Terapi Photothermal Sel Kanker Tunggal

Menggunakan GNR yang Dibuat secara Alami

1. Pendahuluan

Dalam beberapa tahun terakhir, perkembangan pesat dalam proses sintesis dan karakterisasi
nanomaterials memiliki manfaat sebagai nanomedicines dalam terapi kanker, termasuk bahan-
bahan baru dua dimensi yang telah diteliti secara intensif. Secara khusus, nanopartikel telah
berkembang menjadi terapi atau terapi pencitraan yang lebih aman dan efektif. Untuk terapi
photothermal, banyak usaha yang telah dilakukan terhadap nano partikel logam karena dapat
menyerap gelombang elektromagnetik dengan kuat dari beberapa frekuensi, mengarah ke kenaikan
suhu yang cepat.
Nano partikel /nanostructur emas dari berbagai ukuran dan bentuk telah dianggap sebagai salah
satu bahan-bahan yang paling penting untuk terapi photothermal karena mempunyai konduktivitas
suhu dan stabilitas kimia. Sebagai contoh, Sun et al. menemukan bahwa
garam yang induksi oleh nano partikel emas dalam media biologis menghasilkan
photothermal/foto-akustik pencitraan sel kanker yang lebih baik. Selain itu, Li et al. mengamati
bahwa makrofag emas nanorod (GNR) dapat menggambarkan tumor pada terapi photothermal.
Secara umum, gelombang elektromagnetik di kisaran spektral yang berbeda, seperti X-ray, cahaya
putih, dan laser inframerah, dapat digunakan dalam terapi photothermal.
Namun, laser inframerah dianggap sebagai alat yang paling cocok karena mempunyai
redaman energi laser yang rendah ketika melewati jaringan atau sel. Dalam praktiknya, keduanya
sinar laser yang tidak fokus maupun yang fokus telah digunakan dalam photothermal terapi sel.
Dalam penelitian ini, ditemukan bahwa terapi photothermal sel-sel kanker tunggal yang
dimediasi oleh Cluster GNR secara alami terbentuk di Lisosom sel kanker. Efek plasmonic
berpasangan antara GNRs dalam kelompok GNR numerik dipelajari berdasarkan metode Finite
Difference Time-Domain (FDTD) Telah ditemukan bahwa Two-Photon-Induced
Absorption TPA dan Two-Photon-Induced Luminescence (TPL) dari GNR
ditingkatkan secara signifikan yang pada gilirannya mengurangi energi pulse yang digunakan
dalam photothermal terapi sel kanker tunggal.

2. Metode Penelitian
 GNRs yang digunakan dalam penelitian disintesis menggunakan metode yang telah
dijelaskan sebelumnya. GNRs distabilisasi oleh polietilen glikol (PEG). Morfologi GNRs
diteliti dengan menggunakanmikroskop elektron transmisi (TEM).
Sel-sel kanker yang digunakan dalam terapi photothermal adalah hepatocellular karsinoma
hati manusia (HepG2) yang telah dibiakkan di inkubator.

Cytotoxicity GNRs secara in vitro dievaluasi melawan sel-sel HepG2 dengan

menggunakan Uji Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromida (MTT). Sel-sel yang kemudian
diinkubasi dengan media 100-mL mengandung GNRs selama 24 jam.

Percobaan terapi photothermal dilakukan dengan menggunakan laser confocal

pemindaian mikroskop (TCS-SP5, Leica). Dalam kasus sebelumnya, laser difokuskan pada
sel target dengan menggunakan lensa objektif perbesaran 60 ×.
TPL yang dipancarkan oleh Cluster GNR dikumpulkan oleh lensa obyektif yang sama
dan diarahkan ke spektrometer untuk dianalisis. Pencitraan TPL sel dilakukan dengan
menggunakan positioning sistem tiga dimensi (P - 563.3 CD, instrumen Physik). Untuk
terapi photothermal dilakukan dengan menggunakan laser confocal pemindaian
mikroskop, menggunakan sel-sel yang diinkubasi selama 12 jam. Kemudian, diinkubasi
dengan menggunakan medium yang mengandung 104.4-am GNRs selama 24 jam. Setelah
itu, sel-sel itu dicuci oleh PBS tiga kali dan diamati pada DMEM di bawah laser confocal
pemindaian mikroskop.
Perangkat lunak FDTD dikembangkan oleh Lumerical Solutions, Inc yang
digunakan untuk mensimulasikan distribusi medan listrik dalam kelompok GNR yang
penyerapan spectra linear dan nonlinear dari kluster GNR. Dalam simulasi FDTD, yang
digunakan adalah grid yang terkecil dan grid yang sama dengan 0,2 nm.

