ENZIMAS

Las enzimas son polímeros biológicos que catalizan las reacciones químicas que
tienen lugar en las células de los seres vivos, ya que disminuyen energía de
activación que se necesita para que tengan lugar dichas reacciones, permitiendo
que se produzcan a velocidades y temperaturas adecuadas.

Como catalizadores, actúan mediante su presencia, no se consumen en la

reacción y al finalizar estas quedan libres pudiendo utilizarse de nuevo, por eso
se necesitan pequeñas cantidades.

INTRODUCCIÓN

La presencia y el mantenimiento de un conjunto completo y equilibrado de

enzimas son esenciales para la desintegración de nutrientes a fin de que
proporcionen energía y bloques de construcción químicos; el montaje de esos
bloques de construcción hacia proteínas, DNA, membranas, células y tejidos, y
la utilización de energía para impulsar la motilidad celular, la función neural y la
contracción muscular.

La capacidad para valorar la actividad de enzimas específicas en la sangre, otros

líquidos hísticos, o extractos celulares, ayuda en el diagnóstico y el pronóstico
de enfermedad.

Características

1. Catalizadores de las reacciones biológicas.

2. La mayoría son proteínas, aunque hay moléculas de RNA con
actividad catalítica (ribozimas).
3. Gran poder catalítico
4. Alto grado de especificidad
5. Actúan en soluciones acuosas a 37 °C y pH neutro.
6. Su actividad puede regularse.
7. El 25% de los genes humanos codifican enzimas que catalizan
reacciones metabólicas

IMPORTANCIA

Cada paso de una vía metabólica está catalizado por una enzima.
La medida de la actividad enzimática en fluídos biológicos o tejidos es
importante para el diagnóstico de muchas enfermedades.

Muchos fármacos son inhibidores de la actividad enzimática

Importancia en la industria de alimentación y agricultura

FACTORES

Factores que afectan la actividad de las enzimas

Algunos factores que influyen en la actividad de las enzimas son:

• COFACTORES Y COENZIMAS

• TEMPERATURA

Este factor presenta dos efectos contrapuestos, por un lado el aumento de

temperatura produce, de forma general, un aumento en la velocidad de cualquier
reacción química; pero por otro lado, las enzimas experimentan
desnaturalización y pérdida de actividad al superar una determinada
temperatura. En este caso resulta más difícil determinar como en el pH una
temperatura óptima, y las curvas de actividad presentan un incremento inicial de
actividad más pronunciado para posteriormente al irse desnaturalizando,
decrecer la velocidad de reacción.

Se observa que muchas de las enzimas, duplican la velocidad de una reacción

enzimática cuando se aumenta la temperatura de unos 10° C aproximadamente
y luego cae muy rápidamente por encima de los 40° C.

El aumento en la velocidad de reacción se produce porque con temperaturas

más altas, existen más moléculas de sustrato con suficiente energía para
reaccionar; la disminución de la velocidad de la reacción es debida a la
desnaturalización de la enzima (la mayoría de las proteínas globulares se
desnaturalizan por encima de 60 - 70°C).

Benjamin Franklin- Capítulo I. Las enzimas. –pág. 49

file:///C:/Users/CLIENTE/Desktop/ENZIMAS/4-
%20Capítulo%20I.%20Las%20enzimas.pdf
Las enzimas de seres humanos, por lo común, muestran estabilidad a
temperaturas de hasta 40 a 55 °C. En contraste, las enzimas de los
microorganismos termofílicos que residen en manantiales calientes volcánicos u
orificios hidrotérmicos submarinos, pueden ser estables hasta 100°C o incluso
más.

file:///F:/LIBROS/Libro-Harper%20Bioquimica%2028%20edicion.pdf

libro Harper 28a Edición capítulo 8 Enzima cinética página 78.

•pH

1.- Efecto del pH. Al comprobar experimentalmente la influencia del pH en la velocidad

de las reacciones enzimáticas se obtienen curvas que indican que las enzimas
presentan un pH óptimo de actividad. El pH puede afectar de varias maneras:

 El centro activo puede contener aminoácidos con grupos ionizados que

pueden variar con el pH.
 La ionización de aminoácidos que no están en el centro activo puede
provocar modificaciones en la conformación de la enzima.
 El sustrato puede verse afectado por las variaciones del pH.
Algunas enzimas presentan variaciones peculiares. La pepsina del estómago,
presenta un óptimo a pH=2, y la fosfatasa alcalina del intestino un pH= 12
La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de
pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su
actividad. Así, la pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la
arginasa lo tiene a pH 10 (Fig. 1). Como ligeros cambios del pH pueden provocar la
desnaturalización de la proteína, los seres vivos han desarrollado sistemas más o
menos complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores
fisiológicos.

•CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO

file:///F:/LIBROS/Libro-Harper%20Bioquimica%2028%20edicion.pdf

libro Harper 28a Edición capítulo 8 Enzima cinética página 67- 70

CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO

Para una enzima típica, a medida que la concentración de sustrato aumenta, Velocidad inicial
se incrementa hasta que alcanza un valor máximo. Cuando los aumentos adicionales de la
concentración de sustrato no aumentan más la V inicial, se dice que la enzima está “saturada”
con sustrato.
Note que la forma de la curva que relaciona la actividad con la concentración de sustrato (fig.
8-4) es hiperbólica.

A cualquier constante dada, sólo las moléculas de sustrato que se combinan con la enzima
como un complejo ES pueden transformarse en producto.

En segundo lugar, la constante de equilibrio para la formación del complejo de enzima-

sustrato no es infinitamente grande. Por ende, aun cuando el sustrato está presente en exceso
(puntos A y B de la fig. 8-5), sólo una fracción de la enzima puede estar presente como un
complejo ES. Por tanto, de los puntos A o B, aumentar o disminuir [S] aumentará o disminuirá
el número de complejos ES con un cambio correspondiente de V inicial. En el punto C (fig. 8-5),
en esencia toda la enzima está presente como el complejo ES. Dado que no queda enzima libre
disponible para formar ES.

LAS ECUACIONES DE MICHAELIS-MENTEN MODELAN LOS EFECTOS DE LA CONCENTRACIÓN

DE SUSTRATO

La ecuación de Michaelis-Menten La ecuación de Michaelis-Menten ilustra en términos

matemáticos la relación entre la velocidad de reacción inicial (v¡) y la concentración de
sustrato [S].

En 1913 propusieron una ecuación de velocidad que explica el comportamiento cinético de las
enzimas.

Se basan en 3 postulados:

1.- El complejo ES se encuentra en estado estacionario (mantiene constante aunque haiga

transformaciones de sustrato en producto).

2.- En el momento de saturación toda la Enzima tiene que encontrarse en enzima-sustrato.

3.- La Velocidad máxima coincide con el momento de saturación (que al ya encontrarse como
ES, la velocidad de la reacción tiene que llegar a la velocidad máxima).
•INHIBIDORES

http://biblio3.url.edu.gt/Publi/Libros/2013/Bioquimica/09-O.pdf

Capítulo seis/enzima/página 197-200/

Inhibición enzimática

La actividad de las enzimas puede inhibirse. Las moléculas que reducen la actividad de una
enzima, denominadas inhibidores, incluyen muchos fármacos, antibióticos, conservadores
alimentarios y venenos. Las investigaciones de la inhibición enzimática y de los inhibidores
llevadas a cabo por los bioquímicos son importantes por varias razones. En primer lugar, siendo
la razón más importante, en los seres vivos la inhibición enzimática es un medio importante para
regular las vías metabólicas. Para modular las velocidades de las reacciones enzimáticas
específicas se emplean de forma habitual pequeñas biomoléculas para satisfacer las necesidades
del organismo. En segundo lugar, numerosos tratamientos clínicos se fundamentan en la
inhibición enzimática. Por ejemplo, muchos antibióticos y otros fármacos reducen o eliminan la
actividad de enzimas específicas. El tratamiento más eficaz contra el SIDA utiliza varios fármacos
que incluyen inhibidores de proteasas, moléculas que incapacitan a una enzima vírica que se
requiere para formar virus nuevos. Por último, las investigaciones de la inhibición enzimática
han permitido a los bioquímicos diseñar técnicas que se utilizan para analizar las arquitecturas
física y química y las propiedades funcionales de las enzimas. La inhibición enzimática puede ser
reversible o irreversible.

La inhibición reversible.- Ocurre cuando el efecto inhibitorio de un compuesto puede

contrarrestarse incrementando la concentración del sustrato o retirando el compuesto inhibidor
mientras la enzima permanece intacta. Se clasifica a su vez:

1.- INHIBIDORES COMPETITIVOS

La inhibición reversible será competitiva si el inhibidor se une a la enzima libre y no al complejo

ES, para formar un complejo enzima-inhibidor (EI); compitiendo con el sustrato por la ocupación
del sitio activo.

El sustrato y el inhibidor compiten por el mismo sitio en la enzima. Tan pronto como el inhibidor
se une, el acceso del sustrato al sitio activo es bloqueado.
Debido a que el complejo (EI) se disocia con facilidad, la enzima está disponible de nuevo para

unir al sustrato. La actividad de la enzima disminuye si la Km aumenta y la Vmáx permanece sin

cambio en presencia de un inhibidor competitivo, porque el complejo (El) no participa en el

proceso catalítico. Aunque la Vmáx no cambia, el efecto de un inhibidor competitivo sobre la

actividad se invierte si la concentración de sustrato aumenta. A [S] elevadas, todos los sitios
activos se llenan de sustrato y la velocidad de reacción alcanza el valor que se observa sin un
inhibidor.

