Anda di halaman 1dari 1

2 Metodologi Penelitian

2.1 Diagram Alir Penelitian

E.coli TOP 10 transforman pGEM-bcfd1

Isolasi plasmid pGMT-bcfd1 dengan metoda


lisis alkali-sds

Plasmid pGMT-bcfd1 dengan sisi restriksi Dikonfirmasi dengan


elektroforesis gel
sesuai pET30(a) agarosa

1. restriksi dengan enzim HndIII dan EcoRI


Plasmid pET30(a) (vektor ekspresi)
2. ligasi

Klon rekombinan pET30(a)-bcfd1

Sel kompeten E.coli BL21 Transformasi dengan metoda kejut panas


(DE3) dengan metoda cacl2 (Heat Shock)

E.coli BL21 (DE30) transforman

1. screening koloni 3. Analisis restriksi menggunakan enzim


HndIII dan EcoRI pada gel agarose
2 isolasi plasmid pET30(a)-bcfd1 dengan
elektroforesis
metoda lisis alkali

E.coli BL21 (DE30) transforman positif pET30(a)-bcfd1

Analisis ekspresis

Haloacid dehalogenase rekombinan