ACCIÓN DE UNA ENZIMA DE TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES

INTRODUCCIÓN
Las enzimas son proteínas específicas que actúan como catalizadores en muchas de las
reacciones químicas de los seres vivos, siempre que sea termodinámicamente posible. Se
puede confirmar su actividad de manera experimental.
Una enzima ayuda a acelerar procesos químicos que transcurren a una baja velocidad.
La acción de estas proteínas en una reacción se ve afectado por la temperatura, el pH, la
concentración de la enzima y del sustrato (moléculas donde actúan las enzimas).

OBJETIVOS
1. Observar el efecto de la enzima peroxidasa, que se halla presente en tejidos
animales y vegetales, sobre el agua oxigenada.
2. Comparar la acción de la peroxidasa (catalizador orgánico) y el dióxido de
manganeso (catalizador inorgánico) sobre un mismo sustrato (agua oxigenada).
3. Compruebe el efecto de la variación de la temperatura en la actividad enzimática.

MATERIALES Y MÉTODOS

1. Acción de un catalizador inorgánico sobre el agua oxigenada.

Marcamos 3 tubos de ensayo con los números 1,2 y 3. Echamos a cada uno, una
pequeña cantidad de dióxido de manganeso, aproximadamente igual y procedimos de la
siguiente manera:
a. Tomamos el tubo 1 por su parte inferior y agregamos 2 ml de agua oxigenada.
Observamos la intensidad de la reacción para después compararlo con los demás
tubos.
¿Qué papel desempeña el dióxido de manganeso en la reacción? ¿y el agua oxigenada?
¿Hubo desprendimiento de calor?
El dióxido de manganeso tiene el papel de catalizador, interviniendo en la reacción para
acelerarla.​1 El agua oxigenada es el sustrato sobre el cual actúa la enzima. Si ​hubo
desprendimiento de calor.
b. Con unas pinzas pusimos el tubo 2 al baño de maría durante 10 minutos. Luego lo
retiramos e inmediatamente agregamos 2 ml de agua oxigenada. Observamos la
reacción y la comparamos con la anterior.
¿Ocurrió con mayor o menor intensidad? ​Esta reacción ocurre con mayor intensidad. ​¿El
aumento de la temperatura afectó el catalizador? Si, el aumento de la temperatura acelera
las reacciones.

c. Pusimos el tubo 3 en un recipiente con hielo durante 10 minutos, luego lo

retiramos e inmediatamente agregamos 2 ml de agua oxigenada. Comparamos la
reacción con las anteriores.
¿Cómo afectó la disminución de la temperatura la acción del dióxido de manganeso?
Explique. ​Aunque la reacción produjo calor, esta ocurrió más lento que las anteriores
debido a la alta temperatura.

2. Acción de un catalizador de origen animal sobre el agua oxigenada.

Marcamos 4 tubos de ensayo con los números 1,2,3, y 4 y procedimos de la siguiente

manera:
a. Tomamos el tubo 1 por la parte inferior, echamos un pedazo de hígado y luego 2 ml
de agua oxigenada. Observamos la intensidad de la reacción.

¿Qué papel desempeña el hígado en la reacción? el hígado posee una enzima llamada
peroxidasa, que es un catalizador orgánico.​2 ¿​Cuál es la naturaleza química de la
​ u naturaleza es orgánica, del orden animal, y hubo
sustancia que cataliza esta reacción? S
desprendimiento de calor.

b. Tomamos un pedazo de hígado similar al anterior, lo echamos en el tubo 2 y lo

pusimos al baño de maría durante 10 minutos. Luego lo retiramos e
inmediatamente agregamos 2 ml de agua oxigenada.

