MICROBIOLOGY INDUSTRY

PETUNJUK SINGKAT OPERASIONAL

TEMPO
TEMPO OVERVIEW

A. Pengertian

TEMPO adalah sistem otomatis untuk penghitungan organisme Quality Indicator dalam 24-48 jam untuk
bakteri dan 72 jam untuk kapang dan khamir. TEMPO sistem terdiri dari 2 unit instrument, 2 unit
computer, aksesoris, dan reagent spesifik.

Penghitungan mikroorganisme di TEMPO berdasarkan metode MPN (Most Probable Number) yang
dikombinasikan dengan teknologi kartu TEMPO. MPN dalam TEMPO menggunakan seri 16.

Alur kerja dari sistem TEMPO adalah sebagai berikut:

1. Preparasi sampel dengan cara melarutkan sampel sesuai pengenceran yang diinginkan (gunakan
TEMPO bag/filter bag jika melakukan pengenceran).
2. Inokulasi sampel + media spesifik ke dalam kartu TEMPO menggunakan TEMPO Filler.
3. Inkubasi kartu sesuai jenis kartu.
4. Pembacaan kartu menggunakan TEMPO Reader.

B. TEMPO Station dan Aksesoris

Sistem TEMPO terdiri dari 2 stasiun yang mempunyai fungsi yang berbeda, yaitu:

1. TEMPO Preparation Station untuk:

a. Menginokulasi vial medium dengan sampel yang sudah diencerkan.
b. Memberi nama sampel menggunakan software TEMPO Prep.
c. Filling dan sealing kartu TEMPO menggunakan TEMPO Filler. Kapasitas TEMPO Filler adalah 6
kartu per 1 kali running, dengan kecepatan filling 3 menit per 6 kartu.

2
Keterangan:

1. Komputer
TEMPO
Preparation Station
2. Barcode reader
3. Rak reagent
4. Dispenser
5. TEMPO Filler
6. Incubation/reading rack (kapasitas 20 kartu per rack)
7. Filling rack (kapasitas 6 kartu per rack)
8. Vortex (tidak termasuk paket TEMPO)
9. Pipet (tidak termasuk paket TEMPO)

2
Keterangan:

1. Access cover
2. Panel depan dan belakang
3. Panel kontrol (lampu dan tombol indikator)
4. LCD monitor
5. Pintu geser
6. Penutup

2. TEMPO Reading Station untuk:

a. Membaca kartu TEMPO menggunakan TEMPO Reader sesudah kartu TEMPO diinkubasi.
Kapasitas TEMPO Reader adalah 20 kartu per 1 kali running, dengan kecepatan pembacaan
2,5 menit per 20 kartu.
b. Menginterpretasi pertumbuhan mikroba di setiap kartu TEMPO dan mengkalkulasi hasil
penghitungan menggunakan software TEMPO Read.
c. Manajemen hasil pembacaan (melihat, mengedit, ekspor data, dll.)

2
 d. Melihat
data
yang

berhubungan dengan sampel dan kartu.

Keterangan:

1. Komputer TEMPO Reading Station

2. Barcode reader
3. TEMPO Reader
4. Incubation/reading rack (kapasitas 20 kartu per rack)

2
Keterangan:

1. LCD monitor
2. Penutup
3. Panel depan dan belakang
4. Panel kontrol (lampu dan tombol indikator)
5. Lubang perawatan
6. Pintu geser

C. TEMPO Reagent

TEMPO membutuhkan reagent khusus untuk melakukan penghitungan mikroba. Reagent tersebut
terdiri dari vial medium yang berisi media spesifik dan kartu TEMPO sebagai tempat pertumbuhan
mikroba dan terjadinya reaksi. Sehingga reaksi tersebut dapat diinterpretasi oleh TEMPO Reader
dan dikalkulkasi hasil penghitungannya menggunakan software TEMPO Read.

1 kit TEMPO reagent terdiri dari 48 vial medium dan 48 kartu TEMPO. TEMPO memiliki 9 macam
reagent sesuai dengan jenis mikroba yang akan dianalisa. Kesembilan reagent tersebut yaitu:

No. Reagent Paramater Inkubasi (ISO) Inkubasi (BAM) Refrigerasie

2
 Sesudah
1 AC Total Viable Count
30C/40-48 jam
30C/24-48 jama
35C/22-28 jam
32C/22-28 jamb inkubasi
30C/40-48 jam 35C/40-48 jam Sesudah
2 Total Viable Count 32C/40-48 jamc inkubasi

37C/24-27 jam 35C/22-27 jam Sesudah

3 Escherichia coli inkubasi

30C/40-48 jam 35C/40-48 jam Sesudah

4 Lactic Acid Bacteria inkubasi

37C/24-27 jam 35C/24-27 jam Sesudah

5 Staphylococcus coagulase + inkubasi

NA 25C/72-76 jam NA
6
Yeast and Molds

35C/22-27 jam NA Sebelum

7 Enterobacteriaceae inkubasi

30C/24-27 jam NA Sebelum

8 Total Coliform ISO inkubasi

NA 35C/22-27 jam Sebelum

9 Coliform Count BAM 32C/22-27 jamd inkubasi

Keterangan:
a
Untuk sampel daging mentah (termasuk unggas), makanan siap makan, buah dan sayuran.
b-d
Untuk sampel susu dan turunan susu
e
Refrigerasi bertujuan untuk menunda pembacaan kartu di TEMPO Reader, dengan cara
memasukan kartu ke kulkas 2-8C sebelum/sesudah kartu diinkubasi.

