Afrika Jurnal Farmasi dan Farmakologi Vol. 4 (8). pp.

562-573, Agustus 2010 Tersedia

http://www.academicjournals.org/ajpp secara online ISSN 1996-0816 © 2010 Jurnal Akademik

Full Length Penelitian Kertas

Isolasi piperdine dari Piper nigrum dan aktivitas

antiproliferatif yang
SK Reshmi, E. Sathya dan P. Suganya Devi *
Pasca Sarjana Departemen Bioteknologi, Dr Mahalingam Pusat Penelitian dan Pengembangan NGM
College, Pollachi, Coimbatore, Tamilnadu, India - 642001.
Diterima 19 Agustus 2010
Banyak molekul yang diturunkan dari tanaman telah menunjukkan efek yang menjanjikan dalam
terapi. Di antara tanaman diselidiki sampai saat ini, satu menunjukkan potensi besar adalah
Piperaceae. Penelitian ini bertujuan untuk mengekstrak senyawa fitokimia dalam sistem pelarut
yang berbeda di Piper longum, Piper nigrum dan Piper cubeba serta pengujian aktivitas
antibakteri dan antitumor mereka. Analisis HPTLC sampel nigrum P. menunjukkan enam band
alkaloid dua band alkaloid yang mirip dengan Piperine standar 1 dan 2, alkaloid lain mungkin
piperidin, piperettine dan piperanine. P. longum sampel mengandung tiga band alkaloid satu band
yang mirip dengan Piperine standar 1, yang lain mungkin piperlongumine dan piperlonguminine
dan tidak ada band alkaloid ditemukan di P. cubeba. Aktivitas anti bakteri diuji terhadap gram
organisme positif dan negatif menggunakan metode baik difusi agar. Aktivitas tinggi ditemukan di
P. ekstrak nigrum etanol terhadap organisme Salmonella typhii. The piperdine alkaloid dimurnikan
dengan metode refluxion untuk memeriksa aktivitas antitumor yang menunjukkan 51,38% dari
penghambatan pada 5 ug konsentrasi / ml yang sesuai dengan piperidin senyawa untuk
digunakan sebagai obat antikanker untuk karya mekanistik lanjut.
Kata kunci: garis Alkaloid, piperine, HPTLC, aktivitas antibakteri, pemurnian, piperidin, sel HEp2.
PENDAHULUAN
Banyak molekul yang diturunkan dari tanamantelah menunjukkan efek yang menjanjikan dalam terapi
(Lokhande et al., 2007). Di antara tanaman diselidiki sampai saat ini, satu menunjukkan potensi besar
adalah keluarga lada atau dikenal sebagai Piperaceae (Dodson et al., 2000).
Piper longum, Piper nigrum dan Piper cubeba tanaman merambat berbunga dalam keluarga
Piperaceae. P. longum (cabe) adalah semak kecil dengan akar besar kayu dan berbagai merayap,
batang bersendi, menebal di node. Buah mengandung 1% minyak atsiri, resin, alkaloid lilin. Hal ini
digunakan untuk beberapa sifat obat. Ini memiliki tindakan farmakologis banyak seperti antijamur, anti
inflamasi, antioksidan dan efek anti kanker (Atal et al., 1985) dan itu diketahui memiliki aktivitas
insektisida terhadap nyamuk dan lalat (Miyakado et al., 1989). Tanaman tumbuh di seluruh India, di hutan
cemara dan
* Penulis Sesuai. E-mail: suganyabiotech@yahoo.co.in. Telp: 09942625387.

dibudidayakan di Assam, Tamil Nadu dan Andhra Pradesh. P. nigrum (lada hitam) itu adalah panjat
pohon anggur asli monocious atau sopan ke India selatan dan Sri Lanka dan secara luas dibudidayakan
di sana dan di tempat lain di daerah tropis. Pendakian batang pendek sangat fleksibel dengan daun hijau
kehitaman kasar, mereka secara luas dibudidayakan di daerah tropis. Mereka memiliki beberapa
kegunaan seperti mereka membantu dalam menghilangkan rasa sakit, rematik, menggigil, flu, pilek, nyeri
otot dan demam. Eksternal digunakan untuk rubefacient dan sebagai aplikasi lokal untuk sakit santai,
tenggorokan dan beberapa gangguan kulit. Ini memiliki antimikroba (Dorman dan Dekan, 2000),
antimutagenik (El-Hamss et al., 2003), properti pemulungan antioksidan dan radikal (Gulcin, 2005) dan
menghirup minyak lada hitam meningkatkan kembali flexive menelan gerakan (Vijayakumar et al ., 2004).
