6
Penentuan Kadar Hambat Tumbuh Minimal HASIL DAN PEMBAHASAN
(KHTM) Metode David Stout (1971)
Filtrat teleng disiapkan dengan berbagai
konsentrasi 5, 25, 50, 125, dan 500 mg/mL.
Masing-masing filtrat teleng dengan berbagai
konsentrasi tersebut dimasukkan ke dalam
lubang media agar PYG yg telah diinokulasi
bakteri uji sebanyak 50 μL selanjutnya
diinkubasi pada suhu 37 0C selama 24 jam.
Aktivitas antibakteri diperoleh dengan
mengukur zona hambat yaitu Zona bening yang
terbentuk disekitar lubang yang menunjukkan
bakteri tidak dapat tumbuh di sekitar lubang
tempat pemberian filtrat. Zona bening yang
terbentuk di sekeliling lubang tersebut diukur
dengan menggunakan jangka sorong. Zona
hambat yang terkecil menunjukkan aktivitas
antibakteri yang terendah sedangkan zona
hambat yang besar menunjukkan aktivitas
antibakteri yang semakin besar (Lampiran 2).
Penentuan Koefisien Fenol
Metode ini digunakan untuk mengetahui
daya bunuh bakteri filtrat bunga teleng
terhadap bakteri uji Staph. aureus
dibandingkan dengan daya bunuh fenol selama
10 menit masa kontak bakteri uji (Varley dan
Redish 1936).
Biakan bakteri Staph. aureus ditanam satu ose
pada 10 mL media cair kemudian diinkubasi
sambil dikocok pada suhu 37 0C selama 24 jam.
Kemudian dari biakan tersebut diambil 0.5 mL
dan dicampurkan ke dalam berbagai variasi
konsentrasi fenol dan variasi konsentrasi filtrat
bunga sebanyak 5 mL. Lima menit kemudian
secara aseptis dilakukan inokulasi satu ose dari
masing-masing konsentrasi ke dalam tabung-
tabung berisi media cair. hal yang sama dilakukan
lima menit berikutnya. Selanjutnya diinkubasi
pada suhu 37 0C selama 48 jam. Pengamatan
dilakukan secara visual untuk membandingkan
adanya pertumbuhan bakteri pada berbagai
variasi konsentrasi fenol dan filtrat bunga tersebut
(Lampiran 3). Koefisien fenol ditentukan dengan
persamaan:
Kf =
[S ]
[F ]
Keterangan :
Kf = Koefisien fenol
[S] = Konsentrasi sampel yang membunuh
Stap. aureus pada 10 menit masa kontak.
[F] = Konsentrasi fenol yang membunuh Stap.
aureus pada 10 menit masa kontak.
PDF created with pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com
Aktivitas Antibakteri Air Perasan Bunga
Teleng
Uji potensi antibakteri air perasan bunga
teleng dengan menggunakan metode Sumur
agar bertujuan untuk mengetahui perbedaan
daya antibakteri kelompok sampel segar tanpa
melalui proses otoklaf dan kelompok sampel
yang diotoklaf. Sedangkan tujuan dari otoklaf
tersebut adalah memastikan sampel air perasan
bunga tersebut steril.
Hasil pengukuran zona hambat air perasan
bunga yang diotoklaf atau tanpa otoklaf,
kloramfenikol 0.5%, dan amphisilin 0.5%
terhadap bakteri uji Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa, Bacillus substilis dan
Escherichia coli ditunjukkan pada tabel Lampiran
7 dan disajikan dalam grafik pada Gambar 6.
Hasil pengamatan dan pengukuran diameter
zona bening yang terbentuk disekitar lubang
menunjukkan bahwa daya hambat perasan bunga
teleng segar bervariasi terhadap bakteri uji.
Aktivitas hambat bakteri yang terbesar adalah pada
B. substilis sebesar 11.93 mm, dikuti oleh E. coli
sebesar 10.00 mm, P. aeruginosa sebesar 4.92
mm, dan pada Staph. aureus tidak menunjukkan
daya hambat sama sekali, namun menunjukkan
zona hambat terbesar pada Antibakteri
kloramfenikol 0.5% yaitu sebesar 24.70 mm. Ini
menunjukkan bahwa Staph. aureus paling sensitif
terhadap kloramfenikol 0.5% bekerja sebagai
inhibitor sintesa protein pada ribosom 50S bakteri.
kesensitifan tersebut disebabkan oleh karakter
komposisi lipid pada dinding sel Staph. aureus
yang lebih rendah. karakter tersebut umum
ditemukan pada dinding sel bakteri Gram positif
lainnya.
Aktivitas hambat antibakteri air perasan bunga
teleng dapat dinilai menurut Davis dan Stout yaitu:
kuat terhadap B. substilis, sedang terhadap E. Coli,
lemah terhadap P. aeruginosa, dan tidak memiliki
aktivitas hambat terhadap Staph. aureus.
Aktivitas hambat kloramfenikol 0.5% terhadap
B. substilis, E. coli dan P. aeruginosa berturut-turut
adalah: 18.53, 17.33, dan 10.47 mm. Sedangkan
Aktivitas hambat amphisilin 0.5% terhadap B.
substilis, E. Coli, P. aeruginosa dan Staph. aureus
berturut-turut adalah: 34.40, 31.30, 14.90 dan
27.73 mm. Hal ini menunjukkan bahwa B. substilis
paling sensitif terhadap amphisilin 0.5%. Nilai
aktivitas hambat kloramfenikol 0.5% menurut
Davis Stout yaitu: sangat kuat terhadap B. substilis,
dan Staph. aureus, kuat terhadap E. Coli, dan
sedang terhadap P. aeruginosa. Sedangkan nilai
aktivitas hambat amphisilin 0.5% yaitu: sangat

