UJI AKTIVITAS PENGHAMBATAN ENZIM α-GLUKOSIDASE

DARI HIDROLISAT KOLAGEN YANG DIPEROLEH DARI KULIT

IKAN LAMURU (Caranx ignobilis)

Test Of Activity For The Development Of α-Glucosidase

Enzymes From Collagen Hydrolyzat Of Lamuru’s Fish Skin
(Caranx ignobilis)
Halima Sya’roini, Syamsu Nur , Julianri Sari Lebang
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar
Jl. Perintis Kemerdekaan Km. 13,7 Daya Telp./Fax. 0411-583190 Makassar 90242
Email : Imah14.Shahraini@gmail.com

ABSTRAK
Kulit ikan lamuru merupakan salah satu limbah hasil perairan yang dapat digunakan
sebagai sumber alternatif kolagen. Penelitian ini bertujuan untuk menghidrolisis,
karakterisasi dan melihat aktivitas penghambatan enzim α-glukosidase dari kolagen kulit
ikan lamuru. Dilakukan hidrolisis kolagen menggunakan enzim kolagenase untuk
mendapatkan kolagen yang diperoleh dari kulit ikan lamuru, kemudian dilakukan
karakterisasi kolagen yang meliputi identifikasi kualitatif dan FTIR serta pengujian
penghamatan enzim α-glukosidase pada kolagen kulit ikan lamuru. Hasil penelitian
karakterisasi kolagen dengan identifikasi kualitatif menunjukkan hasil positif terdapat
asam amino utama penyusun kolagen berupa glysin, prolin dan hidroksiprolin.
Karakteristik fisik kolagen yang dihasilkan adalah analisis FTIR menunjukkan adanya
gugus amida A, amida B, amida 1, amida 2, dan amida 3, struktur triple helix pada amida
1 dan amida 3 mengindikasikan bahwa senyawa yang dihasilkan adalah kolagen. Pada
uji penghambatan enzim α-glukosidase dapat dilihat pada konsentrasi rendah (0,5 ppm)
dengan % inhibisi 47,06% yang bertindak sebagai inhibitor, sedangkan pada konsentrasi
tinggi (1 ppm) dengan % inhibisi 23,88%.
Kata Kunci : Ikan lamuru (Caranx ignobilis), Hidrolisis, Karakterisasi, Kolagen,
Enzim α-Glukosidase

ABSTRACT
Skin of lamuru fish is one of aquatic by-products which could be used as an alternative
source of collagen. This research is aimed to hydrolysis, characterize and determined
inhibitory activity of the enzyme α-glukosidase from the collagen skin of lamuru fish.
Hydrolisis of collagen was using collagenase enzyme, then the collagen characterization
was carried out which included the identification of qualitative and FTIR and testing of α-
glucosidase enzymes on the collagen of lamuru fish skin. The results showed that
characterization of collagen with qualitative identification showed a positive result with the
main amino acid constituent in the form of glysin, proline and hydroxyproline. Physical
characteristics of collagen resulted from FTIR analysis showed amide A, amide B, amide
I, amide II and amide III, triple helical structure of the amide I and amide III indicates that
the compound produced was collagen. In the inhibition test the α-glucosidase enzyme
can be seen at a low concentration (0.5 ppm) with a% inhibition of 47.06% which acts as
an inhibitor, whereas at high concentrations (1 ppm) with% inhibition 23.88%
Keywords: Lamuru Fish (Caranx ignobilis), Hydrolysis, Characterization, Collagen,
α-Glucosidase Enzymes

PENDAHULUAN kepentingan biomedis, farmasetika,

Kolagen merupakan salah satu industri makanan, industri obat, dan
jenis protein yang banyak terdapat industri kosmetik. kolagen adalah
pada tulang, gigi, dan kulit makhluk biomaterial alami yang memiliki
hidup. Biasanya digunakan untuk kandungan unik dan telah digunakan