P. cubeba (lada Java atau lada tailed) buah P. cubeba umumnya dikenal sebagai kemukus. Hal ini
sebagian besar tumbuh di Jawa dan Sumatera. Ini adalah tanaman tahunan, dengan batang memanjat,
cabang bulat, setebal angsa-pena, abu berwarna dan rooting pada sendi. Daun dari empat enam
setengah inci panjang
satusetengah sampai dua inci yang luas, bulat telur-lonjong, acuminate, dan sangat halus. Bunga diatur
dalam paku pada akhir cabang; buah, berry bukan lama dari itu lada hitam. Hal ini digunakan untuk
mengobati gonore, disentri, sifilis, sakit perut dan asma (Eisai, 1995) dan juga memiliki efek
penghambatan pada virus hepatitis C protease. Choi dan Hwang (2003) menunjukkan aktivitas anti
inflamasi dan analgesik ekstrak metanol dari buah P. cubeba terakumulasi lignan dan minyak esensial
dalam jumlah yang relatif tinggi. Alkaloid, yang beberapa 5.500 dikenal, terdiri dari kelas tunggal terbesar
dari zat tumbuhan sekunder. Alkaloid sering beracun untuk manusia dan banyak memiliki kegiatan
fisiologis yang dramatis; maka luas digunakan dalam obat-obatan. Mereka biasanya tidak berwarna,
sering zat optik aktif; kebanyakan kristal tetapi beberapa (misalnya nikotin) adalah cairan pada suhu
kamar.
Piperin merupakan alkaloid yang ditemukan secara alami dalam tanaman milik kelompok piridin
keluarga Piperaceae, seperti P. nigrum dan P. longum. Piperin adalah stereoisomer trans dari 1-
piperoylpiperidine. Hal ini juga dikenal sebagai (E, E) -1- piperoylpiperidine dan (E, E) -1- [5- (1, 3
benzodioxol-5-il) -1-oxo-2, 4-pentdienyl] piperidin. Piperin adalah alkaloid bertanggung jawab atas
kepedasan lada hitam dan lada panjang, bersama dengan chavicine (isomer dari piperin). Ini juga telah
digunakan dalam beberapa bentuk pengobatan tradisional dan sebagai insektisida.
Majeed et al. (1999) melaporkan bahwa piperin banyak digunakan dalam berbagai obat batuk herbal
untuk ampuh anti tussive dan bronkodilator sifat-sifatnya. Hal ini digunakan dalam anti inflamasi, anti
malaria, pengobatan anti leukemia. Studi medicial terbaru menunjukkan akan sangat membantu dalam
meningkatkan penyerapan vitamin tertentu, selenium dan beta-karoten, juga meningkatkan aktivitas
thermogenic alami tubuh.
Baru-baru ini, banyak bakteri patogen menjadi resisten terhadap antibiotik yang ada karena
penggunaan sembarangan mereka dalam pengobatan penyakit menular (Davis, 1994; Layanan, 1995;
Shears, 2000). Oleh karena itu, ada urgensi untuk menemukan antimikroba baru dan efisien dari sumber
lain seperti tanaman (Cordell, 2000; Karaman et al, 2003;. Raghavendra et al., 2005). Dalam penelitian
ini upaya yang dilakukan untuk menyaring ekstrak yang berbeda dibuat dari buah kering P. nigrum, P.
longum dan P. cubeba untuk tindakan antimikroba terhadap bakteri Gram positif dan negatif. The
piperdine alkaloid dimurnikan untuk studi lebih lanjut untuk aktivitas antitumor.
Tujuan penelitian ini
(1) Untuk menilai senyawa bioaktif (alkaloid) dari P. longum, P. nigrum dan P. cubeba. (2) Untuk
mengevaluasi aktivitas antimikroba senyawa bioaktif (alkaloid) (3) Untuk memurnikan piperdine senyawa
dari kegiatan Piper nigrum (4) antitumor dari Piperdine
Reshmi et al. 563
BAHAN DANMETODE
materiTanaman
Buah kering P. longum, P. nigrum dan P. cubeba diperoleh dari dalam dan di sekitar Kabupaten Coimbatore,
Tamilnadu dan disimpan dalam freezer.
Pelarut ekstraksi (Harborne, 1998)
Bahan tanaman bertenaga (10 g) diekstraksi dengan 50 ml etanol, metanol dan etil asetat dalam shaker selama 72
jam. Ekstrak dipekatkan untuk menghapus pelarut dan disaring melalui Whatmann No 1 kertas filter (berbayang
normal). Ekstrak jelas digunakan untuk screening awal untuk alkaloid.
Screening awal untuk alkaloid (Harborne, 1998)
Kehadiran alkaloid diputar dengan mengendapkan dengan reagen seperti Dragendroff, Wagner dan Mayer.
Kehadiran alkaloid dikonfirmasi oleh UV dan analisis TLC.
 Sampel dijalankan di atas kertas kromatografi dan dikonfirmasi dengan melihat kromatogram di bawah sinar UV.