kuat terhadap B. substilis, E. Coli, Staph. aureus
dan kuat terhadap P. aeruginosa.
35.00
30.00
25.00
20.00
15.00
10.00
5.00
0.00
B. subtilis E. coli P. aeruginosa
Filtrat Otoklaf Filtrat Segar Kloramfenikol 0,5%
Gambar 6 Aktivitas antibakteri filtrat bunga
teleng dibandingkan dengan
amphisilin dan kloramfenikol.
Kelompok sampel teleng yang melewati
proses otoklaf pada tekanan 2 atm suhu 121 0C
selama 15 menit tidak menunjukkan aktivitas
antibakteri sama sekali. Hal ini dapat
disebabkan oleh rusaknya senyawa antibakteri
oleh pemanasan selama proses otoklaf.
Hasil penelitian Osborn et al (1995)
menunjukkan bahwa isolat senyawa peptida dari
ekstrak biji teleng memiliki aktivitas antibakteri
terhadap empat bakteri Gram positif (B.
substilis, M. luteus, Staph. aureus, dan Strep.
faecalis) dan 2 bakteri Gram negatif (E. coli dan
P. vulgaris) dan delapan jenis fungi (Botyris
cinerea, Cladosporium sphaerospermum,
Fusarium culmorum, Leptoshaeria maculans,
Penicillium digitatum, Trichoderma viridae,
Septoria tritici, dan Vertidilium albo-atrum ).
Aktivitas antibakteri dan antifungi isolat
senyawa peptida dari ekstrak biji teleng optimum
pada suhu 30 0C dan semakin menurun
aktivitasnya seiring dengan pengaruh peningkatan
temperatur lingkungan. Penelitian Osborn et al
(1995) mendasari alasan bahwa proses pemanasan
selama otoklaf dapat mendenaturasi senyawa
antibakteri yang tergolong senyawa peptida
tersebut. Hal ini mendukung hasil pengujian
sampel teleng kelompok otoklaf yang tidak
menunjukkan aktivitas antibakteri sama sekali.
Penentuan Kadar Hambat Tumbuh
Minimal (KHTM)
Penentuan KHTM dilakukan setelah
diperoleh data bahwa filtrat teleng memiliki
aktivitas antibakteri. Penentuannya dilakukan
dengan cara menentukan konsentrasi minimal
yang dibutuhkan untuk menghambat
pertumbuhan bakteri uji (Davis dan Stout 1971).
Filtrat teleng dibuat dengan berbagai
konsentrasi yaitu: 5, 25, 50, 125, dan 500
PDF created with pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com
7
mg/mL. Variasi konsentrasi filtrat tersebut
kemudian diuji cobakan pada biakan empat
bakteri uji yaitu: Staph. aureus, P. aeruginosa,
B. substilis dan E. coli. Hasil pengukuran zona
hambat dari variasi konsentrasi yang digunakan
terhadap empat bakteri uji tersebut dapat dilihat
pada Lampiran 6. Data ini disajikan dalam
grafik pengaruh konsentrasi filtrat bunga teleng
terhadap aktivitas antibakteri pada Gambar 7.
Daya hambat masing-masing konsentrasi
filtrat bunga terlihat berbeda pada masing-masing
bakteri uji. Dari Gambar 7 terlihat bahwa
S. aureus
Amphisilin 0,5%
konsentrasi 50 mg/mL merupakan konsentrasi
terkecil yang dapat menghambat pertumbuhan
bakteri: B. substilis, E. coli, dan P. aeruginosa
dengan diameter zona hambat berturut-turut 4.83,
3.17, dan 2.17 mm, sedangkan konsentrasi
terkecil yang dapat menghambat bakteri Staph.
aureus sebesar 125 mg/mL dengan diameter zona
hambat sebesar 2.83 mm.
Daya antibakteri konsentrasi hambat
tumbuh minimum bunga teleng dapat dinilai
lemah menurut Davis Stout (1971) terhadap B.
substilis, E. Coli, P. aeruginosa, dan Staph.
aureus karena menunjukkan diameter zona
hambat yang kurang dari 5 mm.
Data KHTM menunjukkan bahwa B. subtilis
lebih sensitif daripada Staph. aureus meski
keduanya termasuk bakteri gram positif namun
bakteri ini memiliki keunikan dan kemampuan
yang berbeda dalam pertahanan hidupnya. Staph.
aureus memiliki mikrokapsul pelindung dinding
sel dan memiliki enzim FAME (fatty acid
modifying enzyme) yang dapat memodifikasi lipid
antibakteri. Kondisi ini membuat Staph. aureus
memiliki kemampuan resistensi terhadap
antibiotik dan antibakteri yang lebih baik
dibanding bakteri lain (Todar 2004).
Data KHTM menunjukkan bahwa E. coli
lebih sensitif daripada P. aeruginosa meski
keduanya merupakan bakteri Gram-negatif,
bedanya P. aeruginosa bersifat motil dengan
satu flagella dan memiliki kemampuan
toleransi yang lebih tinggi daripada E. coli
terhadap berbagai kondisi fisik, termasuk
temperatur, konsentrasi garam yang tinggi dan
kondisi lingkungan yang miskin nutrisi. P.
aeruginosa secara alami juga memiliki
resistensi terhadap antibiotik dan antibakteri
karena mengandung plasmid penyandi
resistensi yang dapat ditransfer melalui proses
transduksi dan konjugasi. Kondisi ini membuat
P. aeruginosa lebih resisten terhadap antibiotik
dan antibakteri dibanding E. coli (Todar 2004).
Penentuan Koefisien Fenol
 8

