BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Tujuan
a. Menganalisa / menentukan kadar NH4+ menggunakan pereaksi Nessler
dan garam Rochelle dalam sampel.
b. Memahami analisis kadar NH4+.

1.2 Landasa Teori

1.2.1. Efek nitrat dan gizi besi pada beberapa enzim asimilasi nitrat dan
metabolit dalamn Spirulina platensis

Pendahuluan
Cyanobacteria merupakan bakteri fotosintetik yang menggunakan sinar
matahari sebagai sumber energi, air sebagai donor elektron, dan karbon
dioksida sebagai sumber karbon untuk menghasilkan makanan. Mereka
menggunakan oksigen untuk mendukung kehidupan dan biasanya hidup
di segar atau air laut. Mereka menghasilkan bahan organik dan dengan
demikian mereka dikenal sebagai produsen primer (Ozturk Urek dan
Tarhan, 2011; Tian et al., 2014). Cyanobacterium Spirulina platensis
adalah filamen, nitrat-memanfaatkan, nonnitrogen- memperbaiki,
organisme fotosintesis yang kaya akan pigmen seperti klorofil a,
karotenoid, dan phycobiliproteins. Properti ini membuat sangat penting
dalam gizi, industri, dan bioteknologi lingkungan (Tarko et al., 2012).
Ini adalah makanan sehat dan juga memiliki sifat defensif terhadap
penyakit virus dan anemia. Hal ini digunakan sebagai pewarna karena
kandungan pigmen kaya (Henrikson, 2010; Singh et al., 2014). Sifat
antioksidan dan vitamin yang tinggi, protein, karbohidrat, dan mineral
nilai S. platensis menghambat pertumbuhan tumor dan kekurangan gizi.
S. platensis adalah kaya akan kandungan protein dan mengandung 60%
protein -70% oleh berat kering (Jha et al., 2007), termasuk 9 amino
esensial asam yang dianggap protein berkualitas tinggi (Belay, 2008).
Nitrogen merupakan elemen penting karena nitrogen asimilasi atau
penggabungan yang paling penting makromolekul fungsional dan
struktural dalam organisme, seperti asam amino. Nitrogen adalah yang
paling penting. Unsur karena kontribusinya sekitar 10% menjadi Sel
cyanobacterium (Perez-Garcia et al., 2011), dengan 15% tingkat ini
terdiri dari protein yang didirikan dan nukleat asam (Inokuchi et al.,
2002).
Mineral adalah anggota penting lain yang terlibat dalam kegiatan
pertumbuhan dan enzimatik S. platensis (Tarko et al., 2012).
Pertumbuhan dan aktivitas metabolik dari cyanobacteria mungkin
dibatasi oleh berbagai mineral ini. Mereka mempengaruhi pertumbuhan
dan aktivitas metabolik dari Spirulina (Ozturk Urek dan Tarhan, 2011).
Salah satu yang paling penting elemen untuk pertumbuhan Spirulina
adalah besi (Fe). Ini adalah faktor pembatas untuk produksi pigmen
(klorofil a). Penyelidikan hubungan antara klorofil sebuah biosintesis
dan besi menunjukkan bahwa penyebab kekurangan zat besi klorosis.
Ini mengurangi klorofil a dan heme produksi dan merepresi porfirin
biosintesis (Belkhodja et al., 1998; Briat et al., 2007; Reinbothe et al.,
2010). Selain itu, Fe merupakan unsur penting dan signifikan bagi
enzim assimilatory nitrogen. Struktur dari enzim terdiri dari Fe sebagai
kofaktor. Cluster kubik Fe dan S merupakan jenis yang sangat umum
dari kofaktor dalam nitrogen protein assimilatory. Nitrat reduktase (NR)
mengikat 1 [4Fe-4S] klaster dan 1 molybdopterin kofaktor dengan
sistein (Kaca et al., 2009). Reduktase nitrit (NiR) adalah besi kaya
protein yang mengandung 1 [4Fe-4S] klaster dan 1 heme. Itu pusat
kelompok heme juga mengandung 1 atom Fe (Milligan dan Harrison,
2000). Glutamat sintase (GOGAT) adalah salah satu enzim assimilatory
