daniela Russo 1, †, Silvia Varricchio 1, Giovanni Salzano 2,

Giovanni Dell'Aversana Orabona 2, Virginia Napolitano 1, Rosa Maria Di Crescenzo 1,
Alessandra Borzillo 1, Francesco Martino 1, Francesco Merolla 3, * ID . Massimo Mascolo 1
dan Stefania Staibano 1
1 Departemen Lanjutan Ilmu Biomedis, Bagian Patologi, University of Naples “Federico II”,

80.131 Naples, Italia; gennaro.ilardi@unina.it (GI); danielarusso83@yahoo.it (DR); silvia.varricchio@gmail.com (SV); virnap87@hotmail.it
(VN); rosamariadicrescenzo@gmail.com (RMDC); alessandretta82@yahoo.it (AB); f_martino@live.it (FM); mmascol@gmail.com (MM);
staibano@unina.it (SS)

2 Departemen Neuroscience dan Reproduksi dan Ilmu Odontostomatological, Unit Operative dari

Maxillo-Facial Bedah, University of Naples “Federico II”, 80.131 Naples, Italia; giovannisalzanomd@gmail.com (GS);
giovanni.dellaversanaorabona@unina.it (GDO)
3 Departemen Kedokteran dan Ilmu Kesehatan “V. Tiberio”, Universitas Molise, 86100 Campobasso, Italia

* Korespondensi: francesco.merolla@unimol.it; Tel .: + 39-0874-404749 † penulis ini sama-sama

memberikan kontribusi untuk pekerjaan ini.

Diterima: 12 Februari 2018; Diterima: 15 Maret 2018; Diterbitkan: 16 Maret 2018

Abstrak: Human Papilloma Virus (HPV) dapat memainkan peran penyebab dalam pengembangan keganasan saluran sinonasal.
Bahkan, HPV mungkin fi kan agen penyebab paling signifikan terlibat dalam tumorigenesis sinonasal dan terlibat dalam sebanyak
21% dari karsinoma sinonasal. Untuk saat ini, tidak ada definitif, dapat diandalkan dan hemat biaya, tes diagnostik disetujui oleh
FDA untuk penentuan tegas status HPV pada kanker kepala dan leher. Kami mengikuti sebuah algoritma yang lengkap untuk
benar menguji infeksi HPV, termasuk pendekatan berurutan dengan p16INK4a IHC, virus genotipe DNA dan hibridisasi in situ
untuk E6 / E7 mRNA. Di sini, kami melaporkan kasus karsinoma sinonasal dengan hasil sumbang menggunakan tes uji HPV.
Tumor kami menjelaskan menunjukkan immunoreactivity tidak teratur untuk p16INK4a, dan itu dinyatakan positif HPV DNA;
namun, itu negatif untuk HR-HPV mRNA. Kami membahas arti yang mungkin dari perbedaan ini. Ini akan dianjurkan untuk
menguji HPV Status transkripsi karsinoma sinonasal secara rutin diagnostik, tidak hanya oleh p16INK4a IHC assay, tetapi juga
oleh HPV genotip DNA dan penilaian SDM-HPV mRNA.

Kata kunci: HPV; karsinoma sinonasal; RNAscope ®; INNO-Lipa; p16INK4a

1. Perkenalan

karsinoma sel skuamosa (SCC) adalah bentuk paling umum dari neoplasia ganas di saluran sinonasal, faktor risiko terbesar
dalam beberapa menjadi tembakau merokok, diikuti oleh paparan pelarut, debu kayu, debu kulit dan berisiko tinggi Human
Papilloma Virus (HPV) infeksi.
Pada tahun 2017 WHO (Organisasi Kesehatan Dunia) memperbarui fi kasi klasi Kepala dan Leher Tumor, juga merevisi bab
tentang tumor dari rongga hidung, sinus paranasal dan dasar tengkorak, memperkenalkan entitas baru seperti karsinoma sinonasal
terkait HPV [ 1 ].
Sinonasal karsinoma sel skuamosa yang lebih sub-diklasifikasikan ke dalam keratinisasi dan non-keratinisasi karsinoma sel
skuamosa (KSCC vs NKSCC).
Sinonasal KSCC dan NKSCC menunjukkan perbedaan yang signifikan dalam karakteristik klinis, patologis dan molekul
mereka, dan karena itu, pengakuan mereka relevan [ 1 ]. transcriptionally

Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 883; doi: 10,3390 / ijms19030883 www.mdpi.com/journal/ijms
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 883 2 dari 9

HPV risiko tinggi aktif lebih sering terdeteksi di NKSCC daripada di KSCC (35-50% dan 0-15%, masing-masing) [ 2 - 4 ], Meskipun
klinis signifikansi dari HPV positif di SCC sinonasal belum meyakinkan dinilai sebagai yang telah selama orofaring [ 5 . 6 ]. Ekspresi
gen awal HPV risiko tinggi, E1 dan E2, dapat menekan transformasi HPV berisiko tinggi tergantung [ 7 ]. Telah terbukti bahwa
ekspresi E2 dari episomes utuh dapat mengatur ekspresi produk gen E6 / E7 dari genom virus terintegrasi melalui di trans mekanisme
[ 8 . 9 ]. E2 gangguan gen, biasanya terjadi dalam kasus integrasi virus dalam genom sel inang, menghasilkan berlebih dari produk
gen E6 / E7 [ 10 . 11 ].

Beberapa penulis baru-baru ini menunjukkan bahwa saluran sinonasal adalah situs anatomi kedua untuk HR-HPV tumor yang
berkaitan dengan muncul, lebih dari seperlima dari yang menunjukkan HPV transcriptionally aktif [ 12 - 15 ].

Beberapa laporan tampaknya mendukung hipotesis dari hasil yang lebih baik untuk karsinoma sinonasal terkait HPV [ 5 . 16 . 17 ]

Namun demikian, ada kebutuhan mendesak untuk mengumpulkan lebih banyak data untuk memilah peran infeksi HR-HPV pada
perilaku biologis SCC sinonasal.
Beberapa tes HPV saat ini tersedia, tetapi tidak menawarkan sensitivitas optimal dan tingkat spesifisitas untuk deteksi HPV
bila digunakan sebagai tes tunggal [ 18 ]. Untuk menguji status infeksi HPV pada tumor padat selain SCC serviks uterus dengan
benar, akan dianjurkan untuk mengikuti algoritma yang lebih lengkap termasuk pendekatan berurutan dengan p16INK4a IHC, virus
genotipe DNA dan insitu hibridisasi untuk E6 / E7 mRNA [ 19 ].

Di sini, kami melaporkan kasus karsinoma sinonasal dengan hasil sumbang di tes tes HPV. Tumor kami menjelaskan
menunjukkan immunoreactivity tidak teratur untuk p16INK4a, dan itu mengakibatkan positif bagi HPV DNA; Namun demikian, itu
negatif untuk HR-HPV mRNA. Kami membahas arti yang mungkin dari perbedaan ini.