¿Hubo reacción? Comparamos con el resultado obtenido en el ítem 1b. ​En este caso, es
diferente del ítem 1b, pues aquí no hubo reacción debido a que la enzima se
desnaturaliza.​3

c. Tomamos el tubo 3, echamos otro pedazo de hígado (que previamente habíamos

puesto 10 minutos en un baño maría) en la misma cantidad anterior e
inmediatamente le agregamos 2 ml de agua.
¿Hubo reacción? ¿Cómo es su intensidad en relación con la observada en el tubo 1 del
ítem 2a? ¿Qué efecto tiene la disminución de la temperatura sobre la acción del
catalizador? ¿Cree usted que, si el agua oxigenada se agregara después de dejar que el
hígado vuelva a la temperatura ambiental, la intensidad de la reacción sería como la de
dicho tubo 1? Explique​.
Hubo reacción, con una intensidad un poco menor que en el tubo 1 del ítem 2a. La
disminución de la temperatura es la causante de que se ralentizara la acción del
catalizador, e hizo que no produjera calor. Probablemente no va a reaccionar como el tubo
1, pues esta reacción ya ha sido expuesta a un catalizador.

d. Tomamos el tubo 4, echamos media cucharada cafetera de macerado de hígado,

es decir la misma cantidad con la que trabajamos los 3 anteriores, y luego
agregamos 2 ml de agua oxigenada.
¿Esta reacción es mayor o menor en intensidad a la del tubo 1 en el ítem 2a? ¿Por qué?
Esta reacción tiene mayor intensidad que la del tubo 1 en el ítem 2a, debido a que hay
una mayor concentración de hígado, es decir, de enzima catalizadora. 4​
e. Tomamos los dos tubos que se pusieron al baño de maría, tanto de este
experimento como el del anterior, en qué se utilizó MnO​2, y que ya estaban a
temperatura ambiente, y agregamos nuevamente 2ml de agua oxigenada a cada
uno.
¿Qué observa en cada tubo? Explique ese resultado.
En el tubo que fue puesto al baño maría con la peroxidasa, al añadirle más agua
oxigenada después de estar a temperatura ambiente, tuvo una reacción apenas
perceptible, y no cambió. El tubo que fue puesto al baño maría con el dióxido de
manganeso, si tuvo reacción y las burbujas subieron rápidamente, el fondo quedó más
oscuro.

3. Acción de un catalizador de origen vegetal sobre el agua oxigenada.

Marcamos 4 tubos de ensayo con los números 1,2,3 y 4 y realizamos los mismos
procedimientos a, b, c y d del numeral 2. Utilizamos, en todos ellos, papa en vez de
hígado y para cada caso respondimos las mismas preguntas que se hicieron en el hígado.

a. ​¿Qué papel desempeña la papa en la reacción? ¿Cuál es la naturaleza química de

la sustancia que cataliza esta reacción? ¿Hubo desprendimiento de calor?
La papa contiene una enzima llamada catalasa, la cual impide la oxidación de las
sustancias, por eso, separa y libera el oxígeno del peróxido de hidrógeno. Su naturaleza
química es biológica, de la familia de los tubérculos, y la reacción que cataliza produce
calor. 5​

​ Hubo reacción? Comparamos con el resultado obtenido en el ítem 1b.

b. ¿
En este caso, ocurre lo contrario al ítem 1b, pues aquí no ocurre reacción debido a que el
calor desnaturaliza a la enzima que contiene la papa.
c. ¿Hubo reacción? ¿Cómo es su intensidad en relación con la observada en el tubo 1
del ítem 2a? ¿Qué efecto tiene la disminución de la temperatura sobre la acción del
catalizador? ¿Cree Ud. que, si el agua oxigenada se agregara después de ​dejar que la
papa vuelva a la temperatura ambiental, la intensidad de la reacción sería como la de
dicho tubo 1? Explique.

Reaccionó con menor intensidad que el tubo 1 del ítem 2e, pues las bajas temperaturas
ralentizan el funcionamiento de los catalizadores, y si se agrega agua oxigenada después
de dejar que la papa vuelva a temperatura ambiente, probablemente no va a reaccionar
como el tubo 1, porque el tubo 1 no había sido expuesto. anteriormente a ningún
catalizador o disminución de temperatura, a diferencia de esta.
d. ¿​Esta reacción es mayor o menor en intensidad a la del tubo 1 en el ítem 2e? ¿Por
qué?
Esta reacción es de mayor intensidad, porque hay más concentración de papa, es decir,
más disponibilidad de la enzima, lo que hace que la actividad enzimática se haga más
veloz.
e. ​¿Qué observa en cada tubo? Explique ese resultado.
El tubo que tenía la papa con el peróxido de hidrógeno, al volver a la temperatura
ambiente y agregar más peróxido de hidrógeno, no tuvo ninguna reacción. Tampoco la
tuvo el tubo con dióxido de manganeso.

