HEMATOLOGI

EVALUASI ERITROSIT PADA SEDIAAN APUSAN DARAH

TEPI

OLEH

Ni Luh Made Andriyani

(P07134017015)

KEMENTERIAN KESEHATAN RI
POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR
JURUSAN ANALIS KESEHATAN
DENPASAR
2019
 LAPORAN PRAKTIKUM
EVALUASI ERITROSIT PADA SEDIAAN APUS DARAH TEPI

I. Tujuan
A. Tujuan Instruksional Umum
1. Mahasiswa dapat mengetahui cara membuat sediaan apus darah tepi.
2. Mahasiswa dapat mewarnai sediaan apus darah tepi dengan pewarna
Romanowsky.
3. Mahasiswa dapat mengetahui morfologi dari sel eritrosit pada sediaan apusan
darah tepi.
B. Tujuan Instruksional Khusus
1. Mahasiswa dapat melakukan pembuatan apusan darah tepi dengan baik dan
benar.
2. Mahasiswa dapat membedakan apusan darah yang baik dan yang kurang baik.
3. Mahasiswa dapat melakukan pewarnaan apusan darah tepi dengan baik dan
benar.
4. Mahasiswa dapat melakukan pengamatan sediaan apusan darah tepi secara
mikroskopis.
5. Mahasiswa dapat mengetahui jenis jenis dari morfologi eritrosit pada sediaan
apusan darah tepi.

II. Metode
Metode yang digunakan dalam praktikum ini adalah metode Apusan darah (Blood
Smear) dan diamati dibawah mikroskop perbesaran 10x lalu 100 x dengan emersi.

III. Prinsip
Suatu apusan darah tepi dibuat dengan meletakkan setetes (kecil saja) darah pada kaca
objek diratakan sedemikian rupa sehingga terbentuk apusan yang tipis (hanya selapis).
Prinsip pewarnaan didasarkan pada sifat kimiawi dalam sel. Zat warna yang bersifat
asam akan bereaksi dengan komponen sel yang bersifat alkalis, demikian pula
 sebaliknya. Preparat yang sudah diwarnai langsung diamati dibawahmikroskop dengan
pembesaran 10x lalu 100 x menggunakan minyak emersi.

IV. Dasar Teori

Darah adalah cairan yang sangat penting bagi tubuh. Ini lebih tebal dari air, dan terasa
agak lengket. Suhu darah dalam tubuh adalah 38 ° C, yaitu sekitar satu derajat lebih
tinggi dari suhu tubuh. Berapa banyak darah yang Anda miliki tergantung pada ukuran
dan berat badan Anda. Seorang pria yang beratnya sekitar 70 kg (sekitar 154 pon)
memiliki sekitar 5 hingga 6 liter darah di tubuhnya. Darah memiliki tiga fungsi penting
yaitu Pengangkutan, Regulasi dan proteksi. (PubMed, 2015)
Apusan Darah Tepi adalah tes darah untuk melihat jumlah dan bentuk sel darah merah
dan putih dan trombosit untuk melihat sel tersebut normal atau tidak. Apusan darah juga
dapat mendeteksi parasit dalam darah. Namun apusan darah masih rutin dilakukan untuk
mencari penyakit tertentu. Apusan darah diperiksa oleh ilmuwan laboratorium atau
penyedia layanan kesehatan yang berspesialisasi dalam darah atau penyakit menular.
Spesialis ini melihat sel-sel darah pada slide dan menilai mereka. Tes ini dapat
dilakukan bila Kadar sel darah merah yang rendah (anemia) Penyakit kuning, suatu
kondisi yang menyebabkan kulit dan mata Anda menjadi kuning, Merasa lelah atau
pusing sepanjang waktu, Demam yang tidak kunjung hilang atau terus kembali, setelah
bepergian ke negara berkembang atau kontak dengan kutu. Kemungkinan kontak
dengan parasit yang membawa penyakit menular, seperti malaria, Penyedia layanan
kesehatan sering menggunakan apusan darah untuk mengkonfirmasi diagnosis penyakit
tertentu. Jika menderita sakit dada yang parah dan tidak dapat dijelaskan, misalnya,
menderita anemia sel sabit, Ini adalah penyakit bawaan yang dapat diidentifikasi melalui
apusan darah. (Medical,2019).

