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UNIVERSIDAD NACIONAL

“SANTIAGO ANTÚNEZ DE MAYOLO”


FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA SANITARIA

“DETERMINACIÓN DE MICROORGANISMOS DEL


AIRE EN LA BIBLIOTECA DE LA FCAM, UNASAM –
2019”

ASIGNATURA: MICROBIOLOGÍA SANITARIA


DOCENTE : Blga. ROSARIO ADRIANA POLO SALAZAR
INTEGRANTES: RAMIREZ FIGUEROA, Fanny
ROMERO CÁCERES, Lyncy
URIBE PARIAMACHI, Claudia

HUARAZ-2019
UNIVERSIDAD NACIONAL SANTIAGO ANTÚNEZ DE MAYOLO
FCAM – INGENIERIA SANITARIA

ÍNDICE

I. INTRODUCCIÓN: ............................................................................................................. 3
II. OBJETIVOS:................................................................................................................... 4
1. OBJETIVO GENERAL: ................................................................................................ 4
2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS: ....................................................................................... 4
III. MARCO TEÓRICO: ...................................................................................................... 4
1. CALIDAD DE AIRE EN INTERIORES: ..................................................................... 4
2. CONTAMINACIÓN DEL AIRE INTERNO ............................................................... 4
3. FACTORES AMBIENTALES QUE INTERVIENEN EN EL DESARROLLO DE
LOS MICROORGANISMOS ................................................................................................ 5
4. MICROORGANISMOS DEL AIRE ............................................................................. 5
4.1. Bacterias ................................................................................................................... 5
4.2. Fungí ......................................................................................................................... 6
IV. ANTECEDENTES: ......................................................................................................... 6
1. HONGOS AMBIENTALES EN UNA BIBLIOTECA: UN AÑO DE ESTUDIO ..... 6
2. EVALUACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN DEL AIRE POR HONGOS
MICROSCÓPICOS EN DOS COLECCIONES BIOLÓGICAS Y DOS MUSEOS DE
LA CIUDAD DE GUATEMALA .......................................................................................... 7
V. MATERIALES Y MÉTODOS: ......................................................................................... 7
1. MATERIALES:............................................................................................................... 7
2.1. Preparación de medios de cultivo .............................................................................. 8
2.2. Muestreo....................................................................................................................... 8
2.3. Incubación de muestras .............................................................................................. 9
2.4. Tinción de Gram.......................................................................................................... 9
2.4.1. Identificación de bacterias .................................................................................. 9
2.4.2. Identificación de Hongos .................................................................................. 10
VI. RESULTADOS E INTERPRETACIÓN: ................................................................... 10
1. RESULTADOS .............................................................................................................. 10
1.1 DÍA 01 .................................................................................................................... 10
1.1.1. Número de bacterias y hongos ..................................................................... 10
1.1.1.1. Esquina A ................................................................................................... 10
1.1.1.2. Esquina B ................................................................................................... 10
1.1.2. Tipo de bacterias y hongos ........................................................................... 10
1.1.2.1. Bacterias ..................................................................................................... 10

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1.1.2.2. Hongos ........................................................................................................ 10


1.2. DÍA 02 ........................................................................................................................ 10
1.2.1. Número de bacterias y hongos ..................................................................... 10
1.2.1.1. Esquina A ................................................................................................... 10
1.2.1.2. Esquina B ................................................................................................... 11
1.2.2. Tipo de bacterias y hongos ........................................................................... 11
1.2.2.1. Bacterias ..................................................................................................... 11
1.2.2.2. Hongos ........................................................................................................ 11
1.3. DÍA 03 .................................................................................................................... 11
1.3.1. Número de bacterias y hongos ..................................................................... 11
1.3.1.1. Esquina A ................................................................................................... 11
1.3.1.2. Esquina B ................................................................................................... 11
1.3.2. Tipo de bacterias y hongos ........................................................................... 11
1.3.2.1. Bacterias ..................................................................................................... 11
1.3.2.2. Hongos ........................................................................................................ 11
2. INTERPRETACIÓN .................................................................................................... 11
VII. DISCUSIÓN: ................................................................................................................. 12
VIII. CONCLUSIONES:.................................................................................................... 12
IX. RECOMENDACIONES:.............................................................................................. 12
X. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ........................................................................... 13
XI. ANEXOS ........................................................................................................................ 13