¿Qué conclusiones puede sacar?

En términos generales, ¿La intensidad de las reacciones fue mayor o menor cuando se
utilizó hígado o cuando se utilizó papa? De al menos 2 razones que expliquen su
respuesta.
Las reacciones con el hígado fueron más intensas que con la papa. Esto es debido a que
el hígado contiene más peroxisomas que la papa, y estos actúan para proteger las células
del hígado.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Dióxido de Manganeso

Los catalizadores inorgánicos aumentan su actividad al aumentar la Tª, pero suelen actuar
con la máxima velocidad de catálisis o con velocidades óptimas a Tªs mayores (150ºC,
400ºC, 800ºC) que las enzimas biológicas.

Los catalizadores que hacen que la reacción sea más rápida se llaman catalizadores
positivos o promotores, pero si lo que hace es que sean más lentas se llaman inhibidores.

La llamada comercialmente “agua oxigenada” es una solución acuosa de peróxido de

hidrógeno H​2​O​2 que se descompone espontáneamente en presencia de luz solar o altas
temperaturas liberando O​2​. El dióxido de manganeso (MnO​2​) puede catalizar la reacción
2H​2​0​2​ → 2H​2​0 + 0​2​ acelerando la liberación del oxígeno.

El dióxido de manganeso causa la descomposición del agua oxigenada para dar agua y
burbujas de oxígeno. La reacción es exotérmica (desprende energía) y por este motivo se
produce calor. 6​

Al tomar un tubo y agregarle una pequeña cantidad de dióxido de Manganeso con dos
mililitros de agua oxigenada, observamos que en este caso el bióxido de manganeso
actúa como catalizador ayudando a que el oxígeno se separe del agua, esto lo podemos
percibir en la reacción ya que se formaron pequeñas burbujas al interior del tubo que
corresponden al oxígeno liberado, este proceso de liberación de oxígeno produce calor
cómo pudimos evidenciarlo en la práctica.

En el tubo dos que también contenía dióxido de Manganeso y el cual sometimos a baño
de María por 10 minutos, al agregarle agua oxigenada la reacción del catalizador fue
mayor que en el tubo anterior, concordando con la teoría que afirma que a mayor
temperatura aumenta el efecto del dióxido de Manganeso, vimos cómo el dióxido de
Manganeso paso de un color gris oscuro a uno más claro, en este caso las burbujas
ascendieron un poco más que en la reacción anterior, alcanzando la mitad del tubo de
ensayo y produciendo calor.

En el tubo tres que también contenía dióxido de Manganeso, el cual fue puesto en una
vasija con hielo por 10 minutos y al que posteriormente agregamos dos mililitros de agua
oxigenada el efecto del catalizador sobre el agua oxigenada fue de menor intensidad, con
pocas burbujas y menos calor que en los tubos anteriores.

Catalizador de origen animal

La catalasa es una proteína que podemos desnaturalizarla al someterla a altas

temperaturas. Al perder la estructura terciaria, perderá también la función y como
consecuencia su función catalítica, por lo que no podrá descomponer el agua oxigenada y
no se observará ningún tipo de reacción cuando hagamos la experiencia anterior con
muestras de tejidos hervidos. 8​

Las enzimas son catalizadores biológicos, es decir, aceleran las reacciones químicas de
nuestro metabolismo. De no ser así, no sería posible que los organismos viviesen ya que
es necesario que algunas reacciones sean inmediatas. Químicamente son proteínas.
Se llama sustrato a la molécula sobre la cual va a actuar la enzima, para catalizar la
reacción.
Una enzima por sí misma no puede llevar a cabo de una reacción, su ​función es modificar
la ​velocidad de reacción entendiéndose como tal la cantidad del ​producto formada por una
unidad de ​tiempo​. Tal variación se debe a la disminución de energía de activación en una
reacción química.
Las enzimas actúan acelerando la velocidad de una reacción o bien haciendo posible una
determinada reacción.