Metode ini digunakan untuk mengetahui
daya bunuh bakteri filtrat bunga teleng
terhadap bakteri uji Staph. aureus
dibandingkan dengan daya bunuh fenol selama
10 menit masa kontak bakteri uji (Varley dan
Redish 1936).
Hasil pengamatan visual untuk
membandingkan adanya pertumbuhan
bakteri pada berbagai variasi konsentrasi
fenol dan filtrat bunga dapat dilihat pada
Tabel 4.
Tabel tersebut menunjukkan bahwa
konsentrasi Fenol 5% bersifat antiseptik
terhadap Staph. aureus pada 10 menit masa
kontak. Mekanisme kerja senyawa fenol
sebagai antiseptik yaitu merusak dan
menembus dinding sel bakteri, kemudian
mengendapkan protein sel mikroba sehingga
merupakan racun bagi protoplasma (Varley dan
Redish 1936).
Sedangkan filtrat bunga teleng tidak
bersifat antiseptik terhadap Staph. aureus
pada 10 menit masa kontak bahkan pada
konsentrasi maksimum pada penentuan
KHTM yaitu 50%. Hal ini membuktikan
bahwa filtrat bunga teleng tidak memiliki
daya antiseptik.
- : Tidak ada pertumbuhan Staph. aureus,
tidak tebentuk selaput putih.
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Filtrat bunga teleng memiliki aktivitas
hambat tumbuh terhadap empat bakteri uji yaitu:
Staph. aureus, P. aeruginosa, B.substilis dan E.
coli tetapi tidak memiliki daya antiseptik.
Konsentrasi 50 mg/mL merupakan konsentrasi
terkecil filtrat teleng yang dapat menghambat
pertumbuhan bakteri: B. substilis, E. coli, dan P.
aeruginosa dengan diameter zona hambat berturut-
turut 4.83, 3.17, dan 2.17 mm. Sedangkan
konsentrasi terkecil yang dapat menghambat
bakteri Staph. aureus sebesar 125 mg/mL dengan
diameter zona hambat sebesar 2.83 mm.
Saran
Perlu penelitian lanjutan mengenai isolasi,
karakterisasi komponen aktif fitokimia bunga
teleng serta toksisitasnya dengan menentukan
LC 50.