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DETERMINACIÓN DE MICROORGANISMOS DEL AIRE EN LA BIBLIOTECA DE


LA FCAM, UNASAM – 2019

I. INTRODUCCIÓN:

El presente trabajo de investigación denominado “DETERMINACIÓN DE


MICROORGANISMOS DEL AIRE EN LA BIBLIOTECA DE LA FCAM, UNASAM
– 2019” se elaboró en función al cumplimiento del sílabo académico del curso de
Microbiología Sanitaria, a fin de ampliar nuestros conocimientos en el ámbito de
investigación enfocados en las labores de un Ing. Sanitario.

Los microorganismos, como esporas, ácaros y polen son componentes naturales del aire
en ambientes internos y pueden ser transportados desde el exterior por partículas
aerobiológicas que pueden establecerse en el polvo. La composición de los
microorganismos en ambientes cerrados puede variar tanto en calidad como en cantidad
de acuerdo a factores como microbiota predominante en el aire exterior, tipo de
edificación y localización geográfica, número de personas presentes y actividades que se
realizan, y en el caso de bibliotecas y archivos, etc. por ejemplo, por el estado de
preservación de libros y documentos. Varios autores han evaluado el “Síndrome del
edificio enfermo” estimando la calidad microbiológica de diferentes ambientes internos
como archivos, bibliotecas, catedrales, edificios, laboratorios, museos y hospitales.
Presentando un riesgo para la salud, originando alergias, infecciones e intoxicaciones.

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II. OBJETIVOS:

1. OBJETIVO GENERAL:

Determinar los microorganismos presentes en el aire de la biblioteca de la


Facultad de Ciencias del Ambiente, UNASAM.

2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

Reconocer a los microorganismos encontrados en el ambiente de la biblioteca


de la Facultad de Ciencias del Ambiente, UNASAM.

Explicar de qué forma pueden ser perjudiciales para la salud en general de las
personas que están presentes dentro de dicho ambiente.

Cuantificar las unidades formadoras de colonias bacterianas y fúngicas en los


ambientes de la biblioteca de la Facultad de Ciencias del Ambiente.

III. MARCO TEÓRICO:

1. CALIDAD DE AIRE EN INTERIORES:

La calidad del aire interior está ampliamente considerada como un problema significativo
de salud ambiental y económica. Los indicadores de calidad del aire deben determinar
que el aire interior: satisfaga los requerimientos respiratorios, prevenga la acumulación
de contaminantes; y permita el bienestar (BROWN, 1997).

2. CONTAMINACIÓN DEL AIRE INTERNO

Los espacios interiores son microambientes importantes al abordar los riesgos de la


contaminación del aire. La mayor parte de la exposición diaria de una persona a muchos
de los contaminantes del aire proviene de la inhalación en interiores, tanto por la cantidad
de tiempo que se pasa en estos ambientes como por los mayores niveles de contaminación
que hay en ellos (OMS, 2004).

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3. FACTORES AMBIENTALES QUE INTERVIENEN EN EL DESARROLLO


DE LOS MICROORGANISMOS

El desarrollo de microorganismos está influenciado por diferentes factores, físicos tales


como temperatura, humedad relativa, oxigeno, luz y polvo. Pero lo primero que determina
que una bacteria o un hongo se mantengan en el ambiente viable es la cantidad de agua
disponible que existe Mishalski (1985), citado por HERRERA (2009).

4. MICROORGANISMOS DEL AIRE

Los microorganismos son y siempre han sido un factor importante para la salud humana.
Estos microorganismos han desarrollado una extraordinaria capacidad de supervivencia
que les ha permitido colonizar prácticamente cualquier espacio natural de la tierra.