nitrogen yang mengandung [4Fe-4S] klaster dalam struktur (Kaca et al.,
2009).
 Cyanobacteria dapat mengasimilasi berbagai jenis sumber nitrogen,
terutama nitrat, urea, ammonia, amino asam, pepton, ekstrak ragi, dan
purin (Perez-Garcia et al., 2011). Nitrat adalah bentuk tersedia nitrogen
dalam alam dan paling banyak digunakan oleh cyanobacteria (Herrero
et al., 1986). Asimilasi nitrat membutuhkan sejumlah besar karbon,
proton, dan energi. Asimilasi nitrat dalam cyanobacteria terdiri dari 3
langkah dasar (Perez-Garcia et. al, 2011): 1) nitrat diangkut ke dalam
sitoplasma oleh transporter spesifik, 2) ion nitrat berkurang untuk
amonium ion dengan menjadi katalis 2 enzim sebagai NR (EC 1.7.7.2)
dan NiR (EC 1.7.7.1), dan 3) ion amonium memasukkan ke dalam
senyawa karbon sebagai α-amino kelompok L-glutamat dalam sintetase
glutamin (GS; EC 6.3.1.2) / GOGAT (EC 1.4.1.14) jalur (Devriese et
al., 2001). Enzim pertama asimilasi nitrat adalah NR, yang
mengkatalisis reduksi nitrat. Dikurangi nukleotida piridin digunakan
sebagai donor elektron untuk Reaksi (Shah, 2008). NiR mengurangi
nitrit menjadi amonium. Ferredoxin digunakan sebagai donor elektron
dalam reaksi dan transfer 6 elektron (Perez-Garcia et al., 2011). GS
adalah Enzim yang mengkatalisis asimilasi amonium menjadi glutamin.
Secara berurutan, GOGAT mengkatalisis transamidation glutamin-
amido nitrogen untuk 2-oksoglutarat untuk membentuk 2 mol glutamat
(Nalbantoğlu, 2000;. Sood et al, 2002). Asimilasi nitrogen ke dalam
makromolekul seperti asam amino dan protein memerlukan komponen
karbon dalam siklus karbon. Karbon dan nitrogen metabolisme
berinteraksi satu sama lain dalam cyanobacteria (Inokuchi et al., 2002;
Perez-Garcia et al., 2011). Mereka menggunakan karbon disediakan
dari berasimilasi karbon organik oleh pertumbuhan heterotrofik atau
respirasi CO tetap 2 oleh pertumbuhan autotrophic. Mereka juga
berbagi energi yang dihasilkan dalam elektron mitokondria rantai
transportasi dan siklus TCA. Kebutuhan cyanobacteria senyawa karbon
dalam bentuk keto asam (oksaloasetat dan 2-oksoglutarat) dan ATP dan
NADH untuk energi untuk menghasilkan asam amino dalam asimilasi
nitrat proses. Dalam kedua tumbuh autotrophic dan heterotrofik sel,
asam ATP, NADH, dan keto diperoleh dari TCA cycle (Fernandez dan
Galvan, 2007).
Asimilasi nitrat adalah metabolisme yang sangat penting jalur.
Proses ini menyebabkan biosintesis glutamin dan asam glutamat amino.
Asam amino ini memiliki biokimia dan industri penting. Sebagai
contoh, glutamat dan glutamin digunakan sebagai aditif dalam industri
makanan. Baru-baru ini, aktivitas enzim dalam asimilasi nitrogen dan
karakteristik mereka diselidiki dalam banyak tanaman dan beberapa
cyanobacteria (Sood et al, 2002;. Silveira et al., 2003; Penjual et al.,
2004). Asimilasi nitrat di S. platensis (Gamont) Geitler organisme
masih merupakan masalah rasa ingin tahu. Itu Tujuan dari penelitian ini
adalah untuk mengetahui pengaruh yang berbeda konsentrasi nitrat pada
beberapa asimilasi nitrat enzim seperti NR, NiR, GS, dan GOGAT di S.
platensis. Selain itu, hubungan antara nitrat yang berbeda konsentrasi
(10-180 mM) dan beberapa metabolit tersebut sebagai klorofil a, Total
karotenoid, prolin, piruvat, jumlah karbohidrat, dan phycobiliprotein
[phycocyanin (BPK), allophycocyanin (APC), dan phycoerythrin (PE)]
isi diselidiki di S. platensis menurut inkubasi periode.