Kehadiran alkaloid yang dianalisis menggunakan KLT dengan menyemprotkan pelat TLC dengan Dragendroff
reagen
Sampel diberikan untuk analisis HPTLC untuk profil alkaloid (pusat Dalmia Penelitian, CBE) adalah demikian:
P. longum (Ekstrak metanol) - dikodekan sebagai 'A' P. nigrum (ekstrak metanol) - dikodekan sebagai 'B' P. cubeba
(Ethyl ekstrak asetat) - dikodekan sebagai 'C' solusi Standard Piperine - dikodekan sebagai 'D'
Prosedur
Uji persiapan solusi
Semua 3 sampel disentrifugasi pada 3000 rpm selama 5 menit . Sampel 'A' dan 'C' diambil untuk analisis seperti
yang diberikan dan Sampel 'B "diencerkan 4 kali dengan Methanol. Solusi ini digunakan sebagai larutan uji untuk
analisis HPTLC.
Sampel dan standar piperine memuat
3 ml larutan uji dan larutan piperine standar (0,5 mg / 1 ml) di atas dimuat sebagai 8 mm panjang band di 5 × 10
Silica gel 60F
254
TLC plate menggunakan Hamilton jarum suntik dan Camag LINOMAT 5 instrumen.
Spot pengembangan
Sampel piring dimuat disimpan di TLC palung kembar mengembangkan ruang (setelah jenuh dengan uap pelarut)
dengan fase gerak masing-(alkaloid) dan piring dikembangkan dalam fase gerak masing hingga 90 mm.
Foto-dokumentasi
Piring dikembangkan dikeringkan dengan udara panas untuk menguapkan pelarut dari piring. Piring itu disimpan di
ruang Foto-dokumentasi (Camag REPROSTAR 3) dan menangkap gambar di cahaya putih, UV 254 nm dan UV 366
nm.
564 Afr. J. Pharm. Pharmacol.
Derivatisasi
Piring dikembangkan disemprot dengan semprotan masing reagen (alkaloid) dan dikeringkan pada 110 ° C dalam
oven udara panas. Piring adalah foto- didokumentasikan dalam cahaya putih menggunakan Photo-dokumentasi
(Camag REPROSTAR 3) ruang.
Scanning
Akhirnya, piring itu tetap dalam tahap scanner dan scanning dilakukan pada 500 nm. Tabel puncak, tampilan dan
densitogram dicatat.
Rincian analisis
fase Ponsel: Benzene-Etil asetat (8: 4)
Semprot reagen: Reagen Dragondorff diikuti dengan 10% etanol asam sulfat setelah dikeringkan dan disimpan piring
di oven udara panas pada suhu 120 ° C selama 5 menit.
Aktivitas antibakteri
strain The bakteri yang digunakan adalah Pseudomonas berfluoresensi (gram negatif), Bacillus subtilis (gram positif),
Escherichia coli (gram negatif), Salmonella typhii (gram negatif).
Aktivitas antibakteri dari ekstrak kasar ditentukan dengan metode baik difusi agar (Lokhande et al, 2007; Rios et al,
1988; Perez et al, 1990:... Mosquera et al, 2004.). Budaya mikroba ditumbuhkan pada suhu 37 ° C selama 18 jam
dan kemudian sekitar diencerkan dengan garam steril (0,9% w / v) solusi untuk mendapatkan suspensi sel 105 CFU
mL-1. Diencerkan inokulum tersebar di Muller Hinton piring agar. Wells dari 6 mm diameter dipukul ke dalam media
agar dan diisi dengan 25 dan 50 ml ekstrak kasar dari P. longum (metanol), P. nigrum (metanol dan etanol) dan P.
cubeba (etil asetat). Piring diinkubasi selama 18 - 24 jam pada 37 ° C. Aktivitas antibakteri dievaluasi dengan
mengukur Zona Hambat (Zoi). Antibiotik streptomisin digunakan dalam sistem tes sebagai kontrol positif.
Pemurnian
50 g sampel bertenaga P. nigrum dan P. longum diambil dan dicampur dengan 100 ml diklorometana dan disimpan
dalam pengaduk magnetik selama 20 menit untuk sama pencampuran. Ekstrak disaring melalui kertas saring
Whatmann: 1 dan disimpan untuk penguapan di air mandi pada 100 ° C sampai minyak coklat gelap yang tersisa.
Setelah pendinginan dalam paket es selama 5 menit untuk yang menambahkan 25 ml dingin Diethyl ether dan aduk
selama 5 menit dan menguap konten lagi dingin dan tambahkan dietil eter setelah pembentukan 15 menit kuning
piperdine kristal diamati (jika tidak ulangi langkah) . Kristal kuning disaring melalui Whatmann kertas saring: 3. Untuk
mengkristal, kristal piperdine dilarutkan dalam 8 ml aseton: hexane (7: 5) solusi. Centrifuge di 10.000 rpm selama 5
menit. Larutkan pelet dan mencucinya dengan eter dingin lagi sentrifugasi pada 10.000 rpm selama 5 menit.