Al tubo uno se agregó un trozo de hígado con dos mililitros de agua oxigenada pudimos
observar que tuvo una reacción intensa y hubo desprendimiento de calor. El hígado
contiene enzimas que hicieron que se produjera una reacción, también se observaron
algunas burbujas y el tiempo que tardó la reacción fue 6 segundos.

En el tubo dos realizamos el mismo procedimiento que en el tubo anterior pero esta vez lo
colocamos previamente a baño de maría por diez minutos, al agregar los mililitros de agua
oxigenada pudimos notar que no hubo reacción alguna, esto se debe como dice la teoría,
a que la catalasa proteína presente en el hígado al ser sometida a altas temperaturas se
desnaturaliza, su estructura se desorganiza y se destruyen sus interacciones de
catalizador.

El tubo tres se agregó un trozo de hígado y se puso en una vasija con hielo, al agregar los
dos mililitros de agua oxigenada, pudimos observar que tuvo una reacción de menor
intensidad.

El tubo cuatro que contenía hígado macerado al agregarle agua oxigenada sufrió una
reacción mayor y más rápida que el tubo uno. Esto se debe a que cuando maceramos el
hígado se liberaron las enzimas que este contenía lo que causó una reacción casi
inmediata.

El macerado frente al agua oxigenada se explica bajo el mismo principio que el trozo de
hígado completo, sin embargo, éste liberó mayor cantidad de agua y oxígeno debido a
que las células ya están rotas, y de esta manera la catalasa actúa de una manera más
rápida, como señala Brown, T, Bursten, B. y LeMay, H. (2004). 9​

Catalizador de origen vegetal

La papa contiene una enzima (Catalasa) la cual es un poderoso antioxidante, es decir,
que impide la oxidación de las sustancias químicas.
Si agregamos agua oxigenada o Peróxido de Oxigeno (H2O2) a una papa sin cocer, la
catalasa separara el Oxígeno del Peróxido de Oxigeno, liberando una gran cantidad de
gas (O2).
Si al agregar el Peróxido de Oxígeno a una papa cocinada no pasara nada, debido a que
la enzima estará desnaturalizada, es decir, debido al calor la catalasa perderá sus
propiedades antioxidantes.​21

Al primer tubo le añadimos un trozo de papa y luego agua oxigenada, observamos que la
reacción se produjo de inmediato y fue muy intensa, duro un largo rato y al reaccionar la
papa y el agua oxigenada se produjo desprendimiento de calor.

Al tubo dos, también se le agregó un trozo de papa, pero a este le aumentamos la

temperatura poniéndolo a baño de María por 10 minutos, al transcurrir este tiempo lo
retiramos del baño de María y agregamos el agua oxigenada, observamos que la reacción
fue muy débil o casi nula, esto lo
podemos explicar al igual que con el hígado puesto a baño de María y sustentarlo con la
teoría que afirma que la temperatura alta destruye las interacciones del catalizador y lo
desnaturaliza por esto no ocurre reacción.

Al tubo tres le agregamos un trozo de papa de igual tamaño que los anteriores, pero este
lo sometimos a temperatura fría introduciéndolo en una vasija con hielo, pasados los 10
minutos lo retiramos y le agregamos agua oxigenada exactamente 2 mililitros.
Observamos que el tubo que estaba totalmente helado en poco tiempo desprendió calor y
la reacción fue de baja intensidad, reacciono en un tiempo estimado de 12 segundos y
produjo pequeñas burbujas.
Al tubo 4, agregamos papa macerada y luego agua oxigenada y pudimos notar que la
reacción que se produce es de mayor intensidad que las anteriormente realizadas con
papa y con respecto al tubo uno de MnO​2, esta
​ reacción produjo un gran número de
burbujas que salieron del tubo de ensayo, formándose al exterior de este una capa
espumosa. Esto se debe como ha sido comprobado a que cuando maceramos la papa se
liberaron las enzimas que este contenía lo que causó una reacción casi inmediata y de
gran intensidad.

