FASILITAS MASYARAKAT HIV
Entri HIV, fase pertama dari siklus replikasi virus, dimulai dengan adhesi
virus ke sel inang dan berakhir dengan perpaduan sel dan selaput virus
dengan pengiriman inti virus berikutnya ke dalam sitoplasma. Serangkaian
interaksi protein-protein yang rumit yang pada akhirnya menghasilkan
infeksi virus dapat dibagi menjadi beberapa fase, beberapa di antaranya
sangat penting dan yang lainnya dapat berfungsi untuk memodulasi efisiensi
proses. Pertama, virion harus berikatan dengan sel target, dengan ini
dimediasi oleh protein membran envelope (Env) protein atau membran sel
induk yang dimasukkan ke dalam virion dengan salah satu dari sejumlah
faktor pelekatan sel. Lampiran dapat relatif tidak spesifik, dengan Env
berinteraksi dengan proteoglikan sulfat heparan sulfat bermuatan negatif
(Saphire et al., 2001), atau dapat dihasilkan dari interaksi yang lebih
spesifik antara integrin Env dan α4β7 (Arthos et al., 2008; Cicala et al.,
2008; Cicala et al., 2008; ) Atau reseptor pengenalan pola seperti adhesi
interseluler interseluler spesifik dendritik molekul 3-grabbing non-integrin
(DC-SIGN) (Geijtenbeek et al, 2000; diulas di Ugolini et al., 1999).
Keterikatan HIV ke sel inang melalui faktor-faktor ini mungkin membawa
Env ke dekat dengan CD4 dan koreptor reseptor viral, meningkatkan
efisiensi infeksi (Gambar 1) (Orloff et al 1991). Namun, faktor pelekatan
berbeda dari reseptor karena tidak penting, dan walaupun meningkatkan
infeksi in vitro, peran fisiologis mereka secara in vivo tetap tidak jelas
Gambar 1 Overview of HIV entry. To deliver the viral payload into cells, HIV
Env, comprised of gp120 and gp41 subunits (1), first attaches to the host
cell, binding CD4 (2). This causes conformational changes in Env, allowing
coreceptor binding, which is mediated in part by the V3 loop of Env (3).
This initiates the membrane fusion process as the fusion peptide of gp41
inserts into the target membrane, followed by six-helix bundle formation
and complete membrane fusion (4).
Langkah kedua masuknya virus dan yang pertama benar-benar
diperlukan untuk infeksi memerlukan pengikatan Env ke reseptor
utamanya, yaitu protein host CD4 (Maddon et al 1986; McDougal et al.,
1986). Env adalah trimer glikosilasi berat heterodimer gp120 dan gp41.
Subunit gp120 bertanggung jawab untuk mengikat reseptor dan gp120
mengandung lima domain yang relatif lestari (C1-C5) dan lima loop variabel
(V1-V5), dinamai untuk heterogenitas genetik relatifnya. Masing-masing
daerah variabel terdiri dari struktur loop yang dibentuk oleh ikatan
disulfida di dasarnya, kecuali V5. Loop variabel terletak pada permukaan
gp120 dan memainkan peran penting dalam penghindaran kekebalan dan
pengikatan coreceptor, terutama loop V3 (diulas di Hartley et al., 2005).
CD4 adalah anggota superfamili imunoglobulin yang biasanya berfungsi
untuk meningkatkan pensinyalan sel T-sel (TCR) -mediated signaling. Env
berinteraksi dengan tempat pengikatan CD4 (CD4) pada gp120 (Kwong et
al 1998). Env yang mengikat CD4 menyebabkan penataan ulang V1 / V2
dan selanjutnya V3. Selain itu, jumlah CD4 menyebabkan pembentukan
lembaran bridging, lembar egrard beranggota empat terdiri dari dua
lembar β untai ganda yang dipisahkan secara spasial dalam keadaan tidak
dilekatkan (Kwong et al 1998; Chen et al., 2005). Lembar kerja bridging dan
reposisi lingkaran V3 memainkan peran penting dalam langkah masuk virus
berikutnya, keterlibatan coreceptor.
Langkah ketiga masuknya virus, pengikatan coreceptor, secara
luas dianggap sebagai pemicu yang mengaktifkan potensi fusi membran
Env. Strain HIV dapat diklasifikasikan secara luas berdasarkan penggunaan
coreceptor mereka. Virus yang menggunakan reseptor kemokin CCR5
disebut R5 HIV, mereka yang menggunakan CXCR4 disebut X4 HIV, dan
virus yang dapat menggunakan kedua coreceptor disebut R5X4 HIV (Berger
et al 1998). Tidak ada bukti kuat bahwa coreceptor selain CCR5 dan CXCR4
memainkan peran penting dalam mendukung infeksi HIV-1 secara in vivo.