V. Alat dan Bahan

A. Alat
1. Kaca objek 25 x 75 mm
2. Lampu bunsen
3. Kaca penghapus
4. Lancet/Syringe/ Close system
 5. Gelas ukur 50/100 mL
6. Gelas piala
7. Botol semprot
8. Timer
9. Rate pengering
10. Pipet tetes
11. Mikroskop

B. Bahan
1. Metanol absolut
2. Zat warna Wright (1 gr dicampur dg 600 mL metanol absolut)
3. Larutan dapur pH 6,4
4. Zat warna Glemza
5. Zat warna May Grunwald
6. Minyak emersi
7. Tissue Lensa
8. Eter alcohol

VI. Cara Kerja

A. Pembuatan Sediaan Apus :
1. Dipilih kaca objek yang bertepi rata untuk digunakan sebagai “kaca penghapus”
sudut kaca objek yang dipatahkan, menurut garis diagonal untuk dapat menghasilkan
sedian apus darah yang tidak mencapai tepi kaca objek.
2. Satu tetes kecil darah diletakkan pada 2 – 3 mm dari ujung kaca objek. Kaca
penghapus diletakkan dengan sudut 30 – 45 derajat terhadap kaca objek didepan tetes
darah.
3. Kaca penghapus ditarik ke belakang sehingga tetes darah, ditunggu sampai darah
menyebar pada sudut tersebut.
4. Dengan gerak yang mantap, kaca penghapus didorong sehingga terbentuk apusan
darah sepanjang 3 – 4 cm pada kaca objek. Darah harus habis sebelum kaca
penghapus mencapai ujung lain dari kaca objek. Apusan darah tidak boleh terlalu
tipis atau terlalu tebal, ketebalan ini dapat diatur dengan mengubah sudut antara
 kedua kaca objek dan kecepatan menggeser. Makin besar sudut atau makin cepat
menggeser, maka makin tipis apusan darah yang dihasilkan.
5. Apusan darah dibiarkan mengering di udara. Identitas pasien ditulis pada bagian tebal
apusan dengan pensil kaca.

B. Pewarnaan Sediaan dengan Pewarna Giemsa

1. Diletakkan sediaan apus pada dua batang gelas di atas bak tempat pewarnaan.
2. Difiksasi sediaan apus dengan metanol absolut 2 – 5menit.
3. Digenangi sediaan apus dengan zat warna Giemsa yang baru diencerkan selama 30
menit. Larutan Giemsa yang dipakai adalah 5% atau 10%, diencerkan dengan
larutan dapar. Dibiarkan selama 20 – 30 menit. Catatan : Dibuat larutan pewarna
secukupnya saja, untuk pewarnaan hari itu, karena pewarna yang sudah diencerkan
akan rusak kalau disimpan lama. Pewarna Giemsa diencerkan dengan hati – hati,
larutan dicampurkan pelan – pelan, kalau larutan dikocok, zat warna didalamnya
akan mengendap.
4. Dibilas dengan air ledeng atau aquadest, mula – mula dengan aliran lambat
kemudian lebih kuat dengan tujuan menghilangkan semua kelebihan zat warna.
Letakkan sediaan hapus dalam rak dalam posisi tegak dan biarkan mengering.

C. Pemeriksan Sediaan Apus Darah Tepi

1. Dengan mata telanjang, diperiksa mutu pulasan sebelum dipulas.
2. Dengan mikroskop obyektif 10x (setelah dipulas ), diperiksa apakah penyebaran sel
cukup rata, bagaimana mutu pulasannya dan bagaimana penyebaran leukositnya
serta kesan – kesan jumlahnya.
3. Dengan objektif 100x (minyak emersi), diperksa masing- masing sel : Evaluasi
Eritrosit, Evaluasi Leukosit,Evaluasi Trombosit.

VII. Interpretasi Hasil

A. Evaluasi Eritrosi
Yang perlu diperhatikan dalam mengevaluasi eritrosit adalah morfologi, perhatikan,
1. Ukuran (size) : Diameter eritrosit yang normal (normositik) adalah 6-8µm atau
kurang lebih sama dengan inti limfosit kecil.
 2. Bentuk (shape) : Bentuk bikonkaf bundar dimana bagian tepi lebih merah dari
pada bagian sentralnya.
3. Warna (staining) : bagian sentral lebih pucat yang disebut akromia sentral yang
luasnya antara 1/3 – ½ diameter eritrosit.
4. Sel sel muda dan abnormal.
5. Distribusi merata.

B. Evaluasi Leukosit
leukosit adalah sel berinti. Dalam darah tepi yang paling banyak ditemukan yaitu
sel polimorfonuklear neutrophil (PMN). Jenis leukosit yang normal yang ditemukan
dalam darah tepi adalah eusinofil (1%-3%), basophil (0-1%), neutrophil batang (2-
6%),PMN ( 50-70%), limfosit (20-40%), dan monosit (2-8%). Dalam keadaan
normal diperkirakan terdapat 1 leukosit per 500 eritrosit.

C. Evaluasi Trombosit
Diameter trombosit adalah 1-3 µm , tidak memiliki inti, mempunyai granula dan
bentuknya regular. Perkiraan jumlah trombosit dalam keadaan normal diperkirakan
terdapat 1 trombosit per 15- 20 eriitrosit atau 5-15 per lapang pandang imersi.