Halima Sya’roni. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar 1

untuk perawatan kesehatan sejak
peradaban Mesir kuno (Ata TW
Stephanie dkk. 2016).
Sumber utama kolagen
komersial umumnya berasal dari
tulang sapi dan babi. Namun,
penggunaan tulang sapi mulai
menimbulkan kebimbangan di
kalangan produsen karena
merebaknya Bovine Spongiform
Encephalopathy (BSE),
Transmissible Spongiform
Encephalopathy (TSE) dan Foot and
Mouth Disease (FMD). Oleh karena
itu, diperlukan suatu bahan alternatif
yang dapat dijadikan sebagai
sumber kolagen, salah satunya yaitu
limbah organisme perairan. Limbah
dari organisme perairan seperti
tulang, kulit, dan sisik ikan diketahui
banyak mengandung kolagen,
Kolagen dari kulit ikan (food grade)
diketahui mampu diabsorpsi lebih
baik di dalam tubuh manusia dan
sering digunakan dalam bidang
bioteknologi. (Guillen et, al., 2002).
Salah satu ikan yang
berpotensi sebagai sumber kolagen
yaitu kulit ikan lamuru. Ikan lamuru
merupakan salah satu jenis ikan
tangkapan yang jumlahnya cukup
besar di perairan Indonesia.
Pemanfaatan kulit ikan sebagai
bahan baku kolagen merupakan
alternatif yang prospektif untuk
mengatasi masalah tersebut (Minah
dkk, 2016).
Beberapa penelitian
mengenai kolagen khususnya
hidrolisat kolagen dari sumber ikan
telah banyak dilakukan, namun
masih belum terdapat penelitian
kolagen dari limbah kulit ikan dalam
menguji keefektifan kolagen dalam
menghambat enzim α-glukosidase.
Beberapa penelitian juga telah
Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar
mengkaji bahwa hidrolisat protein
memberikan aktivitas sebagai
antidiabetes mellitus. Seperti egg
white protein memiliki aktivitas
sebagai antidiabetes dengan
menghambat enzim α-glukosidase
(Yu et al, 2011), whey protein
digunakan sebagai inhibitor DPP-IV
dan α-glukosidase (Konrad et al,
2014) dan hidrolisat kolagen dari
tulang atau kulit ikan dapat sebagai
antihiperglikemia dengan
menghambat enzim DPP-IV serta
merangsang sekresi GLP-1 yang
diberikan pada tikus jantan secara
oral dan intraperitoneal (Iba et al,
2016).
Berdasarkan latar belakang
yang telah dipaparkan di atas, maka
penulis tertarik untuk melakukan
penelitian dengan judul “Aktivitas
Antioksidan dan Inhibitor α-
glukosidase dari hidrolisat kolagen
yang diperoleh dari limbah tulang
ikan lamuru (Caranx Ignobilis)”.
METODE PENELITIAN
1. Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah
alat-alat gelas, blender, desikator,
freezer,freeze dryer, Hot plate,
Magnetic Stirrer, Mikro plate reader,
pH meter, Sentrifus,
Spektrofotometer UV-Vis,
Spektrofotometer FTIR, Timbangan
Analitik.
Bahan yang digunakan
adalah Kulit ikan lamuru, Air suling
(H2O), Asam asetat (CH3COOH),
Asam klorida (HCl), Asam
trikloroasetat (TCA), Asam sulfat
pekat (H2SO4), Buffer Fosfat pH 7,
Buffer Tris-HCl pH 7,5, Bovine
Serum Album (BSA), Enzim alfa
glukosidase, Enzim Kolagenase,
Folin Cioceltau, Kalium Natrium
2
 Tartrat, Kalsium Bromida (KBr),
Natrium klorida (NaCl), Natrium
Hidroksida (NaOH), Natrium
Karbonat (Na2CO3), Pereaksi
Ninhidrin, Substrat p-nitrophenyl α-
D-glukopyranoside, Tembaga (II)
Sulfat (CuSO4).
2. Isolasi kolagen
Proses ekstraksi kolagen tulang
ikan lamuru menggunakan metode
Mocan dkk, (2011), Ogawa dkk,
(2004) dengan cara ekstraksi
dengan asam. Semua prosedur
dilakukan pada suhu kamar. Ikan
lamuru dipisahkan daging dan tulang