La atmósfera no tiene una microbiota autóctona, pero es un medio para la dispersión de


muchos tipos de microorganismos (esporas, bacterias, virus y fungí), procedentes de otros
ambientes.

Los microorganismos dispersados por el aire tienen una gran importancia biológica y
económica porque producen enfermedades en plantas, animales y humanos, causan
alteraciones en los alimentos y materiales orgánicos y contribuyen al deterioro y corrosión
de monumentos y metales.

4.1. Bacterias

Son microrganismos unicelulares, de forma diferente, habitad variable, algunas son


capaces de formar una envoltura o capsula, se multiplican por división otras son
capaces de formar endosporas más resistentes a las formas adversas de vida. Son
capaces de producir enfermedades por medios tales como: producción de toxinas
dañinas para el hombre, las plantas y algunos animales, es importante que se conozca
las características de cada cepa, lo cual permite la identificación de las mismas
(PELCZAR et al., 1993).

Las bacterias se desarrollan con mayor facilidad a pH 7-8 Y temperaturas entre 25 y


38°C, aunque muchas especies toleran temperaturas inferiores a 0°C, otras, como
las termófilas, resisten más 45°C Shames (2008) citado por HERRERA (2009).

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4.2. Fungí
Los hongos son organismos evolutivamente más desarrollados que las bacterias. Su
desarrollo óptimo se establece a un pH entre 4-6, humedades relativas superiores a
70% y temperaturas entre 22-30°C Shames, (2008) citado por HERRERA, (2009).

El crecimiento de hongos en edificios puede producir en sus habitantes determinadas


patologías entre las que cabe destacar asma y alveolitis alérgicas. La contaminación
ambiental por hongos en el interior de edificios, es debida básicamente a hongos
filamentosos y levaduras (BROCK etal., 2001).

Los fungí son típicamente más abundantes en verano que en el resto del año,
mientras que las bacterias son más abundantes en primavera y otoño debido a
factores como la temperatura, humedad relativa del aire, exposición a la luz solar,
etc. (BOVALLIUS et al., 1978).

IV. ANTECEDENTES:

1. HONGOS AMBIENTALES EN UNA BIBLIOTECA: UN AÑO DE ESTUDIO

El primer trabajo corresponde a Dante J. Bueno, Julio O. Silva y Guillermo Oliver,


quienes realizaron la investigación “Hongos ambientales en una biblioteca: Un año de
estudio” trabajo en el cual se analizó los hongos presentes en una biblioteca científica
situada en un centro de investigación (el cual trabaja con microorganismos) en
Tucumán, Argentina, desde Febrero del 2000 a Enero del 2001. Se identificaron 33
géneros, además de las levaduras y de los hongos clasificados como Mycelia sterilia y
Basidiomycetes. Los géneros que presentaron la mayor frecuencia fueron Cladospo-
rium sp. (30.1%), Fusarium sp (8.6%), Alternaria sp. (8.4%), Acremonium sp. (6.4%)
y Aspergillus sp. (5.5%). La mayor cantidad de esporas fúngicas fue observada en
Octubre y la mínima en Julio. La temperatura estuvo entre 16,5 y 28,5∫C. El género
Cladosporium sp. fue aislado en todos los meses muestreados. Este género predominó
en Febrero (19.6%), junto a Alternaria sp., Mayo (29.6%), Junio (35.7%), Julio
(33.3%), Agosto (40%), septiembre (27.5%) y octubre (51.3%), mientras que
Acremonium sp. predominÛ en Marzo (26.5%), Ceratosporium sp. en Abril (20.4%)
y los Basidiomycetes en Noviembre (17.6%). Adem·s, Alternaria sp. fue el más
abundante en Diciembre (20%) y Enero (35.9%). A pesar del uso de un muestreo no
volumétrico, este estudio provee una información útil sobre la incidencia de los hongos
ambientales en la biblioteca testada.

