IZOENCIMA: Múltiples formas moleculares de la misma enzima, debido a la presencia de más de un gen
codificado para cada una de las enzimas.
PÉPTIDO: consisten de dos o más aminoácidos. POLIPÉPTIDO (del griego "mucho" y "digerido") es el nombre utilizado para designar un péptido de tamaño suficientemente grande; como orientación, se puede hablar de más de 10 aminoácidos. PROTEINA: Cuando el polipéptido es suficientemente grande y, en particular, cuando tiene una estructura tridimensional única y estable, se habla de una proteína. Más de 100 aminoácidos. Las proteínas con una sola cadena polipeptídica se denominan proteínas monoméricas, mientras que las compuestas de más de una cadena polipeptídica se conocen como proteínas multiméricas. POLIAMIDA: Químicamente, un polipéptido es una poliamida, con la única salvedad de que los monómeros constituyentes son únicamente aminoácidos en hélice alfa. 1.- MONÓMEROS: isoenzimas que poseen una sola cadena polipeptídica como estructura cuaternaria activa. 2.- DÍMEROS: isoenzimas cuya estructura cuaternaria activa consiste en la unión de dos polipéptidos. 3.- TETRÁMEROS: la estructura cuaternaria activa de estas isoenzimas consta de cuatro polipéptidos. DETECCIÓN DE MARCADORES ENZIMÁTICOS INCLUYE TRES PASOS: 1. Extracción de proteínas del tejido vegetal 2. Separación de estas proteínas a través de electroforesis y, 3. Coloración histoquímica del gel, visualización en forma de una “banda”. PROCEDIMIENTO Identificar el tejido vegetal adecuado Maceración en presencia de un tampón que permita: La extracción de las proteínas Mantenimiento de su actividad catalítica La prevención contra la oxidación de compuestos fenólicos Extracto de proteínas es separado por electroforesis (almidón, poliacrilamida) Usar diversas sustancias tampón, de acuerdo con el sistema enzimático a ser analizado Visualización directamente mediante colorantes histoquímicos específicos, que proporcionan un sustrato para la enzima. El patrón de bandas observado (zimograma) resulta de la reacción catalizada por la isoenzima presente en aquella posición del gel. VENTAJAS Control genético de la mayoría de las isoenzimas es bien conocido, lo que permite hacer inferencias genéticas directamente de los patrones de bandas observados. Proporcionan amplia información genética para diversas aplicaciones. Técnica barata y tecnicamente accesible. Pueden ser analizados varios loci isoenzimáticos rápida y simultáneamente. Alelos isoenzimáticos codominantes (heterocigóticos y homocigóticos de un determinado locus son fácilmente identificados). Permite calcular frecuencias genotipicas, alélicas y coeficientes de diversidad genética y heterocigosidad (Genética de poblaciones). LIMITACIONES El número total de loci que pueden ser detectados en el genoma. El número de alelos por locus, es decir, el nivel de polimorfismo genético detectable en cada locus. Otras limitaciones: Modificaciones postraduccionales o formas múltiples de un único gen. Especificidad de formas isoenzimáticas en tejidos vegetales. Influencia ambiental en la actividad enzimática Diferencias de actividad asociadas a diferentes fases de desarrollo. CONTROL GENÉTICO DE LAS ISOENZIMAS: Consiste en averiguar el número de loci que codifican para el sistema enzimático, al número de alelos de cada locus y la relación de dominancia o codominancia que existen entre los diferentes alelos, que dan lugar a las isoenzimas estudiadas. ZIMOGRAMA: conjunto de bandas pertenecientes al mismo sistema enzimático que se observan en el mismo individuo.