Luego de haber dejado reposar los tubos con papa, MnO​2 e hígado que previamente
habíamos tenido en baño de María, cuando estaban a temperatura ambiente procedimos
a agregar a cada uno 2 mililitros de agua oxigena y a analizar y comparar con la reacción
que se produjo cuando estos habían sido recién sacados del baño de María y pudimos
concluir lo siguiente:
El cambio en el hígado es poco, pero esta vez contrario a cuando lo sacamos de baño de
María si reaccionó, pero con una intensidad baja, la papa al igual que el hígado tuvieron
reacciones de muy baja intensidad, pero mayores a las de baño de María; el MnO​2 por​ el
contrario tubo una reacción menor que la de este mismo compuesto a baño de María.

El hígado y la papa ambos producen espuma, pero la patata reacciona más rápido que el
hígado, burbujea y produce espuma con más intensidad. A qué se debe esto? la
respuesta es muy simple:
Ya que en el hígado hay más peroxisomas que en la papa estos peroxisomas al
someterlos a la presencia del peróxido de hidrogeno o agua oxigenada, el cual es
altamente reactivo y toxico para las células del hígado, por lo que la función de los
peroxisomas es proteger a las células del hígado del agua oxigenada. Las moléculas de
Agua oxigenada son rápidamente rotas por la enzima catalasa, enzimas las cuales están
contenidas en los peroxisomas. Convirtiendo al agua oxigenada en compuestos no tóxicos
como lo son el oxígeno que es desprendido durante la efervescencia que seguro
observaste cuando le agregaste agua oxigenada al hígado y también se forma agua.​22

RESPUESTA A PREGUNTAS DE LA GUÍA

¿En toda reacción enzimática hay liberación de energía? Explique.

No. Las reacciones pueden liberar energía, siendo una reacción catabólica; pero también
absorberla en forma de ATP, siendo una reacción anabólica. 10
​

Siempre que una reacción enzimática se libera energía, ¿es en forma de calor?
Explique.
No. Las reacciones enzimáticas pueden ser endotérmicas y exotérmicas. Las
endotérmicas utilizan energía adicional para sintetizar moléculas más complejas, y no
producen calor. Las exotérmicas liberan calor en forma de ATP, que en su mayor parte se
disipa hacia la atmósfera. 11
​
¿Qué cambios pueden sufrir, con relación a la estructura química y al número inicial
de moléculas al sustrato y la enzima en una reacción?

En una reacción, el sustrato puede oxidarse, es decir que su estructura química puede
cambiar al serles transferidos grupos funcionales, o al romperse algunos enlaces e
introduciendo radicales. También tiende a disminuir su concentración ya que es
modificado por la enzima.
La enzima permanece constante. Puede recibir cambios en su estructura al ser inactivada
por sales, el calor e incluso otras enzimas. 12
​

Si usted hace reaccionar agua oxigenada con peroxidasa y espera hasta que
termine la reacción, ¿cómo comprobaría que la enzima conserva su poder
catalítico?

Sí la reacción continúa produciendo burbujas, es que aún no se ha oxidado

completamente, porque sigue desprendiéndose oxígeno. Además, si al agregar más agua
oxigenada, se vuelve a producir una reacción, esto significa que aún conserva su poder
catalítico.

Desde el punto de vista enzimático, ¿Qué diferencia hay entre la leche cruda y la
pasteurizada?
La leche pasteurizada tiene menos enzimas que la leche cruda.

¿Cómo explicaría el hecho de que la ptialina de la saliva actúe sobre el almidón en

la boca, pero no en el estómago?
La ptialina tiene la enzima amilasa salival, que puede romper los enlaces externos del
almidón, pero trabaja en un nivel de basicidad y al llegar al estómago, hay un alto nivel de
acidez, que la desnaturaliza. 15-16
​

¿En cuál organela celular se sintetizan las enzimas?

Las enzimas, como toda proteína, son sintetizadas específicamente en los ribosomas.
Pero estos no son organelas, sino que se encuentran en el retículo endoplasmático
rugoso, que es globalmente, el lugar donde se sintetizan las enzimas. 13
​

¿Las enzimas naturales actúan únicamente en el interior de la célula? Explique por

medio de varios ejemplos.
La mayoría de enzimas naturales actúan al interior de la célula, sin embargo, algunas
otras se dan al exterior, por ejemplo, la enzima lactasa que actúa exteriormente
degradando la lactosa en fructosa y glucosa. Las enzimas lisosómicas también pueden
ser liberadas al exterior de la célula por exocitosis. Por ejemplo, el hígado se secretan
enzimas lisosómicas para la bilis. 14
​

