Anda di halaman 1dari 48

PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM

PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS
TUBERKULOSIS

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

Diterbitkan oleh:
Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit & Penyehatan Lingkungan
supported by Global Fund

Acknowledgment
“Buku Pedoman Pemeriksaan Mikroskopis Tuberkulosis”

disusun dengan referensi utama:


Buku Pedoman ”Diagnosis Tuberkulosis secara Laboratorium dengan
Pemeriksaan Mikroskopis Dahak”

Pengarang:
Richard Lumb, Ivan Bastian, Gunawan Yamin

Diterbitkan oleh:
Institute of Medical & Veterinary Science

From Road
Adelaide, South Australia 5000
www.imvs.sa.gov.au
Tahun 2004

Ilustrasi oleh:
Kerry Raid

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

Terima Kasih
Buku Panduan ini diterbitkan atas bantuan dan masukan serta dukungan:

• Seluruh Direksi dan staf RSUP Persahabatan - Jakarta


Terutama staf Instalasi Laboratorium Patologi Klinik dan Mikrobiologi RSUP
Persahabatan, Jakarta

• Prof. dr. Agus Sjahrurrachman, Sp.MK. Ph.D


Guru Besar FK UI - Ketua POKJA Lab TB

• Dr. Sri Widyastuti


Dit. Bina Pelayanan Penunjang Medik - Ketua Tim Manajemen POKJA Lab TB

• Dr. Sri Prihatini, Sp.P


Konsultan TB Nasional - WHO

• Dr. Harini Djaniar, Sp.PK


Ka. Balai Pengembangan Laboratorium Kesehatan Provinsi Jawa Barat

• Dr. dr. Ni Made Mertaniasih, Sp.MK. MS


Ka Instalasi Laboratorium Mikrobiologi FK UNAIR/RS. Dr. Soetomo - Surabaya

• Ivan Bastian, Richard Lumb, Gunawan Yamin selaku pengarang dan Kerry Raid
selaku ilustrator dan artist pada Buku Pedoman “Diagnosis Tuberkulosis secara
Laboratorium dengan Pemeriksaan Mikroskopis Dahak” IMVS, Adelaide, South

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

Tim Penyusun
POKJA LAB TBC

1. Dr. Lia Gardenia Partakusuma, Sp.PK


Instalasi Laboratorium Patologi Klinik dan Mikrobiologi RS. Persahabatan
Ketua Tim Teknis POKJA Lab TB
2. Dr. Tjahyani Mirawati Sudiro, Ph.D, Sp.MK
Departemen Mikrobiologi FK UI
3. Dr. Retno Kadarsih S., Sp. MK
Departemen Mikrobiologi FK UI
4. Dr. Elly Trisnawati
Dit. Bina Pelayanan Penunjang Medik, Ditjen Yanmedik, Depkes RI
5. W.D. Murwheni, S.Si
Balai Laboratorium Kesehatan DKI Jakarta
6. Dr. Syahrial Harun
Puslitbang P2M, Badan Penelitian dan Pengembangan, Depkes RI
7. Ir. Parulian
Balai Besar Teknologi Kesehatan Lingkungan DKI Jakarta, Depkes RI

Subdit P2TBC, Depkes RI

1. Dr. Carmelia Basri, M.Epid


2. Dr. Siti Nadia
3. Sudarman S., SKM, MM
4. Dr. Ratih Pahlesia
5. Mikyal Faralina, SKM

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

Daftar Isi
Terima Kasih.................................................................................................................................................................................i
Tim Penyusun.............................................................................................................................................................................ii
Daftar Isi ..................................................................................................................................................................................iii
Kata Pengantar..........................................................................................................................................................................iv
Sambutan ...................................................................................................................................................................................v
Bab 1 Pendahuluan........................................................................................................................................................1
Bab 2 Pengumpulan Dahak.........................................................................................................................................2
Waktu Pengumpulan Dahak...........................................................................................................................2
Tempat Pengumpulan Dahak.........................................................................................................................2
Pengumpulan Dahak.........................................................................................................................................3
Cara Pengumpulan Dahak...............................................................................................................................4
Kualitas Spesimen...............................................................................................................................................5
Registrasi Spesimen...........................................................................................................................................6
Bab 3 Pembuatan Sediaan Apus................................................................................................................................8
Alat-alat yang dibutuhkan...............................................................................................................................8
Cara Membuat Sediaan Apus.........................................................................................................................9
Bagaimana Membuat Sediaan Apus yang Baik.................................................................................... 10
Bab 4 Alat dan Bahan Pewarnaan.......................................................................................................................... 12
Bab 5 Pewarnaan Metoda Ziehl-Neelsen............................................................................................................. 13
Bab 6 Pembacaan Sediaan Apus............................................................................................................................ 16
Bab 7 Pelaporan............................................................................................................................................................ 21
Bab 8 Penyimpanan..................................................................................................................................................... 23
Bab 9 Keamanan Kerja................................................................................................................................................ 24
Bab 10 Pemantapan Mutu........................................................................................................................................... 26
Bab 11 Lampiran............................................................................................................................................................. 27
Pot Dahak yang Ideal...................................................................................................................................... 27
Formulir Permohonan Laboratorium TB (TB 05)................................................................................... 28
Formulir Register Laboratorium TB (TB 04)............................................................................................. 29
Daftar Tilik Pemantapan Mutu Internal.................................................................................................... 30
Mikroskop........................................................................................................................................................... 31
Cara Pengiriman Sediaan Apus................................................................................................................... 40
Informasi Untuk Pasien.................................................................................................................................. 41
DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 i
PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

Kata Pengantar
Sebagai negara yang sedang berkembang, penyakit
infeksi masih merupakan salah satu penyebab kematian
di Indonesia dan penyakit TB masih merupakan penyakit
infeksi yang utama penyebab kematian tersebut.

Untuk menurunkan angka kesakitan TB tersebut, salah


satu upaya yang perlu mendapat perhatian adalah
penegakan diagnosis dengan pemeriksaan labora-
torium secara mikros-kopis dahak yang berkualitas.
Karena pemeriksaan mikroskopis BTA ini dilaksanakan
pada berbagai jenis dan tingkat laboratorium maka
perlu adanya standarisasi dalam prosedur pemeriksaan
mikroskopis dahak.