Bahan dan metode

1. Kondisi mikroorganisme dan budaya
Cyanobacterium S. platensis (Gamont) Geitler 1952 digunakan
dalam penelitian ini. Organisme ini disediakan oleh Fakultas
Budidaya dari Çanakkale Onsekiz Mart University. Untuk
mempersiapkan dan mempertahankan inokulum, Media Zarrouk
yang digunakan (Zarrouk, 1966). The dimanfaatkan karbonat-
bikarbonat penyangga memberikan pH 9,0 ± 0,2. S. platensis telah
dibudidayakan dalam budaya batch yang mengandung 1500 ml
media pada suhu 30 ° C. Untuk kondisi pertumbuhan S. platensis, 10,
30 (kondisi kontrol), 60, 100, dan 180 konsentrasi natrium nitrat mM
 digunakan. Setelah penentuan konsentrasi natrium nitrat terbaik
untuk pertumbuhan S. platensis, 10 (kondisi besi-terbatas), 50
(kondisi besi-cukup), dan 100 pM (kelebihan-zat besi menengah)
konsentrasi zat besi yang mengandung diadili di kehadiran
konsentrasi nitrat natrium optimum di S. medium pertumbuhan
platensis. Alasan untuk mencoba konsentrasi besi yang berbeda
dalam medium pertumbuhan adalah untuk mencapai pertumbuhan
optimal dan produksi metabolit, pigmen, dan aktivitas enzimatik di
S. platensis. Budaya diinokulasi ke densitas optikal awal (600 nm)
dari sekitar 0,2. Kultur dicampur dan menggelegak menggunakan
udara disaring secara terus menerus. Penerangan pada 2500 lx
intensitas cahaya disediakan oleh lampu neon putih. Intensitas
cahaya diukur dengan pengukur cahaya digital (Luxtron LX-101).
Semua reagen yang digunakan adalah analitis grade.

2. Metode analisis
Sel-sel yang dipanen secara berkala dengan sentrifugasi dan dicuci
dengan air suling. Yang diendapkan. Sel ditimbang, dan 50 mM
bufer fosfat (pH 7) ditambahkan pada tingkat 12,5 mL / 1 g sel. Sel-
sel yang dihomogenisasi pada 8000 rpm selama 1 menit dan 9500
rpm selama 1 min dengan interval 30-s. Setelah sentrifugasi, yang
diperoleh supernatan digunakan untuk penentuan kadar protein dan
phycobiliproteins, karbohidrat total, dan piruvat isi. Tingkat protein
diuji menggunakan bovine serum albumin sebagai standar dengan
metode Bradford (1976). Klorofil a dan isi total karotenoid diukur
seperti yang dijelaskan oleh Lichtenthaler dan Wellburn (1983).
BPK, APC, dan PE isinya ditentukan oleh metode dari Tarko et al.
(2012). Konten prolin diuji oleh metode Bates dkk. (1973). Konten
piruvat diuji oleh 2,4-dinitrophenyllhydrazine reagen (Friedeman dan
Haugen, 1943). Total kandungan karbohidrat diperoleh dengan
 fenol-asam sulfat dengan metode Dubois (1956). Tingkat serapan
nitrat diuji dengan metode Bartzatt dan Donigan (2004).

