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la
Señalización Celular
A . C y Cáncer
o r
f e s
P ro
Dr. Alejandro Claude
Instituto de Bioquímica
UACH
 d e
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. C
r A
es o
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P
Receptores acoplados a proteína-G
„ De los 35,000 genes en el genoma humano, 1,000
codifican para receptores de transmembrana de
segmentos múltiples e
„ Varios cientos para receptores olfatorios,
u d
„ Algunos son receptores huérfanos
C la
„ Dominio extracelular
A .
„
o r
Une al ligando activador
„
f e s
Dominio citoplásmico,
„
P r o
Una vuelta, entre las hélices 6 & 7 interactúa con proteínas
G triméricas
„ Dominio citoplásmico C-terminal
„ Esta sujeto a fosforilación reversible en residuos Ser o Thr
„ Media regulaciones negativas
Características comunes

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P
Auto-activación de Gα
„ Actividad de GTPasa intrínsecae
„ Aumentada por u d
la
C Proteins)
• GAPs, (GTPase Activating
.
• RGS proteínas r A of G-protein signaling)
(regulators
„ e s o
Enzimasfefectoras actuan como GAPs en
r o
algunos
P casos (Adenilato ciclasa activa la
función GTPasa de Gαs)
Hormonas que activan Receptores
Intracelulares
„ Esteroides
„ Androgenos, Testosterona d e
„ Estrógenos, Estradiol la u
„ .
Glucocorticoides, Cortisol
C
r A
Mineralocorticoides, Aldosterona
„
es o
„ Progestinas, Progesterona
f
„ P ro
Hormona Tiroidea , T3/T4
„ Ácido Retinoico
„ Calcitriol, derivado de la vitamina D
Hormonas Esteroidales

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P
Características de las hormonas
esteroidales
„ Proteínas transportadoras en el suero SBG,
TBG d e
„ Hidrofóbicas, insolubles en agua la u
„ Vida media larga . C
r
Receptores intracelulares
A
„
es o
„ Los receptores son proteínas que unen
f
DNA P ro
„ Los sitios de unión en el DNA son
Elementos de Respuesta a Hormonas o
HRE’s
„ Modifican la transcripción de genes
Ciclo celular eucariótico

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Ciclo celular

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Cuatro fases del ciclo celular
„ Fase S, (síntesis), síntesis del DNA e
„ u d
Fase G2, (Gap 2), la célula duplica su volumen
C la
„ Fase M, (Mitosis), el nucleo se fragmenta, los
.
r A
cromosomas se separan, ocurre citoquinesis
es o
„ Fase G1, (Gap 1), etapa previa a la síntesis de
f
DNA P ro
„ Células en cultivo se pueden dividir cada 24 horas
„ G0, fase quiescente de células diferenciadas
El ciclo celular es controlado
por proteínas quinasas

„ Cyclin-Dependent protein Kinases, d e CDK

la u
„Ciclinas, subunidad regulatoria,
. C activa CDKs
r A
• 10 ciclinas distintas , A, B, C, etc.
• 8 distintos
e s o
CDKs, (CDK1-CDK8)
o f
• Múltiples
r combinaciones
„
P
Las formas activas son heterodímeros
Control del ciclo celular por CDKs

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P
La actividad de las CDKs oscila

„ Cuatro mecanismos pueden

e
regular la
d
u
actividad de las CDKs C : la
„ A .
Fosforilación/Desfosforilación de CDKs
o r
„ Degradación
f e sregulada de ciclinas
„ ro
Síntesis
P periódica de CDKs y ciclinas
„ Proteínas inhibidoras específicas para CDKs
CDK Inactiva

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P
CDK activada
por una ciclina
„ El asa T se d e
desplaza la u
„ Las proteínas . C
sustrato pueden r A
es o
unir el sitio activo
„ ro f
Sitio para ATP
„
P
Reorientación de
la hélice amino-
terminal
Fosforilación de Thr 160

„ Thr(160) del e
asa T es u d
C la
fosforilada .
„ El complejo or
A
CDK-ciclinaf e s
r o
estáPen la
conformación
activa
Actividades de algunas CDKs