Direktorat P2ML bersama-sama dengan Direktorat Bina


Pelayanan Penunjang Medik melalui Pokja Laboratorium
TB telah selesai menyusun Buku Pedoman Pemeriksaan
Mikros-kopis Tuberkulosis (TB) Paru. Untuk itu kepada se-
mua pihak yang telah berpartisipasi dalam penyusunan
buku pedoman ini kami mengucapkan terima kasih.

Kami sangat mengharapkan agar semua tenaga labo-


ratorium dalam melakukan pemeriksaan mikroskopis
dahak TB meng-acu pada pedoman ini sehingga dihara-
pkan mutu pemeriksaan laboratorium dapat merata di
semua jenis dan tingkat laboratorium, serta kemampuan
dapat terus ditingkatkan.

Kami menyadari buku ini belum sempurna, oleh karena


itu usul perbaikan sangat kami harapkan untuk penyem-
purnaan buku ini di masa yang akan datang.

Jakarta, Januari 2006


DIREKTUR BINA PELAYANAN PENUNJANG
MEDIK

ii DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

Sambutan
Saat ini Tuberkulosis merupakan masalah kesehatan masyarakat di Indonesia. Jum-
lah Pasien TB di Indonesia menempati urutan ketiga terbanyak di dunia. Kerugian
yang diakibatkannya sangat besar, baik dari aspek kesehatan maupun dari aspek
sosial dan ekonomi.

WHO sejak awal tahun 1990-an telah memperkenalkan strategi penanggulangan


TB yang dikenal sebagai strategi DOTS (Directly Observed Treatment Shortcourse).
Strategi tersebut dinilai sebagai strategi intervensi yang sangat cost-effective dan
dianjurkan oleh WHO dan Bank Dunia untuk diterapkan secara terpadu pada setiap
unit pelayanan kesehatan. Target utama pengendalian TB ini adalah menemukan
pasien TB menular (BTA positif) sedikitnya 70 % pada akhir tahun 2005 dan menyem-
buhkan pasien TB yang diobati sedikitnya 85 %.

Dengan memprioritaskan pada penemuan pasien TB dengan BTA positif, maka labo-
ratorium merupakan kunci utama dalam mendiagnosa pasien TB. Hal ini ditegaskan
pada komponen kedua strategi DOTS, yaitu penegakan diagnosis menggunakan
pemeriksaan mikroskopis.

Walaupun strategi DOTS telah diadopsi sejak tahun 1995, di lapangan tetap masih
dijumpai kendala-kendala terutama dalam hal kualitas pemeriksaan laboratorium.
Berdasarkan hal tersebut, maka dirasakan perlu adanya suatu standar pemeriksaan
mikroskopis TB di seluruh laboratorium.

Kami menyambut gembira dengan diterbitkannya “Buku Pedoman Pemeriksaan


Mikroskopis Tuberkulosis” ini, diharapkan buku ini dapat berguna bagi petugas di
lapangan sehingga pemeriksaan dahak mikroskopis TB dapat sesuai dengan standar
dan kualitas yang telah ditetapkan.

Tak lupa kami sampaikan terima kasih atas dukungan dan kerjasama Direktorat Bina
Pelayanan Penunjang Medik, Direktorat Jenderal Pelayanan Medik, serta kepada
semua pihak yang tidak dapat kami sebutkan satu persatu, yang telah menyum-
bangkan tenaga dan pikiran demi tersusunnya buku ini.

Jakarta, Februari 2006

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 iii


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

1 PENDAHULUAN

Tujuan dari panduan ini adalah untuk penggunaan praktis petugas teknis laborato-
rium dalam melakukan pemeriksaan mikroskopis dahak langsung untuk menemukan
kuman Basil Tahan Asam (BTA) dalam upaya menegakkan diagnosis TB, serta sistem
pencatatan dan pelaporan yang dibutuhkan.
Dalam program pengendalian TB, diagnosis ditegakkan melalui pemeriksaan dahak
secara mikroskopis langsung yang diambil 3 kali berturut-turut : Sewaktu-Pagi-
Sewaktu (SPS).

Pemeriksaan 3 spesimen (SPS) dahak secara mikroskopis langsung menjadi pili-


han, karena nilainya setara dengan pemeriksaan dahak secara kultur atau biakan.
Pemeriksaan kultur memerlukan waktu lebih lama (paling cepat sekitar 6 minggu)
dan mahal.

Tujuan pemeriksaan mikroskopis dahak adalah :


 Menegakkan diagnosis TB
 Menentukan potensi penularan
 Memantau hasil pengobatan pasien

1 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PENGUMPULAN DAHAK 2
Waktu pengUMPUlan spesimen

Dibutuhkan tiga spesimen dahak untuk menegakkan diagnosis TB secara mikrosko-


pis. Spesimen dahak paling baik diambil pada pagi hari selama 3 hari berturut-turut
(pagi-pagi-pagi), tetapi untuk kenyamanan penderita pengumpulan dahak dilakukan
: Sewaktu – Pagi – Sewaktu (SPS) dalam jangka waktu 2 hari.

Sewaktu hari -1 (dahak sewaktu pertama = A)


 Kumpulkan dahak spesimen pertama pada saat pasien berkunjung ke UPK (Unit
Pelayanan Kesehatan)
 Beri pot dahak pada saat pasien pulang untuk keperluan pengumpulan dahak
pada hari berikutnya.

Pagi hari -2 (dahak pagi = B)


 Pasien mengeluarkan dahak spesimen kedua pada pagi hari kedua setelah ban-
gun tidur dan membawa spesimen ke laboratorium.

Sewaktu hari -2 (dahak sewaktu kedua = C)


 Kumpulkan dahak spesimen ketiga di laboratorium pada saat pasien kembali ke
laboratorium pada hari kedua saat membawa dahak pagi (B).

TEMPAT PENGUMPULAN DAHAK

Pengumpulan dahak dilakukan di ruang terbuka dan mendapat sinar matahari lang-
sung atau di ruangan dengan ventilasi yang baik, untuk mengurangi kemungkinan
penularan akibat percikan dahak yang infeksius.

Jangan mengambil dahak di ruangan tertutup dengan ventilasi yang buruk, mis-
alnya:
 Kamar kecil / toilet
 Ruang kerja (ruang pendaftaran, ruang pengumpulan sampel, laboratorium,
dsb)

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 2


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

2 PENGUMPULAN DAHAK

 Ruang tunggu, ruang umum lainnya.