Dengan pengecualian yang langka, hanya virus R5 dan R5X4 yang
ditransmisikan antar individu (Keele et al 2008), kemungkinan karena
beberapa pembatasan host yang tidak sempurna namun tumpang tindih
pada transmisi HIV X4 (diulas di Margolis and Shattock 2006). Menariknya,
meskipun identifikasi pada titik waktu sebelumnya dan meskipun tingkat
ekspresi CXCR4 yang tinggi pada sel target HIV yang beredar, X4 atau
bahkan R5X4 HIV jarang terjadi sampai akhir infeksi (Tersmette et al 1989;
Schuitemaker et al., 1992; Connor et al., 1997; ). Selain itu, virus X4 kurang
umum pada infeksi clan C HIV dan SIV (Chen et al 1998; Ping et al., 1999;
Cecilia et al., 2000; Huang et al 2007). Beberapa model yang tidak eksklusif
mungkin menjelaskan hal ini. Pertama, clade B Envs mungkin berbeda
dalam kemampuan mereka untuk beradaptasi dengan tropisme CXCR4.
Kedua, mungkin ada perbedaan dalam biologi induk klade B. Misalnya,
host klade B mungkin telah mengurangi antibodi penetralisir atau respons
limfosit T sitotoksik terhadap X4 HIV dibandingkan dengan HIV R5.
Akhirnya, host klade B paling sering tinggal di negara maju dan mungkin
menghadapi tekanan lingkungan yang berbeda termasuk koininan kronis
yang lebih sedikit atau berbeda, yang dapat meningkatkan ekspresi CCR5
sel target. Menguraikan mekanisme saklar coreceptor adalah langkah
penting berikutnya karena memiliki implikasi untuk pengembangan
penyakit dan terapi dengan penghambat masuk HIV.
Langkah keempat dari entri virus adalah pergerakan partikel virus
ke tempat dimana fusi membran produktif terjadi. Serangkaian studi
terbaru menunjukkan bahwa sejumlah virus memanfaatkan jalur
transportasi seluler untuk mencapai tujuan tertentu yang diperlukan untuk
infeksi atau membuat entri lebih efisien, dan bahwa HIV juga dapat
menggunakan mesin sel inang untuk mencapai lokasi di mana fusi
membran dapat Terjadi (Lehmann et al 2005; Coyne dan Bergelson 2006;
Sherer et al., 2010). Beberapa virus telah terbukti "berselancar" di
sepanjang permukaan sel, berpindah dari tempat distal ke daerah
proksimal tubuh sel tempat masuk virus. Retrovirus, termasuk HIV, telah
terbukti menggunakan proses ini pada beberapa lini sel (Lehmann et al
2005; Sherer et al., 2010). Selain itu, HIV mungkin perlu diinternalisasi oleh
mesin endositik sel induk untuk fusi membran produktif terjadi, seperti
yang dibahas di bagian selanjutnya (Miyauchi et al., 2009).
Langkah kelima dan terakhir dari entri virus adalah fusi membran
yang dimediasi oleh Env. Pengikatan coreceptor menginduksi paparan
peptida fusi gp41 hidrofobik, yang masuk ke membran sel inang. Ini
tetekkan membran virus dan inang, yang memungkinkan peptida fusi
masing-masing gp41 di trimer untuk dilipat di daerah engsel, membawa
daerah heliks terminal amino (HR-N) dan daerah heliks kotak karboksid
(HR-C) dari Setiap subunit gp41 bersama-sama membentuk bundel enam
helix (6HB) (Chan et al 1997; Weissenhorn et al 1997). Karena domain HR-
N berada di dekat membran sel inang karena peptida fusi, dan domain HR-
C berada di dekat membran virus karena domain transmembran gp41,
formasi 6HB adalah motor penggerak Yang membawa membran yang
berlawanan ke dalam aposisi yang dekat, menghasilkan pembentukan pori
fusi (diulas di Melikyan 2008). Apakah satu atau beberapa pemindai HIV
Env dibutuhkan untuk perpaduan membran lengkap belum jelas.
Singkatnya, pengikatan coreceptor membuka potensi energi kompleks fusi
gp41 sehingga menghasilkan formasi 6HB, pembukaan dan stabilisasi pori
fusi membran, dan pengiriman selanjutnya dari kandungan virus ke dalam
sitoplasma sel induk.
PENCEMARAN PENERIMA HIV Pada tahun 1981, beberapa tahun sebelum
ditemukannya HIV, Gottlieb dan rekan (1981) melaporkan penurunan sel T
CD4 + pada empat pria yang menderita pneumocystis pneumonia dan
kandidiasis mukosa, di antara infeksi oportunistik lainnya. Tiga tahun
kemudian, diketahui bahwa HIV secara istimewa menginfeksi sel T CD4 +
(Klatzmann et al 1984) dan bahwa infeksi berpotensi dihambat oleh
antibodi spesifik CD4 (ditinjau di Sattentau dan Weiss 1988). CD4
kemudian ditunjukkan pada coimmunopresipitate dengan Env (McDougal
et al., 1986) dan ekspresi CD4 dapat menyelamatkan infeksi pada beberapa
sel yang tidak berperasaan (Maddon et al 1986). Namun, transfeksi CD4 ke
sel tikus menyelamatkan pengikatan virus ke permukaan sel tapi tidak
dengan fusi membran atau infeksi virus, menunjukkan bahwa ada kofaktor
lain yang dibutuhkan (Maddon et al 1986).