Akhirnya membubarkan kristal di DMSO atau metanol untuk studi lanjut.
Dalam studi vitro
The piperidin senyawa dimurnikan diisolasi dari P. nigrum diambil untuk skrining sitotoksisitas dan assay MTT.
Sitotoksisitas screening
HT line 29 sel (karsinoma usus besar manusia) dan HepG2 (karsinoma Liver Manusia) dikultur di 5A McCoy dan
DMEM (Dulbecco elang dimodifikasi menengah) media masing-masing mengandung 10% serum janin anak sapi,
penisilin (100 U) dan streptomisin (100 ug ). 10 ml DMEM atau McCoy 5A mengandung 10% serum ditambahkan ke
labu dan dipipet ke rincian rumpun sel. Jumlah sel Total diambil dengan menggunakan haemositometer dan
menghitung jumlah sel. Medium ditambahkan sesuai dengan populasi sel yang dibutuhkan. Jumlah yang diperlukan
medium yang mengandung jumlah yang diperlukan sel (0,5-1,0 × 105 sel / ml) dipindahkan ke dalam botol sesuai
dengan jumlah sel dan volume dibuat dengan media dan diperlukan jumlah serum (medium pertumbuhan 10% dan
2% pemeliharaan menengah) ditambahkan. Termos diinkubasi pada suhu 37oC selama 48 jam dalam 5% CO
2
dan sel-sel berkala diperiksa untuk setiap perubahan morfologi dan kontaminasi. Setelah
pembentukan monolayer, sel-sel lebih dimanfaatkan.
Penentuan sintesis mitokondria oleh microculture tetrazolium (MTT) assay (Mosmann, 1983)
Ini adalah uji kolorimetri bahwa pengurangan kuning 3- (4,5 - dimethylthiazol-2-yl) -2,5-difenil tetrazolium bromide
(MTT) oleh suksinat dehidrogenase. MTT masuk ke dalam sel dan masuk ke dalam mitokondria di mana ia direduksi
menjadi sebuah larut, berwarna (ungu tua) produk formazan. Sel-sel kemudian dilarutkan dengan produk organik
(misalnya isopropanol) dan dilarutkan produk formazan diukur spektrofotometri. Pengurangan tingkat MTT di assay
dapat terjadi hanya jika sel-sel yang layak. Jadi kelangsungan hidup sel-sel menunjukkan tingkat aktivitas diukur
berdasarkan kelangsungan hidup sel. Dalam uji MTT jumlah sel yang layak ditemukan sebanding dengan tingkat
produksi formazan. Penghambatan persentase pertumbuhan sel dihitung dengan menggunakan
rumus:%Pertumbuhan Penghambatan = 100 -
Rata-rataOD dari Individu Uji Kelompok
Berarti OD dari Kelompok Kontrol
× 100

HASIL DANPEMBAHASAN
screeningAwal untuk alkaloid
uji alkaloid
2 ml aliquot dari ekstrak yang diperlakukan dengan reagen berikut untuk kehadiran alkaloid. Ketika
ekstrak dicampur dengan reagen Dragendroff ini memberikan endapan berwarna orange (Gambar 1),
ketika dicampur dengan reagen Wagner memberikan oranye kemerahan endapan berwarna (Gambar 2)
dan memberikan krim endapan berwarna ketika dicampur dengan reagen Mayer (Gambar 3).
Analisis TLC alkaloid
The ekstrak metanol P. longum dan P. nigrum dan ekstrak etanol P. ekstrak nigrum dan etil asetat dari
Gambar 1. Uji dengan reagen Dragendroff ini.
Gambar 2. Uji dengan reagen Wagner.
Gambar 3. reagen Mayer.
Gambar 4. analisis TLC.
P. cubeba diambil untuk TLC dan HPTLC analisis. The kehadiran berbagai alkaloid dianalisis
menggunakan KLT. Sampel yang terlihat secara individual dalam piring TLC dan sistem pelarut yang
digunakan untuk penelitian ini adalah asam asetat dan metanol dalam rasio 8: 2. Warna oranye khas
(Gambar 4) band diperoleh ketika disemprot dengan reagen Dragendroff dan denganR
f

nilaiP. longum (metanol) -0,61, P. nigrum (etanol) -0,64, P. nigrum

(metanol) -0,65. Tidak berwarna oranye band yang diamati di P. cubeba.
Analisis HPTLC untukprofil alkaloid
Deteksi
zona berwarnaterang oranye hadir dalam sampel A dan B pada berbagai nilai Rf dalam kromatogram di
cahaya putih setelah derivatisasi (puncak Tabel 1), yang termasuk alkaloid senyawa kelas hadir dalam
sampel yang diberikan. Dari standar piperine Jalur D, itu menegaskan bahwa piperin hadir dalam Contoh
A dan B dengan alkaloid lainnya. (Gambar 5).
