UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECADA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE QUÍMICA

INFORME DE PRÁCTICAS

DETERMINACIÓN DE NITROGENO TOTAL EN

BIOESTIMULANTES POR MICROKJELDAHL

Presentado por José Antonio Lázaro Herrera

2016
 ÍNDICE
Página

Resumen………………………………………………............ 3

Introducción………………………………………………….. 4

Fundamento teórico……………………………… …….. 6

Detalles experimentales……………………………………. 6

Resultados (tabulación de datos)…………………….………… 14

Discusión de resultados……………………………………………...... 18

Conclusiones…………………………………….…….. ………19

Recomendaciones……………………………………………...... 18

Bibliografía

Anexos
 RESUMEN
Se determinó Nitrógeno total por MicroKjeldahl en un bioestimulante orgánico, desde el día
cero, quince y treinta días de fermentación. Los resultados evidencian un aumento gradual
en Nitrógeno total (fase acuosa) durante todo el proceso fermentativo, debido a que la
muestra está elaborada a partir de sustratos proteicos (de origen animal) las cuales son
hidrolizadas enzimáticamente durante todo el proceso de fermentación, de esta manera, en la
fase acuosa de la muestra, se generan hidrolizados proteicos tales como polipéptidos,
péptidos y aminoácidos de interés. (Resultados informe 20 y 25)

son generados por hidrólisis y simultáneamente consumidos por descarboxilasas

microbianas para la formación de aminas biógenas (especies nitrogenadas volátiles); de ahí
se tiene un porcentaje de aminoácidos relativamente constante durante todo el proceso. En
ese sentido, se deduce que es difícil producir más del 0.30 % de aminoácidos ya que estas
son transformadas en compuestos volátiles.
INTRODUCCION
Gran parte de los productos químicos destinados a la agricultura están generando graves
problemas a los suelos y a la salud humana. Frente a esta problemática, y a los estudios
Biotecnológicos se crearon productos sustitutos amigables con la naturaleza, entre ellas los
bioestimulantes orgánicos, productos que contienen metabolitos con propiedades
potenciadoras en el desarrollo óptimo de las plantas; actualmente está siendo utilizado por
un pequeño grupo de agricultores, y se espera sustituir y erradicar completamente a los
productos químicos que han dañado al ambiente.

Las plantas, al igual que los seres vivos, se encuentran expuestas ante situaciones de estrés
debido a factores tales como clima, radiación, agentes microbianos, etcétera; ellas utilizan
gran parte de su energía para contrarrestarlas, y en consecuencia se obtienen productos
vegetales defectuosos que finalmente generan grandes pérdidas en la agricultura.

Los bioestimulantes entre sus principales nutrientes contienen minerales, carbohidratos y

aminoácidos, estas son absorbidas, vía foliar, por las plantas para realizar su metabolismo
con el mínimo gasto energético, de esta manera se reduce el estrés y se potencia el desarrollo
vegetal.

Los aminoácidos, péptidos y proteínas son componentes principales de los bioestimulantes,

obtenidos por hidrólisis enzimática microbiana a partir de sustratos proteicos de origen
animal; de ahí la necesidad de realizar los análisis químicos para determinarlas; por ello el
objetivo del presente informe de prácticas está orientada a la determinación de Nitrógeno
total presentes en bioestimulantes por MicroKjeldahl
FUNDAMENTO TEÓRICO
La muestra orgánica (rica en compuestos nitrogenados) por reacción con ácido sulfúrico
concentrado es transformada en Sulfato de Amonio, este en reacción con un álcali desprende
amoniaco, la cual es recibida en solución de Ácido Bórico hasta la formación ion Borato que
finalmente en presencia de ácido clorhídrico vuelve a acido bórico. El gasto de volumen de
ácido clorhídrico titulante es proporcional a la cantidad de proteínas contenidas en la muestra
orgánica.

