UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMERICA)

FACULTAD DE MEDICINA

Escuela Académico Profesional de Tecnología Médica

Área: Laboratorio clínico y Anatomía Patológica

PRACTICA 4: DETERMINACION DE GRUPOS

SANGUINEOS ABO Y FACTOR Rh
PRUEBA GLOBULAR, INVERSA Y DETERMINACION
DE SUBGRUPOS

ALUMNAS:
QUISPE GOITIA ROSA ZANINOHGA
MONGE PERALTA JACKELYN ROSA

Lima- Perú

2018
1. OBJETIVOS
-Determinar el grupo sanguíneo ABO por la prueba directa y su confirmación mediante
la prueba inversa.
-Determinar el factor Rh D débil
-Usar las lectinas para la determinación del subgrupo A1 y sustancia precursora
(antígeno H)

2. MARCO TEORICO
Para confirmar el grupo sanguíneo ABO se requieren de la presencia de el o los
antígenos A y B en la membrana del glóbulo rojo, así como deben estar presente en el
suero o plasma las isoaglutininas anti-A y anti-B correspondientes (agrupamiento
directo y prueba inversa respectivamente). La realización de estas pruebas directas
para evidenciar antígeno como las inversas para evidenciar el anticuerpo es necesaria
en todos los pacientes y hemodonantes, ya que unas controlan el resultado obtenido
por las otras. Ambas pruebas confirman o generan discrepancias en la confirmación
del grupo sanguíneo. No se requiere de la prueba inversa en dos circunstancias:
Para confirmación del tipo ABO de las unidades donadas ya rotuladas, al analizar la
sangre de niños menores de 4 meses solo se tipifican los glóbulos rojos.

3. PROCEDIMIENTO
DETERMINACION EN PLACA
-Tomar muestra sanguínea
-Dispensar tres gotas de la muestra de trabajo sobre un placa de vidrio
-Aplicar una gota de cada reactivo (anti A, anti B y anti D) sobre cada gota de sangre,
mezclar con la ayuda de una bagueta.
-Aplicar movimiento de vaivén
-interpretar

DETERMINACION EN TUBO
-Centrifugar la muestra problema
-Separar el plasma y colocarlo en otro tubo
-A partir de la muestra problema se obtendrá suspensiones de trabajo uniforme al 5%
(50uL sangre + 950uL solución salina)
-Rotular tres tubos A, B y D
-Agregar a cada tubo una gota del reactivo.
-Agregar una gota de muestra suspensión de hematíes al 5% a cada tubo
-Centrifugar a 3500rpm por 20 segundos
-Retirar los tubos y leer

PRUEBA INVERSA
-Marcar dos tubos como A y B
-Colocar en cada tubo dos gotas del plasma
-Agregar a cada tubo una gota de glóbulos A y glóbulos B
-Centrifugar a 3500rpm
-Lectura
 COMPROBACION DEL Rh (VARIANTE Du)
-tubo con hematíes+reactivo anti-D (resultado negativo) se deberá adicionar un tubo
control (hematíes 5%+suero del paciente) autocontrol
-Incubar ambos tubos en baño maría a 37°C de 15 a 30 minutos
-Lavar ambos tubos con solución salina cuatro veces
-Agregar a cada tubo 2 gotas de antiglobulina huma, resuspender
-Centrifugar a 3500rpm
-Lectura

LECTINA Anti A1
-Agregar una gota de células al 5% de glóbulos A
-Adicionar una gota de lectina Dolichus biflorus a cada tubo
-Centrifugar a 3500rpm por 20segundos
-Lectura

VERIFICACION DE SUSTANCIA H
-Rotular dos tubos como A y O
-Agregar a cada uno 1 gota de células al 5%
-Adicionar una gota de Lectina Ulex europaeus a cada tubo
-Centrifugar a 3500rpm por 15 segundos
-Lectura

4. RESULTADO

DETERMINACION EN PLACA, DETERMINACION EN TUBO, PRUEBA INVERSA

Muestra Placa Prueba Prueba Prueba Prueba Prueba

globular globular globular inversa inversa
Anti-A Anti-B Anti-D Cel A Cel B
18324323 B+ 0 4+ 3+ 3+ 0
18324257 O+ 0 0 4+ 0 0
18324300 A+ 4+ 0 4+ 0 3+
18220478 AB+ 4+ 4+ 3+ 0 0

LECTINA ANTI A1

MUESTRA Grupo Lectina

Dolichos
biflorus
18324300 A+ 3+

VERIFICACION DE SUSTANCIA H

Muestra grupo Lectina ulex europaeus

18324323 B+ 1+
18324257 O+ 4+
18324300 A+ 1+
 5. CONCLUSIONES

Mediante la determinación de la muestra 18324323 en placa nos dimos cuenta que era un B+,
y asi lo comprobamos en la prueba globular e inversa que salió el mismo resultado. Asi
también la muestra 18324257 nos salio O+ en placa, en la prueba globular e inversa y esto se
confirmó con la lectina ulex europeus que nos dio 4+ lo cual indica que ha utilizado toda la
sustancia H por eso es del grupo O. En la muestra 18324300 nos salio A+ y para saber el
subtipo de A, lo enfrentamos con la lectina dolichus biblorus y esto nos confirmó que era un
A1 pues nos dio 4+. En cuanto a la muestra 18220478 nos dio AB + en placa, en la prueba
globular e inversa. Estos resultados demuestran que las pruebas globulares e inversas son muy
importantes para poder determinar el grupo sanguíneo si es que existe alguna duda también, y
para ayudarnos a determinar específicamente el subtipo de los grupos sanguíneos el papel de
las lectinas tiene un rol fundamental.

CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es el fin d la determinación inversa del grupo sanguíneo?

Confirmar y comparar con lo que me salió con el globular para poder determinar y
establecer el grupo sanguíneo del paciente

2. Establezca ventajas y desventajas de la determinación de grupos sanguíneos en placa

y en tubo.
 En placa En tubo
Ventajas -Es mas rápido - Es más específico porque
se ven claramente las
reacciones.
Desventajas Es inespecífico El tubo puede estar mal
lavado y dar falsos
resultados.

3. ¿Cuál es la importancia de llegar hasta la fase de antiglobulina humana en la

determinación del factor Rh?
Es importante para saber si es compatible en las transfusiones de sangre,
trasplantes y embarazos, de tal manera que no haya problemas en el organismo de
una persona

4. ¿Cuál es la importancia de usar el autocontrol?

Es muy importante porque nos indica si el paciente tiene autianticuerpos lo cual
indicaría que estaría cursando una enfermedad autoinmune.

5. ¿Cuál es el origen de los anticuerpos usados en cada uno de los reactivos usados en la
práctica?
El origen de los anticuerpos usados en los reactivos de la práctica son de tipo Ig G.
6. Explique y/o esquematice la interacción de las lectinas y sus sitios blancos.