Dari puncak Table 1 diberikan dan dari grafik puncak, Rf nilai, daerah dan zat ditentukan. Lagu A (P.
longum) memiliki piperine 2 di puncak kedua dengan nilai Rf 0,4. Track B (P. nigrum) memiliki piperine 1
dan 2 dengan nilai Rf 0,34 dan 0,41. Tidak ada alkaloid yang ditemukan di P. cubeba sampel di bawah
analisis HPTLC. Lagu D (Standard piperine 1 dan 2) yang digunakan untuk mendeteksi keberadaan
piperine di Trek A, B dan C. Dengan demikian dari hasil track B (P. nigrum) menunjukkan nilai Rf yang
lebih tinggi bila dibandingkan dengan jalur A. Shanmugasundaram et al . (2008) melaporkan bahwa
piperin ditemukan di sirup obat batuk dengan nilai Rf 0,37 dengan analisis HPTLC dan quantation
dilakukan pada UV 330 nm. Sehingga konsentrasi piperine lebih di P. nigrum daripada di P. longum.
Reshmi et al. 565
566 Afr. J. Pharm. Pharmacol.
Sebelum derivatisasi
Gambar analisis 5. HPTLC: Kromatogram. Piper longum (Ekstrak metanol) - dikodekan sebagai 'A', Piper nigrum
(Ekstrak metanol) - dikodekan sebagai 'B', Piper cubeba (Ethyl ekstrak asetat) - dikodekan sebagai 'C', solusi
Standard Piperine - dikodekan sebagai 'D'
Table 1. analisis HPTLC.
Track Puncak Rf Tinggi Ditugaskan zat
A 1 0.24 41 Alkaloid 1 A 2 0,4 231,5 Piperine 2 A 3 0.48 250 Alkaloid 2 B 1 0,15 333,9 Alkaloid 3 B 2 0.19 226
Alkaloid 4 B 3 0.37 655,5 Piperine 1 B 4 0.41 558,4 Piperine 2 B 5 0.51 72,5 alkaloid 5 B 6 0,59 46,2 alkaloid 6 C - - -
Tidak alkaloid Band D 1 0.35 176.4 Piperine 1 D 2 0,4 15,2 Piperine 2
Kromatogram
Panjang gelombang alkaloid adalah antara 254-366 nm, setelah derivatisasi di cahaya putih dalam
sampel A, 3 alkaloid diidentifikasi dan satu piperine 2, dalam sampel B 6 loids alka- diidentifikasi dan
mengandung piperine 1 dan 2. dalam sampel C tidak ada band alkaloid diidentifikasi. Badheka et al.,
(1987) melaporkan bahwa band piperine yang terdeteksi oleh sinar UV pada 254 nm.
Puncak densitogram
Dalam densitogram Jalur A berisi tiga puncak; kedua
puncakadalah mirip dengan standar piperine 2. Netz et al. (1993) melaporkan bahwa buah kering P.
nigrum (lada hitam) mengandung piperine, piperidin, piperettine dan piperanine. Dari hasil di atas alkaloid
lain mungkin piperidin, piperettine dan piperanine. Track B memiliki enam puncak di 3 itu dan 4 yang
piperin 1 dan 2. Desai et al. (1989) melaporkan bahwa P. longum menunjukkan adanya Piperlongumine,
piperlonguminine, piperine dan piplartine. Dari hasil alkaloid lain mungkin piperlongumine,
piperlonguminine dan piplartine. Tidak ada alkaloid yang ditemukan dalam sampel P. cubeba bawah
HPTLC ana-lisis. Dari hasil di atas sampel B memiliki konsentrasi yang lebih tinggi dari piperin bila
dibandingkan dalam sampel.
Setelah derivatisasi
Gambar 5
Jalur A. Dasar display (scan pada 500 nm) dan display densitogram puncak.

Jegananthan et al. (2008) melaporkan bahwa sistem pelarut untuk analisis HPTLC untuk piperine
ditemukan toluena dan etil asetat sebagai fase gerak dan juga fase gerak dalam makalah ini adalah
benzena dan etil asetat.
Aktivitas antibakteri
Hasil aktivitas antibakteri dari ekstrak kasar terhadap bakteri uji diwakili dalam Tabel 2. Dalam rison-
perusahaan dengan standar referensi streptomisin (10 mg / disc)
ekstrak kasar menunjukkan aktivitas antibakteri yang signifikan pada konsentrasi 50 ml. Ekstrak etanol P.
nigrum menunjukkan aktivitas yang lebih tinggi terhadap gram negatif organisme Salmonella typhii dan
terendah terhadap ekstrak etanol P. nigrum terhadap E. coli. Zona inhibisi terhadap bakteri gram positif
dan gram negatif berkisar 0,4-1,6 ug / ml masing-masing. Meskipun ekstrak kasar menunjukkan aktivitas
terhadap semua bakteri yang diuji itu lebih baik terhadap bakteri gram negatif dari gram teria bakterial
positif. Analisis ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol P. nigrum dan ekstrak etil asetat dari P. cubeba
menunjukkan tertinggi ekstrak asetat aktivitas etil dan piperine dipamerkan
Reshmi et al. 567
Melacak A. Dasar display (pindai pada 500 nm).
