UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

EVALUACIÓN DE FÁRMACOS Y MEDICAMENTOS I

Integrantes.

❏ Domínguez Cervantes Cinthia Nayeli

❏ Enciso Vázquez Paulina Victoria
❏ Martínez Dorantes Elizabeth
❏ Vázquez Lome Gabriela
❏ Villafuerte Jerónimo Aldo David

Asesor. ​Dr. Osvaldo Garrido Acosta

Grupo: ​1601 ​Equipo:​ 3

Ciclo Escolar.​ 2020-1

Fecha de entrega. ​28/ Ago/ 2019

Práctica 2. Manejo de la rata y ratón en el laboratorio

de Farmacología
Objetivo
● Conocer y aplicar las normas éticas para el manejo adecuado de animales de
laboratorio; así como los métodos de sujeción, inmovilización, transporte y
administración de fármacos y medicamentos en la rata y ratón.
Introducción
El manejo de animales de experimentación y las vías de administración es el punto
central de la presente práctica, la norma que rige el mantenimiento y condiciones en
los que se debe tener a los animales de experimentación (Rata, ratón y conejo) es la
Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999. La cual nos muestra el trato correcto
que se debe dar a los animales para que estos no sufran cuando son utilizados en
investigaciones, experimentos etc, las diferentes técnicas de eutanasia , y la forma
correcta de aplicarlas siendo la técnica de dislocación cervical la utilizada en ésta
práctica, por ser más eficaz y rápida que una cámara de gas.
Existen diversas vías de administración de las cuales se distinguen vías rápidas y
vías más lentas , entre las vías de administración más rápidas están : sublingual,
intravenosa e intramuscular, cada una de las vías tiene ciertas ventajas y
desventajas decidiendo la mejor tomando en cuenta la efectividad y rapidez con la
que se absorben y el medicamento que será administrado. La utilizada en la práctica
de mayor absorción son la intramuscular y la intraperitoneal, mientras que la de baja
absorción es la subcutánea.

Marco teórico
Técnicas de sujeción y de procedimientos
Ratón: Para su manejo hay que considerar que es un animal muy sensitivo, nervioso
y rápido. Para sacarlo de su jaula hay que introducir la mano y tomarlo de la cola.
posteriormente para sujetarlo, se coloca al animal en una superficie rugosa para
permitir que se estire con sus patas superiores , se levanta de la cola y se toma con
la mayor cantidad de piel de la nuca con los dedos índice y pulgar, sosteniendo la
cola con el dedo meñique, apoyado en la palma de la mano, sujeto de esta forma se
le puede aplicar cualquier tipo de administración.
Rata: Es un animal dócil y menos nervioso el macho que la hembra, para extraerlo
de la jaula, se debe abrir previamente la rejilla, dejar que los animales tomen
confianza y posteriormente se realiza una sujeción de todo el cuerpo con los cinco
dedos, de forma gentil. Una de las técnicas más recomendadas para la sujeción
consiste en apoyar la nuca del animal en el borde interno del dedo índice, si se
sujeta con la mano derecha, el dedo pulgar pondrá el miembro anterior izquierdo del
animal frente a su hocico, el miembro anterior izquierdo quedará sujeto entre el
dedo índice y medio de manera que la cabeza quede inmóvil. (Muñoz S. et al.,
2010)
Se deberá contar con la preparación adecuada y conocimientos actualizados para
aplicar el principio de las 3R en el manejo de animales en el laboratorio:
Reemplazar; ​utilización de alternativas que produzcan los mismos resultados, tales
como experimentos in vivo, cultivos celulares, modelos inanimados, modelos por
computadora), ​Reducir; ​utilizar un número mínimo de animales, ​Refinar: ​utilizar
técnicas adecuadas para evitar al máximo el sufrimiento de los animales.
(NOM-062-ZOO-199)