VIII. Hasil Pengamatan

Berdasarkan praktikum yang dilaksanakan hari Jumat, 19 Februari 2019 di
Laboratorium Hematologi, Jurusan Analis Kesehatan, Polteknik Kesehatan Denpasar
didapatkan hasil dibawah ini :
Identifikasi Probandus
Sampel 1
Nama : Ni Kadek Wiraningsih
Umur :20 Tahun
Jenis Kelamin : Perempuan
Golongan : Remaja
Sampel : Darah Vena
Hasil : Normokrom, Normositer
 Sampel 2
Nama : Ni Luh Sukra
Umur : 54 ahun
Jenis Kelamin : Perempuan
Golongan : Dewasa
Sampel : Darah Vena
Hasil : Normokrom, Normositer
Bentuk yang ditemukan : oval cell dan Bursel

IX. Pembahasan
Darah adalah cairan yang sangat penting bagi tubuh. Ini lebih tebal dari air, dan
terasa agak lengket. Suhu darah dalam tubuh adalah 38 ° C, yaitu sekitar satu derajat
lebih tinggi dari suhu tubuh. Berapa banyak darah yang Anda miliki tergantung pada
ukuran dan berat badan Anda. Seorang pria yang beratnya sekitar 70 kg (sekitar 154
pon) memiliki sekitar 5 hingga 6 liter darah di tubuhnya. Darah memiliki tiga fungsi
penting yaitu Pengangkutan, darah mengangkut oksigen dari paru-paru ke sel-sel tubuh,
di mana dibutuhkan untuk metabolisme. Karbon dioksida yang dihasilkan selama
metabolisme dibawa kembali ke paru-paru oleh darah, yang kemudian dihembuskan.
Darah juga menyediakan sel-sel dengan nutrisi, mengangkut hormon dan
menghilangkan produk-produk limbah, yang hati, ginjal atau usus, misalnya, kemudian
singkirkan. Regulasi, darah membantu menjaga nilai-nilai tertentu dari tubuh seimbang.
Misalnya, memastikan bahwa suhu tubuh yang tepat dipertahankan. Ini dilakukan baik
melalui plasma darah, yang dapat menyerap atau mengeluarkan panas, serta melalui
kecepatan aliran darah. Ketika pembuluh darah mengembang, darah mengalir lebih
lambat dan ini menyebabkan panas hilang. Ketika suhu lingkungan rendah, pembuluh
darah dapat berkontraksi, sehingga panas sekecil mungkin hilang. Bahkan apa yang
disebut nilai pH darah dijaga pada tingkat ideal untuk tubuh. Nilai pH memberitahu kita
seberapa asam atau basa suatu cairan. Nilai pH konstan sangat penting untuk fungsi
tubuh. Perlindungan, jika pembuluh darah rusak, bagian-bagian tertentu dari gumpalan
darah bergabung dengan sangat cepat dan memastikan bahwa gesekan, misalnya,
berhenti berdarah. Ini adalah bagaimana tubuh terlindungi dari kehilangan darah. Sel
darah putih dan zat kurir lainnya juga memainkan peran penting dalam sistem kekebalan
tubuh (PubMed, 2015).
Dalam perawatan pasien, formulasi diagnostik terletak pada tripod yang terdiri
atas riwayat klinis, pemeriksaan fisik, dan investigasi laboratorium. Sastra
mengungkapkan bahwa sebanyak 70% dari keputusan klinis dan diagnosa didukung
oleh obat-obatan laboratorium.1 Perifer darah film (PBF) adalah dasar dan alat
hematologis yang sangat informatif di klinik untuk pembuangan dalam skrining,
diagnosis dan pemantauan perkembangan penyakit dan respons terapeutik. Pemahaman
mahir interpretasi darah perifer penting untuk praktik klinis yang sukses. Relevansi
diagnostik PBF sangat besar. PBF memaparkan morfologi sel darah tepi, yang
memastikan tempatnya dalam diagnosis morfologis dari berbagai darah primer dan
sekunder serta penyakit terkait darah. Relevansi diagnostik belum berkurang oleh
kemajuan dalam otomasi hematologi dan teknik molekuler. Inisiasi PBF sering
merupakan permintaan klinis oleh dokter yang menghadiri karena kecurigaan klinis atau
kurang sering diprakarsai oleh laboratorium. 2, 3 Laboratorium dapat memulai film
darah tepi berdasarkan temuan abnormal dari hitungan otomatis atau informasi klinis
pasien yang diagnosis dapat didukung oleh lapisan darah tepi. Yang terakhir dipandu
oleh kebijakan laboratorium individu atau pedoman pengaturan lokal. Indikasi klinis
umum untuk analisis film darah tepi termasuk sitopenia yang tidak dapat dijelaskan:
anemia, leukopenia atau trombositopenia; leukositosis, limfositosis, atau monositosis
yang tidak dijelaskan; penyakit kuning atau hemolisis yang tidak dijelaskan; ciri-ciri
anemia hemolitik kongenital seperti splenomegali, sakit kuning atau nyeri tulang;
diduga penyakit mieloproliferatif kronis atau akut mis. leukemia myeloid kronis; diduga
gagal organ seperti penyakit ginjal, gagal hati; fitur sindrom hiperviskositas seperti pada
paraproteinaemia, hiperleukositosis leukemia, polisitemia; sepsis bakteri parah dan
infeksi parasit; keganasan dengan kemungkinan keterlibatan sumsum tulang; dugaan
kasus anemia gizi. Untuk memastikan hasil yang akurat dan dapat diandalkan, variabel