2. Presentasi Kasus

Seorang pasien pria berusia 63 tahun dengan riwayat medis dari obstruksi lengkap dan permanen dari rongga hidung kiri untuk 1 tahun lalu, di mana ia menerima

computed tomography bebas kontras ditingkatkan (CT) scan, yang tidak diagnostik , dan tidak menerima perawatan medis yang efektif, disajikan ke ruang gawat darurat untuk

tiba-tiba kesulitan untuk bernafas. Pasien dikirim ke maksilofasial Bedah Departemen, di mana ia mengungkapkan bahwa ia juga telah melakukan biopsi sebelumnya massa

hidung yang menerima diagnosis histologis papilloma sinonasal yang dicurigai perubahan sitopatik terkait virus. Pada pemeriksaan, edema dari daerah periorbital kiri

terdeteksi, dengan exophthalmos dari mata kiri dengan keterbatasan visual lapangan di kuadran atas dan luar. The rhinoskopi anterior mengungkapkan mukosa tersipu, tidak

ada aliran melalui rongga hidung sebelah kiri, dan deviasi kanan cembung septum hidung. Pasien tidak merujuk Hiposmia. Karena temuan ini, pasien menjalani

kontras-ditingkatkan magnetic resonance imaging (MRI) scan. MRI scan con fi rmed kehadiran lesi menempati rongga hidung kiri, terkait dengan erosi menggusur dinding

tulang sekitarnya, memperluas lateral ke dalam sinus maksilaris kiri, superior dalam konteks sel ethmoid, posterior mencapai sinus sphenoid, supero -laterally menonjol dalam

rongga orbitary kiri, di infiltratif otot rektus lateral dan inferior dan menggusur saraf optik ke atas. Lesi ini tidak teratur ditingkatkan pada pemberian media kontras. Temuan ini

menyarankan diagnosis dari neoplasia ganas. dan deviasi kanan cembung septum hidung. Pasien tidak merujuk Hiposmia. Karena temuan ini, pasien menjalani

kontras-ditingkatkan magnetic resonance imaging (MRI) scan. MRI scan con fi rmed kehadiran lesi menempati rongga hidung kiri, terkait dengan erosi menggusur dinding

tulang sekitarnya, memperluas lateral ke dalam sinus maksilaris kiri, superior dalam konteks sel ethmoid, posterior mencapai sinus sphenoid, supero -laterally menonjol dalam

rongga orbitary kiri, di infiltratif otot rektus lateral dan inferior dan menggusur saraf optik ke atas. Lesi ini tidak teratur ditingkatkan pada pemberian media kontras. Temuan ini

menyarankan diagnosis dari neoplasia ganas. dan deviasi kanan cembung septum hidung. Pasien tidak merujuk Hiposmia. Karena temuan ini, pasien menjalani

kontras-ditingkatkan magnetic resonance imaging (MRI) scan. MRI scan con fi rmed kehadiran lesi menempati rongga hidung kiri, terkait dengan erosi menggusur dinding

tulang sekitarnya, memperluas lateral ke dalam sinus maksilaris kiri, superior dalam konteks sel ethmoid, posterior mencapai sinus sphenoid, supero -laterally menonjol dalam

rongga orbitary kiri, di infiltratif otot rektus lateral dan inferior dan menggusur saraf optik ke atas. Lesi ini tidak teratur ditingkatkan pada pemberian media kontras. Temuan ini menyarankan diagnosis dari neoplasia ganas. pasien

lesi itu dibiopsi, dan laporan patologi menyoroti kehadiran karsinoma in situ. Pasien menjalani operasi untuk reseksi dengan
hemimaxillectomy kiri, turbinectomy, orbitae exenteratio dan rekonstruksi selanjutnya dengan duniawi ap fl otot dan aposisi
implan isian orbital.

Pada pemeriksaan kotor spesimen, kami mengamati nodular, lesi keputihan konsistensi keras-elastis, berukuran 4 × 3,5 cm
pada sumbu dua utama, makroskopik menduduki sinus maksilaris, dan infiltratif fl lantai orbital (Gambar 1 Sebuah). Dekat dengan
lesi, formasi polypoid dari
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, x UNTUK PEER REVIEW 3 dari 9
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 883 3 dari 9

sinus, dan infiltrasi lantai orbital (Gambar 1a). Dekat dengan lesi, formasi polypoid dari 4 × 4 cm dari penampilan gembur terdeteksi.
Sebulan
4 × 4 cm setelah operasi, pasien
dari penampilan gemburmeninggal
terdeteksi.karena komplikasi
Sebulan pasca-operasi.
setelah operasi, pasien meninggal karena komplikasi pasca-operasi.

Gambar 1. pemeriksaan dan H dan E kotor noda: ( Sebuah) Pemeriksaan kotor hemimaxillectomy kiri dengan turbinectomy dan
di infiltratif fllantai
exenteratio orbitae mengungkapkan lesi nodular makroskopik menduduki sinus maksilaris dan menyusup oor orbital;
orbital;((b,
b,c,
c,d)
d)H-dan-E-bernoda
H-dan-E-bernoda
bagian jaringan
bagian jaringan menunjukkan
menunjukkan diferensiasi
diferensiasi buruk,
buruk, infiltrasi
di infiltratif karsinoma
karsinoma (b:(b:
50 50 ×; 100
×; c: c: 100 ×; 200
×; d: ×).×).
d: 200

3. Hasil

H-dan-E-bernoda bagian jaringan menunjukkan diferensiasi buruk, infiltrasi karsinoma,