PENGUMPULAN DAHAK

Formulir Permohonan
Petunjuk sebelum pengumpulanLaboratorium
dahak TB untuk pemeriksaan dahak (TB 05)

• Periksa Formulir permo-


honan Laboratorium TB 05
• Lengkapi isian formulir
• Tandai (√) untuk Diagnosis
atau Follow-up

 Beri label yang jelas pada dinding pot dahak


sesuai dengan nomor identitas sediaan dahak
(TB 06)
 Label ditempelkan pada dinding pot, jangan
pada tutupnya
 Pot dahak sekali pakai (tidak harus steril), di-

3 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PENGUMPULAN DAHAK 2
Cara pengumpulan dahak

Jangan berdiri di depan pasien saat pengumpulan

Beri petunjuk pada pasien untuk:


1. Kumur dengan air sebelum mengeluarkan dahak
2. Bila memakai gigi palsu, lepaskan sebelum berkumur
3. Tarik nafas dalam 2 – 3 kali dan setiap kali hembuskan nafas
dengan kuat
4. Letakkan pot yang sudah dibuka dekat dengan mulut dan keluarkan dahak ke
dalam pot
5. Batukkan dengan keras dari dalam dada
6. Tutup pot dengan rapat dengan cara memutar tutupnya
7. Setelah mengeluarkan dahak, bersihkan mulut dengan tissue, kemudian buang
tissue di tempat sampah yang bertutup, kemudian cuci tangan

Bila perlu hal di atas dapat diulang sampai mendapatkan dahak yang berkualitas
baik dan volume yang cukup (3-5 ml)

Bila dahak sulit dikeluarkan, dapat dilakukan hal sebagai berikut:


1. Lakukan olah raga ringan kemudian menarik nafas dalam beberapa kali. Bila
terasa akan batuk, nafas ditahan selama mungkin lalu disuruh batuk.
2. Malam hari sebelum tidur, banyak minum air atau menelan 1 tablet gliseril
guayakolat 200 mg.

Bila spesimen jelek, pemeriksaan tetap dilakukan dengan :


1. Mengambil bagian yang paling mukopurulen / kental kuning kehijauan
2. Diberi catatan bahwa ”spesimen tidak memenuhi syarat / air liur”

Bila tidak ada spesimen dahak yang dapat dikeluarkan, pot dahak harus dibuang,
tidak dapat digunakan untuk pasien lain.

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 4


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

2 PENGUMPULAN DAHAK

Kualitas spesimen
√ √


Dahak mukoid Dahak purulen

√ X

Bukan dahak, tetapi air liur (encer dan


Dahak tercampur darah seperti air, atau sebagian besar terdiri dari
gelembung-gelembung)

Pengumpulan spesimen diulang bila :


 Spesimen jelas air liur
 Data pada pot dahak tidak sesuai dengan data dalam formulir permo-
honan laboratorium TB (formulir TB 05)

5 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PENGUMPULAN DAHAK 2
 Spesimen dikumpulkan bukan dalam pot dahak

Registrasi spesimen

Identitas spesimen harus dicatat lebih dahulu pada formulir TB 04 sebelum

4 02/05/757 A

Register Laboratorium (TB 04)

Formulir Permohonan Laboratorium TB (TB

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 6


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

2 PENGUMPULAN DAHAK

diproses.

Keterangan bagan :
1. Periksa data pasien di pot dahak dan cocokkan dengan yang ada di formulir
permohonan laboratorium TB (Formulir TB 05)
2. Pindahkan data pasien dari formulir permohon laboratorium TB (TB 05) ke register
laboratorium TB (Formulir TB 04)
3. Tulis nomor register laboratorium pada formulir TB 04.
4. Tulis nomor register laboratorium pada formulir permohonan laboratorium TB
(TB 05)
5. Berilah tanda pada kolom yang sesuai di register laboratorium alasan pemeriksaan
dahak sesuai formulir permohonan laboratorium TB.

Untuk setiap pasien, gunakan nomor identitas sediaan yang sama dan beri huruf
A,B,C untuk identifikasi spesimen :
 Sewaktu (A)
 Pagi (B)
 Sewaktu (C)

7 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS 4

PEMBUATAN SEDIAAN APUS 3


Spesimen air liur harus dilaporkan pada formulir permohonan laboratorium TB
(TB 05)

ALAT-ALAT YANG DIBUTUHKAN

Aplikator dari bambu/lidi


lancip, bambu/lidi ujung
tidak rata atau ose.

Kaca sediaan yang baru, bersih, jangan


memakai ulang kaca sediaan yang telah

Botol berisi pasir dan Lampu spiritus/bunsen


disinfektan (alkohol
70% / lisol) untuk
membersihkan ose

Wadah pem-
buangan
berisi disinfek-
tan (misalnya
lisol 5%) Wadah pem-
buangan
untuk aplika-
tor

Aplikator dari bambu/kayu yang bersih lebih baik, sebab:


 Dapat lebih cepat memisahkan bagian yang purulen dari air liur
 Dapat mengangkat dahak lebih banyak daripada ose
 Lebih mudah didapat dan lebih aman karena dapat langsung dibuang
DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 8
PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

3 PEMBUATAN SEDIAAN APUS

 Pemakaian lebih cepat

Meja kerja harus kokoh, kedap air, mudah dibersihkan dengan disinfektan.

Cara
Kodemembuat
Kabupaten/sediaan apus
Kode UPK

Satu kaca sediaan digunakan hanya untuk satu spesimen dahak

Nomor sediaan
 B

Waktu pengumpulan

 A

Spesimen dahak dengan bagian


yang purulen (A) di dalam air liur (B)

Pilih dan
ambil
Tulis nomor identitas pasien pada bagian dari
bagian ujung kaca. Bila menggu- dahak yang
nakan kaca frosted tulis dengan purulen
meng-gunakan pensil 2B pada meng-
bagian yang buram/frosted. Bila gunakan
menggunakan kaca biasa, tulis ose atau
dengan spidol permanen pada lidi yang
stiker yang dilekatkan di balik

3 cm

2 cm

Pola 2 cm x 3 cm

9 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PEMBUATAN SEDIAAN APUS 3


BAGAIMANA MEMBUAT sediaan apus YANG BAIK

Jangan terlalu tipis untuk menghindari


apusan menjadi kering sebelum diratakan.
Untuk meratakan sediaan buat spiral-spiral
kecil sewaktu apusan setengah kering
dengan menggunakan lidi lancip sehingga
didapat sebaran lekosit lebih rata dan area
baca lebih homogen.