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P
Regulación de CDKs por
fosforilación
„ Tyr15, fosforilación inactiva CDK bloqueando
e
la entrada de ATP u d
„ C l a
Una fosfatasa específica desfosforila este residuo
„ Thr160, fosforilación A .
activa CDK
o r
„ Cortes en una
f e s hebra del DNA:
„
P ro
Detienen el ciclo celular en G2
Una cascada de señales inactiva la fosfatasa
„
específica que desfosforila Tyr15
„ La célula no se divide hasta que el DNA es reparado
Regulación de
CDKs por
fosforilación
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P
Degradación controlada de ciclinas
„ Las ciclinas son reguladas por degradación
„ Destruction Box: Secuencia amino-terminal en la
ciclina d e
„ la
DBRP (Destruction Box Recognizing Protein)
u
• . C
Dispara la ubiquitinación de las ciclinas
• A
La Ubiquitina Ligasa cataliza la adición de ubiquitina
r
• o
Se adicionan múltiples residuos de ubiquitina
es
• f
Degradación vía proteosomas
ro
„ CDK fosforila y activa DBRP, iniciando la
P
degradacion de la ciclina
„ CDK inactiva (sin ciclina)
„ Ubiquitina media la degradación de múltiples
proteínas
Regulación de
CDKs por
proteólisis
d e
la u
„ Degradación de C
ciclinas A .
o r
„ Ubiquitina f es
„ Proteosoma
P ro
Regulación de la
síntesis de ciclinas
y CDKs
d e
„ Factores de a u
crecimiento C l
A .
„ Citoquinas o r
(inductoresode
f e s
la
r
división celular)
P
„ Cascada de
señales vía MAPK
Inhibicion de CDKs
„ Proteínas inhibidoras especificas para cada e
CDK se unen e inactivan estas quinasas u d
„ i.e. P21 C la
„ Cuatro mecanismos A
de
.
regulación de CDKs
o r
Fosforilación,
„
f e s desfosforilación (Y15, T160)
„
P r o
Degradación controlada (ciclinas, ubiquitina, proteosoma)
Síntesis periódica
„ (factores de crecimiento, citoquinas)
„ Proteínas inhibidoras (p21)
p21 y p53

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P
Funciones de CDKs
„ CDKs fosforilan proteínas e
„ Laminina u d
la
• Interacciones con filamentos intermedios
C
.
• Mantiene la estructura de la membrana nuclear
A
r
• Laminina despolimeriza al ser fosforilada
o
„ f es
Subunidades de miosina
ro
• La citoquinesis es mediada por el complejo actina-miosina
P
• Despues de la division, CDK fosforila la subunidad
regulatoria de miosina, disociandola de la actina
Funciones de CDKs (Cont.)
„ Proteína retinoblastoma, pRb e
„ lau
Participa en el bloqueo dela
d
división celular
en G1 si hay daño en. elCDNA
„
A
r une al factor de
pRb (desfosforilada)
trascripción
e s o
E2F, bloqueando la división
r
celularo f
P
„ CDK2/CiclinaE, fosforila pRb, permitiendo la
división (E2F activo)
Funciones de CDKs (Cont.)
„ Activación de P21 e
„ P21 es una proteína inhibitoria que
u d
une e inactiva
CDK2/CiclinaE C la
„ Daño en el DNA activaA .
las proteínas quinasas ATM
y ATR o r
„ ATM y ATRf e s
activan p53, un factor de transcripción
„ P53 ro
Pestimula la síntesis de p21
„ P21 une e inactiva CDK2/CiclinaE, luego pRb
permanece desfosforilado y unido a E2F,
bloqueando la división celular
p21 y p53

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P
Formación de tumores

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P
Creación de un oncogen viral
(parte 1)

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Creación de un oncogen viral
(parte 2)

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Creación de un oncogen viral
(parte 3)

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P
Creación de un oncogen viral
(parte 4)

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Creación de un oncogen viral
(parte 5)

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Oncogenes

„ Proto-
oncogen d e
la u
„ Gen C
normal A .
o r
„ Mutaciones f
o es
dominantes
P r
„ Un cambio
(heterocigoto)
Otros Oncogenes
„ Ras (Proteína G monomérica en la vía de MAP
quinasa (MAPK)) d e
Constitutiva (siempre activa) en
„ la u
30-50% de los
C y en 90% de los
carcinomas de pulmón y .colon,
A
carcinomas pancreáticos
r
s o
„ Raf (proteínaequinasa citoplasmática)
ro f
„ Receptores
P para factores de crecimiento (ErbB)
„ Factores nucleares de transcripción (división
celular)
„ i.e. Jun, Fos
Cáncer colorrectal

„ Supresores de tumores
„ APC (Inestabilidad d e
cromosomal, pólipos)
la u
„ DCC . C
„ P53 r A
„ Oncogenes es o
ro f
„ Ras P
„ Se requiere un mínimo
de siete mutaciones
Apoptosis
„ Muerte celular programada
„ Por esta razón tenemos dedos d een vez de
aletas la u
. C
„ Factor de necrosisAtumoral (TNF)
r o
Producido por células del sistema inmune
„
fe s
„ Se une a los receptores TNF-R1
r o
•P
El receptor tiene “dominios de muerte” que son
activados
• Une proteínas intracelulares como TRADD
Resumen de Apoptosis

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