pada karsinoma yang melibatkan
infiltratif, tulangtulang
yang melibatkan rahang atas
rahang
dan
atas lantai
dan florbital, mencapai
oor orbital, perbatasan
mencapai otot lurik
perbatasan orbital
otot lurik (Gambar
orbital 1b-d).
(Gambar SarafSaraf
1 b-d). dan mata jaringan
dan mata optik optik
jaringan bebasbebas
dari invasi neoplastik.
dari invasi
Lesi polipoidLesi
neoplastik. kedua menunjukkan
polipoid daerah multifokal
kedua menunjukkan daerahkarsinoma
multifokal in situ, hanya
karsinoma focally
in situ, invasif
hanya (Gambar
focally 2a,
invasif b). IHC 2
(Gambar menunjukkan
a, b). IHC tidak
teratur, “ditambal”
menunjukkan tidakpositif untuk
teratur, p16INK4a,
“ditambal” seperti
positif untukImunostaining tidakImunostaining
p16INK4a, seperti selalu merata tidak
di seluruh
selalumassa tumor.
merata Secara
di seluruh khusus,
massa sinyal
tumor.
IHC darikhusus,
Secara p16INK4a adalah
sinyal IHC meyakinkan positif
dari p16INK4a dengan
adalah pewarnaan
meyakinkan nuklir
positif dan sitoplasma
dengan pewarnaanhanya
nuklir di
danbidang karsinoma
sitoplasma indi
hanya situ, tapi tidak
bidang
di infiltrasi yang
karsinoma (Gambar
in situ, 2c). dalam
tetapi tidak Lesi terbukti positif untuk
orang-orang kehadiran
di infiltratif HPV2 16
(Gambar c). DNA pada genotip
Lesi terbukti positif DNA
untukvirus denganHPV
kehadiran INNO-Lipa
16 DNAassay.
pada
Di sisi lain,
genotip DNA mRNA
virus ISH assay
dengan tidak mengidentifikasi
INNO-Lipa E6 / E7
assay. Sebaliknya, mRNA
mRNA (Gambar
ISH 2d). Jadi,
assay tidak kami menyimpulkan
mengidentifikasi bahwa(Gambar
E6 / E7 mRNA tumor 2 d). Jadi,
memendam infeksi HPV
kami menyimpulkan aktiftumor
bahwa non-transkripsi.
memendam infeksi HPV aktif non-transkripsi.
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 883 4 dari 9
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, x UNTUK PEER REVIEW 4 dari 9

Gambar
Gambar 2.
2. (a,
(a, b)
b) The
The dijelaskan
dijelaskan lesi
lesi polipoid
polipoid kedua
kedua menunjukkan
menunjukkan daerah
daerah multifokal
multifokal karsinoma
karsinoma in
in situ,
situ, hanya
hanya focally
focally invasif
invasif (a: 50 ×;
(a: 50 ×; b:
b:
100 ×);
100 ×); (( c)
c) IHC
IHC sinyal
sinyal p16INK4a (100 ×);
p16INK4a (100 ×); (( d)
d) mRNA
mRNA ISH
ISH assay
assay negatif
negatif untuk
untuk E6
E6 // E7
E7 mRNA (200 ×).
mRNA (200 ×).

4. Diskusi
4. Diskusi

Untuk saat
Untuk saat ini,
ini, FDA
FDA belum
belum menyetujui
menyetujui tes
tes diagnostik
diagnostikyang
yanghandal
handaluntuk
untukmenilai
menilaistatus
statusHPV
HPVpada
padakanker
kankerkepala
kepaladan
danleher.
leher.
teknik yang
teknik yang berbeda
berbeda saat
saat ini
ini digunakan
digunakan untuk
untukmendeteksi
mendeteksiHPV
HPVpada
padatumor
tumorpadat,
padat,mulai
mulaidari
darimetode
metodespesifik
PCR spesifik, tesPCR
PCR, tes PCR
real-time, dalam
real-time, dalam hibridisasi
hibridisasi in
in situ
situ DNA
DNA (ISH)
(ISH)dan
dandeteksi
deteksiimunohistokimia
imunohistokimiabiomarker
biomarkerpengganti
pengganti(protein
(proteinp16INK4a).
p16INK4a).Karena
Karenatidak
tidak
satupun dari
satupun dari metode
metode ini
ini menawarkan
menawarkan tingkat
tingkat optimal
optimalsensitivitas
sensitivitasdan
danspesifisitas,
spesifisitas,ada
adakebutuhan
kebutuhanuntuk
untukpendekatan
pendekatanMultiTest
MultiTestyang
yang
dapat membantu
dapat membantu untuk
untuk mengungkap
mengungkap hasil
hasil sumbang
sumbang[[20].
20 ].

HPV juga
HPV juga memainkan
memainkanperan
peranpenyebab
penyebabdalam
dalampengembangan
pengembangankeganasan
keganasansaluran
saluransinonasal,
sinonasal,akuntansi
akuntansiuntuk
untuksebanyak
sebanyak21%
21%dari
dari
karsinoma sinonasal
karsinoma sinonasal[[5].
5 ].
Sebuah peran
Sebuah peran penting
penting baru-baru
baru-baru ini dianggap
ini dianggap berasal
berasal dari dariantara
perbedaan perbedaan antara HPV-aktif
tumor HPV-aktif dan HPV-aktif
dan HPVinactive tumor anatomi
terkait di situs-situs terkait di
klasik terkait

situs-situs anatomi
dengan infeksi klasikorofaring
HPV, seperti terkaitdan
dengan
serviksinfeksi
uterus. HPV,
Infeksi seperti orofaring
HPV persisten diakuidan serviks
sebagai uterus.
peristiwa Infeksi
penyebab HPV persisten
di oropharyngeal diakui sel
karsinoma sebagai
skuamosa

peristiwa penyebab
[21], dan status di oropharyngeal
HPV tumor merupakan faktorkarsinoma sel kuat
prognostik yang skuamosa [ 21 Status],
dan independen dan tumor HPV
untuk kelangsungan hidup merupakan faktor prognostik
orofaringeal Karsinoma yang
sel skuamosa kuat
(OPSCC)

dan independen
pasien untuk
[22], sementara kelangsungan
peran hidup orofaringeal
infeksi HPV di non-oropharyngeal SCCKarsinoma sel skuamosa
masih diperdebatkan (OPSCC)
[23,24]. Sampai saatpasien [ 22
ini, di luar ], Sedangkan
HPV, peranatau
tidak ada prognostik infeksi
HPV pada
prediksi non-oropharyngeal
biomarker SCC terutama
yang dapat diandalkan, masih diperdebatkan [ 23 . SCC
untuk non-orofaringeal 24 ].[25,26].
Sampai saat
tumor ini, di luar
HPV-aktif HPV,
adalah tidak
mereka ada
yang biomarker
positif untuk p16prognostik atau
imunohistokimia

prediksi
dan untukyang handal,
HPV RNA terutama
dan DNA, untukyang
sedangkan non-orofaringeal SCCuntuk
HPV-aktif yang positif [ 25HPV
. 26DNA
]. tumor HPV-aktif
dan negatif untuk adalah
HPV RNAmereka yang
[27]. Profil positif
ekspresi genuntuk p16
juga berbeda

imunohistokimia dan
dalam dua kelompok. untuk
tumor HPV RNA
HPV-negatif dandengan
ditandai DNA, ekspresi
sedangkan yang
gen yang HPV-aktif
mengontrol positifsel,
motilitas untuk DNA HPV
angiogenesis dan dan negatif untuktransisi;
epitel-mesenchymal HPV RNA [ 27 ].
semua