Meskipun penemuan CD4 sebagai reseptor HIV primer terjadi segera
setelah timbulnya epidemi, dibutuhkan waktu lebih dari satu dekade untuk
menemukan koreceptor pertama. Pada tahun 1993, CD26 dilaporkan
sebagai koreceptor HIV yang sulit dipahami (Callebaut et al 1993); Namun,
ini kemudian dibantah oleh beberapa kelompok (Lazaro et al 1994.
Stamatatos dan Levy 1994). Pada tahun 1995, Feng dan rekannya secara
meyakinkan mengidentifikasi CXCR4 sebagai coreceptor HIV utama dengan
menggunakan strategi kloning ekspresi. Temuan kritis dari penelitian ini
adalah bahwa CXCR4, yang kemudian diistilahkan fusin, berfungsi sebagai
koreceptor untuk strain HIV tropik tipe sel T namun tidak untuk strain virus
yang dapat menginfeksi makrofag manusia namun gagal memasuki jalur
sel T (Feng et al 1995, 1996). Penemuan mani CXCR4 sebagai reseptor G-
protein-coupled (GPCR) dikombinasikan dengan identifikasi efek
penghambatan dari β chemokines CCL3 (MIP-1α), CCL4 (MIP1β), dan CCL5
(RANTES) (Cocchi et al 1995) pada beberapa isolat virus menyebabkan
penemuan CCR5 simultan dan cepat sebagai coreceptor untuk strain virus
macrophage-tropic oleh lima kelompok yang berbeda (Alkhatib et al 1996;
Choe et al 1996; Deng et al 1996; Doranz et Al. 1996; Dragic et al
1996).Pentingnya coreceptors virus untuk infeksi HIV in vivo ditunjukkan
dengan ditemukannya penghapusan base-pair 32 pada ccr5, yang disebut
ccr5Δ32, yang memiliki frekuensi allelic ~10% pada Kaukasia (Dean et al
1996; Liu et al 1996; Samson et al 1996). Mutilasi Δ32 menghasilkan kodon
stop prematur pada loop ekstraselular kedua CCR5 dan retensi protein
mutant berikutnya dalam retikulum endoplasma. Homozigositas untuk
polimorfisme ini menghasilkan resistensi yang mendalam terhadap infeksi
HIV, walaupun beberapa Δ32 homozigot telah terinfeksi virus X4 (Balotta
et al 1997. O'Brien et al 1997; Theodorou et al 1997). Selain itu,
heterozigositas memberikan perlindungan parsial terhadap infeksi (Dean
et al 1996; Samson et al 1996) dan perkembangan penyakit (Dean et al
1996; Huang et al 1996).
Menguraikan mekanisme masuknya HIV secara langsung telah
diterjemahkan ke dalam manfaat terapeutik. Saat ini, ada dua penghambat
masuk yang disetujui FDA, enfuvirtide dan maraviroc, sedangkan yang
lainnya berada dalam berbagai tahap perkembangan. Pada tahun 2003,
enfuvirtide menjadi penghambat masuk berlisensi pertama; Ini adalah
peptida residu 36-residu yang urutannya berdasarkan pada HR-C di gp41.
Akibatnya, enfuvirtide berperilaku seperti HR-C karena mengikat
intermediate HR-N intermediate dan menghambat formasi 6HB dan fusi
membran berikutnya (Wild et al 1992, 1993). Meskipun enfuvirtide adalah
penghambat fusi membran yang sangat spesifik dan efektif (Lalezari et al
2003; Lazzarin et al., 2003), penggunaannya terbatas karena harus
disuntikkan karena kekurangan bioavailabilitas oral. Baru-baru ini, inhibitor
fusi penghambat D-peptida protease telah dikembangkan yang juga
mencegah pembentukan 6HB, yang dapat mengatasi keterbatasan ini
(Eckert et al., 1999; Welch et al., 2007, 2010). Selain enfuvirtide, inhibitor
CCR5 maraviroc telah disetujui untuk penggunaan klinis. Maraviroc adalah
penghambat alosteron molekul kecil yang mengikat di dalam rongga
transmembran CCR5 yang mengakibatkan perubahan konformasi pada
domain loop ekstraseluler dari reseptor kemokin yang berinteraksi dengan
Env (Dorr et al., 2005). Penghambat molekul CCR5 serupa berada dalam
berbagai tahap pengujian (diulas di Tilton dan Doms 2009
UANG KUNCI YANG PENTING
Pemahaman kita tentang proses masuk HIV sebagian besar berasal dari
studi struktural dan in vitro. Sebagai bidang telah berevolusi, sekarang ada
peningkatan penekanan pada penempatan reaksi fusi membran yang
sekarang dipahami dengan baik dalam konteks seluler, menanyakan di
mana dan kapan masuk virus terjadi serta bagaimana partikel virus
ditransfer antar sel. Peningkatan detail struktural terus memberikan
wawasan tentang proses masuk dan menyarankan target untuk
penghambat molekul kecil dan antibodi penetralisir. Akhirnya, upaya
rekapitulasi fenotipe ccr5Δ32 telah dikembangkan dengan beberapa
diajukan ke tahap awal pengembangan klinis (Perez et al 2008).