pra-analitik yang dapat mempengaruhi kualitas film harus dikontrol. Ini termasuk
persiapan dan persetujuan pasien, teknik pengambilan sampel darah, transportasi ke
laboratorium dan pelestarian sampel. Pengambilan sampel darah invasif, pasien / klien
harus berkonsultasi tentang prosedur. Umumnya, darah diperoleh dari vena perifer dan
disimpan dalam botol antikoagulan. Darah untuk antikoagulan harus dalam proporsi
yang tepat. Jarang, darah kapiler bisa didapat dengan jari-tusukan. Perawatan harus
diambil untuk memastikan kerusakan jaringan minimal. Kelebihan cairan jaringan dari
elemen seluler darah. Ethylene diamine tetra-acetic Acid (EDTA) adalah antikoagulan
pilihan. Sampel harus dikirim ke laboratorium sesegera mungkin. Sampel dianalisis
terbaik dalam waktu 2 jam dari pengumpulan darah. Keterlambatan persiapan untuk
apusan darah dapat menyebabkan jumlah trombosit berkurang karena pembentukan
agregat trombosit. (Nwogoh, Transfusion, State, Transfusion, & State, 2014)
Dalam metode wedge, setetes darah campuran (minimum 10 inversi lembut)
ditempatkan di dasar slide dekat ke salah satu ujung (sekitar 1 cm dari tepi) dengan pipet
/ tabung kapiler. Slide spreader dengan tepi terkelupas ditempatkan pada slide dasar di
depan darah dan bergerak mundur untuk menyentuh setetes darah yang membuat darah
menyebar sepanjang lebar slide dasar. Slide penyebar harus memiliki ujung yang halus
untuk mencegah ujung ekor noda menjadi tidak teratur. Kemudian, apusan dibuat
dengan penyebar yang miring pada sudut sekitar 30 hingga 45 derajat terhadap darah.8
Perawatan harus diambil untuk tidak memberikan tekanan berlebihan pada slide
penyebar saat mengolesi. Hal ini dapat menyebabkan kerusakan geser dan kecelakaan
laboratorium. Artefak kotor mungkin disebabkan oleh slide yang kotor, tetesan lemak
atau slide yang berkualitas buruk. Tindakan pencegahan keamanan laboratorium harus
diperhatikan ketika mengerjakan apa pun spesimen klinis. Setiap spesimen darah harus
diperlakukan berpotensi berisiko tinggi. Meskipun noda yang biasa digunakan adalah
agen interkalasi yang menghancurkan mikroba, mereka tidak menawarkan perlindungan
terhadap HIV dan HBV. Corengan harus menutupi dua pertiga dari panjang slide dasar
dan harus memiliki ujung berbulu oval. Sebagai aturan, semakin cepat dan curam
apusan, semakin tebal itu.9 Misalnya, curam dan apusan yang lebih cepat dapat
disesuaikan untuk sampel anemia. Apusan tersebut dikeringkan dengan benar di udara.
Hindari kelembaban yang tinggi (menyebabkan pengeringan yang tidak memadai)
ketika membuat noda karena biasanya merupakan batas refraktil tajam artefaktual yang
membatasi area pucat pusat, sehingga membuat hipokromia sulit untuk dinilai.
Kemudian lanjutkan dengan label slide dengan pensil atau krayon pada ujung slide yang
buram atau ujung kepala. Corengan kering difiksasi dengan metanol absolut atau etil
alkohol dan diwarnai dengan pewarna Rowmanosky. Apusan kering dengan udara yang
benar harus diperbaiki dalam waktu 4 jam persiapan tetapi lebih disukai dalam waktu
satu jam. 6 Fiksasi yang baik membutuhkan sekitar 10 hingga 20 menit. Fiksasi yang
tidak tepat menyebabkan sel duri artefaktual (sel merah crenated dengan batas
refraktil).Romanosky adalah campuran pewarna asam dan pewarna dasar yang
memberikan pewarnaan diferensial dari komponen seluler yang berbeda.10 Pewarnaan
yang umum digunakan di lingkungan kita adalah pewarnaan Leishman yang terdiri dari
polikrom metilen biru (komponen dasar) dan eosin (komponen asam). Pewarnaan May-
Grunwald Giemsa atau Wright-Giemsa juga dapat digunakan.9 Intensitas pewarnaan
bervariasi dengan durasi waktu kontak pewarnaan dan konsentrasi pewarnaan. Penting
untuk menentukan waktu kontak yang memadai dengan setiap noda baru yang dibuat
atau dibeli.Apusan diwarnai dengan pewarna selama 5-10 menit, kemudian diencerkan
ganda dengan air buffer dan biarkan selama 5-10 menit untuk sel-sel untuk memilih
noda. Setelah ini, slide dibilas dengan benar di bawah air mengalir. Upaya harus
dilakukan untuk menyeka bagian bawah slide dengan kapas untuk menghilangkan noda
berlebih. Akhirnya, slide ditempatkan di rak dengan ujung berbulu miring ke atas hingga
kering. Artefak noda seperti puing-puing dan endapan dapat disebabkan oleh pewarnaan
yang berlebihan (waktu kontak noda yang berlebihan) dan mencuci yang tidak memadai
di bawah air mengalir. Kadang-kadang, sel besar seperti monosit dapat didorong ke
