MEDIOS DE CULTIVO:

Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo

de microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe
sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos
van a crecer y multiplicarse para dar colonias. (López T. & Torres C., 2006) Los
microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones
extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de
nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo están el
carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno. Muchas bacterias sin
embargo necesitan del aporte extra de factores de crecimiento específicos en forma de
suero, sangre y extracto de levadura entre otros. (Ramón P. & Juárez A., 2002)

Fig. 1 Microorganismo

El desarrollo de un microorganismo en un medio de cultivo depende de diversos factores,

entre los cuales los más importantes son:

- Disponibilidad de los elementos nutritivos necesarios

- Existencia del oxígeno requerido - Grado de humedad apropiado - Valores de pH
adecuados: Usualmente neutro o ligeramente alcalino (7.2 – 7.4), salvo
excepciones.
- Temperatura de incubación precisa: 35 – 37°C para las bacterias patógenas.
- Condiciones de esterilidad del medio y protección de posibles contaminaciones.

(García M., Fernández T. & Paredes S., 2005)

CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:

Según su origen:

Naturales: Son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o

vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se
conoce exactamente.

Sintéticos: Son los medios que contienen una composición química definida cuali y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.

Semisintéticos: Son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento bajo
una forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.
(López T. & Torres C., 2006)

Según su consistencia:

Líquidos: Se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa.

Favorecen mucho el desarrollo y la multiplicación de las bacterias porque al difundirse
estas por todo el medio encuentran con facilidad las sustancias que necesitan para
nutrirse.

Sólidos: Se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo). El agar es una

sustancia inerte polisacárida (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como esta
sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo, en
ellos las bacterias crecen con mayor dificultad, pues los nutrientes se agotan con rapidez
en el punto donde se desarrollan.

Semisólidos: Se utilizan para determinar la motilidad de las especies en estudio.

Actualmente se encuentran disponibles comercialmente con el agregado de agar.
(García M., Fernández T. & Paredes S., 2005)
 Fig. 2 Cultivos sólidos y líquidos

Según su composición:

Comunes o universales: Su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los

microorganismos poco existentes. Es el medio más frecuentemente utilizado para
mantener colonias microbianas. Por ejemplo: agar común o caldo común.

Selectivos: Son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones
físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos con el
fin de inhibir el crecimiento de especies químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo
de medio sólo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibiendo el de
otros. Se utiliza para seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones
mixtas. Por ejemplo Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de ciertos
estafilococos). (López T. & Torres C., 2006)

Según su aplicación:

Generales: También llamados comunes, son apropiados para el cultivo de la mayoría de

los microorganismos por la facilidad con que se desarrollen en ellos.

Especiales: Conocidos también como específicos, van dirigidos al cultivo de

determinadas especies bacterianas o son utilizadas con fines de diferenciación.
 Enriquecidos: Van añadidos de nutrientes muy ricos que permiten el crecimiento de
ciertas bacterias difíciles de cultivar.

COMPONENTES USUSALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:

Extractos: Para su preparación, ciertos órganos o tejidos animales o vegetales (por

ejemplo carne, hígado, semillas, etc.) son extraídos con agua y calor, y posteriormente
concentrado hasta la forma final de pasta o polvo. Estos preparados deshidratados son
frecuentemente empleados en la confección de medios de cultivo. Ejemplos: extracto de
carne, de levadura, de malta, etc. En el caso del extracto de carne en polvo o pasta,
provee sustancias nitrogenadas, minerales y vitaminas, mientras que el extracto de
levaduras provee vitaminas del grupo B, nitrógeno y carbono.

Peptonas: Son mezclas complejas de compuestos orgánicos nitrogenados y sales

minerales que carecen de identidad química definida; se obtienen por digestión
enzimática o química de proteínas animales o vegetales (soja, carne, gelatina, caseína,
etc.). Las peptonas son muy ricas en péptidos y aminoácidos, pero pueden ser
deficientes en determinadas vitaminas y sales.

Fluidos Corporales: Sangre completa, sangre desfibrinada, plasma o suero sanguíneo

son frecuentemente añadidos a los medios empleados para el cultivo de algunos
patógenos. La sangre no puede ser esterilizada y debe, por tanto, ser obtenida en
condiciones asépticas directamente de un animal sano. Los fluidos corporales no
solamente contribuyen con factores de crecimiento, sino también con sustancias que
neutralizan inhibidores del crecimiento de algunas bacterias.

Sistemas amortiguadores: Algunos componentes son incorporados al medio de cultivo

para mantener el pH dentro del rango óptimo del crecimiento bacteriano. Los
microorganismos más comunes son neutrófilos (el pH óptimo para su crecimiento está
próximo a la neutralidad), y sales como fosfatos bisódicos o bipotásicos, o sustancias
como las peptonas, previenen una desviación del pH.

Indicadores de pH: Indicadores ácido- base se añaden a menudo a los medios de

cultivo con objeto de detectar variaciones del pH.

Agentes reductores: Cisteína, tioglicolato y otros son agentes reductores que se

añaden a los medios de cultivo para crear condiciones que permitan el desarrollo de los
gérmenes microaerófilos o anaerobios.
 Agentes selectivos: La adición de determinadas sustancias al medio de cultivo puede
convertirlo en selectivo (ver más adelante, clasificación de los medios de cultivo). Por
ejemplo, cristal violeta, sales biliares, ácida sódica, telurito potásico, antibióticos, etc., a
la concentración adecuada, actúan como agentes selectivos frente a determinados
microorganismos. (Rodríguez C., Gamboa C. & Hernández Ch., 2005)

MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS EN LABORATORIO:

AGAR NUTRITIVO:

Es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es
muy útil porque permanece solido incluso a relativas altas temperaturas. Además, el
crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen
mejor las colonias pequeñas. En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el líquido, y
aparece como una sustancia espesa, con colonias difícilmente observables. (Uberoa F,
1981)

Fig. 3 Agar nutritivo

CALDO BRILA:

Medio selectivo recomendado para la prueba confirmatoria en la detección del grupo

coliforme en aguas, leche, derivados lácteos y otros productos de importancia sanitaria,
mediante la determinación del NMP. López T. & Torres C. (2006)

Fig. 4 Caldo brila

AGAR NUTRITIVO:

El medio contiene extracto de carne, peptona y agar, siendo una formulación suficiente
para el desarrollo de los microorganismos. El extracto de carne proporciona al medio
fuente de carbohidratos, de nitrógeno y vitaminas. El empleo de este medio es de acuerdo
al tipo de estudio por realizar. (García M., Fernández T. & Paredes S., 2005)

Fig. 5 Agar nutritivo

BIBLIOGRAFIA:

- Delgado A., Polanco A. & Prieto S. (2001) Manual de laboratorio clínico básico
“Microbiología”. España: Mc Graw
- García M., Fernández T. & Paredes S. (2005) Microbiología clínica práctica. España:
Repeto
- López T. & Torres C. (2006) Microbiología General. Argentina
- Ramón P. & Juárez A. (2002) Bioquímica de los microorganismos. España: Editorial
Reverté
- Rodríguez C., Gamboa C. & Hernández Ch. (2005) Bacteriología General: Principios
y prácticas de laboratorio. Costa Rica
- Uberoa F. (1981) Medios de cultivo para microbiología. Barcelona: ADSA – MICRO
- Pinto, G., & Martín, M. (2012). Enseñanza y Divulgación de la Química y la Física.
Madrid: Garceta.