dan kulitnya lalu dicuci dengan air
mengalir kemudian dipotong kecil-
kecil dan ditimbang. Sampel lalu
direndam dalam NaOH 0,1 M
sebanyak 300 ml selama 3x24 jam
dan tiap hari pelarut diganti dengan
yang baru. Kulit lalu dicuci dengan
air suling hingga pH netral (Ata,
2016). Sampel kemudian diekstraksi
dengan asam asetat 0,3 M 300 ml
selama 2 jam. Hasil ekstraksi
disaring untuk memisahkan residu
dan ekstrak (supernatan).
Supernatan dipresipitasi dengan
NaCl 0,9 M sehingga didapatkan
presipitat kolagen (proses salting-
out). Presipitat dibiarkan selama 24
jam. Presipitat selanjutnya
dikeringkan dengan alat Frezze
drying selama 24 jam sehingga
DH (%)= 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑘𝑎𝑛𝑑𝑢𝑛𝑔𝑎𝑛 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛
didapatkan kolagen kering lalu
dihitung rendamennya (Ata, 2016).
1. Hidrolisis Kolagen
Sampel kolagen sebanyak 1 gram
dilarutkan hingga 100 ml air suling
lalu dipanaskan pada suhu 600C
selama 15 menit. Kemudian disaring
dengan kertas saring, filtrat
kemudian digunakan sebagai
substrat. Selanjutnya 1 mg enzim
kolagenase yang diperoleh dari
Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar
Clostridium histolyticum dilarutkan
dengan buffer Tris-HCl diaduk
homegen. Substrat kemudian
dimasukkan kedalam larutan
kolagenase lalu di stirrer
menggunakan magnetic stirrer
selama 0,30, 60, 90, 120 dan 150
menit. Setelah di stirrer larutan
kemudian dipanaskan pada suhu 50-
600C untuk menginaktifkan
enzimnya. Larutan kemudian
disaring, lalu filtratnya dikeringkan
dengan alat freez dryer (Bosoupa,
2016). Derajat hidrolisis kolagen
ditentukan berdasarkan metode
Silvestree et al (2013) dengan
pengendapan Trichloroacetic acid
(TCA) 20% untuk menghasilkan 10%
fraksi protein terlarut dan 10% fraksi
tidak larut. Sebanyak 500 µl sampel
kolagen beku yang telah dicairkan
(dibiarkan pada suhu ruang)
ditambah dengan 500 µl TCA 20%
kemudian dihomogenkan dan
diinkubasi pada suhu 40C sel ama
30 menit. Selanjutnya campuran di
sentrifuse 3000 rpm selama 20
menit. Kandungan protein terlarut
dan protein total dianalisis
berdasarkan metode Lowry dkk,
(1951). Brovine serum albumin
(BSA) digunakan sebagai standar.
Derajat hidrolisis dihitung dengan
rumus (Khirzin, 2015) :
𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛 𝑡𝑒𝑟𝑙𝑎𝑟𝑢𝑡 10% 𝑇𝐶𝐴 𝑋 100
3. Karakterisasi Kolagen
a. Uji Ninhidrin
Sampel hasil isolat dimasukkan
dalam tabung reaksi, kemudian
dilakukan penambahan basa NaOH
1M, lalu dengan pereaksi Ninhidrin
1% dipanaskan , dan diamati
perubahan yang terjadi. Hasil positif
yang ditunjukkan adalah berwarna
kuning.
3
b. Uji Hopkins-Cole
Sampel hasil isolat di masukkan
dalam tabung reaksi, dan dengan
penambahan asam oksalat 1% lalu
dengan serbuk Mg dalam larutan.
Kemudian dengan penambahan
asam kuat H2SO4 pekat. Diamati
perubahan yang terjadi. Hasil positif
yang ditujukan adalah
pembentukkan cincin ungu pada
pisahan dua lapisan.
c. Uji Kelarutan Kolagen
Kolagen kering kulit ikan lamuru
sebelum hidrolisis dan sesudah
hidrolisis masing-masing ditimbang
sebanyak 10 mg. setelah itu
dilarutkan dalam 10 ml asam asetat
0,5 M dan dilarutkan juga dengan 10
air suling kemudian diamati.
d. Analisis Spektroskopi UV-Vis
Kolagen
Kolagen kering kulit ikan lamuru
sebelum hidrolisis dan sesudah
hidrolisis masing-masing ditimbang
sebanyak 10 mg dilarutkan dalam 10