Jangan membuat spiral-spiral kecil pada


apusan yang sudah kering, karena dapat
terkelupas dan menjadi aerosol yang
berbahaya.
Cara membuat sediaan apus

Ose yang telah digunakan dicelupkan


dalam botol pasir disinfektan, kemudian
bakar sampai ose membara
Bila menggunakan lidi, langsung dibuang
ke dalam botol berisi disinfektan.

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 10


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

3 PEMBUATAN SEDIAAN APUS

Keringkan di udara. Keringkan


Setelah kering lakukan fiksasi apusan di atas
dengan pemanasan. rak sediaan,
 Pastikan apusan mengha- hindari sinar
dap ke atas matahari lang-
 Lewatkan 3 x melalui api sung.
dari lampu spiritus.
Gunakan pinset atau penjepit
kayu untuk memegang kaca Cuci tangan
Pemanasan yang berlebihan akan merusak hasil. setelah selesai
membuat sediaan
Sediaan apus yang baik ialah : apus.

• Berasal dari dahak mukopurulen, bukan air liur.


• Berbentuk spiral-spiral kecil berulang (coil type), yang tersebar merata, ukuran
2 x 3 cm.
• Tidak terlalu tebal atau tipis.
• Setelah dikeringkan sebelum diwarnai, tulisan pada surat kabar 4 - 5 cm di bawah
sediaan apus masih terbaca.
Sediaan yang baik
dapat dinilai dengan
cara membaca tulisan
di bawahnya

Cara penanganan dahak yang bercampur darah


1. Dahak dengan darah sedikit:
Pilih bagian dahak yang tidak mengandung darah, dan buat sediaan seperti
biasa
2. Dahak dengan darah sedang
Buat sediaan, kemudian fiksasi, genangi dengan air bersih/aquades lalu digoyang-
goyang sampai warna merah darah hilang. Lalu air dibuang dan bilas lagi dengan
air kemudian warnai dengan Ziehl-Neelsen.

Cara penanganan dahak yang encer

11 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS 5

ALAT DAN BAHAN PEWARNAAN 4


Untuk mewarnai sediaan apus dengan pewarnaan Ziehl-Neelsen diperlukan :

Rak sediaan untuk meletakkan


sediaan. Rak diletakkan di atas
bak cuci atau baskom.

Pinset atau Air mengalir


Penjepit kayu atau botol sem-

Rak untuk mengeringkan sedi-


Lampu spiritus aan yang telah diwarnai. Pengatur waktu

Sulut api
Methylene blue Carbol fuchsin Asam alkohol
0,3% 0,3% (3% HCl dalam etanol)

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 12


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PEWARNAAN METODA ZIEHL-NEELSEN

1 2

Letakkan sediaan dengan bagian


apusan meng-hadap ke atas pada rak Genangi seluruh permukaan sedi-
yang ditempatkan di atas bak cuci atau aan dengan carbol fuchsin.
baskom, antara satu sediaan dengan Saring zat warna setiap kali akan
sediaan lainnya masing-masing berjarak melakukan pewarnaan sediaan
kurang lebih 1 jari. Jumlah maksimum
3 4

Panasi dari bawah dengan menggu- Diamkan selama minimal 5 menit.


nakan sulut api setiap sediaan sampai Waktu yang lebih lama juga boleh, tetapi
keluar uap. pewarna di atas sediaan tidak boleh
5

Bilas sediaan dengan hati-hati dengan Jangan ada percikan ke sediaan lain

13 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PEWARNAAN METODA ZIEHL-NEELSEN

6 7

Miringkan sediaan menggunakan Genangi dengan asam alkohol sam-


penjepit kayu atau pinset untuk pai tidak tampak warna merah carbol
membuang air fuchsin
8 9

Genangi permukaan sediaan Bilas sediaan dengan air mengalir


dengan methylene blue selama Jangan ada percikan ke sediaan lain

10 11

Keringkan sediaan pada rak pengering


Miringkan sediaan untuk mengalirkan Jangan keringkan dengan kertas tissue

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 14


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

5 PEWARNAAN METODA ZIEHL-NEELSEN

Sediaan apus yang telah diwarnai dengan

Hasil pewarnaan apusan dengan teknik pembuatan yang kurang baik

Terlalu tebal Terlalu tipis

Kurang di tengah, terlalu tipis Pewarnaan tidak merata, ukuran


dan kurang dekolorisasi terlalu besar

15 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PEMBACAAN SEDIAAN APUS

Sediaan apus harus diperiksa secara sistematis untuk memastikan bahwa hasil
yang dilaporkan telah mewakili seluruh bagian sediaan. Jangan memeriksa sediaan
sebelum kering.
Langkah-langkah pembacaan sediaan apus :
1 2

Teteskan satu tetes minyak


Gunakan lensa objektif 10 x untuk emersi, aplikator minyak emersi
menetap-kan fokus dan menemukan tidak boleh menyentuh kaca
lapang pandang. Periksa sediaan untuk objek. Tetesan harus jatuh bebas
menentu-kan kualitas sediaan. Pada ke permukaan sediaan apus
sediaan dahak umumnya ditemukan agar aplikator minyak emersi
lebih banyak sel lekosit atau sel radang tidak terkontaminasi dengan

3 4

Putarlah lensa objektif 100x dengan


hati-hati ke atas sediaan apus.
Jangan sekali-kali lensa menyentuh Sesuaikan fokus dengan hati-hati
kaca sediaan. sampai sel-sel terlihat dengan

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 16


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

6 PEMBACAAN SEDIAAN APUS

Sebelum melakukan pembacaan, lakukan penilaian sediaan apus yang telah di-

A. Kualitas dahak
A Kualitas dahak yang baik
dinilai dengan melihat di
bawah mikroskop, yaitu
terlihat lebih dari 25 leko-
sit (sel radang) per lapang
pandang pada pembe-
saran 100 x (10 x pem-
besaran lensa objektif /
10 x pem-besaran lensa
okuler), juga dapat dilihat
sel debu (dust cells) atau

B. Ukuran sediaan apus


Ukuran sediaan apus yang baik
adalah 2 x 3 cm, karena dengan
ukuran tersebut dapat dibaca
minimal 100 lapang pandang
sepanjang garis tengah.