2
2
TEMPO Reader mendeteksi pertumbuhan mikroba berdasarkan reaksi flouresensi yang terjadi di dalam
kartu TEMPO. Flouresen ini dihasilkan oleh mikroba yang bereaksi dengan media spesifik yang terdapat
di vial medium.

Ada 3 macam reaksi flouresensi yang terjadi pada reagent TEMPO yaitu:

1. Hilangnya flouresen karena reaksi asidifikasi.

Reagent: STA, TC, CC, EB
2. Munculnya flouresen karena aktivitas enzimatik.
Reagent: TVC, EC
3. Munculnya flouresen karena aktivitas oksidasi/reduksi.
Reagent: AC, YM, LAB

2
 CARA MEMULAI SISTEM

1 Pastikan tidak ada filling rack yang tertinggal di dalam TEMPO Reader dan TEMPO Filler.

2 Hidupkan komputer Reading Station.

Hidupkan TEMPO Reader.
Hidupkan komputer Preparation Station.
Hidupkan TEMPO Filler.

3 Diamkan beberapa menit untuk TEMPO Reader dan TEMPO Filler selesai melakukan self-test (ditandai dengan
berubahnya lampu indikator merah menjadi hijau).
4 Software TEMPO di komputer Reading Station dan Preparation Station akan otomatis terbuka.

CARA MENGAKHIRI SISTEM

Pindahkan filling rak yang terdapat di TEMPO Reader dan TEMPO Filler.
1
2 Tutup semua program di komputer Preparation Station dan komputer Reading Station.

3 Matikan TEMPO Filler (TEMPO Filler dimatikan setiap akhir minggu).

Matikan komputer Preparation Station.
Matikan TEMPO Reader (TEMPO Reader dimatikan setiap hari selesai dipakai).
Matikan komputer Reading Station.

2
 TEMPO PREPARATION SOFTWARE

Nyalakan sistem (lihat CARA MEMULAI SISTEM halaman 9)

Masukkan user name dan password untuk login ke TEMPO Preparation software.

1 Password
User name
LabAdmin Lab_Admin
LabSuper Lab_Super
LabTech Lab_Tech
3 Setelah berhasil login akan muncul windows TEMPO Preparation Software.

3.1. Tekan F6 untuk melihat detail

identitas sampel, detail
pengujian, dan detail kartu.
3.2. Pilih sampel yang akan
didelete lalu tekan F7.
3.3. Tekan F8 untuk memasukkan
identitas sampel (perhatikan
pemakaian huruf besar dan
huruf kecil).

CARA MENYIAPKAN SAMPEL

1 Timbang X gram sampel ke dalam TEMPO Bag.

Tambahkan 9X mL pengencer (pengencer primer) ke dalam TEMPO Bag.
Homogenkan sampel dan pengencer tersebut (dengan stomacher) dan diamkan 15 menit.
Sampel yang disiapkan di atas merupakan sampel dengan pengenceran 10 -1.

2
2 Buka aplikasi TEMPO Preparation (lihat TEMPO PREPARATION SOFTWARE halaman 10).

3 Tekan F8 untuk memberi identitas sampel.

4 Scan barcode di vial medium (1)

5 Selanjutnya akan muncul windows Available test.

6 a. Tambahkan 3 mL pengencer sekunder ke vial medium jika ingin menggunakan faktor pengenceran 1/40.
atau
b. Tambahkan 3.9 mL pengencer sekunder ke vial medium jika ingin menggunakan faktor pengenceran 1/400.

2
7 Transfer sampel pengenceran 10-1 ke dalam vial medium.
a. Transfer 1 mL jika ingin menggunakan faktor pengenceran 1/40.
b. Transfer 0.1 mL jika ingin menggunakan faktor pengenceran 1/400.

Catatan:
a. Volume total sampel + pengencer sekunder di dalam vial medium = 4 mL.
b. Faktor pengenceran yang disarankan oleh TEMPO adalah 1/40 yang memiliki range pembacaan 10-
49,000 CFU/g dan 1/400 yang memiliki range pembacaan 100-490,000 CFU/g.
c. Volume sampel yang ditransfer minimal 0.1 mL.
d. Lihat tabel berikut untuk membuat faktor pengenceran yang lain.

8 Homogenkan menggunakan vortex sekitar 3-5 detik.

9 Beri identitas sampel di label kartu dan dan barcode di kartu TEMPO (2)

2
10 Selanjutnya akan muncul windows Test recording
a. Pilih faktor pengenceran sesuai faktor pengenceran yang dipakai.
b. Jika sudah selesai, klik OK.