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2. EVALUACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN DEL AIRE POR HONGOS


MICROSCÓPICOS EN DOS COLECCIONES BIOLÓGICAS Y DOS
MUSEOS DE LA CIUDAD DE GUATEMALA

Se determinó la calidad del aire en el interior y exterior de la Micoteca Licenciado


Rúben Mayorga Peralta (MICG), el Herbario de Biología de Guatemala (Herbario
BIGU), el Museo de Historia Natural (MUSHNAT) y el Museo de la Universidad de
San Carlos de Guatemala (MUSAC). Para la recolección de los hongos microscópicos
se utilizó la técnica volumétrica por impactación haciendo uso de un biocolector.

Los muestreos fueron realizados de octubre de 2011 a marzo de 2012, la identificación


microscópica se realizó por medio de preparaciones con azul de lactofenol y para la
identificación de levaduras se utilizó el API 20C AUX.

Los resultados obtenidos en los ambientes Micoteca Licenciado Rúben Mayorga


Peralta indican que la mayor concentración fúngica fue de 1,780, (unidad formadora
de colonias por metro cúbico UFC/m3) en el exterior y para el interior fue de 1,270
UFC/m3, en el caso del Herbario BIGU en el exterior fue de 2,790 UFC/m3 y en el
interior de 1,450 UFC/m3, para el MUSAC la mayor concentración observada fue de
990 UFC/m3 para el exterior y de 1,010 UFC/m3 para el interior, y para el MUSHNAT
en el caso del ambiente exterior fue de 1,630 UFC/m3 y para el interior fue de 2,850
UFC/m3.

Los géneros predominantes durante los muestreos en ambos ambientes en todas las
áreas muestreadas fueron Penicillium sp., Cladosporium sp. y Aspergillus sp. Se logró
el aislamiento de otros géneros fúngicos de gran importancia Fusarium sp

V. MATERIALES Y MÉTODOS:

1. MATERIALES:
1.1. Materiales de laboratorio
Matraces Erlenmeyer, placas Petri, algodón, varillas de vidrio, porta objetos,
cubre objetos, mechero de bunsen, asa de siembra, espátulas.

1.2. Equipos
Autoclave, balanza, microscopio, cámara fotográfica.

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2. MÉTODO
2.1. Preparación de medios de cultivo
Los agares necesarios para comprobar la presencia de bacterias y hongos son los
siguientes:
Agar nutritivo
 8 Placas de agar nutritivo (15ml c/u)
Agar sabouraud:
 8 Placas de agar sabouraud (15ml c/u)
Agar neurosporas
 4 Placas de agar endosporas (15ml c/u)
Agar recuento
 4 placas de agar recuento (15ml c/u)
PREPARACION:
 Se pesó cada muestra.
 Se le añadió agua destilada.
 Se mezcló.
 Se le puso un tapón de algodón a cada matraz y encima de este se le
coloco un pedazo de papel para que la solución no este expuesta.
 De rotuló.
 Se colocó en el autoclave.
Todos los matraces se mezclan bien, para llevarlos al autoclave para el proceso de
esterilización por una hora, se deja enfriar hasta 45 ºC para luego proceder a
plaquear.

2.2. Muestreo
Se realizaron 6 muestreos, realizándose dos muestreo por cada día, para cada
muestreo se eligieron dos zonas de la biblioteca, siendo elegidas las que presentan
mayor número de estudiantes. En cada muestreo se realizaron la toma de muestra
a las 10 am y 5pm, horarios en los que la biblioteca se encuentra con más personas,
tanto para el muestreo de bacterias y fungís.

Para las 2 zonas de muestreo en el aire se preparó 24 placas petri, 10 con agar
nutritivo, 10 con agar sabouraud, 2 con agar neuroesporas y 2 con agar recuento.
Para muestrear el aire del ambiente, colocamos las placas abiertas en dos esquinas
de la biblioteca por 10 minutos

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2.3. Incubación de muestras


Las placas petri con la muestra para crecimiento de bacterias y hongos se incubaron
a 37 ºC por un tiempo de 74 horas.