Track A. Puncak display densitogram.
568 Afr. J. Pharm. Pharmacol.
Track B. Dasar display (pindai pada 500 nm).
Melacak B. Puncak densitogram display.
Melacak B. Dasar display (pindai pada 500 nm) dan display densitogram Peak.
sensitivitas yang baik dipamerkan melawan Shigella dysenteriae, Staphylococcus aureus dan Bacillus
subtilis. Ifra Ghori et al. (2009) juga melaporkan bahwa P. nigrum ditemukan
efek terhadap Salmonella dan B. subtilis. Reddy et al. (2001) juga melaporkan tentang aktivitas
antibakteri isolat murni dari lada hitam terhadap B. subtilis dan
tampilan Lacak C. Dasar (pindai pada 500 nm) dan display densitogram puncak.
piperine terhadap S. aureus.
Namun, penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mengoptimalkan penggunaan efektif agen ini dalam
praktek klinis (Molen, 2001). Penegasan ini juga dikukuhkan sebagai ekstrak,
menunjukkan jumlah yang relatif morerate hadir fotokimia. Dari analisis HPTLC dilaporkan bahwa saat ini
fitokimia utama dalam ekstrak kasar P. nigrum, P. longum ditemukan piperin sehingga
Reshmi et al. 569
Lacak C. Dasar display (pindai pada 500 nm).
Melacak C. Puncak densitogram display.
570 Afr. J. Pharm. Pharmacol.
Track D. Dasar display (pindai pada 500 nm).
Melacak D. Puncak densitogram display.
Melacak D. Dasar display (pindai pada 500 nm) dan Lacak D. Puncak densitogram display.
efek inhibitor dari ekstrak kasar P. nigrum, P. longum dan konstituen aktif ditemukan piperine.
Piperin diekstrak dari Ludwigia hyssopifia dilaporkan memiliki antitumor dan acitivity antimikroba
dilaporkan
oleh Banibrata das et al. (2007). Aktivitas antimikroba ekstrak etilasetat dari P. cubeba adalah karena
kehadiran fitokimia lainnya dalam ekstrak.
Disarankan bahwa penelitian lebih lanjut yang akan dilakukan yang
Reshmi et al. 571
Tabel 2. Aktivitas antibakteri terhadap diuji organisme.
Sampel
Konsentrasi (ml)
E. coli (mm) Pseudomonas
fluroscens (mm)
Bacillus subtilis (mm)
Salmonella typhii (mm) Piper longum (Methanol)
50 25
1.2 0.6
1.1 0.6
0.8 0.5
0.6 0.5
Piper nigrum (Methanol)
50 25
0,8 0,7
0,7 0,4
1,2 1
1,2 0,8
Piper nigrum (Etanol)
50 25
0,5 0,4
1,5 0,6
__
1,6 1,4
Piper cubeba (Ethyl acetate)
50 25
__
1 0,6
0,9 0,8
16 1,2
Tabel aktivitas 3. antitumor dari P. nigrum
Konsentrasi sampel ( ug / ml) viabilitas sel Persentase (MTT assay) 5 51,38 2,5 62,5 1,25 80,55 0,625sel control -
perubahan sitotoksik diamati sel pembulatan, kematian sel
akan lebih menjelaskan dan mengkarakterisasi komponen aktif dari P. cubeba.
Isolasi dan pemurnian piperdine
The piperdine alkaloid murni diamati hanya di Piper nigrum tapi tidak di Piper longum. Lim et al 2009
idientified alkaloid seperti pelliterine, piperidin, piperine dan pellitorine di Piper nigrum dan Piper betle dan
itu adalah laporan pertama pada (E) -1- [3'4 '- (methylenedioxy) sinamoil] pierdine 2 dari Piper nigrum
sebagai produk alami.
Aktivitas antitumor
Menurut sebuah laporan oleh Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), penggunaan obat herbal adalah
dalam meningkatkan tren di kedua negara berkembang dan industri. Mengingat fakta bahwa lebih dari
sepertiga dari populasi di negara-negara berkembang tidak memiliki akses ke untuk obat esensial dan
penyediaan terapi tradisional yang aman dan efektif bisa menjadi alat penting untuk meningkatkan akses
ke perawatan kesehatan, WHO meluncurkan hensive pernah komprehensif secara pertama strategi obat
tradisional pada tahun 2002 (Banibarta das et al., 2007). Dari ekstrak P. nigrum kita telah
mengisolasi suatu piperidin konstituen alkaloid.