1.- DIGESTIÓN:

∆
𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑜𝑟𝑔á𝑛𝑖𝑐𝑎 + 𝐻2 𝑆𝑂4(𝑐𝑐) + 𝑐𝑎𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑜𝑟 → (𝑁𝐻4 )2 𝑆𝑂4 + 𝐻2 𝑂 + 𝑆𝑂2 + ⋯

2.- DESTILACIÓN:

(𝑁𝐻4 )2 𝑆𝑂4 + 2𝑁𝑎𝑂𝐻 → 2𝑁𝐻3(𝑔) + 𝑁𝑎2 𝑆𝑂4 + 2𝐻2 𝑂

3.-TITULACIÓN:
𝑁𝐻3(𝑔) + 𝐻3 𝐵𝑂3 + 𝑖𝑛𝑑. (𝑟𝑜𝑗𝑜) → 𝑁𝐻4 + + 𝐻2 𝐵𝑂3 − + 𝑖𝑛𝑑. (𝑣𝑒𝑟𝑑𝑒)

𝑁𝐻4 + + 𝐻2 𝐵𝑂3 − + 𝐻𝐶𝑙 + 𝑖𝑛𝑑. (𝑣𝑒𝑟𝑑𝑒) → 𝑁𝐻4 𝐶𝑙 + 𝐻3 𝐵𝑂3 + 𝑖𝑛𝑑. (𝑣𝑖𝑜𝑙𝑒𝑡𝑎)

DETALLES EXPERIMENTALES

Digestión:

En un balón con 1 gramo de catalizador, se pesa 2 g de Bioestimulante, inmediatamente (en

campana extractora) se adiciona por las paredes 3ml de ácido sulfúrico 18M, se lleva al
digestor hasta liberación completa de vapores y gases, obteniendo una muestra sea
translucida.

Destilación:

Luego la muestra se llevó al sistema de destilación (previamente acondicionada);

inicialmente se coloca el matraz Erlenmeyer (que contiene 25ml de ácido bórico e indicador
mixto) la cual recibirá el amoniaco desprendido (para evitar pérdida de amoniaco la
manguera deberá chocar con el matraz), luego se adiciona la muestra del balón kjeldahl,
se enjuaga y se incorpora lentamente 8ml de NaOH al 45% (p/p) (evitar que ocurra reacción
violenta, ya que puede perder gas amoniaco), inmediatamente se cierra la llave, se coloca el
balón a la cocinilla para iniciar la destilación y no olvidar dejar la corriente de agua para el
refrigerante (la cocinilla deberá de estar a nivel 6, ebullición). Más tarde la solución del
matraz cambiara de color (de rojo a verde) evidenciando la recuperación del gas amoniaco
como una sal de amonio; inmediatamente se retira el Erlenmeyer y el balón de la cocinilla
(se debe enjuagar la manguera para recuperar muestra lo más rápido posible) enseguida se
generará vacío que succionara la matriz de la muestra limpiando el sistema de destilación,
esta emitirá un primer sonido, indicando la extracción del agua en la cámara. Abrir las llaves
para descargar el líquido. Luego adicionar un vaso de agua en la cámara y dejar medio vaso
con agua en lugar del matraz con la llave cerrada para que el vacío extraiga el líquido y pueda
enjuagar nuevamente el sistema, que se evidenciara al emitir un segundo sonido, luego abrir
las llaves y desechar el líquido al balón de residuos. De esta manera el sistema estará listo
para destilar una segunda muestra.

Finalmente solución verdosa fue titulada con ácido (sulfúrico o clorhídrico) hasta que el
indicador vire de verde a un color humo traslucido medio violeta, indicando así el término
de la titulación.

RESULTADOS

Tabla N° Resultados HAPA-85

D. F. PROCESO REPROCESO
%Nitrógeno total 0.67 0.606
%Bases volátiles 0.44 0.402
%Aminoácidos 0 0.266 0.221
%Carbohidratos 0.057 0.899
%Sólidos totales 3.91 4.25
%Nitrógeno total 0.83 0.639
%Bases volátiles 0.60 0.521
%Aminoácidos 15 0.276 0.281
%Carbohidratos 0.604 0.670
%Sólidos totales 4.11 4.11
%Nitrógeno total 0.93 0.631
%Bases volátiles 0.68 0.493
%Aminoácidos 30 0.248 0.275
%Carbohidratos 0.047 0.082
%Sólidos totales 3.65 3.16

EJEMPLOS DE CÁLCULO

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
CONCLUSIONES

RECOMENDACIONES

BIBLIOGRAFIA
ANEXOS