ml asam asetat 0,5 M. Setelah itu
diambil sekitar 5 ml untuk dilakukan
pengukuran dengan menggunakan
spektrofotometer UV-Vis pada
rentang panjang gelombang 200-400
nm.
e. Analisis Spektroskopi FTIR
Kolagen
Kolagen kering kulit ikan lamuru
sebelum hidrolisis dan sesudah
hidrolisis ditimbang sebanyak 10 mg
digerus halus kemudian
ditambahkan dengan bubuk KBr
gerus hingga homogen. Campuran
tersebut kemudian dibentuk pellet.
Setelah berbentuk pellet, sampel
kemudian ditempatkan pada sampel
pen dan siap untuk dianalisis.
f.Pengujian Aktivitas
Penghambatan Enzim α-
glukosidase
Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar
Dilakukan dengan 4 pengujian
yaitu blanko, kontrol negatif, kontrol
positif dan sampel kulit ikan lamuru.
Campuran pereaksi yang digunakan
dalam uji ini terdiri dari buffer fosfat
0,1 M (pH 6,8), Substrat p-
nitrophenyl α-D-glukopyranoside 5
mM, Sampel uji pada berbagai
konsentrasi (pada pengujian
sampel), larutan acarbose (pada
pengujian Kontrol positif) dan larutan
α-glukosidase (0,5 unit/mL).
Campuran reaksi ini diinkubasi pada
suhu 370 C selama 30 menit. Reaksi
dihentikan dengan menambahkan
larutan Natrium Karbonat 0,2 M.
Hidrolisis enzimatik substrat
dimonitor oleh jumlah p-nitrophenol
yang dilepaskan dalam campuran
reaksi pada 405 nm menggunakan
ELISA reader.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi Kolagen
Isolasi kolagen dari kulit ikan
lamuru (Caranx ignobilis) dengan
beberapa proses seperti
perendaman dengan NaOH,
ekstraksi dengan asam asetat,
presipitasi dengan NaCl dan
pengeringan. Tahapan awal yang di
lakukan dalam penelitian ini yaitu
proses degresing atau biasa di sebut
proses penghilangan protein non
kolagen dari kulit ikan dengan
menggunakan pelarut NaOH 0,1 M.
Penggunaan larutan basa
pada proses degreasing karena
lebih efektif dalam proses
penghilangan protein non kolagen
dan hanya menyebabkan tingkat
kehilangan kolagen yang rendah
dibandingkan dengan penggunaan
larutan asam (Zhou dan Regenstein,
2005), selain itu kolagen juga
merupakan protein jaringan ikat
yang lebih sulit diekstraksi
4
dibandingkan dengan protein lainnya serat kolagen karena terganggunya
sehingga pada saat proses ikatan non kovalen sehingga akan
degreasing menggunakan NaOH, melarutkan kolagen pada larutan
protein-protein non kolagen akan asam asetat.
larut terlebih dahulu. Setelah proses ektraksi
Kolagen merupakan protein selesai, dilakukan penyaringan untuk
jaringan ikat. Protein jaringan ikat memisahkan filtrate dan residu.
merupakan protein yang lebih sulit di Supernatant/filtrate yang diperoleh di
ekstrak apabila dibandingkan presipitasi menggunakan garam
dengan protein lain sehingga pada NaCl, penambahan garam dengan
saat Pretreatment menggunakan konsentrasi tinggi secara terus
NaOH,protein-protein non kolagen menerus akan menyebabkan salting
akan larut terlebih dahulu. Liu et al. out dimana garam akan mengikat air
(2015) menyatakan bahwa kolagen dan menyebakan agresasi pada
biasanya tidak dapat larut dalam protein sehingga terjadi presipitasi
larutan alkali. Penggunaan NaOH pada molekul protein. Hal ini
biasa digunakan dalam proses disebabkan karena kekuatan ionic
pertreatment ekstraksi kolagen dari garam lebih tinggi dibanding
karena mampu meminimalkan protein sehingga mudah mengikat
kehilangan kolagen serta secara air. Jumlah air yang terikat pada