}
C. Kerataan sediaan apus
Dahak tersebar merata, tidak
ter-lihat daerah yang kosong
pada kaca objek.
+ 150
lapang D. Ketebalan sediaan apus
pan- Diperiksa dengan cara me-
megang sediaan apus 4 - 5 cm
di atas surat kabar atau tulisan
cetakan. Ketebalan sediaan
apus dianggap baik bila huruf-
huruf tulisannya masih dapat

17 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PEMBACAAN SEDIAAN APUS

E. Pewarnaan sediaan apus


BTA terlihat jelas berwarna merah terang dengan latar belakang biru tanpa ada
sisa-sisa zat warna fuchsin.

F. Kebersihan sediaan apus


Sediaan apus harus bebas dari sisa-sisa zat warna fuchsin, kotoran serta kristal
yang dihasilkan dari pemanasan berlebih saat pewarnaan.

Dekolorisasi yang tidak baik

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 18


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

6 PEMBACAAN SEDIAAN APUS

Untuk menghindari kelelahan pembacaan sediaan apus, lakukan pemeriksaan


dengan sikap tubuh yang benar

Sikap yang benar Sikap yang salah

Beri pen-
yangga pada
Kaki meng-
kaki agar
gantung
punggung
menjadi
lurus

Sikap yang benar Sikap yang salah


Naikkan Mikroskop
mikroskop terlalu rendah
untuk dan kaki tidak
membantu rata dengan
meluruskan lantai
punggung
dan letakkan
kaki rata den-
gan lantai

19 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PEMBACAAN SEDIAAN APUS

A B

Sediaan apus dahak dengan pewarnaan Sediaan apus air liur dengan pewarnaan
Zielh-Neelsen (banyak sel radang) Zielh-Neelsen (banyak sel epitel)

Lakukan pembacaan sediaan apus secara sistematis untuk memastikan hasil yang
dilaporkan mewakili seluruh bagian sediaan.
Pembacaan dimulai dari ujung kiri ke ujung kanan dan dilakukan pada sediaan
yang sel-selnya terlihat, bila sediaan tampak kosong, geser pada lapang pandang

Setelah selesai pembacaan, bersihkan minyak dari sediaan apus dengan meng-
gunakan pelarut organik.
Setelah kering, tempatkan sediaan apus tersebut dengan hati-hati dalam kotak
penyimpanan guna pengontrolan kualitas oleh laboratorium rujukan/cross-check
. Ini harus dikerjakan berdasarkan petunjuk yang ditetapkan oleh Program TB Na-

Sebelum menguji sediaan apus


selanjutnya, bersihkan lensa
dengan menggunakan tissue.

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 20


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

7 PELAPORAN

Apa yang terlihat Apa yang dilaporkan


Tidak ditemukan BTA minimal dalam 100 BTA negatif
lapang pandang
1 – 9 BTA dalam 100 lapang pandang Tuliskan jumlah BTA yang ditemukan/100
lapang pandang

10 – 99 BTA dalam 100 lapang pandang 1+


1 – 10 BTA dalam 1 lapang pandang, 2+
periksa minimal 50 lapang pandang
Lebih dari 10 BTA dalam 1 lapang 3+
pandang, periksa minimal 20 lapang

BTA yang ditemukan menegakkan diagnosis TB dan jumlah BTA yang ditemukan
menunjukkan beratnya penyakit. Oleh karena itu sangat penting untuk mencatat
dengan benar apa yang terlihat. Skema pelaporan ini mengacu pada skala Interna-
tional Union Against Tuberculosis and Lung Diseases (IUATLD).

21 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PELAPORAN 7
Formulir Permohonan Laboratorium TB

4 Catat Hasil 2

3
Beri tanggal dan tandatan-
5
Kembalikan ke dokter atau

Register Laboratorium (TB 04)

1. Periksa Nomor Register Laboratorium, cocokkan dengan formulir Permohonan


Laboratorium (TB 05)
2. Catat hasil pemeriksaan pada Formulir Permohonan Laboratorium (TB 05)
3. Beri tanggal dan tandatangani Formulir Permohonan Laboratorium (TB 05)
4. Catat hasil pemeriksaan pada Register Laboratorium (TB 04)
5. Kembalikan Formulir Permohonan Laboratorium TB 05 kepada dokter atau UPK
yang mengirimkan

Pelaporan disampaikan secepatnya pada dokter pengirim, petugas harus menjaga


kerahasiaan hasil laboratorium.
Jangan menuliskan hasil pemeriksaan pada sediaan karena sediaan dibutuhkan
untuk cross check/uji silang pemantapan mutu.

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 22


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

8 PENYIMPANAN

Hapus dengan hati-hati min-


yak imersi pada sediaan dengan
menggunakan ujung kertas tissue
yang bersih.
Untuk setiap sediaan digunakan
satu kertas tissue.

Jangan menggunakan 1 kertas tis-

Simpan sediaan dalam kotak


sediaan secara berurutan
menurut nomor register
laboratorium untuk keper-
luan pemantapan mutu/uji
silang (cross check) minimal

Kertas tissue yang telah digunakan


dibuang ke tempat pembuangan
yang telah diberi disinfektan.

23 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

KEAMANAN KERJA 9
Penularan TB terjadi karena percikan dahak infeksius di udara terhirup orang lain.
Pemeriksaan dahak yang dilakukan sesuai prosedur standar oleh petugas labora-
torium menjamin tidak akan berisiko penularan TB.