Existen diferentes vías de administración de los medicamentos que, dependiendo de

su forma farmacéutica y características del fármaco será la vía de administración
más conveniente; siendo las vías de administración más utilizadas:
a) Enteral. Es aquella que comprende la administración de fármacos en los
cuales hacen uso de la vía digestiva. Ej. oral
b) Parenteral. Es aquella en la que no se requiere de la vía digestiva y atraviesa
la barrera cutánea mediante inyección y con asepsia para evitar alguna
infección. Dependiendo de la profundidad y el lugar de la inyección se
tendrán: Subcutánea, intradérmica, intramuscular, intravenosa e
intraperitoneal.(Buenaventura, 2008)
Las vías parenterales utilizadas:

Vía de administración Ventaja Desventaja

Intramuscular Absorción rápida Técnica en extrema

(Goodman & Gilman,2012) aséptica
Control de dosis con calor y
frío con vehículos Hematomas, hipotensión,
adecuados neuralgia, infecciones
directas y graves en SNC
Puede influir en la rapidez
de la absorción
 Líquidos oleosos Limitada para el uso en
pacientes con baja masa
muscular o pérdida de masa
muscular

Subcutánea Para fármacos oleosos Aparición lenta del efecto

(Goodman & Gilman,2012)
Absorción gradual Volúmenes pequeños

Acción lenta

Intraperitoneal *Administrar volúmenes ● Las sustancias

relativamente grandes de irritantes pueden
sustancias solubles. resultar fatales.
* Rápida absorción ● Producen dolor,
(Baamonde,2013) fibrosis y
adherencias.
● No se puede
asegurar que la
dosis se esté
administrando en la
cavidad en lugar del
intestino, vejiga,
músculo u otro
órgano.
(Baamonde,2013)

Intradérmica ● Permite la Absorción prácticamente

Administración en el visualización de las nula
interior de la dermis reacciones a la
inyección debido a la
poca
queratinización, falta
de vello y
pigmentación ligera.
● Usada para pruebas
cutaneas de alergias
y con fines de
diagnóstico.
Metodología:
Manipulación y administración en rata
Se inició transfiriendo a la rata tomándola de la base o el primer tercio de la cola
para evitar que girara o se desprendiera la piel de la cola. Una vez familiarizado el
experimentador, se procedió a sujetarla para realizar las administración se colocó el
dedo índice y medio para sujetar la cabeza de la rata y el dedo el índice y el pulgar
para sujetar el brazo derecho, mientras que el brazo izquierdo se inmovilizó con el
dedo medio y el anular de una manera gentil hacia el espécimen para evitar ejercer
presión sobre la cavidad torácica de la rata y no se impidiera su respiración. Al
mismo tiempo, se ajustó y se preparó el volumen de colorante azul de metileno a
administrar midiendo así 6 UI en una jeringa de 10 mL. Con la rata ya sujeta, se
procedió a colocar a la rata de cabeza para evitar así el daño a algún órgano interno
producido por la aguja. Se dividió de manera imaginara la región ventral en cuatro
cuadrantes y se administraron por vía intraperitoneal las unidades mencionadas de
azul de metileno en el cuadrante inferior izquierdo, introduciendo la aguja en un
ángulo de 45°. Se jaló el émbolo para comprobar que ésta se encontrara en el
espacio peritoneal observando aire en la jeringa para después verter la solución
colorante. Posteriormente, manteniendo sujeto al animal, se realizó la
administración de 6 UI del mismo azul de metileno por vía intramuscular en el muslo
de la rata. Finalmente se dejaron pasar 10 minutos colocando a la rata en su
confinamiento para continuar con eutanasia por dislocación cervical. Se observaron
los resultados de las administraciones realizadas diseccionando la cavidad
abdominal y corroborar que el azul de metileno se encontrara en el peritoneo y en la
vía intramuscular.
Manipulación y administración intraperitoneal en ratón
Primeramente se tomó al ratón del primer tercio de la cola para evitar que girara o
se desprenda la piel de la cola y se colocó el ratón en una superficie rugosa para
someterlo a tracción. Se sujetó la cola del ratón entre el dedo anular y el meñique y
se jaló cuidadosamente hacia a atrás al ratón y así sujetar la piel del cuello con el
dedo pulgar e índice para lograr inmovilizarlo. Igualmente, se dividió de manera
imaginara la región ventral en cuatro cuadrantes y se administraron 6 UI de azul de
metileno con ayuda de una jeringa de 1 mL en el cuadrante inferior izquierdo
introduciendo la aguja, de menor longitud que la de la rata, en un ángulo de 45°. Se
jaló el émbolo para asegurarse que estuviera en el espacio peritoneal al observar
aire en la jeringa y se procedió a administrar el colorante.