signifikan menyebabkan protein akan menurun sehingga
pembengkakan pada kulit apabila terjadi gaya tarik menarik antara
dibandingkan dengan larutan alkali molekul protein lebih besar dari pada
lainnya. Proses ini juga untuk gaya tarik antara protein dan air
memudahkan protein kolagen sehingga terjadi pengendapan
mudah larut pada ekstraksi protein (Winarno, 2008). Didapatkan
selanjutnya. Kulit ikan kemudian supernatan yang didiamkan 1 hari
dicuci dengan aquadest hingga pH dalam lemari pendingin kemudian
sampel mencapai pH 7. diliofilisasi (Freeze drying) sehingga
Selanjutnya dilakukan didapatkan kolagen kering.
ektraksi kulit ikan lamuru Selanjutnya kolagen kering dihitung
menggunakan larutan asam. rendamennya dengan
Ekstraksi dilakukan menggunakan membandingkan berat kolagen
pelarut asam, sehingga kering dengan berat awal sampel,
menyebabkan terjadinya perubahan diperoleh rendemen sebesar 8,21%.
struktur serat kolagen dan
melarutkannya. Asam asetat dipilih Analisa Karakterisasi Kolagen
sebagai pelarut untuk mengekstraksi Dari hasil pengujian ninhidrin
kolagen karena dapat mengestrak didapatkan perubahan warna kuning
kolagen lebih baik dari pelarut lain pada sampel kolagen. Hasil ini
(Liu et al., 2015). Perendaman menunjukkan didalam sampel
dengan asam menyebabkan kolagen kulit ikan lamuru terdapat
masuknya air dalam serat kolagen asam amino prolin dan hidroksiprolin
sehingga kulit ikan mengembang. (Bintang, 2010). Sedangkan dari
Pengembangan kulit ini hasil uji Hoopkins-cole tidak terjadi
menyebabkan rusaknya struktur
Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar 5
perubahan warna yang
menunjukkan hasil negatif.
Kolagen yang telah dihidrolisis
kemudian di freezdrying selama 24
jam. Setelah itu kolagen kering
sesudah hidrolisis dan sebelum
hidrolisis diuji kelarutannya
menggunakan air suling dan asam
asetat. Hasilnya menujukkan bahwa
kolagen hasil hidrolisis larut dalam
air suling dan asam asetat
sedangkan kolagen sebelum
hidrolisis larut dalam asam asetat
tetapi tidak larut dalam air suling. Hal
ini menunjukkan bahwa kolagen ikan
lamuru setelah hidrolisis akan lebih
bersifat polar dibandingkan sebelum
hidrolisis.
Penentuan Derajat Hidrolisis
Setelah diuji kualitatif
selanjutnya dilakukan hidrolisis
secara enzimatik menggunakan
enzim kolagenase serta diikuti
dengan perhitungan derajat hidrolisis
pada kolagen kering. Derajat
hidrolisis dapat dijadikan sebagai
indikator keberhasilan proses
hidrolisis. Hasil derajat hidrolisis
yang diperoleh dapat dilihat pada
gambar 1.
hidrolisis tertinggi pada menit ke 120
yaitu sebesar 5,533%. Hal ini
menunjukkan bahwa
semakin lama waktu hidrolisis maka
semakin tinggi derajat hidrolisis,
reaksi berjalan stabil dan pada
waktu 150 menit terjadi penurunan
besar derajat hidrolisis karena
karena substrat telah habis berikatan
dengan enzim dan enzim telah jenuh
terhadap substrat. Menurut De Man
(1997) proses pengubahan kolagen
menjadi gelatin atau hidrolisat
kolagen melibatkan tiga perubahan,
yaitu pemutusan sejumlah terbatas
ikatan peptida untuk memperpendek
rantai , pemutusan atau pengacauan
sejumlah ikatan samping antar rantai
dan perubahan konfigurasi rantai.
Sedangkan menurut Poppe (1992)
konversi kolagen yang bersifat tidak
larut air menjadi gelatin yang larut air
menyebabkan pemutusan ikatan
hidrogen diantara ketiga rantai
bebas.

