cara-Cara UJI HA Dan HI Yang Praktis dan Mudah Dipahami

Kreatif Education - Disini penulis akan berbagi pengetahuan tentang bagaimana cara Uji HA
dan HI. Sebelum kita masuk kedalam materi Uji Ha dan Hi, teman teman harus mengetahui
Pengertian HA , HI. Apa manfaat uji HA dan HI.
Hemaglutination (HA) serta Hemaglutination Inhibition (HI) Test
1. Mengetahui ada tidaknya perkembangan virus ND dengan menggunakan uji HA serta HI
cepat.

Baca Juga
GELENIKA EKSTRAKS DAN CARA MEMBUAT SEDIAAN GELANTIKA EKSTRAK
DENGAN SEDERHANA
Uji Karbohidrat Biokimia, Uji Karbohidrat Sederhana, Kompleks dan Kualitatif
Cara Mudah Memahami METODE PENELITIAN KUALITAIF (Sistematika Penelitian
Kualitatif)
2. Mengetahui ada tidaknya perkembangan virus ND dengan menggunakan uji HA serta HI
lambat.
3. Mengidentifikasi virus yang menghalangi aglutinasi dengan uji HI cepat.
4. Mengukur titer antibodi pada virus ND dengan uji HI lambat.
5. Uji hemaglutinasi dengan pelat mikro untuk ketahui titer enceran virus yang paling kecil
yang masih tetap dapat mengaglutinasi eritrosit ayam serta kendala aglutinasi dengan pelat
mikro bermanfaat untuk ketahui titer pengenceran paling kecil antibodi pada serum ayam
yang masih tetap dapat menghalangi aglutinasi virus spesifik.

Pemeriksaan Mikrobiologi Uji HA

UJI HEMAGLUTINASI (HA)

Hemaglutinasi yang dikarenakan oleh antibodi pada antigen pada permukaan sel darah
merah. Umpamanya untuk memastikan kelompok darah bisa dikerjakan reaksi hemaglutinasi.
Sebagian virus spesifik memiliki kekuatan untuk berikatan dengan permukaan sel darah
merah dari spesies berlainan hingga berlangsung aglutinasi.

Hemaglutinasi di mana sel darah merah cuma berperan jadi pembawa antigen, sel darah
merah spesifik bisa dilapiskan dengan antigen sesudah permukaannya dirubah sifatnya
dengan asam tannin atau kromium klorida. Sesudah antigen melekat pada permukaan sel
darah merah, antigen ini bisa ditetapkan dengan serum yang sesuai sama. Keuntungan reaksi
ini yaitu mempermudah lihat hasil reaksi karna dikerjakan dengan partikel-partikel yang
besar. Reaksi ini dimaksud juga passive heamagglutination.

Baca Juga : REAKSI-REAKSI UJI KARBOHIDRAT

Uji HA mempunyai tujuan untuk :

Membedakan subtipe HA
Mengukur nilai HA sediaan virus Influenza
Pengukuran titer HA dikerjakan ketika :
kultur virus (sebagian titer virus yang berhasil dikultur)
ambil stock virus
sebelumnya lakukan uji HI
pemilihan kandungan 4 HAU untuk standarisasi antigen uji HI
uji HA1

Langkah Kerja Uji Hemaglutinasi (HA)

Alat serta Bahan :

Microplate dengan basic berupa V (untuk ayam/kalkun) atau U (untuk manusia gol
O/marmut)
Micropipet
PBS (Phosphat Buffer Saline)
Antigen (virus utuh H1N1 inactivated)
Sel darah merah ayam segar
Langkah Kerja

Siapkan microplate dengan basic berupa V

Masukan 50 µl PBS kedalam sumur A2 – A12 serta B2 – B12 (duplo)
Masukan 100 µl antigen kedalam sumur A1 serta B1
Masukan 100 µl kontrol sel darah merah (SDM)
Serial twofold dilution, masukan antigen lewat cara pengenceran bertahap
ambillah 50 µl antigen dari sumur A1, masukan ke sumur A2 (up and down ±5 kali untuk
mengaduk), ambillah 50 µl kombinasi barusan dari sumur A2 lantas masukan ke sumur A3,
kerjakan lewat cara yang sama teruskan hingga A11, buang sisa 50 µl dari sumur A12
kerjakan juga untuk duplo pada baris B2 – B12
duplo HA

Masukan semasing 50 µl sel darah merah ayam pada semuanya well dari mulai sumur A12
serta B12 hingga sumur A1 serta B1
Campur dengan baik dengan manual (ketuk-ketuk dengan perlahan-lahan pinggir microplate
pada tiap-tiap sisinya)
Inkubasi pada suhu ruangan (22-25oC) ± 15 menit check pada well apakah SDM telah
mengendap.
Tulis hasil
Hasil uji HA

ha 2
Untuk lebih terang bisa diliat pada contoh gambar berikut ini :
BACA JUGA : Cara Membuat Preparat basah dan Preparat Kering, Paling
Lengkap dan Prakrtis

uji HA

Berlangsung endapan hemaglutinasi

(-)
Berlangsung hemaglutinasi
(+)
kontrol
PEMBAHASAN

Pada praktikum ini juga akan dikerjakan pengukuran titer HA sediaan virus H1N1 yang juga
akan dipakai untuk standarisasi uji Kendala aglutinasi (HI). Didapat hasil kalau titer antigen
16 HAU yang berarti pada pengenceran 1/16 HA Unit antigen masih tetap berikatan pada sel
darah merah serta mengakibatkan hemaglutinasi.

Antigen standard untuk uji HI pada praktikum ini yaitu 8 HA unit/50 µl. Kalkulasi
pengenceran antigen dengan membagi 8 (berdasar pada volume reaksi 50 µl) karna kita
menginginkan juga akan peroleh 8 unit HA/50 µl. 16 HA belum juga menjangkau
standarisasi 8 HAU jadi diperlukan pengenceran lewat cara membahkan 50 µl Antigen
dengan 100 µl PBS dengan perbandingan 1 : 2.

Titer HA yaitu pengenceran teratas yang masih tetap bisa mengaglutinasi eritrosit. HA prima
diikuti dengan susunan sel darah merah dengan rata pada basic sumuran microplate serta
penjernihan dari cairan dibagian atas tanpa ada terjadinya pengendapan. Sedang hasil
negative memberikan sel darah merah berupa titik di dalam sumuran.

Sebagian virus dapat mengaglutinasikan sel darah merah. Kekuatan ini jadi contoh dari
kesibukan biologik serta kesibukan ini bisa dihambat oleh antibodi spesifik. Bagian partikel
virus yang khusus bisa berhubungan dengan reseptor mukoprotein pada sel darah merah serta
permukaan sel beda. Hubungan dari bagian reseptor serta virion buat aglutinasi sel darah
merah jadi terlihat. Enzim virus neuraminidase memecah ikatan pada virus serta sel, serta
melepas keduanya kedalam larutan.

KESIMPULAN

Menambahkan antigen pada sel darah merah bisa menimulkan reaksi aglutinasi di mana
antigen juga akan melekat pada permukaan sel darah merah. Pada praktikum ini juga akan
dikerjakan pengukuran titer HA sediaan virus H1N1 yang juga akan dipakai untuk
standarisasi uji Kendala aglutinasi (HI).