pinggiran dan berbulu film dan ini harus dicatat ketika menafsirkan film.(Nwogoh et
al., 2014)
Analisis mikroskopis dari darah yang bernoda tebal apusan masih merupakan
metode yang paling cocok untuk diagnosis malaria. Ini adalah teknik sederhana, cepat,
murah yang memungkinkan diagnosis yang benar dari spesies parasit malaria dan
penentuan kepadatan parasit. Diagnosis memerlukan apusan berkualitas tinggi dan
mencapai pewarnaan apusan yang tepat adalah wajib. Noda yang umum digunakan
adalah Romanowsky encer, misalnya sebagai pewarnaan Field dan JSB, atau
Romanowsky berbasis alkohol, seperti pewarnaan Giemsa, Leishman dan Wright.
Encer Noda Romanowsky umumnya lebih disukai dalam pengaturan bidang di mana
ada risiko penguapan berbasis alkohol noda. Noda ini juga cocok untuk pewarnaan
apusan darah kental. Noda berbasis alkohol, seperti Giemsa atau Leishman, cocok untuk
apusan tipis dan tebal dan paling sering digunakan di laboratorium yang dilengkapi
dengan lebih baik dengan ketersediaan personel yang terlatih. Di daerah endemis
malaria, sediaan apus tipis dan tebal digunakan untuk mendiagnosis malaria, tetapi
pemeriksaan termasuk leukemia, atau petunjuk untuk infeksi virus atau bakteri sepsis.
Untuk tujuan ini, pewarnaan Leishman bisa lebih disukai untuk Giemsa, sejak
visualisasi kromatin nuklir pola dan kontras warna sitoplasma diketahui lebih jelas
dengan metode Leishman. Noda Leishman juga membutuhkan waktu lebih sedikit
untuk persiapan daripada pewarnaan Giemsa. Namun, keuntungan ini tidak harus
mengorbankan akurasi dalam penilaian parasitemia, yang merupakan yang utama tujuan
pemeriksaan peredaran darah malaria.(Sathpathi, Mohanty, Satpathi, Mishra, & Behera,
2014)
Sel darah merah (RBC) atau eritrosit adalah jenis darah selain elemen lain dalam
darah seperti sel darah putih (WBC), trombosit dan plasma. Bentuk normal dari eritrosit
adalah bulat, biconcave dan rata, sekitar 7 µm diameter dan 2.2 µm tebal. Bentuk
eritrosit berkaitan dengan fungsinya yaitu pengangkut oksigen dan untuk transmisi atau
menyebarkan gas. Di area medis, diagnosis RBC digunakan untuk mendiagnosis
penyakit seperti penyakit Huntington, Myalgic Encephalomyelities (ME), dan Multiple
Sclerosis (MS). Oleh karena itu diagnosis yang akurat sangat penting dalam menentukan
perawatan yang benar kepada pasien.(Tomari et al., 2015)
Untuk meninjau morfologi sel darah merah. Ada lima aspek penting: Bentuk.
Apakah poikilocyte dominan, Ukuran. Adakah anisositosis atau populasi ganda Warna.
Apakah ada hipo- atau hiperkromasia, Adakah anisochromia atau polikromasia Inklusi.
Apakah ada tubuh Howell – Riang, parasit malaria, sel darah merah berinti, dll,
Pengaturan. Apakah ada aglutinasi atau rouleaux. Untuk pasien dengan anemia,
morfologi apusan tepi memberikan informasi kunci untuk membuat diagnosis banding.
Review smear perifer memiliki tiga komponen utama: Untuk mengkonfirmasi temuan
CBC Adalah tidak biasa untuk kesalahan laboratorium untuk mempengaruhi
pengukuran dalam CBC, tetapi temuan palsu dapat termasuk yang berikut : jumlah
rendah karena aspirasi darah lengkap yang salah oleh penghitung otomatis, makrositosis
akibat aglutinasi sel darah merah atau rouleaux, hiperukositosis, atau hiperglikemia
berat dan mikrositosis karena kesalahan identifikasi penghitung trombosit raksasa
sebagai sel darah merah.(Ford, 2013)
Menurut (Kumar, 2016) evaluasi morfologi sel darah merupakan langkah kritis
secara menyeluruh pemeriksaan apusan darah, yang dapat membantu mengidentifikasi
banyak gangguan metabolisme, mengindikasikan kerusakan oksidatif dan dapat
membantu melokalisasi suatu proses penyakit.terdapat berbagai macam bentuk sel
darah merah yang mengalami kelainan yaitu:
1. sel acanthrocyte atau spur yang berspekulasi atau berduri eritrosit Nama
ini berasal dari kata Yunani yang berarti "duri". Ini adalah eritrosit yang memiliki
banyak, spasi acak tidak beraturan proyeksi (umumnya 2-20) di atas membran RBC.
Perubahan pada Membran sel darah merah dikaitkan dengan kadar kolesterol tinggi
membran memperluas lapisan luar bilayer lipid. Acanthocytes juga terbentuk
sebagai akibat dari fragmentasi sel darah merah. Itu ditemukan di apusan darah tepi
hewan yang terkena hati, limpa atau gangguan ginjal. Acanthocytes sering terlihat
dalam darah tepi apusan pasien yang menderita neoplasma vaskular (Hemangioma
dan Hemangiosarcoma), penyakit hati, pirau portosystemic, glomerulonefritis, diet
kolesterol tinggi, DIC dan limfoma.