Gambar 2. Spetrum UV-Vis kolagen sebelum

hidrolisis

Gambar 1. Grafik derajat hidrolisis

Penentuan derajat hidrolisis

dapat dijadikan indikator
keberhasilan proses hidrolisis
kolagen. Hasil menunjukkan derajat

Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar 6

 Gambar 5. Spetrum FTIR kolagensetelah
hidrolisis
Analisis FTIR yang dilakukan
Gambar 3. Spetrum UV-Vis kolagen setelah pada penelitian ini bertujuan untuk
hidrolisis memastikan senyawa yang
Pada spektroskopi UV-vis dihasilkan merupakan kolagen
untuk kolagen kulit ikan lamuru berdasarkan gugus-gugus fungsi
sebelum hidrolisis menunjukkan penyusunnya. Berdasarkan
adanya absorbansi pada panjang Spektrum FTIR kolagen
gelombang 233, 227 dan 220 nm menunjukkan puncak-puncak
sedangkan untuk kolagen hasil serapan pada wilayah serapan
hidrolisis menunjukkan adanya amida A, amida B, amida 1, amida 2,
absorbansi panjang gelombang 233 dan amida 3. Puncak serapan amida
nm (gambar 2 dan gambar 3). A dari hidrolisat kolagen kulit ikan
Kedua hasil ini menunjukkan positif lamuru terdeteksi pada panjang
adanya kolagen dimana serapan gelombang 3412,08 cm-1 yang
panjang gelombang untuk kolagen menunjukkan vibrasi Stretching NH.
terdapat pada rentang 200-250 nm Spectrum FTIR juga menunjukkan
(Faizal, 2014). Kemudian dilakukan adanya puncak serapan pada
analisis menggunakan spektroskopi panjang gelombang 2926,01 cm-1
FTIR untuk mengetahui gugus fungsi yang mengindikasikan adanya
dari kolagen (gambar 4 dan gambar gugus khas kolagen, yaitu amida B
5.) (Kong & Yu, 2007).
Hasil spektra FTIR
menunjukkan bahwa amida II dan III
kolagen hasi penelitian berturut-turut
memiliki bilangan gelombang
1556,55 cm-1 dan 1244,09 cm-1.
Amida III menunjukkan interaksi
intermolekuler pada kolagen yang
berkaitan dengan CN sterching dan
NH bending
(Kong dan Yu 2007). Intensitas rasio
Gambar 4. Spetrum FTIR kolagen sebelum antara amida III tersebut
hidrolisis menunjukkan struktur triple helix
pada kolagen. Nilai rasio yang

Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar 7

mendekati 1,0 menandakan bahwa
kolagen tersebut memiliki struktur
triple helix (Matmaroh et al. 2011).
Kolagen yang dihasilkan tidak
terdegradasi menjadi gelatin yang
ditandai dengan masih terdapatnya
struktur triple helix. Proses
kerusakan ikatan hidrogen dan
kovalen karena pemanasan >45°C
mengakibatkan terganggunya
stabilitas struktur triple helix kolagen
sehingga terjadi perubahan bentuk
menjadi gulungan dan akhirnya
kolagen terdegradasi menjadi gelatin
(Gómez-Guillén et al. 2011).
Berdasarkan Gómez-Guillén;(2011),
bahwa ekstraksi kolagen hasil
hidrolisis kulit ikan lamuru belum
mengubah kolagen menjadi gelatin
yang di tandai dengan adanya
struktur triple heliks.
Pengujian Aktivitas
Penghambatan Enzim α-
glukosidase
Dalam pengujian ini
digunakan kontrol positif yaitu
acarbose dan kontrol negatif berupa
buffer fosfat. Sampel, Kontrol positif
dan negatif diukur serapannya
dengan menggunakan micro plate
reader pada panjang gelombang
maksimum 405 nm. Hasil yang
didapat menunjukkan bahwa
aktivitas penghambatan enzim α-
glukosidase tertinggi dari hidrolisat
kolagen kulit ikan lamuru sebesar
47,06% pada konsentrasi 0,5 ppm
dengan persen penghambatan yang
tinggi, kemudian pada konsentrasi
tinngi 1 ppm mengalami penurunan
penghambatan sebesar 23,88%. Hal
ini di sebabkan oleh beberapa faktor
yang dapat mempengaruhi aktivitas
enzim yaitu tidak dilakukannya
purifikasi atau karakterisasi analisis
komposisi kimia sehingga masih
Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar
terdapat residu asam amino non
kolagen dari sampel yang dapat
mengganggu pengujian enzim.
Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang
dilakukan dapat disimpulkan bahwa :
1. Dari hasil Karakterisasi Uji
Kualitatif positif terdapat asam
amino utama penyusun kolagen.
Karakterisasi kolagen spektrum
FTIR kolagen hasil hidrolisis kulit
ikan lamuru belum mengubah
kolagen menjadi gelatin yang di
tandai dengan adanya struktur
triple heliks.
2. Pada uji penghambatan enzim α-
glukosidase dapat dilihat pada
konsentrasi rendah (0,5 ppm)
dengan % inhibisi 47,06% yang
bertindak sebagai inhibitor,
sedangkan pada konsentrasi
tinggi (1 ppm) dengan % inhibisi
23,88%.
Daftar Pustaka
Ahmad R., Shanti DL., Baehaki A.,
2015, Hidrolisis Protein Ikan Patin
Menggunakan Enzim Papain dan
Aktivitas Antioksidan
Hidrolisatnya, Jurnal Pengolahan
Hasil Perikanan Indonesia.
Ata TW Stephanie, Yulianty Risfah,
Sami J. Fitriyanti, Ramli Naimah.
2016. Isolasi Kolagen Dari Tulang
Ikan Cakalang (Katsuwonus
Pelamis). Makassar. Journal of
Pharmaceutical and Medicinal
Science. 1(1). 27-30.
Bosenberg, L.H. dan D. G. Van zyl.
2008. The Mechanism of Action
of Oral Antidiabetic Drugs: a
Review of Literature. Journal of
Endocrinology, Metabolism and
Diabetes of South Africa.
Chan,A.C.,B,Ozcan,N.Tekin, dan
C.Cokmus.2010. Characterization
8
 of a Thermostable α-Glucosidase Collagen.International Journal of
From Geobacillus thermos Pharmacy.(221): 1–22
denitrificans f 84a, Current Lehninger, Albert L. 1982. Dasar
Research, Technology and Dasar Biokimia jilid
Education Topics in Applied 1.M.Thenawidjaja, Trans.
Microbiology and Microbial Erlangga : Jakarta
Technology Lowry, O,H., Rosebrough, N.J., Farr,
Chaplin, M. 2005. Gelatin. A.L., & Randal, R.J. 1951. Protein
www//Isbuc.ac.uk Measurement with The Folin
Draeloz, Z.D. and Thaman L.A., Phenol Reagent. Departement of
2006, Cosmetics Science and Pharmacology, Whashintgon
Tehcnology Series. Vol- University School of Medicine, St.
30,Cosmetics Formulation of Skin Louis, Missouri Marks Dawn B,
Care Products, Taylor and Marks Afian D, Smith Collen.
Francis Group, New York. 2002. Biokimia kedokteran dasar
Guillen MC, Gomez JT, Fernandez edisi 1. EGC : Jakarta
MD, Ulmo N, Lizarbe MA, Mocan, E., Tagadiuc, O., and Nacu,
Montero P. 2002, Structural and V. 2011. Aspects of Collagen
physical properties of gelatin Isolation Procedure. CLINICAL
extracted from different marine RESEARCH STUDIES.Nicolae
species: a comparative study, Testemitanu State Medical and
Food Hydrocol, 16:25-34. Pharmaceutical
Faizal, Fiqi. 2014. Isolasi dan University.Chisinau.Republic of
Karaterisasi Kolagen dari Kulit Moldova.
Ikan Buntal Pisang (Tetradon Murray, RF., Granner OK, Rodwell
lunaris). Skripsi. Departemen V. 2003. Biokimia Harper Edisi
Teknologi Hasil Perairan Fakultas 25. Jakarta: Buku Kedokteran.
Perikanan dan Ilmu Kelautan Muyonga JH, Cole CGB, Doudu KG.
Institut Pertanian Bogor. 2004. Characterisation Of Acids
Fernandez-Diaz, M.D; P. Montero; Oluble Collagen From Skins Of
and M.C. Gomez-Guillen. 2001. Young And Adulti Nileperch
Gel Properties of Collagens from (Lates Nilloticus). Food
Skin of Cod (Gadus morhua) and Chemistry. 85(1): 81-89.
Hake (Merluccius merluccius) and Ogawa, M., R.J. Portier, M.W.
their Modification by The Moody, J. Bell, M.A.
Coenhancers Manesium Schexnayder, and J.N. Losso.
Sulphate, Glycerol and 2004. Biochemical Properties of
Transglutaminase. Jurnal of Food Bone and Scate Collagens
Chemistry 74: 161 – 167. Isolated from The Subtropical
Lebovitz, H. E. 1997. Alpha- Fish Black Drum (Pogonia
Glucosidase Inhibitor.Current cromis) and Sheepshead
Therapies for Diabetes Seabream (Archosargus
Lee, C.H., Singla, A., and Lee, Y. probatocephalus). Food
2001. Review Biomedical Chemistry. 88: 495-501.
Application of

Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar 9

Poedjiadi, A., dan Supriyanti, F.M.T.,
2009. Dasar Dasar Biokimia.
Universitas Indonesia : Jakarta
Pujianto S dan Fernia RS. 2010.
Aktivitas Inhibitor Alfa
Glukosidase Bakteri Endofit PR-3
yang Diisolasi dari Tanaman Pare
(momordica charantia). Journal
bioma
Rodwell, V. W. R. K. Murray dan F.
W. Keeley, 1995. Protein
Kontraktil dan Struktural dalam
Biokimia Harper. Edisi 22. Alih
Bahasa oIleh Andry Hartono.
Kedokteran EGC. Jakarta
Yu Z, Yin Y, Zhao W. 2011. Novel
Peptides Derrived From Egg
White Protein Inhibiting Alpha
Glucosidase. Food Chem
Zahrani, R.A. 2009. Extraction and
Isolation of Collagen Type 1 From
Fish Skin. University of otago.
Dunedin. New Zealand
Zusfahair, Dian Riana Ningsih,
Febrina Nur Habibah. 2014.
Karakterisasi Papain Dari Daun
Papaya (Carica papaya L.)
Program Studi Kimia Jurusan
MIPA Fakultas Sains dan Teknik
Universitas Jenderal Soedirman
Purwokerto

Halima Sya’roini. 2019. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar 10