Informasi Struktur Baru
Pemahaman lengkap tentang proses masuk HIV memerlukan informasi
struktural yang terperinci. Struktur CD4 saja dan kompleks dengan fragmen
inti gp120 telah dipecahkan untuk HIV (Kwong et al 1998; Huang et al.,
2005) dan simian immunodeficiency virus (SIV) (lihat Film 1) (Chen et al.,
2005) . Struktur postfusi 6HB dalam gp41 juga telah ditentukan (lihat Film
2) (Chan et al 1997, Weissenhorn et al 1997). Yang kurang adalah struktur
trimer Env asli dan coreceptors HIV. Namun, Wu et al. (2010) baru-baru ini
menggambarkan lima struktur independen CXCR4 yang terikat pada dua
molekul antagonis kecil yang berbeda, yang telah memberi wawasan
tentang struktur tersier dan kuartener dari protein asli (Gambar 2).
Pertama, kemokin dan Env telah dilaporkan melibatkan CCR5 dan CXCR4
dalam model dua lokasi dengan terminal amino reseptor kemokin sebagai
satu lokasi dan loop ekstraselular (ECLs), terutama ECL2, sebagai dua
lokasi. Meskipun orientasi domain terminal amino CXCR4 tidak dapat
dipecahkan karena fleksibilitas struktural, struktur kristal memberikan
wawasan resolusi tinggi ke situs pengikatan ECL2. Kedua, kelima struktur
tersebut menggambarkan CXCR4 sebagai homodimer (lihat Film 3), yang
sesuai dengan penelitian biokimia yang menyarankan CXCR4 ada sebagai
oligomer pada membran sel inang (Babcock et al., 2003). Meskipun
implikasi dimerisasi CXCR4 tetap tidak jelas untuk infeksi HIV, namun dapat
menjelaskan fenotipe dominan mutasi gen CX484 berbasis karboksi yang
menghasilkan sindroma WHIM, yang ditandai dengan kutil,
hipogamaglobulinemia, infeksi, dan myelokathexis (retensi neutrofil di
Sumsum tulang belakang) (Hernandez dkk., 2003). Akhirnya, antarmuka
homodimer yang diidentifikasi dapat mewakili CXCR4 atau target obat
CCR5 yang baru, karena CCR5 dan CXCR4 telah dilaporkan heterodimerisasi
secara in vivo (Sohy et al 2007, 2009). Studi struktural lebih lanjut
diperlukan untuk menentukan secara lebih baik interaksi tepat dari Env
dan coreceptor dan untuk menilai mekanisme pensinyalan dan
heterodimerisasi dengan reseptor kemokin lainnya.
Gambar 2
Model keterlibatan gp120 CD4 dan CXCR4. Studi struktural terbaru telah
meningkatkan pemahaman kita tentang interaksi molekuler antara gp120
(cyan) dan reseptornya. Di sini, CD4 (hijau) dan CXCR4 (ungu), ditunjukkan
sebagai monomer untuk kejelasan, ditunjukkan bersamaan dengan ikatan
pada gp120. (A) Tampilan lateral. (B) tampilan teratas Namun, jumlah
molekul CD4 dan coreceptor yang dibutuhkan untuk berinteraksi dengan
Env untuk menengahi fusi produktif tetap tidak diketahui. (C) Gp120
memiliki dua interaksi kunci dengan coreceptor. (1) Basis loop V3 berikatan
dengan domain terminal amino dari coreceptor, sedangkan ujung lingkaran
V3 berikatan dengan loop ekstraselular kedua (ECL2). Meskipun kedua
interaksi itu penting, strain virus berbeda pada ketergantungan masing-
masing interaksi. (Model struktural yang dihasilkan oleh Wu et al 2010.)
Dimana Apakah Entri Virus Terjadi?
Masuknya virus ke dalam sel dikendalikan baik dalam ruang dan waktu,
dengan parameter ini diatur oleh faktor sel inang yang berfungsi untuk
membuka potensi fusi membran protein membran virus. Banyak virus
memerlukan pengiriman oleh sel inang ke dalam kompartemen
intraseluler asam di mana pH rendah memicu perubahan konformasi
pemicu fusi membran (diulas dalam Marsh and Helenius 2006). Masuknya
HIV tidak memerlukan pH rendah; Melainkan dipicu oleh keterlibatan
reseptor (Stein et al 1987). Fakta bahwa HIV tidak memerlukan pH rendah
untuk entri seluler tidak menyiratkan bahwa fusi terjadi pada permukaan
sel. Padahal, tidak ada informasi spasial yang disediakan oleh mekanisme
pemicu. Meskipun demikian, sering diasumsikan bahwa sekering HIV di
permukaan sel karena beberapa pengamatan (diulas di Uchil and Mothes
2009). Pertama, ekspresi Env pada permukaan sel dapat memediasi fusi
sel-ke-sel, yang menunjukkan tidak hanya bahwa Env adalah satu-satunya
protein membran virus yang dibutuhkan untuk menghasilkan fusi namun
pH rendahnya jelas tidak diperlukan. Kedua, penelitian awal tentang entri
HIV menunjukkan bahwa agen lysomotropic, yang meningkatkan pH
endosom, tidak menghambat infeksi HIV (McClure et al 1988). Ketiga,
menghambat endositosis CD4 dalam sel dengan mengubah gen
sitoplasmiknya tidak mempengaruhi infeksi HIV (Maddon et al 1988).