Manipulación y administración subcutánea en ratón

Se tomó al ratón del primer tercio de la cola para evitar que girara o se desprenda la
piel de la cola y se colocó en una superficie rugosa nuevamente para someterlo a
tracción. Se sujetó la cola del ratón entre el dedo anular y el meñique y se jaló
cuidadosamente hacia a atrás para así sujetar la piel del cuello con el dedo pulgar e
índice para lograr inmovilizarlo dejando libre la piel de la espalda. En seguida se
tomó la piel floja de la espalda y se introdujo la aguja, antes jalando el émbolo, al no
visualizar sangre se continuó a administrar las 6 UI del colorante. Se dejaron pasar
10 minutos colocando ratón en su confinamiento para continuar con eutanasia por
dislocación cervical. Se observaron los resultados de las administraciones
realizadas diseccionando la cavidad abdominal y corroborar que el azul de metileno
se encontrara en el peritoneo y en la vía subcutánea.
Resultados

Imagen 1. Vía de administración Imagen 2. Vía de administración

intraperitoneal en rata hembra Wistar intramuscular en rata hembra Wistar
Imagen 3. Vía de administración Imagen 4. Vía de administración
subcutánea en ratón. intraperitoneal en ratón.

Análisis de resultados
Durante las técnicas de manipulación de animales se presentaron algunas
dificultades, pues se trabajó con ratas wistar de apenas tres meses de vida, que no
tuvieron previa manipulación por el humano, por lo que se mantuvieron estresadas y
con miedo hacia los alumnos.
Algunas de las vías de administración empleadas en los animales fueron diferentes
pero todas de forma parenteral, es decir no se utilizó el tracto digestivo para su
absorción. Para la rata Wistar se realizaron dos inyecciones de 6 UI, una vía
intramuscular y la otra vía intraperitoneal, mientras que a los ratones no se les
realizó la intramuscular para prevenir el roce de la aguja con el nervio isquiático pero
se le aplicaron las inyecciones vía subcutánea e intraperitoneal.