Keamanan Kerja Laboratorium:


1. Selain petugas laboratorium tidak diperkenankan masuk ke dalam ruangan
pemeriksaan laboratorium. (Petugas kebersihan dan teknisi alat hanya diperk-
enankan masuk setelah mempelajari keamanan kerja laboratorium dan menda-
pat izin dari pimpinan unit laboratorium)
2. Setiap petugas laboratorium hendaknya menyadari bahwa sedang bekerja
dengan bahan-bahan yang berbahaya, karena itu harus mengenakan jas lab.
3. Dilarang makan, minum atau merokok di dalam ruangan laboratorium.
4. Dilarang memakai perhiasan pada tangan selama bekerja dan dilarang meny-
entuh wajah dengan tangan atau peralatan laboratorium.
5. Dilarang menggunakan pipet dengan mulut.
6. Setelah selesai bekerja, bersihkan meja kerja, peralatan dan lantai dengan dis-
infektan.
7. Bersihkan tangan setelah melakukan setiap kegiatan. Setelah menyelesaikan
semua pekerjaan, cucilah tangan dengan sabun sampai bersih.
8. Tanggalkan jas lab sebelum meninggalkan ruangan laboratorium dan cuci tangan
kembali
9. Pekerjaan administratif sebaiknya di kerjakan di luar ruangan laboratorium.
10. Ruangan harus mempunyai ventilasi yang baik. Bila ruang memakai AC, exhaust
fan harus dipasang setiap 6 jam selama 30 menit.
11. Setiap orang yang bekerja di laboratorium dianjurkan melakukan pemeriksaan
kesehatan secara berkala.
12. Penggunaan masker tidak menjamin keamanan kerja dan tidak diharuskan.

Pengelolaan limbah :
1. Buang aplikator bambu, lidi lancip bekas pakai, dan kaca sediaan yang sudah
tidak dipakai ke dalam ember yang telah dilapisi kantung plastik dan diisi disin-
fektan
2. Buka tutup pot dahak bekas, isi dengan desinfektan sama banyak dengan sisa
dahak, tutup kembali lalu masukkan ke dalam ember yang telah dilapisi kantung
plastik yang telah diisi disinfektan untuk dibuang
3. Untuk limbah cair (bekas pewarnaan) ditampung dulu dalam wadah yang diberi
disinfektan sebelum dibuang.
4. Semua bahan bekas pakai direndam dalam disinfektan selama minimal 12 jam,

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 24


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

9 KEAMANAN KERJA

Tuangkan disinfektan ke Buang wadah dahak yang telah


dalam wadah dahak yang te- diberi disinfektan ke dalam tempat
lah selesai diperiksa sebelum pembuangan yang telah diberi

Seluruh limbah yang telah direndam


dalam disinfektan dibakar atau dikubur
dalam lubang sedalam minimal 1,5

25 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

PEMANTAPAN MUTU

Untuk menjamin ketepatan hasil pemeriksaan dahak mikroskopis, harus dilakukan


kegiatan pemantapan mutu yang meliputi:

1. Pendidikan dan pelatihan


2. Pelaksanaan pemantapan mutu internal:
 persiapan penderita,
 pengumpulan dan penanganan spesimen,
 pemeliharaan alat/mikroskop,
 uji kualitas reagen / larutan pewarna,
 penyusunan prosedur tetap, dan
 pencatatan serta pelaporan.
3. Pelaksanaan pemantapan mutu eksternal :
• Melakukan uji silang/cross check.
• Mengikuti uji profisiensi/uji panel.
• Supervisi.
4. Melaksanakan praktek laboratorium yang benar.
5. Menindaklanjuti pemantapan mutu internal dan eksternal dengan kegiatan
peningkatan mutu.

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 26


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
POT DAHAK YANG IDEAL

Syarat :
 Sekali pakai.
 Bahan kuat, tidak bocor dan tidak
mudah pecah.
 Tutup berulir, dapat menutup
rapat.
 Plastik jernih/ tembus pandang.
 Mulut lebar, diameter 6 cm.
 Dapat ditulisi dengan pena per-

X √ X

X
X

Pot dahak yang tidak dian-


jurkan:
 Tidak tembus pandang
 Terlalu kecil
 Tutup tidak berulir

27 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
FORMULIR PERMOHONAN LABORATORIUM TB (TB 05)

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 28


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
FORMULIR REGISTER LABORATORIUM TB (TB 04)

29 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
DAFTAR TILIK PEMANTAPAN MUTU INTERNAL

No. Kegiatan Ya* Tidak*

1. Mengikuti pelatihan pemeriksaan mikrosko-


pis dahak dalam 3 tahun terakhir.
2. Memberi instruksi yang benar tentang cara
mengeluarkan dahak pada pasien.
3. Menyediakan wadah dahak yang sesuai den-
gan persyaratan.
4. Ada SOP mengenai cara pemeriksaan
mikroskopis dahak:
• Membuat apusan sesuai dengan SOP.
• Mewarnai sediaan apus menggunakan
pewarnaan Ziehl Neelsen sesuai dengan
SOP.
• Melakukan pembacaan sediaan apus
sesuai SOP.
• Melaporkan hasil pembacaan sesuai SOP.
5. Melakukan uji kualitas reagen menggunakan
kontrol positif (1+) dan negatif.
6. Melakukan pemeliharaan berkala mikroskop
dan peralatan lain.
7. Tidak menggunakan reagensia kadaluarsa.
8. Pemeriksaan ulang oleh pengawas.
9. Menyimpan seluruh sediaan sekurang-
kurangnya selama 3 bulan (untuk cross
check/uji silang).

* Beri tanda 
( ) pada kolom yang sesuai

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 30


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP

BAGIAN-BAGIAN MIKROSKOP

Bagian penting dari mikroskop adalah lensa okuler, lensa objektif, tabung mikroskop,
makrometer/pengatur fokus kasar, mikrometer/pengatur fokus halus, revolver/lem-
peng objektif, lengan, meja sediaan, penjepit sediaan, skala, kondensor, pengatur
iris/diafragma, penggeser sediaan dan pengatur lampu.

a. Bagian mekanik
1) Kaki, bentuknya bermacam-macam tergantung pabrik pembuatnya, ada
yang berbentuk V, bulat, segi empat.
2) Lengan menghubungkan kaki dan tabung mikroskop (untuk dipegang
pada waktu mengangkat mikroskop).
3) Tabung mikroskop, menghubungkan antara lensa okuler dan lensa ob-
jektif, merupakan jalan cahaya. Pada mikroskop berprisma antara tabung
mikroskop dan lempeng objektif terdapat lensa prisma.
4) Makrometer (Pengatur fokus kasar).
Untuk menggerakkan meja sediaan ke atas dan ke bawah secara makro.
5) Mikrometer (Pengatur halus).
Untuk menggerakkan meja sediaan ke atas dan ke bawah secara mikro
sehingga objek dapat terlihat dengan lebih jelas.
6) Pengatur kondensor, untuk menggerakkan kondensor ke atas dan ke
bawah.
7) Pengatur iris/diafragma, untuk mengatur kekuatan cahaya.
8) Meja sediaan, untuk meletakkan kaca sediaan.
9) Penjepit sediaan untuk menjepit kaca sediaan.
10) Penggeser sediaan, berfungsi menggeser kaca sediaan ke depan dan ke
belakang atau ke kiri dan ke kanan untuk mendapatkan lapangan pandang
yang baik.

