Extracción de DNA
1. Introducción
Sobre el DNA.
5. Método
5.1 Materiales
- Hígado de pollo (Gallus gallus, sp.)* - Trozo de tela para filtrar o papel filtro
- Cebolla pequeña (Allium cepa, sp)* - Alcohol de 96% (etílico) 100 ml
- Varilla de vidrio - Cloruro de sodio 2M (NaCl)
- Mortero - SDS o detergente líquido
- 2 Vasos de precipitados - Orceína acética (1%) o hematoxilina
- Pipeta 10 ml - Aceite de inmersión
- Probeta - Agua destilada
-1 Microscopio óptico - Glicerina
-2 Portaobjetos y cubreobjetos
*Alumnos
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5.2 Procedimiento para el hígado de pollo
1. Triturar medio hígado de pollo en un mortero.
2. Añadir al triturado 50 ml de agua, remover hasta hacer una especie de papilla o puré.
3. Filtrar varias veces sobre una tela o papel filtro para separar los restos de tejidos que
hayan quedado por romper.
4. Medir el resultado con una probeta para calcular su volumen.
5. Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro de sodio 2M.
6. A continuación agregar 1 ml de detergente líquido.
7. Añadir con una pipeta 50 ml de alcohol de 96°, esto se realiza con cuidado y lentamente
de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas.
8. Introducir una varilla de vidrio solamente hasta la región de alcohol e ir removiendo en
la misma dirección. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas.
9. Tomar con la varilla unas fibras blancas y depositarlas sobre un portaobjetos, agregar dos
gotas de Orceína acética o hematoxilinay dejar que se tiñan durante unos cinco o diez
minutos. A continuación, lavar la preparación con agua destilada, cuidando de no arrastrar
las fibras de DNA, secar los bordes, añadir una gota de glicerina, poner un cubreobjetos y
observar al microscopio.
8. Referencias Bibliográficas
Añadir las referencias que utilizaron para investigar los conceptos previos y el análisis de
resultados.
EL DÍA DE LA PRÁCTICA SOLO VAN A ENTREGAR LOS PUNTOS 3, 6, 7 Y 8.
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