2. Codocytes atau sel target

Ini adalah eritrosit dengan area berpigmen terpusat di tengah materi
dikelilingi oleh zona bening tanpa pigmen, dengan padat cincin sitoplasma tentang
pinggiran eritrosit. Itu menyerupai mata banteng. Mereka memiliki peningkatan
jumlah kolesterol yang dihasilkan dalam peningkatan keseluruhan pada luas
permukaan membran eritrosit. Codocytes sering diamati pada pasien dengan
kekurangan zat besi, penyakit hati kolestatik dan pasca-splenektomi; Namun,
Codocytes juga sering ditemukan pada anemia regeneratif.
 3. Echinocytes
Ia juga dikenal sebagai Erythrocytes crenated atau Burr Cells atau Berry Sel,
adalah sel darah merah yang memiliki spikula tersebar merata di permukaannya.
Mereka terbentuk ketika selebaran luar dari bilayer lipid dari RBC membran
diperluas relatif ke lapisan dalam. Mekanismenya yang terlibat termasuk
menipisnya ATP, pemberian obat amphipathic, pemuatan kalsium dll. Echinocytes
diklasifikasikan sebagai tipe I, II dan III pada fitur morfologis khusus mereka.
Kadang-kadang Echinocytes dibentuk sebagai artefak dari penanganan sampel,
penyimpanan sampel berkepanjangan atau selama persiapan slide.
Glomerulonefritis, limfoma, hemangio sarkoma dan neoplasma lainnya, anemia
hemolitik yang dimediasi imun, defisiensi piruvat kinase, gigitan ular.

4. Elliptocyte RBC
defisiensi besi berbentuk oval, terjadi pada penderita anemia megaloblastik,
elliptocytosis herediter, post kemoterapi
5. Sel Teardrop RBC
Bentuknya meruncing ke titik di satu ujung, menyerupai rendering air artis klasik.
Pada sel imi temuan tidak jelas terlihat dalam beberapa kondisi termasuk
myelofibrosis
6. Spherocyte RBC
 Bentuknya lebih kecil dan lebih gelap dari biasanya. Tidak ada zona pucat pusat.
Tepi luar harus hampir bulat sempurna (untuk membedakan sel ini dari sel yang
berkontraksi tidak teratur)terjadi pada Anemia hemolitik autoimun, anemia
hemolitik alloimun (mis., Penyakit hemolitik pada bayi baru lahir), sferositosis
herediter
7. Stomatosit
Adalah Zona pucat pusat linier, bukan bundar. Biasanya 'garis pucat' berjalan sejajar
dengan sumbu panjang RBC, jika yang terakhir berbentuk bulat telur, tetapi dalam
varian tertentu (misalnya, ovalositosis Asia Tenggara), garis tersebut dapat melintasi
sumbu panjang atau mungkin nonlinear, untuk misalnya, bercabang dua atau
trifurcated Artefak, penyakit hati obstruktif, stomatositosis herediter, ovalositosis
Asia Tenggara, sindrom Rh null.

