BAB III

METODE PERCOBAAN

3.1 Alat dan Bahan

1. Alat
- Cawan Petri
- Bunsen
- Kawat ose
- Tabung reaksi
- Rak tabung
- Hockey stick
- Spidol permanen
2. Bahan
- Bakteri Jerawat yang sudah diisolasi terlebih dahulu
- Media Nutrient Agar (NA)
- Wipol
- Alkohol
- Kertas cakram
- Facial wash (Pond’s Anti-bacterial)

3.2 Prosedur Kerja

1. Metode Cawan Gores

Pertama lakukan sterlisasi, cawan petri di sterilkan terlebih dahulu, lalu

meja pratikum disterilkan menggunakan wipol, kemudian cuci tangan pakai sabun
atau sterilkan tangan dengan menggunakan alkohol.

Disiapkan media Nutrient Agar (NA) yang sudah di sterilkan. Dituangkan

ke dalam cawan petri steril secara aseptis. Diratakan dengan membentuk angka

12
delapan. Dibiarkan hingga memadat. Diambil bakteri jerawat yang sudah di
isolasi sebelumnya menggunakan kawat ose, dan digoreskan pada media yang
sudah padat. Di inkubasi selama 24 jam di inkubator. Kemudian amati.

2. Metode Cawan Sebar

Disiapkan sebuah cawan petri steril, kemudian dituang media NA ke

dalam cawan petri secara aseptis. Diratakan dengan memutar membentuk angka 8,
lalu dibiarkan memadat. Selanjutnya dilakukan pengenceran. Disiapkan 3 tabung
reaksiyang masing-masing berisi 10 ml, 9 ml, dan 9 ml aquades steril. Lalu ambil
satu ose bakteri yang telah ditentukan dari biakan campuran, kemudian
diinokulasikan kedalam tabung reaksi pertama yang berisi 10 ml aquades steril,
dihomogenkan dengan vortex, larutan ini selanjutnya disebut suspensi. Dari
suspensi diambil sebanyak 1 ml dengan menggunakan pipet serologi kemudian
diinokulasikan ke dalam tabung reaksi kedua yang berisi 9 ml aquades steril,
dihomogenkan dengan vortex maka pengenceran larutan menjadi 10-1.

Selanjutnya dari pengenceran 10-1, diambil larutan sebanyak 1 ml dengan

menggunakan pipet serologi kemudian diinokulasikan kedalam tabung reaksi
ketiga yang berisi 9 ml aquades steril, dihomogenkan dengan vortex maka
pengenceran larutan menjadi 10-2. Kemudian diambil 0,1 ml larutan dari
pengenceran 10-2 secara aseptis dan diinokulasikan kedalam media NA yang telah
memadat. Diratakna dengan menggunakan hockey stick. Lalu bungkus dengan
kertas pembungkus, diinkubasi selama 1x24 jam, diamati dan dihitung jumlah
koloni.

3. Identifikasi Bakteri Jerawat dengan Menggunakan facial wash Anti-Acne

Ambil cawan petri steril, kemudian teteskan facial wash kedalam nya.
Kemudian ambil 3 lembar potongan kertas cakram lalu rendam dalam facial wash
selama 5 menit. Setelah itu ambil cawan petri yang berisi bakteri jerawat dari
TBM metode cawan sebar. Lalu bagi menjadi 3 bagian kuadran dengan
menggunakan spidol permanen dan beri tanda. Kertas cakram yang sudah
terendam diambil menggunakan pinset yang sebelumnya dibakar diatas api

13
bunsen, lalu diletakkan ke masing-masing bagian kuadran pada bakteri. Setelah
itu, bungkus cawan petri dengan kertas pembungkus dan masukkan dalam
inkubator selama 1x24 jam. Ukur zona hambat pada kertas cakram mulai dari hari
pertama sampai pada hari ketiga.

14