31 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP
11) Skala, terletak pada meja sediaan berguna untuk menandai letak objek
yang terlihat.
12) Lempeng objektif dengan 3 atau 4 lubang tempat lensa objektif melekat,
dan dapat diputar.

b. Bagian optik
1) Lensa okuler
Lensa yang berhadapan dengan mata, terletak di ujung tabung mikroskop,
dapat diangkat dengan menariknya ke atas. Ukuran pembesaran 5 x dan 10
x. Untuk pemeriksaan dahak BTA, digunakan yang 10 x. Fungsi dari lensa
okuler memberikan perbesaran kedua kalinya pada benda/objek.
2) Lensa objektif
Lensa objektif berada tepat di bawah tabung mikroskop, melekat pada
lempeng objektif. Lensa ini berfungsi memberi pembesaran pertama pada
benda. Terdapat objektif dengan perbesaran 10 x (pembesaran kecil), 40 x
/45 x (pembesaran sedang) dan 100 x (pembesaran besar). Ukuran lensa
dapat diatur dengan memutar lempeng objektif, bila kedudukan lensa
sudah tepat akan terdengar bunyi “klik”. Untuk pembesaran 100 x sediaan
harus ditetesi minyak emersi.
3) Kondensor
Fungsi kondensor adalah memfokuskan cahaya agar menjadi kuat sehingga
jatuh sebagai titik cahaya di atas sediaan. Kondensor dapat dinaik turunkan
dengan memutar-mutar pengatur kondensor. Bila tidak memerlukan
cahaya yang terlalu kuat maka kondensor diturunkan. Pada pemeriksaan
dahak kondensor dinaikkan sampai maksimal. Pada kondensor terdapat
juga tempat filter yang bersifat menyaring cahaya, tetapi pada pemeriksaan
mikroskopik dahak, filter ini tidak digunakan.
4) Iris/Diafragma
Terletak pada kondensor, berfungsi mengatur banyak sedikitnya cahaya

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 32


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP

33 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP
yang masuk ke dalam mikroskop. Untuk pemeriksaan BTA diafragma harus
dibuka maksimal.
5) Sumber cahaya
Di bawah kondensor terdapat sumber cahaya yang dapat berupa cermin
atau lampu. Untuk cahaya yang jauh, digunakan cermin datar, sedangkan
untuk cahaya dekat (misalnya menggunakan lampu meja) digunakan
cermin cekung.

Untuk dapat melihat benda atau objek dengan mikroskop maka perlu diketahui
prinsip kerja mikroskop dan cara penggunaannya.

a. Prinsip kerja mikroskop


Cahaya yang berasal dari sumber cahaya (cermin atau sinar lampu) diteruskan ke
diafragma, kondensor dan kaca sediaan yang diperiksa. Cahaya dari lensa objektif
diteruskan melalui tabung mikroskop ke lensa okuler dan selanjutnya diterima oleh
mata sehingga objek terlihat.

b. Cara menggunakan mikroskop untuk pemeriksaan dahak


1) Letakkan mikroskop di meja yang permukaannya datar, tidak licin dan
dekat sumber cahaya.
2) Bila menggunakan sumber cahaya lampu :
a) Atur tegangan lampu ke minimum.
b) Nyalakan mikroskop memakai tombol ON.
c) Sesuaikan dengan pelan-pelan sampai intensitas cahaya yang di-
inginkan tercapai.
3) Bila menggunakan cermin, arahkan cer-
min ke sumber cahaya.
4) Letakkan sediaan yang telah diwarnai ke
atas meja sediaan.
5) Putar lempeng objektif ke objektif 10 x.
6) Atur dengan tombol pengatur fokus kasar
dan pengatur fokus halus sampai sediaan
terlihat jelas.

Selalu gunakan tombol pengatur focus


untuk menurunkan meja sediaan menjauhi

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 34


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP
lensa

7) Sesuaikan jarak antar pupil sampai gambar kiri dan gambar kanan menyatu
dengan cara menggeser-geser kedua lensa okuler karena setiap orang
mempunyai jarak antar pupil yang berbeda-beda).
8) Fokuskan gambar dengan mata kanan dengan cara melihat ke dalam
okuler kanan dan sesuaikan dengan tombol pengatur focus halus.
9) Fokuskan gambar dengan mata kiri dengan cara melihat ke dalam okuler
kiri dan putar. cincin penyesuai diopter sampai didapatkan gambar yang
paling jelas, baik untuk mata kiri maupun mata kanan.
10) Buka iris/diafragma sampai 70 – 80%, hingga lapangan pandang terang
dengan merata.

11) Teteskan minyak imersi di atas sediaan (aplikator jangan menyentuh sedi-
aan) dan putar lensa objektif 100 x ke tempatnya sampai berbunyi “klik”.
12) Fokuskan dengan menggunakan tombol pengatur fokus halus (jangan
menggunakan tombol pengatur fokus kasar sebab dapat menyebabkan
pecahnya lensa objektif maupun kaca sediaan) sampai didapatkan gambar
yang paling jelas.
13) Gunakan pengatur tegangan lampu untuk mendapatkan cahaya yang
tepat.

35 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP
14) Begitu sediaan selesai dibaca, putar objektif 100 x menjauhi kaca sediaan,
tempatkan objektif 10 x di atas sediaan, lalu sediaan diambil.
15) Bila telah selesai, atur kembali pengatur tegangan lampu ke minimum dan
matikan mikroskop dengan menekan tombol OFF.
16) Setiap selesai menggunakan mikroskop, bersihkan dengan hati-hati minyak
emersi dari lensa objektif 100 x dengan menggunakan kertas lensa/kain
halus, masukkan dalam kotak mikroskop yang telah dikontrol kelembaban-
nya dengan menempatkan lampu 5 watt yang menyala.

