SOAL 1

1. Tunjukkan dengan perhitungan sederhana bahwa laju aliran ini akan melakukan fase
gerak pada kecepatan linear yang hampir sama dengan jenis yang sama tetapi memiliki
diamter standar 4,6 mm yang laju aliran yang disarankan adalah ml/menit. Kromatogram
diatas sesuai dengan contoh pemisahan yang diperoleh dengan kolom sempit 300 𝜇𝑚 x
25 cm
2. Berapakah volume mati kolom ini? (Panah yang ditandai pada kromatogram menunjukan
waktu penahanan)
3. Berapa volume retensi, yang dinyatakan dalam ml, dari senyawa yang memiliki afinitas
terbesar untuk fase diam?
4. Hitung efisiensi kolom untuk senyara ini
5. Hitung faktor retensi senyawa ini di kolom

SOAL 2
Apa urutan elusi asam berikut ini sesuai dari kolom HPLC yang fase diamnya tipe C 18
sedangkan fase geraknya untuk buffer format C = 200 mM pH 9.
Campuran :
1. Asam Linoleat CH3(CH2)4CH = CHCH2CH=CH(CH)7CO2H
2. Asam Arachidis CH3 (CH2)18CO2H
3. Asam Oleat CH3(CH2)7CH = CH(CH2)7CO2H

JAWAB :
Soal 1
1. 300 𝜇𝑚 = 4 𝜇𝑙 / Menit
1 𝜇𝑚 = X 𝜇𝑙/menit
300
X= = 0,013 𝜇𝑙/𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡
4

Kesimpulan : jadi untuk diameter yang berukuran 1 𝜇𝑚 akan menghasilkan laju

aliran sebesar 0,013 𝜇𝑙 / menit.

2. Dik : tM : 4 menit
F : 4 𝜇𝑙/menit = 0,004 ml/menit
Dit : VM : ..........?
Jwb : VM = tM . F
= 4 menit . 0,004 ml/menit
= 0,016 ml
 3. Dik : tR : 29 menit
F : 4 𝜇𝑙/menit = 0,004 ml/menit
Dit : VR : ............?
Jawab : VR = tR x F
= 29 menit x 0,004 ml/menit
= 0,0016 ml

4. Dik : tR : 29 menit
W : 1 menit
Dit : N : .............?
𝑡𝑅 2
Jwb : N = 16 ( 𝑊 )
29 2
= 16 ( 1 )
= 13.456

5. Dik : tR : 29 menit
tM : 4 menit
Dit : k = ...............?
𝑡𝑅−𝑡𝑀 29−4
Jawab : k = = = 6,25
𝑡𝑀 4

SOAL 2
Jawab :
Pada HPLC yang fase diamnya tipe C18 (fase terbalik), pelarut yang kepolarannya lebih rendah
memiliki kekuatan eluen yang lebih kuat. Oleh karena itu maka semakin kuat eluennya maka
semakin cepat elusinya. Berdasarkan ketiga pelarut tersebut urutan polaritas mulai dari yang
lebih polar sampai kurang polar adalah asam Arachidis, asam oleat dan asam linoleat sehingga
yang memiliki kemampuan elusi yang paling baik adalah asam linoleat didalam fase diam tipe
C18.