30 DAFTAR PUSTAKA
Diameter Zona Bening (mm)

25
Bucharan RE, Gibbons NE. 1974. Burgeys
20 Manual of Determinative Bacteriology.
8th ed. Baltimore: Willian and Wilkins.
15

10 Bintang M. 1993. Studi antimikroba dari

Streptococcus lactis BCC2259. [disertasi].
5 Bandung. Program Doktor. ITB.
0 BPS. 2003. Statistic Kesejahteraan Rakyat
5 25 50 125 250 500
(Welfare Statistics). Jakarta: Biro Pusat
Konsentrasi Filtrat (mg/ml) Statistik.
P.aeruginosa S.aureus E.coli B.substilis
Davis WW, Stout TR. 1971. Disc plate method
of microbiological antibiotic assay: I.
Gambar 7 Pengaruh konsentrasi bubuk bunga factors influencing variability and error 1.
teleng terhadap aktivitas antibakteri. Appl Microbiol; 22 (4) : 659-665.

Herman. 2005. Pengetahuan, sikap dan perilaku

Tabel 4 Hasil penentuan koefisien fenol pengguna tanaman obat di Desa Sukajadi,
Bahan Uji 5 menit 10 menit Kecamatan Tamansari Kabupaten Bogor dan
Fenol 5% + - faktor-faktor yang mempengaruhinya. [skripsi].
Fenol 3.5% + + Bogor. Jurusan Gizi Masyarakat dan
Fenol 2% + + Sumberdaya Keluarga Fakultas Pertanian IPB.
Filtrat bunga 50% + +
Filtrat bunga 25% + + Hutapea JR, dkk. 1991. Inventaris Tanaman
Keterangan: Obat. Jakarta: Badan Penelitian dan
+ : Terdapat pertumbuhan Staph. aureus Pengembangan Kesehatan, Depkes.
berupa selaput putih.

PDF created with pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com