Perawatan mikroskop
Jangan sekali-kali membongkar bagian dalam mikroskop.

Membersihkan lensa
 Untuk membersihkan lensa sebaiknya gunakan Ethyl ether atau pembersih
lensa yang sesuai anjuran pabrik. Beberapa bahan pembersih dapat merusak
permukaan lensa atau melarutkan perekat lensa setelah digunakan beberapa
waktu.

Bahan pembersih Penggunaan jangka panjang Pengunaan sekali-sekali


Rekomendasi pabrik √ √
Ethyl ether/ethanol √ √
Alkohol X √
Bensin X √
Aseton/ keton X √
Xylol X X

 Gunakan sesedikit mungkin cairan pembersih. Letakkan sedikit cairan pada


kertas lensa untuk membersihkan.
 Kertas lensa adalah yang terbaik untuk membersihkan lensa, dapat pula
digunakan kain halus (flannel).
 Kertas tissue dapat menggores permukaan lensa.

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 36


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP
Sumber cahaya
• Jangan sekali-sekali menyentuh permukaan bola lampu dengan tangan telan-
jang, karena lemak kulit yang tertinggal akan mengurangi terangnya sinar.
• Gunakan kertas tissue/ kertas lensa/ pembungkus lampu untuk memegang bola
lampu saat memasangnya ke mikroskop.
• Sebaiknya selalu tersedia cadangan lampu dan sekering. Pastikan voltase yang
digunakan sesuai, 110V atau 220V, dan bilamana perlu gunakan stabilisator
voltase.
• Harus ada ventilasi yang cukup agar panas yang dihasilkan lampu dapat diatasi.
Sebelum menyalakan lampu, putarlah regulator voltase ke minimum. Setelah

Jangan menyentuh
bola lampu saat mema-
Penghembus udara sang, gunakan tissue

37 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP
 Okuler harus tetap pada tempatnya, jamur atau debu dapat masuk melalui
lubang kosong tempat objektif bila lensa tidak terpasang. Bila lensa ada yang
hilang, tutup rapat dengan penutup yang tersedia.
 Bila gambar terlihat buram atau ada bintik hitam, periksa adanya debu atau
kotoran pada lensa objektif, okuler, kondensor, dan kaca sumber cahaya.
Bintik hitam bergerak bila okuler diputar, berarti debu pada okuler. Bintik
hitam bila sediaan digerakkan, berarti debu pada kaca sediaan.
 Debu pada lensa dapat dihilangkan dengan menggunakan sikat halus atau
dengan meniupkan udara dengan penghembus udara di atas permukaan
lensa.

Pemeliharaan bagian-bagian mekanik dari mikroskop

Sulit digerakkan
Hal ini terjadi karena akumulasi debu atau karena saluran penggeser/ rakJamur
dan/roda
Jamur
gigi telah menjadi kasar. Atasi dengan cara membersihkan kotoran dan meminyak-
tumbuh
tumbuh
inya dengan minyak gemuk/ silicone grease. Debu dibersihkan dengan penghembus
di bagian
di
udara atau kuas, dapat pula dibersihkan dengan pelarut, misalnya bensin.dalam
bagian
Gangguan ini dapat pula terjadi akibat ada bagian yang melengkung. kepala
dalam
tabung
Longgar
Hal ini sering terjadi karena ulir kondensor telah aus. Laporkan pada teknisi alat.

Pertumbuhan jamur

• Jamur yang tumbuh di lensa, tabung okuler dan prisma menyebabkan gambar

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 38


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
MIKROSKOP
Kotak penghangat untuk menyimpan mikroskop

Untuk pertukaran udara

Penempatan bahan pengering

39 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
CARA PENGIRIMAN SEDIAAN APUS
1. Periksa masing-masing pot dahak
dengan menuliskan:
- Nama Pasien
- Tanggal
- .............
2. Tutup masing-masing pot dalam
Kantong bio-hazard secara bersa-
maan
3. Periksa ulang spesimen dengan
formulir pemeriksaan
4. Letakkan kantong bio-hazard yang
sudah disegel ke dalam kotak pen-
giriman
5. Letakkan formulir dan daftar asli ke
dalam kantong segel
6. Aturlah pengiriman agar tidak
bergerak
7. Kemudian masukkan kantong

• Kirimkan sediaan apus di dalam kotak sediaan.


• Bila tidak tersedia kotak sediaan lakukan pengiriman dengan cara berikut:
1 2

1. Bungkus sediaan apus dengan kertas tissue satu persatu.


2. Ikat dengan karet agar gulungan tidak terlepas.
Masukkan gulungan kedalam kantong plastik yang tertutup rapat kemudian masu-
kkan kedalam amplop untuk dikirim ke laboratorium rujukan

DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006 40


PANDUAN BAGI PETUGAS LABORATORIUM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TUBERKULOSIS

LAMPIRAN
INFORMASI UNTUK PASIEN
1. Dokter/perawat mengirim anda ke laboratorium karena mereka menduga bahwa
mungkin anda mempunyai gejala TB.
2. Untuk mendiagnosa TB dibutuhkan 3 spesimen dahak yang akan dikumpul-
kan:
- Pemeriksaan pertama
- Esok paginya sebelum sarapan
- Ketika kembali ke laboratorium keesokan harinya
3. Contoh kualitas dahak yang baik adalah dari paru-paru, bukan dari air liur atau
lendir hidung.
4. Berkumur dengan air jika anda baru saja makan, atau jika anda memakai gigi
palsu (cabut terlebih dahulu).
5. Untuk menghasilkan contoh dahak yang baik:
- Tarik nafas dalam-dalam 2 sampai 3 kali, hembuskan dengan kuat setiap kali
membuang nafas.
- Batukkan yang dalam melalui dada.
- Letakkan pot dalam keadaan terbuka dan tutupkan pada mulut untuk me-
nampung spesimen dahak.
- Tutup dengan rapat bila telah selesai.
6. Anda mungkin diminta untuk mengulang pengumpulan dahak untuk mempe-

41 DEPARTEMEN KESEHATAN RI 2006

Anda mungkin juga menyukai