Bersama-sama, penelitian ini menunjukkan bahwa entri HIV tidak
bergantung pada pH, namun tidak memberikan informasi pasti mengenai
apakah fusi terjadi pada permukaan sel atau dari dalam vesikula endositik,
meskipun dengan cara yang bebas pH.
Pertanyaan tentang di mana fusi membran-HIV terjadi baru-baru ini telah
diperiksa ulang (Miyauchi et al., 2009). Dengan menggabungkan uji
pencampuran lipid dan konten dengan pencitraan fluorescent virion
tunggal, Miyauchi dkk. Melacak lokasi fusi membran virus di sel HeLa yang
terlalu banyak mengekspresikan CD4, CCR5, dan CXCR4. Mereka
menemukan bahwa sementara pencampuran lipid dapat terjadi pada
permukaan sel, pencampuran isi hanya terjadi di kompartemen
perinuklear intraseluler dan dengan demikian menyimpulkan bahwa fusi
lengkap memerlukan endositosis. Apakah hal ini selalu harus ditentukan
karena variabilitas genetik HIV dan beragam jenis sel yang dapat
menginfeksi membuat generalisasi menjadi sulit.
Pertanyaan yang menarik adalah apakah situs masuk penting; Berkenaan
dengan penggunaan inhibitor masuk, mungkin tidak: Antagonis coreceptor
dan penghambat fusi memblokir infeksi virus secara in vitro dan in vivo,
dan antibodi penetralitas juga berfungsi dengan baik. Namun, situs masuk
lebih cenderung memiliki dampak pada kemungkinan terjadinya infeksi
produktif yang sebenarnya terjadi. Misalnya, setelah keterikatan seluler,
HIV dapat secara aktif berselancar di sepanjang selaput seluler dari
filopodia atau mikrovili ke tubuh sel. Proses yang bergantung pada aktin ini
memerlukan keterlibatan reseptor dan berfungsi untuk meningkatkan
efisiensi infeksi. Berselancar ke tubuh sel mungkin memiliki beberapa
konsekuensi yang menguntungkan bagi virus. Pertama, ini bisa membantu
pengambilan HIV endositik. Kedua, virus ini bisa membawa virus ke daerah
membran yang memiliki kadar coreceptor atau molekul penting sinyal hilir
yang lebih tinggi (McDonald et al., 2003). Ketiga, memungkinkan terjadinya
peristiwa fusi lebih dekat ke nukleus, yang merupakan sasaran utama HIV.
Dengan demikian, situs lampiran HIV awal kemungkinan acak; Namun, HIV
membajak mesin seluler untuk melintasi membran sel ke tempat masuk
yang lebih menguntungkan, baik pada membran plasma atau endosom,
yang pada akhirnya berfungsi untuk meningkatkan efisiensi infeksi
(Lehmann et al., 2005).
Sel-Sel Transfer dan Synapse Synological
Secara in vitro, langkah pembatas laju infeksi virus adalah keterikatan pada
sel inang. In vivo, virion yang baru diproduksi mungkin menemukan sel
yang segera berdampingan dan tidak terinfeksi. Dalam beberapa kasus,
transfer virus dari satu sel ke sel lainnya adalah proses khusus, seperti
pada kasus sel dendritik (DC), yang merupakan sel antigen-presenting
profesional (APC) yang mengais pinggiran, antigen sampling. Mereka
biasanya ditemukan di mukosa dan oleh karena itu dapat ditemukan oleh
HIV selama transmisi. Pada pengikatan antigen, DC bermigrasi ke kelenjar
getah bening, memproses, dan menyajikan antigen ke sel T untuk memicu
respons imun adaptif. DC relatif resisten terhadap infeksi HIV produktif
karena kombinasi ekspresi CD4 dan coreceptor yang rendah, faktor
pembatasan host, blok transkripsi HIV pasca integrasi, dan faktor lain yang
tidak diketahui (Bakri et al., 2001). Namun, mereka mengekspresikan
beragam faktor pelekatan yang memfasilitasi internalisasi dan pengolahan
patogen sebelum presentasi antigen. HIV, bersama dengan virus (Igakura
et al 2003; Yang et al., 2004), dapat memanfaatkan jalur ini untuk
meningkatkan efisiensi dan diseminasi infeksi (Gambar 3) (diulas di Piguet
dan Steinman 2007
Gambar 3
Model transfeksi CD4-T yang dimediasi oleh DC. (A) DC menangkap dan
memusatkan virion pada kompartemen yang mudah dijangkau dari
permukaan trips. (B) sel T CD4 +, yang mengandung tonjolan membran,
mengikat DC. (C) Tonjolan sel CD4 + menyerang kompartemen yang
mengandung virus dan mengikat HIV secara efisien. (D) Virus kemudian
bermigrasi ke arah sel tubuh untuk memulai infeksi. (Gambar direproduksi
dari Felts et al. 2010; dicetak ulang, dengan izin, dari Prosiding National
Academy of Sciences © 2010.)