Anemia diklasifikasikan berdasarkan ukuran sel darah merah yang dilakukan

secara otomatis atau dengan pemeriksaan mikroskopis dari apusan darah tepi.
Ukurannya tercermin dalam mean corpuscular volume (MCV). Jika sel-sel lebih kecil
dari normal (di bawah 80 f), anemia dikatakan mikrositik, jika ukurannya normal (80 –
100 fl), normositik; dan jika mereka lebih besar dari normal (lebih dari 100 f), anemia
diklasifikasikan sebagai mikrositik. MCV hanya mengukur volume sel rata-rata. MCV
dapat menjadi normal sementara sel darah merah individu dalam volume sangat
bervariasi dari satu ke yang lain. Variasi abnormal seperti itu dalam volume sel disebut
anisositosis. (Ravi, 2018)
Untuk mengukur diameter dari sel eritrosit dapat dibandingkan dengan limfosit
yang sudah matur dan kecil. Limfosit adalah sel darah putih yang seragam dalam
penampilan tetapi bervariasi fungsinya dan termasuk T, B, dan sel pembunuh alami.
Sel-sel ini bertanggung jawab untuk produksi antibodi, pembunuhan langsung sel-sel
yang terinfeksi virus dan sel tumor, dan pengaturan respons imun. (Jacob, 2016)
Diagnosis dari film darah harus direkonsiliasi dengan gambaran klinis pada
pasien; dokter laboratorium (ahli hematologi / hematopatologi) memiliki posisi
istimewa untuk dapat memiliki simptomatologi pasien dengan temuan hematologis
untuk memberikan diagnosis atau perbedaan spesifik khususnya pada gangguan
hematologis primer dan penyakit sistemik lainnya dengan manifestasi hematologis
Daftar berbagai kelainan pada setiap baris sel yang dibahas di atas tidak berarti lengkap.
Anda mungkin perlu merujuk ke buku teks standar untuk lebih jelasnya. Membuat
diagnosis dari PBF membutuhkan database klinis yang baik dari berbagai kemungkinan
kelainan sitologi, etiologinya dan banyak pengalaman laboratorium. Kesimpulan dari
PBF dapat benar-benar diagnostik untuk kondisi penyakit seperti diagnosis film darah
penyakit sel sabit atau leukemia myeloid kronis. Dalam kasus lain, itu paling sugestif
dan memerlukan pemeriksaan laboratorium lebih lanjut atau investigasi yang lebih maju
seperti sitokimia, aliran sitometri, sitogenetika atau teknik molekuler terutama ketika
berhadapan dengan keganasan. Meskipun ada kemajuan besar dalam teknik genetika
dan molekuler dalam diagnosis berbagai penyakit, pemeriksaan morfologi apusan darah
tetap merupakan alat yang sangat diperlukan untuk praktik hematologi. (Nwogoh et al.,
2014)
Faktor lain yang berkontribusi terhadap kompetensi diagnose Apusan Darah
yaitu pembuatan sediaan seperti tingkat pendidikan, pengalaman pelatihan mikroskopis
malaria, lama kerja dan mikroskopis juga sedang dievaluasi. Keakuratan dalam
identifikasi parasit malaria menggunakan 2 jenis darah, pertama, dengan menggunakan
slide darah basah.(Saleh et al., 2013)
Saat memproduksi apusan, sumber kesalahan yang paling umum adalah
menggunakan setetes darah dengan diameter terlalu besar (seharusnya tidak lebih dari
3 mm) . Apusan masih dapat dibuat jika tetesannya terlalu besar oleh menyentuh slide
penyebar ke drop sehingga lebar ujung ditutupi dengan darah, menghapus spreader dari
drop, menempatkan spreader pada bagian lain dari slide, dan kemudian melanjutkan
seperti sebelumnya. Sumber lain untuk kesalahan mendorong slide penyebar dalam
gerakan tersentak-sentak dan pada sudut yang buruk. Jika spreader dipindahkan terlalu
lambat atau sudut yang digunakan terlalu kecil, film tebal akan diproduksi dan tidak
akan terbaca. Jika penyebar bergerak terlalu cepat atau sudutnya terlalu besar, film tipis
akan diproduksi, menghasilkan banyak leukosit menjadi agregat di tepi dan di
ekor.Setelah membuat apusan darah, slide harus dikeringkan. Sangat penting bahwa
slide dikeringkan sepenuhnya sebelum pewarnaan. Jika apusan difiksasi dan diwarnai
segera setelah dipersiapkan, struktur nuklir sel darah putih mungkin mengalami
denaturasi yang mengakibatkan rusaknya nuklei dan garis sel perifer yang dapat secara
serius menghambat diferensiasi yang tepat. Metode pengeringan yang harus dilakukan
adalah disengketakan di antara para hematologi. Satu fakta yang disepakati secara
universal adalah bahwa pengeringan harus diselesaikan sesegera mungkin setelah noda
dibuat. Hasil pengeringan yang berkepanjangan menyebabkan pergerakan air keluar
dari sel darah merah Apusan yang berkualitas baik memiliki beberapa ciri berikut :
Apusan yang padat; ini harus memakan waktu sekitar 2/3 dari seluruh noda dan harus
berbaur dengan lancar ke area monolayer,Tepi berbulu yang berkembang dengan baik.
Tepi ini harus memiliki penampilan yang halus dan berbulu; jika ada garis darah tebal
di mana slide berhenti, itu merupakan indikasi apusan yang buruk. Area monolayer tepat
di belakang tepi yang berbulu. Daerah ini harusnya terasa lebih tipis daripada tubuh,
tetapi harus berbaur dengan tubuh apusan. Seringkali area ini lebarnya hanya sekitar ½
cm. Sebelum pewarnaan, jika slide diangkat ke atas cahaya, ada efek pelangi terlihat
tepat di belakang tepi berbulu pada apusan yang dibuat dengan baik.Slide berkualitas
buruk biasanya disebabkan oleh tekanan ke bawah yang berlebihan, gerakan penyebaran
yang lambat, atau goyangan slide penyebar pada permukaan noda. Gerakan penyebaran
yang lambat cenderung menyebabkan bercak panjang dan tipis yang tidak memiliki
tubuh padat, lapisan tipis, dan tepi berbulu yang berkembang dengan baik. Tepi terdepan
mungkin memiliki garis darah bukannya penampilan yang tipis dan berbulu karena
mendorong darah alih-alih menariknya. Seringkali ada goresan pada apusan. Garis-garis
linier yang diatur secara horizontal ke tepi depan disebut tanda ragu-ragu dan
menunjukkan keraguan dalam gerakan maju. Tekanan ke bawah yang berlebihan akan
menghasilkan slide pendek dengan tanda ragu dan daerah tepi bulu dan monolayer yang
kurang berkembang. Goyangan sering disebabkan oleh kurangnya pengalaman atau
mencoba untuk memberikan tekanan daripada membiarkan penyebar bergeser ke
permukaan noda. Karena analisis rutin apusan darah adalah perilaku yang dipelajari dan
interpretasi yang benar difasilitasi oleh pengalaman, kami berutang kepada generasi
dokter yang lebih muda, terutama peserta hematologi, untuk meneruskan keterampilan
ini. Lebih pragmatis, kemahiran dalam analisis apusan darah adalah persyaratan
prosedural untuk sertifikasi dalam Hematologi-Onkologi oleh American Boards of
Internal Medicine and Pediatrics. Mengingat pentingnya apusan darah tepi dalam
praktik hematologi. (Jennifer,2016)
X. Kesimpulan
Berdasarkan Praktikum Evaluasi Eritrodit Sediaan Apusan darah tepi terhadap
probandus Ni Kadek Wiraningsih, Umur 20 tahun, Jenis Kelamin Perempuan,
didapatkan hasil Normokrom,Normositik. Pada pasien Ni Luh Sukra, umur 54 Tahun,
Jenis Kelamin Perempuan didapatkan hasil Normokrom, Normositer, dan ditemukan
bentuk sel eritrosit seperti oval cell dan Bursel.
XI. Daftar Pustaka