Las sustancias que se comportan como inhibidores competitivos (que reducen la afinidad
aparente de una enzima por el sustrato) suelen tener una estructura semejante a la del sustrato.
Entre estas moléculas hay productos de reacción, análogos que no se metabolizan o derivados
del sustrato. La deshidrogenasa de succinato, una enzima del ciclo del ácido cítrico o de Krebs,
cataliza una reacción redox que convierte el succinato en fumarato.

EFECTOS

I sólo se une a E = Aumentando Km y Vmáx permanece sin cambio.

2.- INHIBIDORES NO COMPETITIVOS

Es no competitiva, si el inhibidor se une tanto a la enzima libre como al complejo enzima-

sustrato.

En estas circunstancias, que se denominan inhibición no competitiva, el inhibidor se une a un

lugar diferente del sitio activo. La unión del inhibidor ocasiona la modificación de la
conformación de la enzima, lo que impide la formación del producto. Los inhibidores no
competitivos tienen escaso o nulo parecido con el sustrato, pero pueden influir en la unión del
sustrato si sus sitios de unión están en estrecha cercanía con el sitio de unión del sustrato. En
algunos casos la inhibición no competitiva se invierte en parte, aumentando la concentración de
sustrato. El análisis de reacciones inhibidas por inhibidores no competitivos a menudo es
complejo porque suelen participar dos o más sustratos. De esta forma, las características de la
inhibición que se observan pueden depender en parte de factores como el orden en que se unen
los diferentes sustratos.

Dependiendo del inhibidor que se considere, los valores de las constantes de disociación pueden
ser o equivalentes. Existen dos formas de inhibición no competitiva: la pura y la mixta. En la
inhibición no competitiva pura, que es un fenómeno poco frecuente, ambos valores de K, son
equivalentes. La inhibición no competitiva mixta es en general más complicada debido a que los
valores de K, son diferentes.

EFECTO

I se une a E o a ES = Vmáx desciende y Km permanece sin cambio.

3.- INHIBIDORES ACOMPETITIVO

Acompetitiva si el inhibidor se une sólo al complejo enzima-sustrato. En consecuencia, el

inhibidor es ineficaz a bajas concentraciones de sustrato porque hay muy poco complejo ES
presente.

La constante de disociación del paso de unión de un inhibidor acompetitivo a una enzima es

K = [ES)[I] / [EI S)

Cuando 1 se une al ES, el sustrato no está libre para disociarse de la enzima y la Km disminuye,
lo que da el aspecto de mayor afinidad por el sustrato. A alta [SJ, el inhibidor está en su forma
unida al ES, más eficaz, y la Vmáx del sistema disminuye en grado significativo. La Km y la Vmáx
pueden disminuir o no en la misma magnitud. La inhibición acompetitiva se observa más a
menudo en el caso de enzimas que se unen a más de un sustrato

EFECTO

I sólo se une a ES = Vmáx y Km descienden (no cambia la relación Vmáx/Km).

La inhibición irreversible.- La inhibición irreversible ocurre cuando la unión al inhibidor altera

de manera permanente la enzima, por lo común a través de una reacción covalente que la
modifica de forma permanente.

En la inhibición reversible, el inhibidor puede disociarse de la enzima debido a que se une

mediante enlaces no covalentes. Los inhibidores irreversibles en general se unen de forma
covalente a la enzima, con frecuencia a una cadena lateral del sitio activo.

LA INHIBICIÓN DE ENZIMAS, AYUDAN A LA CREACIÓN DE FÁRMACOS

Muchos fármacos actúan como inhibidores de enzimas; El objetivo de la farmacología es

identificar agentes que pueden

1. Destruir o alterar el crecimiento, la invasividad o el desarrollo de agentes patógenos invasores

2. Estimular mecanismos de defensa endógenos
3. Suspender u obstaculizar procesos moleculares aberrantes desencadenados por estímulos
genéticos, ambientales o biológicos, con trastorno mínimo de las funciones celulares normales
del huésped.

En virtud de sus diversas funciones fisiológicas y alto grado de selectividad de sustrato, las
enzimas constituyen blancos naturales para la creación de fármacos que son tanto potentes
como específicos. Los fármacos estatina, por ejemplo, disminuyen la producción de colesterol
al inhibir la 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A reductasa, mientras que la emtricitabina y el
tenofovir disoproxil fumarato bloquean la replicación del VIH al inhibir una inverso transcriptasa
viral. La farmacoterapia de la hipertensión a menudo incluye la administración de un inhibidor
de la enzima convertidora de angiotensina, lo que disminuye la concentración de angiotensina
II, un vasoconstrictor.

•MECANISMOS REGULADORES