Cameron dkk. (1992) pertama kali menunjukkan bahwa DC dapat
mengkatalisis infeksi HIV pada sel CD4 + sel hati tanpa dirinya terinfeksi
secara produktif. Setiap DC dapat mengikat hingga beberapa ratus virion
(McDonald et al., 2003) kemungkinan besar melalui lectin tipe-C seperti
DC-SIGN (Geijtenbeek et al., 2000; Turville et al., 2002). Setelah mengikat,
virion diekstraksi menjadi kompartemen tahan trypsin (Geijtenbeek et al.,
2000), dan kemudian setelah DC mengikat sel T, virus yang diinternalisasi
bermigrasi ke antarmuka sel T: DC et al. 2003) di mana Ia menemukan
membran sel T yang membentuk sinapsis menular, serupa dengan sinaps
imunologis yang terbentuk pada pengikatan MHC-TCR (diulas di Vasiliver-
Shamis et al., 2010). Selain berkonsentrasi secara efisien dan
mempresentasikan HIV di tempat kontak sel T, sinapsis menular ditandai
dengan perekrutan CD4, CCR5, dan CXCR4.
Kemajuan terbaru dalam mikroskop elektron telah memungkinkan
penelitian struktural tiga dimensi (3D) tentang sinapsis menular yang telah
menjelaskan mekanisme ini (Felts et al., 2010). DC menghasilkan tonjolan
membran yang menelan lingkungan ekstraselular sekitarnya, menjebak
virion di kompartemen yang mudah dijangkau namun terlindungi. Masih
belum jelas apakah ini terjadi sebelum atau sesudah virion mengikat dan
apakah itu Env diinduksi. Ketika sel CD4 + T menghubungi DC, mereka
memperpanjang filopodia, memperkaya jumlah CD4 dan coreceptor, ke
dalam kompartemen DC yang teragregasi yang mengandung virion terikat
(Gambar 3). Bersama-sama, pengikatan HIV yang efisien, melakukan
relokasi sampai pada titik kontak sel T + CD4, dan rekrutmen reseptor entri
HIV yang diminta mempromosikan infeksi HIV pada sinapsis menular
(McDonald et al 2003; Hubner et al., 2009).
Faktor Keterlibatan Novel: α4β7 Integrin
Meskipun penularan HIV dari sel ke sel mengurangi efisiensi infeksi,
mekanisme pembentukan sinapsis virologi masih belum jelas. Integrin
α4β7 telah dilaporkan mengikat gp120; Menginduksi aktivasi integrase
LFA-1 (αLβ2), yang berkontribusi terhadap pembentukan sinaps imunologis
(diulas di Bromley et al., 2001); Dan kemudian meningkatkan efisiensi
infeksi in vitro (Arthos et al 2008; Cicala et al., 2009).
Α4β7 adalah protein heterodimerik yang terdiri dari subunit α4 dan β7
yang bila diekspresikan pada sel CD4 + T memfasilitasi homing ke usus dan
jaringan mukosa lainnya. Aktivasi dan pengekspresiannya diatur oleh asam
retinoat secara in vitro, yang mungkin juga disekresikan secara lokal oleh
DC mukosa in vivo. Penemuan α4β7 sebagai faktor keterikatan sangat
diminati karena HIV mengganggu integritas penghalang mukosa dan secara
khusus mengurangi sel CD4 + T, yang lebih aktif dan mengekspresikan
kadar CCR5 yang lebih tinggi daripada sel CD4 + perifer. Α4β7 diperkirakan
akan mengikat motif tripeptida LDV (Leu-Asp-Val) pada loop variabel kedua
(V2) gp120, dengan ini menghasilkan aktivasi antigen terkait fungsi limfosit
1 (LFA-1). Sebagai tambahan, α4β7 melakukan colocalizes dengan CD4 dan
CCR5 pada sinapsis virologi, yang selanjutnya dapat meningkatkan infeksi.
Blokade α4β7 dengan antibodi monoklonal atau peptida menunda replikasi
HIV secara in vitro, yang selanjutnya mendukung perannya dalam infeksi
HIV (Cicala et al., 2009). Pekerjaan di masa depan diperlukan untuk menilai
apakah ada efek perlindungan untuk menghambat interaksi HIV-α4β7
secara in vivo, dan untuk memvalidasi faktor pelekatan baru ini sebagai
target terapeutik.