Ekspresi gen pro

yang menentukan fi les klinis
perilaku juga agresif
berbeda
[28].dalam dua kelompok.
tumor HPV-aktif tumor
memiliki profil HPV-negatif
ekspresi gen yangditandai dengan
secara jelas ekspresi
menunjukkan gentangan
“tanda yangHPV,”
mengontrol
didominasi oleh

motilitas
perubahansel,
gen angiogenesis
yang mengontroldan epitel-mesenchymal
siklus transisi;
sel, proliferasi, dan mitosis semua
[28]. Profil yanggen
ekspresi menentukan perilaku
tumor HPV tidak klinis agresif
aktif kekurangan "HPV [tanda
28 ].tangan"
tumor fitur
HPV-aktif
dan, oleh

memiliki
karena itu,ekspresi
lebih miripgen protumor
dengan fi lesHPV-negatif,
yang jelas meskipun
menunjukkan “tanda
beberapa tangan
perbedaan HPV,”
dapat didominasi
dideteksi, oleh
signifikansi perubahan
klinis yang masih gen
harusyang mengontrol
ditentukan [28,29]. Saat

siklus
ini, HPVsel,
DNA proliferasi,
dalam tumordan
HPVmitosis [ 28
tidak aktif ]. Ekspresi
ditafsirkan gen
sebagai pro fi lessederhana
penumpang tumor HPVtidaktidak aktif
terlibat kekurangan
dalam "HPV
perkembangan tanda
tumor. tangan"
Tomar fiturmendalilkan
et al. telah dan, oleh
karena itu, lebih
bahwa tumor mirip
HPV-aktif dengan
mungkin tumor
berasal dariHPV-negatif,
lesi HPVactive,meskipun beberapa
yang semakin perbedaan
menjadi independen dapat
dari dideteksi, E6
aksi Onkoprotein klinis
/ E7signifikansi yang
untuk proliferasi masihdan
neoplastik

harus ditentukan
perkembangan [29]. [Pembungkaman
28 . 29 ]. Saatgen
ini,E6HPVDNA
/ E7 dapat pada
terjadi tumor HPV tidak
karena fenomena aktif di
metilasi ditafsirkan
sel-sel yangsebagai penumpang
telah diperoleh sederhana
mutasi yang tidak terlibat
dapat “menggantikan”

dalam perkembangan
fungsi mereka. tumor. Tomar
Namun, mekanisme et al. telah
yang mendasari mendalilkan
akuisisi bahwa tumor
virus tumor kemerdekaan HPV-aktif
HPV-aktif mungkin
masih berasal lesi
dalam penyelidikan [29].fromHPV-aktif,
ekspresi transien yang
HPV

semakin
onkogenik menjadi independen
protein telah dari genus
dilaporkan untuk aksi E6 / E7
beta Onkoprotein
Pembungkaman untuk
gen proliferasi
E6 / E7 neoplastik
dapat terjadi dan perkembangan
karena fenomena metilasi di sel-sel[ yang
29 ]. telah
Pembungkaman
diperoleh mutasi

gen
yangE6 / E7
dapat dapat terjadi
“menggantikan” karena
fungsi fenomena
mereka. metilasi diyang
Namun, mekanisme sel-sel yang telah
mendasari akuisisidiperoleh
virus tumormutasi yang HPV-aktif
kemerdekaan dapat “menggantikan” fungsi [29].
masih dalam penyelidikan

mereka. Namun,
ekspresi transien mekanisme
HPV yang telah
onkogenik protein mendasari akuisisi
dilaporkan HPV-aktif
untuk genus beta Pembungkaman gen E6 / E7 dapat terjadi karena fenomena metilasi di sel-sel yang

telah diperoleh mutasi yang dapat “menggantikan” fungsi mereka. Namun, mekanisme yang mendasari akuisisi virus tumor kemerdekaan HPV-aktif masih

dalam penyelidikan [29]. ekspresi transien HPV onkogenik protein telah dilaporkan untuk genus beta
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 883 5 dari 9

tumor virus kemerdekaan masih dalam penyelidikan [ 29 ]. ekspresi transien HPV onkogenik protein telah dilaporkan untuk HPV
genus beta di non-melanoma kanker kulit [ 30 ]. Genus beta HPV tidak diperlukan untuk pemeliharaan tumor, meskipun terlibat
dalam langkah pertama transformasi neoplastik, mungkin karena keterlibatannya dalam memperbaiki kerusakan DNA,
mendestabilisasi keratinosit pada paparan UV [ 31 ]

Di sini, kami melaporkan kasus kepala dan karsinoma leher dengan hasil sumbang yang muncul dari tes HPV. Hal ini
menunjukkan positif tidak teratur untuk p16INK4a, positif untuk HPV 16 DNA, tetapi negatif untuk HR-HPV mRNA. Meskipun data
dalam literatur mengenai HPV di saluran sinonasal tidak univocal, kami percaya bahwa bahkan dalam kasus yang tidak biasa kami
kami dapat berhipotesis infeksi HPV awal, terbukti dengan diagnosis sebelumnya papiloma, dan positif untuk protein p16INK4a
karsinoma di in situ. Mungkin, dengan kemajuan neoplasia, yang terakhir menjadi independen dari aksi virus, memperoleh lebih
agresif fenotipe [ 32 ].

Laporan kasus ini menggarisbawahi pentingnya, dalam kasus infeksi HPV diduga, untuk mengidentifikasi status transkripsi
virus. Titik kunci untuk pendekatan ini alternatif didasarkan pada modi fi kasi baru-baru ini diusulkan dari RNA hibridisasi in situ
(RNAISH) assay yang dirancang untuk menguji aktivitas transkripsi dari HPV, mendeteksi E6 / E7 mRNA, dalam sel tumor, dari
HPV risiko tinggi yang paling umum jenis melalui metode kolorimetri (RNAscope ®) [ 19 . 33 ]. pengujian ini adalah mudah untuk
menafsirkan, mudah beradaptasi ke laboratorium klinis, dan memberikan bukti langsung dari HPV aktivitas transkripsi pada
formalin- fi rutin xed fi bagian jaringan n-tertanam parafin dengan keuntungan besar untuk overlay sinyal yang dihasilkan dengan
morfologi jaringan. Tes ini menunjukkan HPV onkogenik transcriptionally aktif dengan sensitivitas yang sangat baik dan spesifisitas
terhadap standar acuan [ 3 ]; RNAscope ® stabil bisa melengkapi algoritma diagnostik saat ini untuk kanker terkait HPV, tepatnya
mengidentifikasi tumor HPV-driven dan e fi sien membedakan antara orang-orang HPV-aktif dan HPV-aktif.