¿Qué otros factores, además de los cambios de la temperatura y el pH, influyen en

la actividad de una enzima?
Uno de los factores que influyen en la actividad enzimática, es la concentración de
sustrato, pues entre más cantidad de sustrato haya, mayor cantidad de moléculas estarán
asociadas a la actividad enzimática, y esto significa que la velocidad de la actividad
enzimática es mayor. Otro factor es la concentración de enzima: la velocidad de reacción
es directamente proporcional a la cantidad de enzimas disponibles. También los
inhibidores tienen influencia en esto, porque estos tienden a evitar las actividades
enzimáticas. 4​

Cite 5 enzimas con los sustratos respectivos sobre las cuales actúan y los
productos que se obtienen.
● maltasa, que actúa sobre la maltosa: convierte la matosa en dos glucosas de las
que está compuesta rompiendo sus enlaces. 17 ​
● lactasa, que actúa sobre lactosa: descompone la lactosa en pequeñas partículas
de glucosa y galactosa.
● pirúvato quinasa, que actúa sobre el fosfoenol piruvato (glucólisis): ​Produce
una molécula de piruvato y otra de adenosín trifosfato. 18
​
● citrato sintetasa, que actúa sobre acetil CoA y Oxalacetato (ATC): ​La citrato
sintasa cataliza la reacción de condensación del acetato, proveniente del
acetil-CoA, y del oxaloacetato para formar citrato​. El oxaloacetato es regenerado
después de completar el ciclo de Krebs. 19
​
glutamato descarboxilasa, que actúa sobre el glutamato: ​Responsable de la síntesis
del ácido gamma-aminobutírico (GABA), un importante neurotransmisor inhibitorio que se
encuentra en las neuronas y en las células beta pancreáticas. 20 ​
CONCLUSIONES
Pudimos observar que efecto tiene la enzima peroxidasa presente en los tejidos vegetales
y animales sobre el agua oxigenada. Además, vimos las diferencias entre el efecto de un
catalizador orgánico y uno inorgánico sobre un mismo sustrato. Observamos como la
temperatura tiene un efecto en la actividad enzimática.

REFERENCIAS

1. www.educ.ar/Dinamico/UnidadHtml/obtenerSitio?rec_id=70843
2. https://es.wikipedia.org/wiki/Peroxidasa
3. http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz22.htm
4. http://lasaludi.info/los-factores-importantes-que-influyen-en-la-actividad-enzimatica.
html
5. https://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080806143402AAxR7Hx
6. http://www.todoexpertos.com/categorias/ciencias-e-ingenieria/quimica/respuestas/x
tfe6po8gfzrk/enzimas-y-catalizadores-inorganico
7. http://www.monografias.com/trabajos82/las-enzimas/las-enzimas2.shtml#ixzz4KAf
ae3Q2
8. http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa
9. https://www.scribd.com/doc/80995770/Reaccion-de-higado-de-res-en-presencia-de
-agua-oxigenada
10. canal-h.net/webs/sgonzalez002/Bioquímica/METABOLabólicas.htm
11. es.slideshare.net/jose99100/reacciones-endotérmica-y-exotérmicas
12. https://www.clubensayos.com/Ciencia/Ensayo/1406670.html
13. http://www.mendoza-sierra.org/Biologia_1_Mendoza_Sierra.html
14. www.botanica.cnba.uba.ar/Pakete/6to/Enzimas.htm
15. https://es.wikipedia.org/wiki/Saliva
16. http://www.livestrong.com/es/cuales-son-funciones-info_24267/
17. http://www.youbioit.com/es/article/9958/funcion-de-la-enzima-de-maltasa&size=_or
iginal
18. https://es.wikipedia.org/wiki/Piruvato_quinasa
19. https://es.wikipedia.org/wiki/Citrato_sintasa
20. http://www.ehowenespanol.com/acido-glutamico-descarboxilasa-sobre_145080/
21. http://www.experimentosfaciles.com/hacer-una-reaccion-quimica-de-descomposici
on-del-agua-oxigenada/
22. http://elricondelexperimento.blogspot.com.co/