En la imagen uno se muestra la disección de la rata hembra Wistar en el abdomen,

donde el azul de metileno debió teñir la zona peritoneal de un azul intenso, lo cual
no se observa en la imagen, debido a que el colorante permaneció entre la capa de
la piel y la capa muscular. Aunque se colocó la inyección en el cuadrante inferior
izquierdo de la rata, debido a que no hay una alta presencia de órganos en ese
cuadrante (Machholz,2012), se debió de introducir la aguja un poco más, verificando
de que el émbolo sólo succiona aire, para que de esa manera el azul de metileno se
introdujera en la zona peritoneal.
Aun así la vía de administración peritoneal presenta algunos problemas potenciales,
como lo es que algunos disolventes acuosos o sustancias irritantes producen
inflamación e irritación, además de que la vía produce dolor en el animal, que se
demostró durante la experimentación, pues al iniciar la administración del azul de
metileno la rata se quejo, moviéndose de la posición en la que se tenía sujeta.
Además no se puede asegurar que la dosis se está administrando en la cavidad en
lugar del intestino, vejiga, músculo u otro órgano, y también pueden dañarse vasos
sanguíneos. (Baamonde,2013)
En la imagen 2 se observa la misma rata Wistar, pero ahora con la vía
intramuscular, donde se observa que el músculo se tiñó efectivamente de color azul
intenso, lo que indica que se realizó una inyección exitosa. En esta vía se tuvieron
cuidados como inyectar por la parte frontal de la pata de la rata, ya que si se
hubiese realizado en la parte posterior se habría corrido el riesgo de lastimar el
nervio ciático.(Machholz,2012) Aunque algunos de los problemas potenciales luego
de la administración es una cojera temporal, o dolor, no se observó ninguno de
estos en la rata. (Baamonde,2013)
En el caso del ratón, se observa en la imagen 3 que la zona peritoneal presenta
una coloración azul intenso, lo cual indica que la administración se realizó forma
adecuada. Aunque es una vía de administración de rápida absorción, no es
recomendable para animales pequeños porque puede provocar la distensión del
abdomen , que se traduce en una peritonitis (Baamonde,2013), lo cual fue
confirmado en el experimento ya que luego de la administración el ratón se movía
de una forma extraña, separando las patas trasera y pegando su cuerpo sobre la
caja de contención.
En la imagen 4, se observa la disección del cuello y lomo del ratón, donde se le
aplicó la inyección vía subcutánea. Se sujetó al ratón de una manera en la que su
cola estuviese sujeta entre el meñique y el anular y la piel del cuello entre el pulgar y
el índice. Para así facilitar la administración subcutánea. Sin embargo, al ir
administrando el azul de metileno debido a que se hizo de forma lenta el ratón se
movió ocasionando que no se administra en la zona correcta. Una forma de
cerciorarse de que la administración fue en la zona subcutánea, es insertar la aguja
y cargar suavemente la piel hacia arriba con la aguja para confirmar que la aguja
esté en el espacio subcutáneo. Cuando una inyección subcutánea es exitosa, se
debe de observar una hinchazón debajo de la piel.(Machholz,2012)
Luego de la administración no todo el azul de metileno logró ingresar, pues parte de
la sustancia salió del sitio de aplicación, para lo que se debió de aplicar una presión
suave y de esa manera evitar el reflujo del material. (Machholz,2012)
Algunas desventajas sobre esta administración es que el medicamento puede ser
retenido en la circulación pulmonar, y es de absorción lenta (Mendoza N, 2008).
Aunque es de absorción rápida para soluciones acuosas.(Mendoza N, 2008).
Antes de la disección se sacrificaron a los animales de experimentación, se les
aplicó la forma de eutanasia por dislocación cervical, que es aceptable en animales
por debajo de los 150 g. Además de ser una muerte muy rápida y eficaz, sin
embargo para llevarla a cabo se requiere de práctica. Ésta técnica fue preferible en
lugar de la cámara de CO​2 por
​ ser más rápida. (Close B,1986)

Conclusión
Con los resultados obtenidos en la práctica y el objetivo planteado al inicio de ella se
concluye que se cumplio el objetivo parcialmente debido a que en la administración
del azul de metileno a la rata vía intraperitoneal no se logró ya que solamente se
administró el colorante en la parte subcutánea. Por otro lado, en el caso del ratón,
la administración vía subcutánea no fue llevada a cabo satisfactoriamente debido a
la falta de experiencia en el manejo del espécimen.
Referencias
❖ Muñoz J.J. Saldivar S, Maldonado C., Muñoz C.Y., Moreno M.A. (2010). La
habilidad para sujetar y manejar animales de laboratorio no se adquiere
fácilmente. REDUET vol. 12, N° 5
❖ Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999. Especificaciones técnicas
para la producción, cuidado y uso de los animales en el laboratorio. Diario
Oficial de la Federación Estados Unidos Mexicanos.
❖ Aceves G. Balderas, J García A. López A., López E., Valencia E; Manual de
laboratorio de Evaluación de Fármacos y Medicamentos I. UNAM.
❖ Baamonde J. [página de internet] Chile: Baamonde J; 2013c [citado 27 de
agosto de 2019]. Disponible en: ​www.bioterios.com
❖ Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B.F., Pritchett-Corning, K.R.
Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and
Rats. ​J. Vis. Exp. 9/26/2012 ​(67), e2771: p 1-8.
❖ Mendoza N. Farmacología médica. México: Editorial Media Panamericana;
2008.
❖ Buenaventura L J. (2008). Cuidados auxiliares básicos de enfermería.
Editorial Vértice:España. pp. 241-270
❖ Goodman & Gilman.(2012) Las bases farmacológicas de la terapéutica.
México: McGraw Hill Education.