Protokol multi-uji yang kami diterapkan terbukti dengan jelas membedakan, atas dasar status HPV, dalam infiltratif lesi dari
papiler, sebagian besar non-in infiltratif satu. Menariknya, dalam terakhir, komponen CIS menunjukkan positif p16INK4a yang kuat,
dan tidak memiliki itu di dalam fi fraksi infiltratif. Kami berhipotesis peran penyebab asli untuk HPV risiko tinggi dalam timbulnya
neoplasia, dan kurangnya progresif dependensi fromHPV terkait rangsangan proliferasi selama perkembangan neoplastik ke arah
yang lebih agresif, di infiltratif fenotipe. Ada kebutuhan mendesak untuk data lebih lanjut tentang hasil klinis dan perilaku biologis
karsinoma terkait HPV-, untuk mengungkap peran infeksi virus sebagai biomarker prognostik dan prediktif dari kemoterapi dan
radioterapi tanggapan. Saat ini,

5. Bahan dan Metode

Formalin yang tetap, parafin fi spesimen n-tertanam diproses untuk H rutin dan E pewarnaan. Tiga tes yang berbeda
dilakukan untuk deteksi HPV: p16 imunohistokimia (IHC) pewarnaan, uji Ekstra INNO-Lipa HPV genotipe v2 untuk genotipe HPV
DNA, dan uji HR-HPV E6 / E7 mRNA ISH (RNAscope ®, Canggih Diagnostik Sel, Milano, Italia) untuk con fi rm kehadiran HPV pada
sel-sel tumor dan aktivitas transkripsi nya.

Semua subjek memberikan persetujuan mereka untuk dimasukkan sebelum mereka berpartisipasi dalam studi. Penelitian ini
dilakukan sesuai dengan Deklarasi Helsinki, dan protokol telah disetujui oleh AOU “Federico II” dari Naples (tanggal Persetujuan:
27 Februari 2013).

5.1. p16INK4a Imunohistokimia

p16INK4a-IHC dilakukan pada benchmark Ventana Ultra (Ventana Medical Systems Inc, Tucson, AZ, USA) dengan
menggunakan CINtec p16 Histologi Kit (Ref. 9511, Roche mtm laboratorium AG, Heidelberg, Jerman), sesuai dengan rekomendasi
kedua produsen . Sebelumnya disiapkan
Int. J. Mol.
Int. Sci.
J. Mol. Sci. 19,
2018, x UNTUK
2018, 19, 883 PEER REVIEW 6 dari 9 6 dari 9

dengan Ultra View Universal Alkaline Phosphatase Red Detection Kit (Ventana Medical Systems, Inc, Tucson, AZ, USA) .Slides
4 μ m jaringan tumor FFPE parafin fi n bagian yang deparaf fi nized dan dikenakan pengambilan antigen menggunakan CC1
akhirnya counterstained dengan Hematoksilin II selama 8 menit (Ventana Medical Systems, Inc., Tucson, AZ, USA) dan kebiruan
penyangga selama 30 menit. Selanjutnya mereka berturut-turut diinkubasi di CINtec p16 antibodi primer prediluted (clone E6H4)
reagen untuk 4 menit dan kemudian dicuci. p16INK4a IHC itu dinilai sebagai positif jika ada yang kuat, homogen dan menyebar
selama 20 menit pada suhu kamar dan mengungkapkan dengan Ultra ViewUniversal Alkaline Phosphatase Red Detection Kit
nuklir dan sitoplasma hadir pewarnaan di lebih dari 70% dari sel-sel ganas [34].
(Ventana Medical Systems, Inc, Tucson, AZ, USA) .Slides yang akhirnya counterstained Hematoksilin II selama 8 menit (Ventana
Medical Systems, Inc., Tucson, AZ, USA) dan kebiruan reagen untuk 4 menit dan kemudian dicuci. p16INK4a IHC itu dinilai sebagai
positif jika ada yang kuat, homogen dan menyebar nuklir dan sitoplasma hadir pewarnaan di lebih dari 70% dari sel-sel ganas [ 34 ].
5.2. HPV genotipe

Untuk tes Ekstra INNO-Lipa HPV genotipe v2, DNA diekstraksi dengan QIAmp DNA Mini Kit (Qiagen, Hilden, Jerman)
mengikuti instruksi
5.2. HPV pabrik dan dielusi dalam 100 uL seperti yang disarankan dalam petunjuk uji produsen INNO-Lipa. Genomik
genotipe
DNA dianalisis untuk kehadiran HPV tipe tertentu dengan multiplex assay berbasis PCR (SPF10-dimodifikasi primer), diikuti oleh
Untuk tes Ekstra INNO-Lipa HPV genotipe v2, DNA diekstraksi dengan QIAmp DNA Mini Kit (Qiagen, Hilden, Jerman)
garis terbalik blot hybridization, mendeteksi dan genotipe 28 genotipe HPV yang berbeda, termasuk 18 HPV berisiko tinggi (16, 18,
mengikuti instruksi pabrik dan dielusi di 100 μ L seperti yang disarankan dalam petunjuk uji produsen INNO-Lipa. Genomik DNA
26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82), 6 HPV berisiko rendah (6,
dianalisis untuk kehadiran spesifik jenis c HPV oleh multiplex assay berbasis PCR (SPF10-dimodifikasi primer), diikuti oleh garis
terbalik blot hybridization, mendeteksi dan genotipe 28 genotipe HPV yang berbeda, termasuk 18 HPV berisiko tinggi (16, 18, 26,
11, 40, 43,
31, 33,44,
35,54,
39, 70), dan52,
45, 51, 3 53,
HPV56,lainnya
58, 59, tidak diklasifikasikan
66, 68, (69, 71,rendah
73, 82), 6 HPV berisiko 74), menargetkan
(6, 11, 40, 43,fragmen 65-bp
44, 54 , 70), dandari L1 ORF. Uji ini
3 tidak-klasifikasi
dilakukan
HPV mengikuti
lainnya fi edinstruksi dari menargetkan
(69, 71, 74), pabriknya. Hasilnya visualdari
fragmen 65-bp ditafsirkan
L1 ORF. oleh
Uji inidua peneliti
dilakukan independen
mengikuti dengan
instruksi membandingkan
dari pabriknya.
Hasilnya
mereka dengan visual ditafsirkan
template yangoleh dua peneliti
disediakan independen
dengan dengan membandingkan themwith template yang disediakan dengan
uji [35].
assay [ 35 ].

