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Actividad Experimental

Extracción de DNA
1. Introducción
Sobre el DNA.

2. Planteamiento del problema a investigar:


En las actividades de aula concerniente a los cursos de Biología existe el problema que
cuando se hablan de temas aparentemente complejos como el DNA, suele considerarse muy
complicado y abstracto, pero como se puede apreciar toda la biología es explicable a partir
del estudio del DNA, de una simple fisiología o estructura de vida, hasta una enfermedad y
la diversidad de la vida en el planeta. Esta situación problemática se sintetiza en que, por un
lado hay necesidad de que el DNA sea entendido y por el otro existe cierta complejidad
teórica y experimental para lograr este cometido. Esta situación plantea que, a partir de
experiencias sencillas de alguna manera infieran en el concepto de DNA a partir de
evidencias científicas experimentales observables.

2.2 Objetivos de la investigación.


Objetivo General:
Mostrar la presencia de DNA (indirectamente) en los seres vivos.
Objetivos específicos
2.2.1 El objetivo fundamental de esta práctica es utilizar unas sencillas técnicas para poder
extraer el DNA de un tejido animal y vegetal.
2.2.2 Mostrar que a partir de fibras conseguidas podemos “obtener” DNA haciendo una
inferencia de conceptos.
2.2.3 A partir de la longitud enorme de las fibras también se confirma que en el núcleo, el
DNA se encuentra replegado.

3. Definición de términos básicos a INVESTIGAR


DNA, cromosoma eucariota, número de cromosomas de la cebolla y número de
cromosomas de pollo. Papel del NaCl, del detergente y del alcohol en la obtención de
DNA.

4. Formular una hipótesis.

5. Método
5.1 Materiales
- Hígado de pollo (Gallus gallus, sp.)* - Trozo de tela para filtrar o papel filtro
- Cebolla pequeña (Allium cepa, sp)* - Alcohol de 96% (etílico) 100 ml
- Varilla de vidrio - Cloruro de sodio 2M (NaCl)
- Mortero - SDS o detergente líquido
- 2 Vasos de precipitados - Orceína acética (1%) o hematoxilina
- Pipeta 10 ml - Aceite de inmersión
- Probeta - Agua destilada
-1 Microscopio óptico - Glicerina
-2 Portaobjetos y cubreobjetos
*Alumnos

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5.2 Procedimiento para el hígado de pollo
1. Triturar medio hígado de pollo en un mortero.
2. Añadir al triturado 50 ml de agua, remover hasta hacer una especie de papilla o puré.
3. Filtrar varias veces sobre una tela o papel filtro para separar los restos de tejidos que
hayan quedado por romper.
4. Medir el resultado con una probeta para calcular su volumen.
5. Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro de sodio 2M.
6. A continuación agregar 1 ml de detergente líquido.
7. Añadir con una pipeta 50 ml de alcohol de 96°, esto se realiza con cuidado y lentamente
de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas.
8. Introducir una varilla de vidrio solamente hasta la región de alcohol e ir removiendo en
la misma dirección. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas.
9. Tomar con la varilla unas fibras blancas y depositarlas sobre un portaobjetos, agregar dos
gotas de Orceína acética o hematoxilinay dejar que se tiñan durante unos cinco o diez
minutos. A continuación, lavar la preparación con agua destilada, cuidando de no arrastrar
las fibras de DNA, secar los bordes, añadir una gota de glicerina, poner un cubreobjetos y
observar al microscopio.

5.2 Procedimiento para la cebolla


1. Licuar o triturar la cebolla pequeña.
2. Añadir al triturado 50 ml de agua, remover hasta hacer una especie de papilla o puré.
3. Filtrar varias veces sobre una tela o papel filtro para separar los restos de tejidos que
hayan quedado por romper.
4. Medir el resultado con una probeta para calcular su volumen.
5. Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro de sodio 2M.
6. A continuación agregar 1 ml de detergente líquido.
7. Añadir con una pipeta 50 ml de alcohol de 96°, esto se realiza con cuidado y lentamente
de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas.
8. Introducir una varilla de vidrio solamente hasta la región de alcohol e ir removiendo en
la misma dirección. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas.
9. Tomar con la varilla unas fibras blancas y depositarlas sobre un portaobjetos, agregar dos
gotas de Orceína acética o hematoxilinay dejar que se tiñan durante unos cinco o diez
minutos. A continuación, lavar la preparación con agua destilada, cuidando de no arrastrar
las fibras de DNA, secar los bordes, añadir una gota de glicerina, poner un cubreobjetos y
observar al microscopio.

6. Análisis de Resultados (agregar dibujos, descripciones y sus aumentos)


Para esta parte ya habrás investigado el papel del NaCl, del detergente y del alcohol en la
obtención de DNA.
7. Conclusiones
Se cumplieron los objetivos sí o no y ¿por qué?

8. Referencias Bibliográficas
Añadir las referencias que utilizaron para investigar los conceptos previos y el análisis de
resultados.
EL DÍA DE LA PRÁCTICA SOLO VAN A ENTREGAR LOS PUNTOS 3, 6, 7 Y 8.

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