11 Tempatkan vial medium dan kartu ke filling rack.

Catatan:
Waktu maksimal persiapan sampel di vial medium sampai siap difilling adalah
30 menit. Jika lebih dari 30 menit, homogenkan kembali sampel di vial medium
menggunakan vortex.

12 Buka TEMPO Filler

13 Masukan filling rack ke dalam TEMPO Filler dan tutup TEMPO Filler

14 Tekan START untuk memulai filling.

15 a. Setelah filling selesai (ditandai lampu hijau menyala kedap-kedip), buka TEMPO Filler dan keluarkan filling
rack.
b. Pastikan bahwa kartu sudah terisi sempurna.
c. Pindahkan kartu ke incubation rack sesuai dengan jenis analisa/jenis
kartunya.

2
16 Inkubasi kartu sesuai jenis kartunya.
17 Setelah inkubasi selesai, lakukan pembacaan kartu di TEMPO Reader.

TEMPO READER SOFTWARE

Nyalakan sistem (lihat CARA MEMULAI SISTEM halaman 9)

Masukkan user name dan password untuk login ke TEMPO Reader software.
1
User name Password
LabAdmin Lab_Admin
LabSuper Lab_Super
LabTech Lab_Tech
3 Setelah berhasil login akan muncul windows TEMPO Reading Software.

CARA MEMBACA KARTU

1 Nyalakan sistem (lihat CARA MEMULAI SISTEM halaman 9)

2 Masukkan user name dan password untuk login ke Login ke TEMPO Reader software.
3 Setelah berhasil login akan muncul windows Reading Software.

4
Klik ikon atau tekan F2 untuk melihat kartu yang siap dibaca.

2
5 Selanjutnya akan muncul windows Manage cards being incubated.

6
Klik ikon untuk memilih kartu yang akan dibaca.

7 Selanjutnya akan muncul windows Filter on incubated cards.

8 Centang () kriteria kartu yang akan dibaca lalu klik OK.
9 Keluarkan kartu yang akan dibaca dari inkubator, biarkan kering jika di kartu dan incubation rack terdapat
embun.
10 Susun kartu di inkubation rack sesuai dengan urutan di layar komputer.

11 Pastikan tidak ada incubation rack di dalam TEMPO Reader dan pastikan lampu indikator hijau menyala.
12 Buka TEMPO Reader

13 Masukan incubation rack ke dalam TEMPO Reader dan tutup TEMPO Reader.

14 Tekan START untuk memulai pembacaan.

15
Klik ikon atau tekan F3 untuk melihat proses pembacaan kartu.

Kartu yang memiliki catatan angka (misal 01), akan dijelaskan lebih lengkap di kolom keterangan.

16 Setelah pembacaan selesai (ditandai lampu hijau menyala kedap-kedip), buka TEMPO Reader dan keluarkan
incubation rack.
17
Centang () lalu klik ikon untuk memvalidasi pembacaan.

18

2
 Klik ikon atau tekan F5 untuk melihat hasil pembacaan.

19 Musnahkan kartu yang sudah dibaca sebagai limbah mikrobiologi.

PEMELIHARAAN TEMPO READER BULANAN

1 Bulanan
 Pembersihan dan dekontaminasi permukaan luar TEMPO Reader
 Quality Control TEMPO Reader menggunakan TEMPO QC control kits.

2  Pembersihan dan dekontaminasi permukaan luar TEMPO Reader

a. Matikan TEMPO Reader.
b. Bersihkan permukaan luar TEMPO Filler menggunakan alkohol 70% atau desinfektan lain.
c. Lap dan keringkan menggunakan kertas bebas serat.

3  Quality Control TEMPO Reader menggunakan TEMPO QC control kits.

a. TEMPO QC control kits terdiri dari 3 kartu QC 8 M, 3 vial 8 M, 2 kartu QC 20 M, 2 vial 20 M, dan 1
package insert.
b. Lakukan pemeriksaan segera mungkin setelah kemasan dibuka dan hindarkan dari cahaya.
c. Tempatkan kartu dan vial QC di filling rack seperti gambar berikut.

d. Masukkan ke TEMPO Filler dan lakukan filling.

e. Setelah selesai filling, tempatkan kartu QC di incubation rack seperti gambar berikut.

f. Nyalakan komputer Reading Station.

2
 g. Dobel klik ikon

h. Masukkan user name dan password untuk login ke TEMPO Check software (gunakan user name dan
password yang sama dengan TEMPO Reader software).
i. Setelah berhasil login akan muncul windows TEMPO Reader Check Software.
k. Masukkan kartu QC (point e) ke dalam TEMPO Reader.
l. Tekan START di TEMPO Reader untuk memulai pembacaan.
m. Selesai pembacaan, tampilan windows akan seperti ini.

Keterangan status pembacaan dapat berupa:

2
n. Centang () lalu klik ikon untuk
memvalidasi pembacaan.