PubMed. (2015). What does blood do? PubMed Health, 2–4. Retrieved from

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmedhealth/PMH0072576/

Blood Smear Does this test have other names ? What other tests might I have along

with this. (2019), 2–5.

Ford, J. (2013). Red blood cell morphology. International Journal of Laboratory

Hematology, 35(3), 351–357. https://doi.org/10.1111/ijlh.12082

Jacob, E. A. (2016). Complete Blood Cell Count and Peripheral Blood Film , Its

Significant in Laboratory Medicine : A Review Study, 1(3), 34–57.

https://doi.org/10.11648/j.ajlm.20160103.12

Kumar, R. (2016). Abnormal Scenes in a Blood Film. Hematology & Transfusion

International Journal, 2(6), 121–124.

https://doi.org/10.15406/htij.2016.02.00055

Not, D. O. (n.d.). Lood mear asics.

Nwogoh, B., Transfusion, B., State, E., Transfusion, B., & State, R. (2014).

PERIPHERAL BLOOD FILM - A REVIEW, 12(2), 71–79.

PubMed. (2015). What does blood do? PubMed Health, 2–4. Retrieved from

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmedhealth/PMH0072576/

Ravi, H. (2018). “Comparison of Morphological Analysis of RBC through Peripheral

Smear and Automated Method.” Global Journal of Pharmacy &

Pharmaceutical Sciences, 1(5), 1–2.

https://doi.org/10.19080/gjpps.2017.01.555571

Saleh, I., Lazuardi, L., Checker, C., Mau, F., Murhandarwati, E. H., Nasrul, M., …

Murhandarwati, E. H. (n.d.). No Title.

Sathpathi, S., Mohanty, A. K., Satpathi, P., Mishra, S. K., & Behera, P. K. (2014).

Comparing Leishman and Giemsa staining for the assessment of peripheral

blood smear preparations in a malaria-endemic region in India, 1–5.

Tomari, R., Nurshzwani, W., Zakaria, W., Ngadengon, R., Helmy, M., & Wahab, A.

(2015). Red Blood Cell Counting Analysis By Considering an. ARPN

Journal of Engineering and Applied Sciences ISSN 1819-6608, 10(3), 1413–

1420.