PETUNJUK MASA DEPAN SIGNALING
Transduksi Sinyal yang Dimediasi oleh HIV Env
HIV Env memiliki kemampuan untuk menengahi kaskade transduksi sinyal
melalui CD4 dan coreceptors, meskipun signifikansi fisiologis pada entri
virus, replikasi, dan patogenesis tetap kontroversial. Penemuan terbaru
telah memberikan bukti bahwa pemberian sinyal memainkan peran
penting dalam keadaan tertentu. Pada bagian ini, kami meninjau secara
singkat apa yang diketahui tentang Env yang memberi sinyal melalui
reseptor dan coreceptornya dan menyoroti beberapa penemuan terakhir
di lapangan.
Transduksi Sinyal melalui CD4
Selama pertemuan antara sel CD4 + T dan APC, molekul CD4 bertindak
untuk meningkatkan pemberian sinyal melalui TCR karena melibatkan
peptida serumpun yang terikat pada kelas kompleks histokompatibilitas
kompleks II (pMHC). Perekrutan tirosin kinase Src-keluarga protein Lck ke
sinaps imunologis melalui interaksi dengan ekor sitoplasma hasil CD4
dalam fosforilasi dari aktivasi aktivasi berbasis imunoseptor-tirosin (ITAM)
yang ada pada CD3γ, CD3δ, CD3ε, dan TCR-ζ Subunit kompleks TCR dan
interaksi dengan molekul efektor (Love and Hayes 2010; Padhan and
Varma 2010). Dua kali lipat ITAM pada botol subunit TCR-it merekrut
tirosin tirosin protein Syk-keluarga ZAP-70, yang pada gilirannya
memfosforilasi protein perancah LAT dan SLP-76 yang merekrut banyak
protein sinyal tambahan, yang pada akhirnya menghasilkan aktivasi dan
proliferasi sel T Ditinjau dalam Love and Hayes 2010).
Meskipun HIV telah terbukti menandakan melalui jumlah CD4 yang
mengikat (Hivroz et al., 1993; Briant et al., 1998) dan untuk meningkatkan
aktivitas Lck (Juszczak et al 1991), masih belum jelas apakah pemberian
sinyal sangat penting untuk infektivitas. Meskipun beberapa penelitian
awal dengan bentuk CD4 yang terpotong menunjukkan bahwa pemberian
sinyal melalui CD4 tidak diperlukan untuk masuknya HIV (Benkirane et al
1994; Tremblay et al 1994), sebagian besar tes ini dilakukan pada sel dan
menggunakan infeksi virus bebas sel . Beberapa studi yang lebih baru telah
menunjukkan peran potensial untuk sinyal Env-CD4 dalam konteks sel-sel
yang menyebar di sinapsis menular, yang seperti dicatat sebelumnya
adalah persimpangan khusus antara sel-sel yang menyerupai sinaps
imunologis antara sel-sel APC dan T. Salah satu fitur utama dari sinaps
imunologis adalah bahwa sel T menghentikan migrasi melalui jaringan
kelenjar getah bening atau jaringan target untuk memungkinkan interaksi
berkelanjutan dengan APC. HIV gp120 mampu menangkap migrasi sel T
CD4 + primer yang diaktivasi dengan adanya ICAM-1 dan secara spontan
menginduksi pembentukan sinaps virologi (Vasiliver-Shamis et al 2008).
Transduksi sinyal melalui CD4 dan Lck kemudian ditemukan bertanggung
jawab atas penipisan F-actin korteks di bawah sinapsis virologi
menggunakan sistem model membran planar, yang memungkinkan
pengalihan inti virus dari membran plasma ke nukleus (Vasiliver-Shamis et
al. 2009). Studi ini menunjukkan bahwa pemberian Env melalui CD4
mungkin berperan dalam masuknya HIV dalam kondisi fisiologis.
Transduksi Sinyal melalui CCR5 dan CXCR4
CCR5 dan CXCR4 keduanya merupakan anggota dari keluarga
penggambaran tujuh tipe transmembran dari GPCR heterotrimerik.
Keluarga protein ini ditandai oleh domain terminal amino ekstraselular,
tujuh domain pembentuk selaput yang membentuk tiga loop ekstraselular
dan tiga intraselular, dan domain ekor sitoplasma. Terminus amino (satu
lokasi) dan tiga ECL (situs dua) bersama-sama membentuk kantong
pengikat kemokin kognitif, yang tampaknya menempel pada reseptor dan
mengirimkan sinyal dalam proses pengikatan dua sisi (ditinjau di Clark-
Lewis et al. 1995). Loop intraselular dan ekor sitoplasma berikatan dengan
protein G heterotrimer yang pada gilirannya memediasi fungsi efektor.