2.4. Tinción de Gram

2.4.1. Identificación de bacterias

Se seleccionó la muestra a identificar para así tomar una pequeña muestra


de la cepa, posteriormente se hizo un frotis fino del material de estudio
fijando así la muestra al calor, flameándola en el mechero a gas. De manera
haciendo que el material no se desprenda durante el lavado (tinción).

Se colocó el frotis en un soporte para tinción y recubrió la superficie con


solución de cristal violeta (2 o 3 gotas) se esperó de 1 - 3 minutos de
exposición al colorante (cristal violeta), se lavó exhaustivamente con agua
destilada, luego se cubrió el frotis con reactivo de lugol (2 o 3 gotas), durante
1 - 3 minutos.

Nuevamente se lavó con agua destilada después se impregno la superficie


con 2 o 3 gotas de decolorante alcohol-acetona (haciendo movimientos de
vaivén), esto suele tomar 10 – 5 segundos.

Posteriormente se lavó con agua corriente y colocó el frotis nuevamente en


el soporte para tinción. Se cubrió la superficie con la tinción de safranina (2
o 3 gotas) durante 1 minuto.

Se lavó con agua corriente, y se colocó el frotis en posición vertical en el


soporte para tinción, para permitir que el exceso de agua drene y el frotis se
seque.

Después se agrega una gota de aceite de inmersión y se observa en el


microscopio a 100X

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2.4.2. Identificación de Hongos

Al término de la incubación, se retiró pequeñas muestras colocándolas en el


porta objeto, en cual previamente se colocó una gota de agua destilada.

Se la agregó una gota de azul de metileno, luego se cubrió la muestra con el


cubre objetos y se observó en el microscopio a 10X.

VI. RESULTADOS E INTERPRETACIÓN:

1. RESULTADOS

1.1 DÍA 01

1.1.1. Número de bacterias y hongos

1.1.1.1. Esquina A

Bacterias Hongos
06 02

1.1.1.2. Esquina B

Bacterias Hongos
10 00

1.1.2. Tipo de bacterias y hongos

1.1.2.1. Bacterias
Se identificó bacterias del tipo cocos gram negativas.

1.1.2.2. Hongos
Se identificó hongos del tipo Verticillium y Trichoderma.

1.2. DÍA 02

1.2.1. Número de bacterias y hongos

1.2.1.1. Esquina A

Bacterias Hongos
05 01

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1.2.1.2. Esquina B

Bacterias Hongos
07 01

1.2.2. Tipo de bacterias y hongos

1.2.2.1. Bacterias
Se identificó bacterias del tipo cocos gram negativas.

1.2.2.2. Hongos
Se identificó hongos del tipo Verticillium y Penicillium- Mucor.

1.3. DÍA 03

1.3.1. Número de bacterias y hongos

1.3.1.1. Esquina A

Bacterias Hongos
04 03

1.3.1.2. Esquina B

Bacterias Hongos
11 02

1.3.2. Tipo de bacterias y hongos

1.3.2.1. Bacterias
Se identificó bacterias del tipo cocos gram negativas.

1.3.2.2. Hongos
Se identificó hongos del tipo Rhizopus, Fusarium, Trichoderma,
Fusarium y Verticillium

2. INTERPRETACIÓN

La cantidad de bacterias y hongos encontrados en la biblioteca de la Facultad de


Ciencias del Ambiente fueron mínimas, lo que indica que la calidad de aire en el
ambiente aún es adecuada para que los estudiantes la habiten.

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VII. DISCUSIÓN:

BOVALLIUS et al., 1978 nos menciona que los fungí son típicamente más abundantes
en verano que en el resto del año, mientras que las bacterias son más abundantes en
primavera y otoño debido a factores como la temperatura, humedad relativa del aire,
exposición a la luz solar, etc. Es por ello que no encontramos gran cantidad de hongos en
el ambiente muestreado.