Dalam kegiatan antitumor vitro senyawa terisolasi, piperidin dilakukan oleh MTTassay. Senyawa
piperidin dipamerkan 51,38% penghambatan sel HEp2 (sel epithiloma Manusia laryax) pada konsentrasi
5 ug / ml. Dari enam konsentrasi yang berbeda dari piperidin konsentrasi tertinggi ditampilkan
penghambatan tertinggi ditampilkan aktivitas antiproliferatif tergantung dosis pada sel HEp2 (Tabel 3).
Sel HEp2 diobati muncul bentuk sebagai memanjang, melekat lancar pada wajah sel budaya dan
beberapa sel dikelompokkan bersama untuk membentuk koloni (Gambar 6).
Setelah pengobatan dengan ekstrak selama 24 jam, sel-sel berubah menjadi bentuk bulat dan
kehilangan kontak sel (Gambar 7). Khususnya sel-sel kehilangan morfologi permukaan dan meninggal
pada konsentrasi 50%. Studi ini menegaskan in vitro properti antiproliferatif dari piperidin terhadap HEp2
sel kanker. Lim et al. (2009) melaporkan bahwa ekstrak P. nigrum dan P. betle memiliki aktivitas
sitotoksisitas terhadap HL60 dan garis sel HeLa. Untuk yang terbaik dari pengetahuan kita, tidak ada
pekerjaan sebelumnya pada aktivitas antitumor dari piperdine senyawa. Laporan terakhir telah
menyebutkan bahwa begitu banyak tanaman dan komponen mereka bisa bertindak sebagai atumour
penekan, inducer apoptosis pada sel kanker. Penelitian ini baik berkorelasi dengan laporan sebelumnya
pada aktivitas penekan kanker dan aktivitas anti kanker.
572 Afr. J. Pharm. Pharmacol.
Gambar 7. Piperdine diperlakukan sel Hep2 menunjukkan sel-sel berbentuk bola yang mengarah ke hilangnya
anchorage sel dengan konsentrasi 5 ug / ml.
Kesimpulan
Banyak tanaman memiliki alkaloid sebagai lite METABO- utama sekunder, sekarang poin studi
keantimikroba kemungkinan
Gambar6. sel Kontrol Hep2 menunjukkan sel oval atau berbentuk batang dengan sel ke sel anchorage.

dan potensi antitumor dan juga mengkonfirmasi kehadiran piperin alkaloid dan piperidin dengan analisis
HPTLC. Hasil penyelidikan ini harus membantu dalam lebih baik menjelaskan aktivitas farmakologi
kompleks. Berikut studi ini, itu menegaskan potensi piperidin yang dapat digunakan sebagai obat
antikanker, lanjut kerja yang lebih mekanistik penting untuk membuktikan senyawa ini sebagai salah satu
obat kanker tertentu.
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada anggota staf dan teman-teman dari PG Departemen
Bioteknologi, Nallamuthu Gounder Mahalingam College, Pollachi, Tamilnadu dan pusat penelitian
Dalmia, Coimbatore, atas kerjasama yang baik mereka untuk menyelesaikan pekerjaan ini.
PUSTAKA
Atal CK, Dubey AK, Singh J (1985), secara biokimia dariditingkatkan
ketersediaan obatdengan piperin. J. Exp. Ther, 232:. 258-262. Badheka LP, Prabhu BR (1987). Ligans dari Piper
cubeba.
Fitokimia. 26 (7): 2033-2036. Banibrata D, Juthika K, Sitesh CB, Mohammad AU, Joydeb KK (2007). Antitumor dan
antibakteri; aktivitas ekstrak etil asetat dari Ludwigia hyssopifolia Linn dan piperine prinsip aktif. Pak. J. Pharm. Sci.
20 (2): 128-131. Bauer AW, Kirby WM, Sherris JC, Turck M (1966). Pengujian kerentanan antibiotik dengan metode
single disc standar. Saya. J. Clin. Pathol. 45, 493-496. Eun-Mi C, Jae-Kwan H (2003). Investigasi kegiatan anti-
inflamasi dan antinociceptive dari Piper cubeba, Physalis angulata dan Rosa hybrida. J. Ethnopharmacol. 89: 171-
175. Chung TH, Kim JC, Kim MK, Choi SC, Kim SL, Chung JM, Lee IS, Kim SH, Hanh KS, Lee IP (1995). Investigasi
pabrik Korea ekstrak untuk agen phytotherapeutic potensial terhadap B-virus Hepatitis. Phytotherapy Res. 9: 429-
434. Cordell GA (2000). Keanekaragaman hayati dan penemuan obat
hubungan simbiosis.Fitokimia. 55: 463-480. Davis J (1994). Inactivatin antibiotik dan penyebaran
gen resistensi. Ilmu. 264: 375-385. Dodson CD, Dyer LA, Searcy J, Wright Z, Letourneau DK (2000).
Cenocladamide, alkaloid diydropyridone dari Piper cenocladum. Fitokimia. 53: 51-54. Dorman HJ, Dekan SG (2000).