Kemampuan HIV untuk memberi sinyal melalui reseptor kemokin telah
didokumentasikan sejak lama setelah identifikasi mereka sebagai
coreceptors. Studi awal menguji kebutuhan HIV untuk memberi sinyal
melalui coreceptor saat masuk ke sel dengan menghambat subunit Gαi
melalui toksin pertusis (PTX) (Cocchi et al 1996) atau dengan menciptakan
mutan kemokin yang menghapus kemampuan untuk memobilisasi Ca2 +
intraselular, utusan kedua kunci Dalam jalur transduksi sinyal (Alkhatib et
al 1997: Farzan et al 1997; Gosling et al 1997). Tidak satu pun dari
intervensi ini menghalangi kemampuan HIV memasuki sel, yang
menyebabkan kesimpulan bahwa pemberian sinyal dapat disebarkan
untuk infeksi virus dan replikasi pada sel target. Selama dekade berikutnya,
banyak penelitian meneliti persyaratan untuk sinyal coreceptor selama
masuknya HIV, dengan hasil yang terkadang kontradiktif (diulas di Wu dan
Yoder 2009). Seringkali, percobaan menggunakan garis sel atau sel primer
yang diaktifkan akan menunjukkan bahwa pemberian sinyal tidak
diperlukan untuk masuk, sedangkan percobaan dengan sel primer istirahat
akan menunjukkan peran untuk pemberian sinyal. Karena sebagian besar
sel T dalam jaringan limfoid berada dalam keadaan beristirahat atau
nondividing - terutama sebelum infeksi HIV - memeriksa peran pensinyalan
dalam kondisi ini sangat relevan.
Beberapa penelitian terbaru menunjukkan bahwa HIV bergantung pada
sinyal reseptor kemokin untuk infeksi yang efisien pada sel target.
Pertama, Yoder dan rekan (2008) meneliti kemampuan X4 HIV untuk
menginfeksi sel T CD4 + yang beristirahat dan menemukan bahwa HIV-
dimediasi, sinyal Gαi melalui CXCR4 diperlukan untuk masuk. Jalur ini
memicu aktivasi molekul aktin-depolimerisasi seluler, cofilin, mengubah
dinamika aktin kortikal di dekat permukaan sel dan memfasilitasi fusi virus.
Selain itu, penelitian ini menyarankan adanya peran cofilin dalam
pergerakan kompleks preintegrasi virus (PIC) menuju nukleus. Berbeda
dengan model sel istirahat yang digunakan dalam penelitian ini, sel T CD4 +
yang paling aktif dan bersepeda membongkar aktin kortikal tanpa
persyaratan cofilin. Meskipun penelitian ini terbatas pada masuknya virus
CXCR4, pengaktifan cofilin juga diperlukan bagi virus CCR5 untuk memasuki
sel memori yang beristirahat dan tidak ada, seperti mayoritas sel T CD4 +
yang ada di lamina propria usus.
Rangkaian percobaan kedua dari Harmon dan rekan (2010) menunjukkan
bahwa HIV juga menandakan melalui subunit Gαq, menghasilkan aktivasi
fosfolipase C dan Rac. Rac dan tirosin kinase Abl kemudian dihubungkan
dengan kompleks Wave2 melalui protein adaptor Tiam-1 dan IRSp53, yang
mempromosikan nukleasi dan polimerisasi aktif Arp2 / 3. Pemblokiran
aktivasi kompleks Wave2 dengan RNA interfering kecil (siRNAs) atau
inhibitor Abl kinase menahan masuknya HIV pada tahap hemifusion.
Bersama-sama, eksperimen ini menunjukkan peran penting untuk
pemodelan ulang aktin yang dipicu sinyal amplop-coreceptor selama
masuknya HIV, terutama pada kasus sel T CD4 + yang beristirahat.
Peran pensinyalan Env-mediated melalui CD4 dan coreceptor dalam proses
masuk HIV tetap tidak didefinisikan secara pasti, namun tampaknya
semakin penting bahwa ada peran penting untuk transduksi sinyal dengan
kondisi dan tipe sel yang sesuai secara fisiologis. Tema umum di antara
penelitian ini adalah perlunya memberi sinyal dalam reorganisasi aktin
sitoskeletal, yang mungkin terlibat dalam beberapa proses virus utama
termasuk "berselancar," melalui penghalang aktu kortikal di dekat
membran plasma, dan pergerakan virus PIC ke Inti.
TERMASUK REMARKS
Entri HIV adalah proses aktif yang melibatkan pembajakan berbagai
komponen mesin seluler. Meskipun keterlibatan CD4 dan coreceptor
adalah kejadian paling penting dalam proses masuk, selancar virus,
endositosis, transmisi sel ke sel, dan sinyal yang dimediasi reseptor
mungkin berperan dalam meningkatkan efisiensi infeksi dengan mengatasi
berbagai batasan host. Faktor-faktor tersebut mungkin mempengaruhi
efisiensi penyebaran tropisme sel inang, dan perkembangan penyakit dan
merupakan area kritis dalam penyelidikan di masa depan. Meskipun
banyak pertanyaan tetap ada, yang paling penting adalah bagaimana kita
bisa memanfaatkan pengetahuan kita tentang entri HIV dengan lebih baik
untuk keuntungan terapeutik? Maraviroc dan enfuvirtide telah
menunjukkan keampuhan penghambatan masuk, namun target terapeutik
baru dibutuhkan dan ini mungkin mewakili molekul host yang dikooptasi
oleh HIV.