3. Hasil dan Diskusi

3.1 penyerapan linear dan nonlinear GNR cluster
 Telah diketahui bahwa GNRs yang biasanya dikumpulkan di Lisosom, dan menjadi
GNR cluster setelah masuk ke dalam sel. Berbeda dengan GNRs terisolasi, ada ikatan yang
kuat antara GNRs dalam kelompok GNR tersebut dan menghasilkan penyerapan linear dan
non linear.

3.2 peningkatan suhu naik GNR cluster

Kenaikan GNR cluster penting untuk photothermal terapi sel tunggal yang
menggunakan kelompok GNR alami. Oleh karena itu, efisiensi konversi photothermal
ditentukan terutama oleh penyerapan nonlinier GNR cluster yang meningkatkan cahaya
dan panas.
Untuk GNRs terisolasi, hal ini tergantung pada ukuran dan rasio GNRs dan panjang
gelombang eksitasi laser. Untuk gugus GNR, akan terpengaruh oleh jumlah GNRs di
cluster, ikatan antara GNRs dan panjang gelombang eksitasi laser.Kenaikan suhu pada
gugus GNR dengan plasmonic kopling jauh lebih besar daripada di klaster GNR tanpa
plasmonic kopling.

3.3. Morfologi, Penyerapan, Cytotoxicity dan Penyerapan GNRs

Morfologi GNRs disintesis menggunakan metode observasi TEM. Tipe spektrum
penyerapan diukur dengan GNRs yang tersebar dalam air. Cytotoxicity GNRs sel-sel
HepG2 diamati dengan GNRs dengan konsentrasi yang berbeda. Dalam rangka
mewujudkan terapi photothermal yang efisien, pengambilan GNRs untuk HepG2 sel juga
diamati. Pengambilan GNRs ini tidak sebanding dengan konsentrasi GNRs.

3.4 GNR cluster dibentuk di Lisosom

Telah diketahui bahwa GNRs yang telah memasuki sel membentuk GNR
cluster. Sehingga terapi photothermal untuk satu sel HepG2 hanya memerlukan energi
yang sangat rendah karena GNRs cluster secara efektif dapat mengkonversi energi foton
menjadi panas, mengarah ke suhu tinggi.

Seperti telah dibahas dalam bagian 3.1, GNR cluster dengan plasmonic coupling yang kuat
dapat memancarkan TPL yang lebih kuat dibandingkan dengan GNRs terisolasi atau GNR
cluster yang berpasangan. Sehingga, kita dapat dengan mudah menentukan lokasi dari
GNR cluster dengan memindai gambar TPL dengan energi rendah.

3.5 Terapi Photothermal Dimediasi oleh GNR Cluster

Terapi photothermal sel tunggal dengan memanfaatkan TPA/TPL ditingkatkan di
GNR cluster. Setelah lokasi GNR cluster dalam satu sel ditentukan dengan bantuan TPL
terapi photothermal untuk sel dapat dilakukan dengan menarik GNR cluster menggunakan
TPA/TPL besar dengan energi yang lebih tinggi. Dengan cara ini, apoptosis sel-sel kanker
dapat lebih mudah dicapai dengan akurat dan cepat.

4. Kesimpulan

Terapi photothermal sel tunggal HepG2 yang dimediasi oleh kelompok-kelompok

GNR alami terbentuk di Lisosom sel-sel HepG2. TPA dan TPL GNR kelompok yang
terbentuk di Lisosom sel HepG2 secara signifikan meningkat dibandingkan dengan GNRs
terisolasi atau GNR cluster yang tidak berpasangan. Penyerapan nonlinier menyebabkan
kenaikan suhu yang lebih besar dapat dimanfaatkan untuk menginduksi apoptosis dari sel
tunggal. Ternyata bahwa lokasi kelompok GNR tersebut dapat dengan mudah
diidentifikasi berdasarkan gambar TPL sel tunggal yang diperoleh dengan menggunakan
energi rendah.

GNR cluster dengan fs sinar laser mengakibatkan perubahan morfologi sel dan
menimbulkan gelembung, menyebabkan nekrosis sel tanpa radiasi. Apoptosis sel dapat
disebabkan oleh energi serendah 70 pJ. Penelitian ini berguna untuk terapi photothermal
sel-sel kanker tunggal dengan energi rendah dan akan menemukan aplikasi potensial di
biophotonics dan biomedik.