5.3. RNAscope ®

HR-HPV
5.3. E6 / ®E7 mRNA ISH assay dilakukan dengan menggunakan RNAscope otomatis ® 2,5 LS RED
RNAscope
assay kit (Cat # 322.150 Lanjutan Diagnostik Sel, Srl, Segrate (Milano), Italia) pada platform Leica Biosystems BOND RX (LS) dan HPV-HR16 Probe (Cat # 311.521,
HR-HPV E6 / E7 mRNA ISH assay dilakukan dengan menggunakan RNAscope otomatis ® 2,5 LS RED
Advanced Diagnostik Sel) sesuai dengan instruksi pabrik . Secara singkat, 4 m bagian dipanggang dan deparaffinized pada instrumen, diikuti oleh pengambilan sasaran (15
assay kit (Cat # 322.150 Lanjutan Diagnostik Sel, Srl, Segrate (Milano), Italia) pada platform Leica Biosystems BOND RX (LS) dan
menit pada 95 ° C menggunakan
HPV-HR16 Probe (CatLeica Epitope Retrieval
# 311.521, Advanced Buffer 2) dan pengobatan
Diagnostik protease
Sel) sesuai (15 menit
dengan pada 40
instruksi ° C). Probe
pabrik kemudian
. Secara hibridisasi
singkat, selama m
4 μ bagian 2 jam pada 42 ° C

dipanggang
diikuti oleh RNAscope dan deparaf
amplifikasi. fi nized
deteksi sinyalpada instrumen,
dilakukan diikuti oleh pengambilan
dengan menggunakan sasaran
cepat merah (red). (15 menit
Peptidylprolyl pada B
isomerase 95(PPIB,
◦ C menggunakan
sebuah konstitutifLeica
menyatakan gen

Epitope
endogen) Retrieval
(Gambar Buffer
3) dan gen bakteri, dapB, digunakan sebagai kontrol positif dan negatif, masing-masing. Tes PPIB digunakan untuk menilai keberadaan RNA hybridizable

2) dan pengobatan
untuk mengkonfirmasi protease
kualitas RNA (15 menit
yang memadai pada
dan 40 ◦ C).sebagai
didefinisikan Probememadai
kemudian
jika hibridisasi selama
setidaknya ada 2 jam
5 titik-titik pada
sinyal 42 ◦ C diikuti
belang-belang padadengan
sel tumorRNAscope
yang paling di
penguat fi kasi. deteksi sinyal dilakukan dengan menggunakan cepat merah (red). Peptidylprolyl isomerase B (PPIB, sebuah
bagian. Hal ini sangat penting ketika sinyal HPV probe negatif untuk menghindari hasil negatif palsu. Tes dapB digunakan untuk menilai pewarnaan spesifik; hanya
konstitutif menyatakan gen endogen) (Gambar 3 ) Dan gen bakteri, dapB, digunakan sebagai kontrol positif dan negatif,
kasus-kasus yang negatif atau lemah bernoda dianggap untuk HPV mencetak gol. Hasil tes HPV positif didefinisikan sebagai belang-belang merah sinyal yang diterjemahkan
masing-masing. Tes PPIB digunakan untuk menilai keberadaan RNA hybridizable untuk con fi rm kualitas RNA memadai dan
ke dalam sitoplasma dan / atau inti dari setiap sel-sel ganas, dan di mana pewarnaan hadir dalam kontrol negatif, itu setidaknya tiga kali sekuat pewarnaan dapB. Hal ini
didefinisikan sebagai memadai jika setidaknya ada 5 titik-titik sinyal belang-belang pada sel tumor yang paling di bagian. Hal ini
sangat penting ketika sinyal HPV probe negatif untuk menghindari hasil negatif palsu. Tes dapB digunakan untuk menilai pewarnaan spesifik; hanya kasus-kasus yang
sangat penting ketika sinyal HPV probe negatif untuk menghindari hasil negatif palsu. Tes dapB digunakan untuk menilai tidak
negatif atau lemah bernoda dianggap untuk HPV mencetak gol. Hasil tes HPV positif didefinisikan sebagai belang-belang merah sinyal yang diterjemahkan ke dalam
spesifik pewarnaan; hanya kasus-kasus yang negatif atau lemah bernoda dianggap untuk HPV mencetak gol. Hasil tes HPV positif
sitoplasma dan / atau inti dari setiap sel-sel ganas, dan di mana pewarnaan hadir dalam kontrol negatif, itu setidaknya tiga kali sekuat pewarnaan dapB. Hal ini sangat penting
adalah didefinisikan sebagai belang-belang merah sinyal yang diterjemahkan ke dalam sitoplasma dan / atau inti dari setiap sel-sel
ketika sinyal
ganas,HPVdan
probe negatif untuk
di mana menghindari
pewarnaan hadirhasil
dalamnegatif palsu.negatif,
kontrol Tes dapBitu
digunakan untuktiga
setidaknya menilai
kalipewarnaan spesifik; hanya
sekuat pewarnaan kasus-kasus yang negatif atau lemah
dapB.
bernoda dianggap untuk HPV mencetak gol. Hasil tes HPV positif didefinisikan sebagai belang-belang merah sinyal yang diterjemahkan ke dalam sitoplasma dan / atau inti

dari setiap sel-sel ganas, dan di mana pewarnaan hadir dalam kontrol negatif, itu setidaknya tiga kali sekuat pewarnaan dapB.

Gambar 3. mRNA
Gambar ISHISH
3. mRNA assay kontrol
assay positif.
kontrol positif.PPIB
PPIB mRNA diujidalam
mRNA diuji dalam sampel
sampel ditunjukkan
yang ditunjukkanpada
pada Gambar
Gambar 22b (200×).
b (200 ×).

6. Kesimpulan

Ini akan dianjurkan, menurut kami, untuk menguji status HPV karsinoma sinonasal secara rutin diagnostik, tidak hanya oleh
p16INK4a IHC assay, tetapi mengambil keuntungan dari orang-orang teknik yang memungkinkan penentuan diandalkan status
transkripsi virus. The RNAscope ® Teknik memungkinkan untuk menguji HPV Status transkripsi melalui penilaian E6 / E7 mRNA,
hanya dua gen virus HPV
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 883 7 dari 9

6. Kesimpulan

Ini akan dianjurkan, menurut kami, untuk menguji status HPV karsinoma sinonasal secara rutin diagnostik, tidak hanya oleh
p16INK4a IHC assay, tetapi mengambil keuntungan dari orang-orang teknik yang memungkinkan penentuan diandalkan status
transkripsi virus. The RNAscope ® Teknik memungkinkan untuk menguji status transkripsi HPV melalui penilaian E6 / E7 mRNA,
hanya dua HPV gen virus dengan potensi onkogenik diakui pada tingkat sel dan melestarikan morfologi tumor pada slide kaca.

Ucapan Terima Kasih: Semua biaya untuk publikasi ini telah ditutupi oleh dana lanjutan Biomedical Sciences Departemen. Kami mengakui
ROCHE kontribusi yang bersifat sukarela dan non-AC.

Penulis Kontribusi: Stefania Staibano dan Massimo Mascolo membuat diagnosis histologis; Gennaro Ilardi, Silvia Varricchio dan Francesco
Martino melakukan percobaan laboratorium; Giovanni Salzano dan Giovanni Dell'Aversana Orabona memberikan informasi klinis dan informed
consent; Rosa Maria Di Crescenzo, Alessandra Borzillo dan Virginia Napolitano disediakan gambar, montages dan referensi; Daniela Russo dan
Francesco Merolla menulis kertas.