La teoría indica que se encontraran gran cantidad de hongos que van a producir
enfermedades como la tiña, pitiriasis, y severas irritaciones en la piel y los resultados
obtenidos nos dicen lo contrario ya que no se encontraron gran cantidad de hongos y en
algunos casos no se encontraron la presencia de estos

VIII. CONCLUSIONES:

Las especies de bacterias encontradas son bacterias Gram negativas, bacterias que suelen
causar enfermedades debido a que la parte exterior de esta membrana comprende un
complejo de lipopolisacáridos cuya parte lípida (el lípido A) actúa como una endotoxina
y es responsable de la capacidad patógena del microorganismo.

Los resultados de este proyecto nos muestran que si hay presencia de microorganismos
estando los hongos en mayor; encontrándose a los siguientes: Verticillium, Trichoderma,
y Penicillium- Mucor, Rhizopus, Fusarium.

La especie Verticilliun es el que tiene mayor probabilidad de contagio, ya que esta especie
predomina entre los hongos encontrados en los muestreos realizados.

La biblioteca de la Facultad de Ciencias del Ambiente se puede considerar como un


ambiente con calidad de aire adecuado.

IX. RECOMENDACIONES:

Implementar un plan de mejora continua de acuerdo al protocolo de descontaminación


microbiológica, que considere el aire interior, que constituya un plan de desinfección en
la biblioteca de la Facultad de Ciencias del Ambiente, UNASAM.

Para prevenir problemas de salud relacionados con enfermedades respiratorias,


gastrointestinales y de tipo alérgico, se debe realizar de manera rutinaria un análisis de la

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calidad microbiológica del aire, así como una limpieza periódica de cada área para evitar
los padecimientos asociados con los microorganismos presentes en el ambiente interno.

Al momento de sacar las colonias para verlas en el microscopio esterilizar el asa de


siembra y después dejarlo enfriar un momento ya que se trata de hongos.

Para futuros trabajos se recomienda que después del cultivo, el tiempo de incubación
sea mayor a 48 horas para la identificación de bacterias y hongos sea más sencillo, pues
estos demoran en crecer.

X. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

BOVALLIUS, A.; BUTCH, B.; ROFFEY, R., Y ANAS, P. 1978: Three-year


investigation of the natural airborne bacterial flora at four locations in Sweden. Applied
and Environmental Microbiolgy, 35, pp.847-852.

DIAZ, J. 2009. Condiciones microambientales y de higiene en la biblioteca de la


Facultad de Ingeniería. Universidad Central de Venezuela. Trabajo de licenciatura de
Bibliotecología de la Universidad Central de Venezuela. 130 pg.

https://www.insst.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/NTP/Fich
eros/201a300/ntp_243.pdf

XI. ANEXOS

MUESTREO DEL 1° Y 2° DIA:

MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Verticillium
PARTES DEL HONGO:
 Conidio ramificado
 Hifas
 Conidios
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

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MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Verticillium
PARTES DEL HONGO:
 Conidio ramificado
 Hifas
 Conidios
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Penicillium-Mucor
PARTES DEL HONGO:
 Conidio ramificado
 Hifas
 Conidios
 Esporangios
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Trichoderma
PARTES DEL HONGO:
 Fialide
 Conidióforo
 Conidios
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

MUESTRO DEL 3° DIA:

MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Rhizopus
PARTES DEL HONGO:
 Esporangios
 Hifas
 Micelio
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

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MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Fusarium
PARTES DEL HONGO:
 Macroconidias
 Esporodoquia
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Trichoderma
PARTES DEL HONGO:
 Fialide
 Conidióforo
 Conidios
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Fusarium
PARTES DEL HONGO:
 Macroconidias
 Esporodoquia
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

MUESTRA: Aire
NOMBRE DEL HONGO: Verticillium
PARTES DEL HONGO:
 Conidio ramificado
 Hifas
 Conidios
MONTAJE: Húmeda
COLORACION: Simple (azul de metileno)

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RESULTADO GENERAL DE LA CARGA MICROBIANA EN EL AIRE DE LA


BIBLIOTECA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE

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