BIOSEGURIDAD, ESTERILIZACION Y

MEDIOS DE CULTIVOS
Fonseca Ducon Edwin, Alfonso Chávez Heidy 2 Gomes SilvaViviana3, Alejandra4

Fundación Universitaria de San Gil - UNISANGIL

Facultad de Ciencias Naturales e Ingeniería
Programa de Ingeniería Ambiental
Microbiología – Grupo A Día
Yopal, Colombia

edwinfonseca@unisangil.edu
heidyalfonso@unisangil.edu.co
yurivivi0107@hotmail.com
@unisangil.edu.co

Resumen — En la primera práctica realizada , se basó en
recocer las medidas de bioseguridad que siempre deben ser
tomadas para permitir el uso adecuado del lugar, permitiendo
la seguridad ante los riesgos o peligros latentes cuando se entra
al contacto con los utensilios, se desinfecto el lugar donde se
trabajó, para que así el cultivo mantuviera totalmente
desinfectado y eliminar a todos aquellos microorganismos
que pudieran ser competencia y afectaran el crecimiento de
nuestro microorganismo.
Se pueden cultivar millones de microorganismos en un
solomililitro de medio para su estudio como se realizó en la
práctica con el cultivo (plate count) agar donde se Pudo
observar el crecimiento de microorganismos y bacterias para el
caso de la muestra contaminada. En una segunda muestra, y
con las condiciones necesarias de esterilización a fin de
eliminar toda
forma de vida o tipo de organismos que puedan crear una
deficiencia en la misma se pudo obtener un cultivo estéril.
Palabras clave— Agar (plate count), bacterias, Esterilización,
medio, microorganismos, y organismos.
las actividades de atención a pacientes o durante el trabajo con
sus fluídos o tejidos corporales. (Bolano, 2011)
ESTERILIZACIÓN lo podemos definir como un método de
eliminación total de todo tipo de organismos que asegura la
USENCIA ABSOLUTA de cualquier forma de vida. Una
esterilización deficiente o manipulación incorrecta de
materiales y medios de cultivo, conlleva a contaminaciones,
resultados erróneos o pérdida del material biológico.
Los microorganismos requieren ciertos nutrientes básicos y
factores físicos para el mantenimiento de su vida, estas
necesidades varían según el tipo de microorganismos y es
necesario conocerlas para poder cultivarlos en el laboratorio.
(Rojas, 2011) el objetivo es recuperar y hacer crecer
adecuadamente el microorganismo en el laboratorio. De
manera general, estos medios pueden ser medios artificiales o
medios químicamente definidos. Esta práctica nos ayuda a
conocer los aspectos básicos de bioseguridad y reconocer las
metodologías existentes para la esterilización, así como aplicar
algunos métodos para esteriliza medios de cultivo y materiales
de laboratorio.

I. MARCO TEÓRICO
Bioseguridad, se define como el conjunto de medidas
preventivas, destinadas a mantener el control de factores de
riesgo laborales procedentes de agentes biológicos, físicos o
químicos, logrando la prevención de impactos nocivos.
PRECAUCIONES UNIVERSALES Se entienden como
Precauciones Universales al conjunto de técnicas y
procedimientos destinados a proteger al personal que conforma
el equipo de salud de la posible infección con ciertos agentes,
principalmente Virus de la Inmunodeficiencia Humana, Virus
de la Hepatitis B, Virus de la Hepatitis C, entre otros, durante
III.MONTAJE EXPERIMENTAL
A, PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACIÓN DE LOS
MEDIOS DE CULTIVO
 Se realizaron los cálculos respectivos para 100ml de medio
de cultivo plate count agar.
 Luego se desinfecto el área de trabajo con alcohol y una
toalla desechable.
 Seguidamente se pesó la cantidad de medio de cultivo
calculada (1.35 g) y se midió el volumen del agua destilada
con la probeta
.  Aparte se mezcló el medio de cultivo con la mitad del agua,
agitando hasta diluirse para agregar el agua restante hasta
obtener una solución homogénea, siendo necesario utilizar el
agitador magnético para una mayor homogenización; se cubrió Figura 2. Vertido y solidificación de medios en cajas de Petri.
el Erlenmeyer con papel craff llevándolo a la plancha de
calentamiento hasta llegar a su punto de ebullición para activar IV.RESULTADOS Y ANALISIS
el agar.
A. MEDIO DE CULTIVO CONTAMINADO
 Se llevó a la autoclave para esterilizar cualquier tipo de
contaminación adquirida durante el proceso, dejándolo
alcanzar una presión de 15lb o 120°C durante 10 minutos ya
que la autoclave se encontraba encendido previamente.