Agen Antmicrobial dari tanaman: Aktivitas antibakteri tanaman minyak atsiri. J. Appl. Microbiol. 88 (2): 308- 316. Eisai
PT (1995). Obat Indeks Herb di Indonesia. 2nd edition. Dian
Rakyat, Jakarta, 21 pp. El Hamss R, Idaomar M, Alonso-Moraga A, Muñoz SA (2003). Sifat antimutagenik bel dan
lada hitam. Makanan Kimia. Toxicol. 41 (1): 41-47. Gulcin I (2005). Kegiatan pemulungan antioksidan dan radikal
bijilada hitam. Int. J. Food Sci. Nutr. 56 (7): 491-499. Harborne J (1998). Fitokimia Metode edisi ketiga. 203-214. Ifra
G, Sheikh SA (2009). Kegiatan antibakteri madu, minyak sandal dan
lada hitam. Pak. J. Bot. 41 (1): 461-466. Jeganathan NS, Kannan K, Manavalan R, Vasanthi, Hannah R (2008).
Standarisasi formulasi siddha Amukkara Curanam oleh HPTLC. Afr. J. Tradit. Melengkapi. Altern. Med. 5 (2): 131-
140. Karaman saya, Sahin F, Güllüce M, Ogütçü H, Sengul M, Adigüzel A (2003). Aktivitas antimikroba dari air dan
metanol ekstrak Junipelis oxycedrus. J. Ethnopharmacol. 2837: 1-5. Lim CM, Ee GCL, Rahmani M, Bong CFJ (2009).
Alkaloid dari Piper
nigrum dan Piper betle. Pertanika. J. Sci. Technol. 17 (1): 149-154.
Lokhande PD, Gawai KR, Kodam KM, Kuchekar BS (2007). Aktivitas antibakteri ekstrak Piper longum. J. Pharm.
Toxicol. 2 (6): 574-579. Majeed M, Badmeev V, Rajendran R (1999). Gunakan dari piperin sebagai
penambah bioavailabilitas. Amerika Serikat Paten No.5, 972: 382. Masakazu M, Isamu N, Nobuo O (1989).
Insektisida isobutylamides tak jenuh: Dari produk alami untuk lead agrokimia. Dalam Insektisida Tanaman Asal. ACS
Simposium Seri 387, Arnason JT, Philogene BJR, Morand P (eds). American Chemical Society: New York. 183-187.
Molan PC (2001). Madu sebagai agen antibakteri topicial untuk pengobatan luka yang terinfeksi. Laporan Unit Madu
Penelitian, Departemen Ilmu Biologi, University of Waikato, Private Bag 3105, Hamiltom, Selandia Baru. Mosmann T
(1983). Uji kolorimetri cepat untuk pertumbuhan sel dan kelangsungan hidup: aplikasi untuk proliferasi dan
sitotoksisitas tes. J. Immunol. metode. 65: 55-63. Mosquera OM, Correa YM, Niño J (2004). Aktivitas antibakteri dari
beberapa
tanaman colombial Andean. Pharm. Biol. 42: 499-503. Perez C, Paul M, Bazerque P (1990). Assay antibiotik
denganagar.
metode baik difusi Acta Biol. Med. Exp. 15: 113-115. Recio MC (1989). Sebuah tinjauan dari beberapa senyawa
antimikroba yang diisolasi dari tanaman obat yang dilaporkan dalam literatur 1978-1988. Phvtother. Res. 3: 117-125.
Reshmi et al. 573
Reddy PS, Jamil K, Madhusudhan P (2001). Studi pada lukapenyembuhan
propertitanaman obat pesisir. Pharm. Biol. 39 (3): 236-238. Rios JL, Recio MC, Villar A (1988). Metode skrining
untuk produk alami dengan aktivitas antimikroba: Sebuah tinjauan literatur. J. Ethnopharmacol. 23: 127-149. Layanan
RF (1995). Antibiotik yang menolak perlawanan. Ilmu. 270: 724-
727. Shanmugasundaram P, Maheswari R, Vijayaanandhi M (2008). Estimasi kuantitatif dari Piperine dalam sirup
batuk herbical dengan metode HPTLC, Rasayan J.Chem. 1: 212-217. Shears P (2000). Resistensi antimikroba di
tropics.Tropics Doctor.
30 (2): 114-118. Vijayakumar RS, Surya D, Nalini N (2004). Efisiensi antioksidan lada hitam dan piperine pada tikus
dengan lemak tinggi diet diinduksi stres oksidatif. Redoks Rep 9 (2):. 105-110. Vlietinck AJ, Van Hoof L, Totté J,
Lasure A, Vanden BD, Rwangabo PC, Mvukiyumwami J (1955). Skrining ratus tanaman obat Rwanda untuk sifat
antimikroba dan antivirus. J. Ethnopaharmacol, 46:. 31-47. Netz DF, Seidel JL (1993). Isolasi Piperine JLJChem.Ed.
598-
599.