Konflik Menarik: Para penulis menyatakan tidak ada konflik yang menarik.

singkatan

HPV Human Papilloma Virus

OSCC Oral Karsinoma sel skuamosa
OPSCC Orofaringeal Karsinoma sel skuamosa
FFPE Formalin Tetap parafin fi n Tertanam
ISH Di Situ Hibridisasi
FDA Food and Drug Administration
ICH imunohistokimia
HR Berisiko tinggi

UV Ultraungu

Referensi

1. El-Naggar, AK; Chan, JKC; Grandis, JR; Takata, T .; Slootweg, PJ WHO Klasifikasi Kepala dan Leher Tumor; IARC: Lyon, Perancis, 2017.

2. Larque, AB; Hakim, S .; Ordi, J .; Nadal, A .; Diaz, A .; del Pino, M .; Marimon, L .; Alobid, saya .; Cardesa, A .; Alos, berisiko tinggi L.
papillomavirus manusia transcriptionally aktif dalam subset dari sinonasal karsinoma sel skuamosa. Mod. Pathol. 2014, 27, 343-351. [ CrossRef ]
[ PubMed ]
3. Thompson, LD; Franchi, entitas tumor A. Baru di edisi ke-4 Organisasi Kesehatan Dunia klasifikasi dari tumor kepala dan leher: rongga
hidung, sinus paranasal dan dasar tengkorak. Virchows Arch. 2017,
1-16. [ CrossRef ] [ PubMed ]
4. Laco, J .; Sieglov Sebuah, K .; Vošmikov Sebuah, H .; Dundr, P .; N emejcov Sebuah, K .; Mich Sebuah lek, J .; Celakovsk ý, P .; Chrobok, V .;
Mottl, R .; Mottlov Sebuah, SEBUAH.; et al. Kehadiran berisiko tinggi human papillomavirus (HPV) E6 / E7 mRNA transkrip dalam subset dari
karsinoma sinonasal bukti keterlibatan HPV di etiopatogenesis nya.
Virchows Arch. 2015, 467, 405-415. [ CrossRef ] [ PubMed ]
5. Bishop, JA; Guo, TW; Smith, DF; Wang, H .; Ogawa, T .; Pai, SI; Westra, WH Manusia Papillomavirusrelated Karsinoma dari sinonasal
Tract. Saya. J. Surg. Pathol. 2013, 37, 185-192. [ CrossRef ] [ PubMed ]
6. ALOS, L .; Moyano, S .; Nadal, A .; Alobid, saya .; Pucat, JL; Ayala, E .; Lloveras, B .; Quint, W .; Cardesa, A .; Ordi, papillomaviruses J. Manusia yang

diidentifikasi dalam subkelompok karsinoma sel skuamosa sinonasal dengan hasil yang menguntungkan. Kanker 2009, 115, 2701-2709. [ CrossRef ] [ PubMed

7. Romanczuk, H .; Howley, PM Gangguan baik E1 atau gen peraturan E2 manusia papillomavirus tipe 16 meningkatkan kapasitas virus
mengekalkan. Proc. Natl. Acad. Sci. Amerika Serikat 1992, 89, 3159-3163. [ CrossRef ] [ PubMed ]

8. Arias-Pulido, H .; Peyton, CL; Joste, NE; Vargas, H .; Wheeler, CM jenis Human papillomavirus 16 integrasi pada karsinoma serviks in situ
dan kanker serviks invasif. J. Clin. Microbiol. 2006, 44, 1755-1762. [ CrossRef ] [ PubMed ]
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 883 8 dari 9

9. Yilmaz, G .; Biswas-Fiss, EE; Biswas, variasi SB genetik dalam asal-usul replikasi DNA dari keluarga human papillomavirus berkorelasi
dengan potensi onkogenik mereka. Biochim. Biophys. Acta Jenderal Subj. 2018, 1862,
979-990. [ CrossRef ] [ PubMed ]
10. Moody, CA; Laimins, LA Human Papillomavirus Onkoprotein: Persiapan transformasi. Nat. Kanker Rev.
2010, 10, 550-560. [ CrossRef ] [ PubMed ]
11. Schiller, JT; Hari, PM; Kines, RC pemahaman Saat mekanisme infeksi HPV. Gynecol. Oncol.
2010, 118, S12-S17. [ CrossRef ] [ PubMed ]
12. Salem, F .; Rosenblum, MK; Jhanwar, SC; Kancherla, P .; Ghossein, RA; Carlson, DL Teratocarcinosarcoma dari rongga hidung dan sinus
paranasal: Laporan dari 3 kasus dengan penilaian status kromosom 12p.
Bersenandung. Pathol. 2008, 39, 605-609. [ CrossRef ] [ PubMed ]

13. Kumar, S .; Perlman, E .; Pack, S .; Davis, M .; Zhang, H .; Meltzer, P .; Tsokos, M. Tidak adanya EWS / FLI1 fusi di neuroblastoma penciuman
menunjukkan tumor ini bukan milik keluarga sarkoma Ewing. Bersenandung. Pathol.
1999, 30, 1356-1360. [ CrossRef ]
14. Taxy, JB; Bharani, NK; Mills, SE; Frierson, HF; Gould, VE Spektrum tumor saraf penciuman. Sebuah imunohistokimia dan ultrastructural
analisis cahaya-mikroskopis. Saya. J. Surg. Pathol. 1986, 10, 687-695. [ CrossRef ] [ PubMed ]

15. Lewis, JS sinonasal Karsinoma sel skuamosa: Suatu Tinjauan dengan Penekanan pada Muncul histologis Subtipe dan Peran Human
Papillomavirus. Kepala Leher Pathol. 2016, 10, 60-67. [ CrossRef ] [ PubMed ]
16. Hwang, SJ; Ok, S .; Lee, H.-M .; Lee, E .; Park, I.-H. Manusia karsinoma terkait papillomavirus dengan adenoid fitur cystic-seperti dari konka
rendah: Sebuah laporan kasus. Auris nasus Laring 2015, 42, 53-55. [ CrossRef ] [ PubMed ]

17. El-Mofty, SK; Lu, DW Prevalensi risiko tinggi DNA human papillomavirus di nonkeratinizing (sel silinder) karsinoma saluran sinonasal: A
berbeda klinikopatologi dan molekul entitas penyakit. Saya. J. Surg. Pathol. 2005, 29, 1367-1372. [ CrossRef ] [ PubMed ]

18. Gloghini, A .; Volpi, CC; Gualeni, AV; Cortelazzi, B .; Perrone, F .; Pilotti, S. De fi ning Algoritma yang lebih baik untuk Akurat Identi fi kasi
Status HPV antara orofaringeal skuamosa-Karsinoma Sel. Hasil Dari Studi Percontohan. WCRJ 2015, 2, 2-6.