 Finalmente se apagó la autoclave esperando bajar la presión

a cero.

Figura 3. Medio de cultivo contaminado

En las siguientes tablas se muestran los resultados

obtenidos al culminar la preparación de los medios de cultivo
plate count agar.
Tabla 1. OBSERVACIONES MEDIO DE CULTIVO CONTAMINADO

Figura 1. Preparación de los medios de cultivo.

B. VERTIDO DE LOS MEDIOS EN CAJAS DE PETRI Y

SOLIDIFICACIÓN

 Se dejó hasta que alcanzara una temperatura adecuada,

teniendo en cuenta que si la temperatura era muy elevada
podía evaporarse y producir gotas que dañaran el resultado; si
por el contrario su temperatura era muy baja podía
rápidamente solidificarse en el Erlenmeyer. B.MEDIO DE CULTIVO NO
CONTAMINADO
 Luego se esterilizo el área de trabajo con alcohol para
eliminar cualquier microrganismo presente en el
ambiente, se encendió el mechero con el fin de esterilizar la
boca del Erlenmeyer, cerca del mismo se colocó la caja de
Petri abriéndola lentamente para ir agregando
aproximadamente la mitad del cultivo en cada caja de Petri.

 Tomando una de las cajas de Petri se expuso al ambiente con

el propósito de contaminarla.

 Finalmente se rotulo cada caja como: contaminada y no

contaminada, dejándolas solidificar, colocándolas con la tapa
Figura 4. Medio de cultivo no contaminado
hacia abajo y llevándolas a la incubadora a 37°C por 24 horas.
Tabla 2. OBSERVACIONES MEDIO DE CULTIVO NO CONTAMINADO

Según los resultados de la preparación de los medios

donde se obtuvieron dos cultivos, uno contaminado y otro
no contaminado se pudo llegar a la conclusión que:
 farmacológica para la elaboración de un sin número de
productos, o en la industria alimenticia. En fin los medios
de cultivo dan la posibilidad de desarrollar diversas
actividades que aportan al desarrollo del campo de la
microbiología.

V.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

Bolano, A. (2 de 06 de 2011). Bioseguridad en el laboratorio.

Obtenido de SlideShare: https://es.slideshare.net/doctor-
Teniendo un manejo adecuado y cumpliendo algunas Alfredo-Bolano/bioseguridad-en-el-laboratori.
condiciones óptimas para el desarrollo del medio como: el
control de la temperatura, el grado de humedad, la Ministerio de Ambiente, V. y. (1995). Decreto 948 de junio 5
consistencia adecuada del medio, la esterilización de los de 1995. . Bogota: MAVDT.
instrumentos utilizados y del área de trabajo, entre otras
condiciones se puede llegar a tener un medio de cultivo
libre de algún agente de tipo contaminante como el obtenido Manual de Bioseguridad en el laboratorio, tercera edición.
en unas de las muestras, donde se pudo evidenciar que no OMS, Ginebra 2005.
hubo afectación por crecimiento o invasión de otro tipo de
microorganismos tales como bacterias que son de tipo más
común.
Si por el contrario no se toman en cuenta las medidas
necearías se puede correr el riesgo de contaminación en el
medio, por lo general esto se debe a diversos factores como:
la contaminación humana como fuente primaria, los equipos
y el instrumental en general mal esterilizados, las
condiciones o exposición al ambiente de los medios o un
manejo inadecuado al momento de almacenar las muestras
ya que estas deben quedar dispuestas boca abajo a fin de
evitar evaporación o exceso de humedad durante la
incubación y se pueda ver afectada la placa o muestra.
Para el caso de la placa contaminada obtenida, las
razones que dieron origen a su estado estuvieron sujetas a la
exposición voluntaria al ambiente, de ahí el resultado
evidenciando en la aparición de colonias bacterianas por
contaminación biológica, esto debido a que los medios de
cultivo proporcionan un medio ideal para el crecimiento de
contaminantes microbianos.

V.CONCLUSIÓN

A manera de conclusión podemos decir que:

Los medios de cultivo son un gran método por el cual se
pueden estudiar diversas características atribuidas a los
microorganismos ya que nos permite conocer información
valiosa respecto a su composición bilógica,
comportamiento, desarrollo y otras condiciones.
Además se comprobó que con el manejo adecuado de los
instrumentos, equipos y área de trabajo se pueden obtener
resultados satisfactorios como en el caso de la muestra que
se obtuvo libre de contaminación u otros microorganismos.
Por otra parte cabe resaltar las destrezas y conocimientos
adquiridos respecto al tema como por ejemplo: la
utilización de medios de cultivo en la industria