Materiales

 2 repollos verdes
 3 repollos morados
 2 kilogramos de zanahoria
 9 pimientos rojos
 Tomillo
 Romero
 Dextrosa
 Sal
 Cuchillo
 Gasa
 Metabisulfito de potasio (MBS-K)
 Agua filtrada
 Agua estéril
 18 frascos de litro
 Ácido peracético

Procedimiento

Procesamiento del material vegetal

Lavar el material vegetal, para luego cortar y picar todo los vegetales individualmente en trozos
pequeños. Se procede a masar y porcionar el material en 18 partes de 500g con repollo verde
230g, repollo morado 140g, zanahoria 75g y pimiento rojo 60g.colocar sobre gasa y cerrar.

En 14 sobres de aluminio masar 10g de sal, 10 gramos de azúcar, 0,5g de tomillo y 0,5g de romero,
2 sobres con 10g de sal, 0,5g de tomillo y 0,5g de romero, y 2 sobres con 10g de azúcar, 0.5 tomillo
y 0,5g de romero.

Desinfección de Frascos

Los frascos de litro fueron sumergidos y llenados con una solución de ácido peracético al 5% por
20 minutos para eliminar cualquier contaminación externa, al momento de ser utilizados se les
elimino la solución e inmediatamente fueron llenados con el material vegetal.

Esterilización vegetal mediante vapor de agua

De los 18 sacos 14 fueron esterilizados con vapor de agua por 20 minutos (100°C). (Insertar foto
explicativa)

Esterilización con metabisulfito de potasio

En uno de los frascos de litro desinfectados con ácido peracético se procedió a eliminar la solución
que contenía para introducir la materia vegetal de uno de los sacos no esterilizado a vapor más el
contenido de una de las bolsa de aluminio que contenía sal, azúcar, tomillo y romero. Se adiciona
0,05g de MBS-K junto con un poco de agua filtrada luego homogenizar y enrasar el frasco con agua
filtrada evitando que queden aire en su interior.
Preparación de controles

Controles estériles

Se realizan 3 controles con diferente contenido de ingredientes (control 1 con sal, tomillo y
romero, control 2 con azúcar, tomillo y romero y control 3 con sal, azúcar, tomillo y romero).
Proceso de elaboración de controles en frascos de litro previamente lavados con ácido peracético
agregar el material vegetal esterilizado con vapor (500g) más su correspondiente contenido de sal,
azúcar o ambas, colocar agua estéril, homogenizar, enrasar y cerrar.

Controles sin esterilizar

Realizar el mismo número de controles anteriores (3) repitiendo el procedimiento pero sin el
material vegetal esterilizado y con agua filtrada.

NOTA: los controles no llevan inoculo.

Preparación frasco con inoculo.

En 11 frascos desinfectados con ácido peracético agregar los vegetales esterilizados junto a los
condimentos (sal, azúcar, tomillo y romero) rellenar con agua estéril y homogenizar, esperar a que
los ingredientes estén fríos (frascos cerrados), llevar a inocular cada frasco con las cepas. Todo el
procedimiento de inoculación debe ser bajo campana de flujo laminar. Cada frasco se inoculo con
800 células por litro con 14,5 grados platos. Enrasar los frascos y cerrar inmediatamente.

Mantenimiento del ensayo

Los frascos del ensayo deben mantenerse en oscuridad a una temperatura constante (entre 18-19
grados Celsius), liberando la presión de su interior todos los días para evitar accidentes (reviente
algún frasco) y hacer mediciones el primer mes cada 7 días.