19. Volpi, CC; Ciniselli, CM; Gualeni, AV; Plebani, M .; Al fi eri, S .; Verderio, P .; Locati, L .; Perrone, F .; Quattrone, P .; Carbone, A .; et al. Dalam
metode deteksi hibridisasi in situ untuk HPV16 E6 / E7 mRNA dalam mengidentifikasi infeksi HPV transcriptionally aktif karsinoma
oropharyngeal: Sebuah update.
Bersenandung. Pathol. 2017. [ CrossRef ] [ PubMed ]

20. Qureishi, A .; Musim dingin, Surat S. editor: Current dan teknik masa depan untuk human papilloma virus (HPV) pengujian pada karsinoma sel
skuamosa orofaringeal. Eur. Lengkungan. Oto-Rhino-Laryngol. 2017, 274, 4259. [ CrossRef ] [ PubMed ]

21. D'Souza, G .; Kreimer, AR; Viscidi, R .; Pawlita, M .; Fakhry, C .; Koch, WM; Westra, WH; Gillison, ML Kasus-Control Study of Human
Papillomavirus dan Kanker orofaringeal. N. Engl. J. Med. 2007, 356,
1944-1956. [ CrossRef ] [ PubMed ]
22. Ang, KK; Harris, J .; Wheeler, R .; Weber, R .; Rosenthal, DI; Nguyen-T Sebuah n, PF; Westra, WH; Chung, CH; Jordan, RC; Lu, C .; et al.
Papillomavirus manusia dan Survival of Pasien dengan kanker orofaringeal.
N. Engl. J. Med. 2010, 363, 24-35. [ CrossRef ] [ PubMed ]
23. Combes, J.-D .; Franceschi, S. Peran human papillomavirus di non-orofaringeal kanker kepala dan leher.
Oral Oncol. 2014, 50, 370-379. [ CrossRef ] [ PubMed ]
24. Isayeva, T .; Li, Y .; Maswahu, D .; Brandwein-Gensler, M. Human Papillomavirus di Kepala Non-orofaringeal dan Kanker Leher: Sebuah
sistematis Literatur. Kepala Leher Pathol. 2012, 6, 104-120. [ CrossRef ] [ PubMed ]

25. Walter, V .; Yin, X .; Wilkerson, MD; Cabanski, CR; Zhao, N .; Du, Y .; Ang, MK; Hayward, MC; Salazar, AH; Hoadley, KA; et al. Subtipe molekul
dalam Kanker Kepala dan Leher Bukti Pola berbeda kromosom Keuntungan dan Kerugian dari Gen Kanker Canonical. PLoS ONE 2013, 8, e56823.
[ CrossRef ]
26. Kang, H .; Kiess, A .; Chung, CH Muncul biomarker dalam kanker kepala dan leher di era genomik.
Nat. Rev. Clin. Oncol. 2015, 12, 11-26. [ CrossRef ] [ PubMed ]
Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 883 9 dari 9

27. Weinberger, PM; Yu, Z .; Kountourakis, P .; Sasaki, C .; Haffty, BG; Kowalski, D .; Merkley, MA; Rimm, DL; Camp, RL; Psyrri, A. De fi ning
fenotipe molekul oropharyngeal squamous cell carcinoma papillomavirus terkait manusia: Validasi hipotesis tiga kelas. Otolaryngol. Kepala
Leher Surg. 2009, 141,
382-389. [ CrossRef ] [ PubMed ]
28. Jung, AC; Briolat, J .; Millon, R .; de REYNIES, A .; Rickman, D .; Thomas, E .; Abecassis, J .; Clavel, C .; Wasylyk, B. Biologi dan relevansi
klinis infeksi transcriptionally aktif human papillomavirus (HPV) pada karsinoma sel skuamosa orofaring. Int. Kanker J. 2010, 126, 1882-1894. [ CrossRef
] [ PubMed ]
29. Tomar, S .; Graves, CA; Altomare, D .; Kowli, S .; Kassler, S .; Sutkowski, N .; Gillespie, MB; Creek, KE; Pirisi, L. Manusia papillomavirus status
dan ekspresi gen pro fi les dari oropharyngeal dan kanker mulut dari pasien Amerika Amerika dan Afrika Eropa. kepala Leher 2016, 38, E694-E704.
[ CrossRef ] [ PubMed ]
30. Howley, PM; P fi ster, HJ papillomaviruses Beta genus dan kanker kulit. Ilmu pengetahuan virus 2015, 479-480, 290-296.

[ CrossRef ] [ PubMed ]
31. Wendel, SO; Wallace, NA Kehilangan genom fi delity: HPV Beta dan respon kerusakan DNA.
Depan. Microbiol. 2017, 8, 2250. [ CrossRef ] [ PubMed ]
32. Banister, CE; Liu, C .; Pirisi, L .; Creek, KE; Buckhaults, PJ Identi fi kasi dan karakterisasi kanker serviks HPV-independen. Oncotarget 2017, 8, 13.375-13.386.
[ CrossRef ] [ PubMed ]
33. Wang, H .; Wang, MX-M .; Su, N .; Wang, L.-C .; Wu, X .; Bui, S .; Nielsen, A .; Vo, H.-T .; Nguyen, N .; Luo, Y .; et al. RNAscope untuk in situ
Deteksi transcriptionally Aktif Papillomavirus Manusia di Kepala dan Leher Karsinoma sel skuamosa. J. Vis. Exp. 2014. [ CrossRef ] [ PubMed ]

34. Mascolo, M .; Ilardi, G .; Romano, MF; Celetti, A .; Siano, M .; Romano, S .; Luise, C .; Merolla, F .; Rocco, A .; Vecchione, ML; et al. Berlebih
dari faktor-1 kromatin perakitan P60, poli (ADP-ribose) polymerase 1 dan nestin memprediksi metastasis perilaku kanker mulut. histopatologi 2012,
61, 1089-1105. [ CrossRef ] [ PubMed ]

35. Russo, D .; Merolla, F .; Mascolo, M .; Ilardi, G .; Romano, S .; Varricchio, S .; Napolitano, V .; Celetti, A .; Postiglione, L .; Di Lorenzo, P .; et al.
FKBP51 Ekspresi imunohistokimia: Anew prognosis Biomarker untuk OSCC? Int. J. Mol. Sci. 2017, 18, 443. [ CrossRef ] [ PubMed ]

© 2018 oleh penulis. Lisensi MDPI, Basel, Swiss. Artikel ini adalah artikel akses terbuka didistribusikan di bawah
persyaratan dan ketentuan Creative Commons Atribusi (CC BY) lisensi
(http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).