3. Prosedur assay enzim

Sel-sel yang dipanen secara berkala tergantung pada inkubasi hari
dengan sentrifugasi dan dicuci dengan air suling. Supernatan
digunakan untuk penyerapan nitrat tes. Sel-sel yang diendapkan
ditimbang dan dibekukan pada -20 °C untuk tes enzim.
Kegiatan NR ditentukan dengan metode Jha et al. (2007). Satu unit
aktivitas NR didefinisikan sebagai kuantitas dari enzim yang
dibutuhkan untuk memproduksi 1 umol nitrit per menit pada 25 °C.
Aktivitas enzim NiR ditentukan dengan metode Losada dan Paneque
(1971). Satu unit dari NiR didefinisikan sebagai jumlah enzim yang
diperlukan untuk mengurangi 1 umol nitrit per menit pada 30 °C.
Kegiatan GS ditentukan dengan metode Berteli et al. (1995). Satu
unit GS didefinisikan sebagai jumlah enzim yang dibutuhkan untuk
menghasilkan 1 umol dari GGH-kompleks per menit pada 30 °C.
Aktivitas NADH-GOGAT ditentukan dengan metode Chen dan
Cullimore (1988). NADH oksidasi adalah diukur pada 340 nm dan
aktivitas enzim didefinisikan sebagai nmol mL-1.

4. Analisis statistik
Untuk signifikansi statistik analisis, uji Tukey digunakan. Nilai
tersebut ditentukan setelah 3 percobaan terpisah.

Hasil
Perubahan serapan nitrat, OD600, Biomassa kering, pH, tingkat
protein, BPK, APC, PE, klorofil a, Total karotenoid, prolin, piruvat,
jumlah karbohidrat, dan beberapa aktivitas enzim asimilasi nitrat di S.
platensis diselidiki dalam medium Zarrouk dengan berbeda konsentrasi
natrium nitrat (10-180 mM) selama masa inkubasi. Media Zarrouk ini
digunakan untuk S. Studi platensis, dan berisi 30 mM natrium nitrat dan
35,9 konsentrasi besi pM. Demikian pula, media adalah digunakan
untuk produksi industri Spirulina (Belay, 2008). Media standar Zarrouk
ini digunakan sebagai kontrol dalam kami eksperimen.

1. Perubahan dalam penyerapan nitrat dan tingkat biomassa

kering tergantung konsentrasi natrium nitrat yang berbeda
dalam S. platensis
Dalam media pertumbuhan S. platensis, serapan nitrat
tingkat dipercepat dengan meningkatnya konsentrasi nitrat. Seperti
pada hari ke-10 inkubasi konsentrasi periode sisa nitrat dalam
pertumbuhan media yang mengandung 10, 30, 60, 100, dan 180 mM
natrium nitrat diperoleh sebagai 39,2 ± 1,4%, 77,43 ± 3,2%, 66,73 ±
3,1%, 48,88 ± 1,7%, dan 59,99 ± 2,9%, masing-masing. Menurut
hasil, serapan nitrat tertinggi diamati dalam medium yang
mengandung 30 mM sodium nitrat.
Dalam media pertumbuhan yang mengandung natrium yang
berbeda konsentrasi nitrat, tingkat pertumbuhan S. platensis
ditentukan oleh tingkat biomassa kering tergantung pada waktu
inkubasi (Gambar 1b). Pertumbuhan tertinggi di organisme diamati
pada hari ke-14 dalam medium mengandung 100 mM natrium
nitrat. Tertinggi kering biomassa ditentukan pada hari ke-14 (95,06
± 3,4 mg mL-1 di media ini). Setelah hari ke-14 inkubasi Hasil
periode tidak menunjukkan perubahan penting. Demikian pula,
OD600 tertinggi dan tingkat protein ditentukan pada tanggal 15 di
media yang sama. Tidak ada perbedaan pH penting antara natrium
nitrat diuji konsentrasi selama masa inkubasi.
2. Perubahan dalam produksi pigmen dengan berbeda konsentrasi
natrium nitrat di S. platensis
Klorofil a, Total karotenoid, dan isi BPK S. platensis
dengan konsentrasi nitrat natrium yang berbeda. Tertinggi klorofil a
dan jumlah karotenoid isi ditentukan dalam medium mengandung
100 mM natrium nitrat (106,3 ± 5,2 mg g-1 dan 33,002 ± 1,3 mg g-1 ,
Masing-masing) pada hari ke-14. Namun, isi BPK tertinggi S.
platensis adalah 1,406 ± 0,05 mg g-1 dalam medium yang sama pada
hari ke-12 dari inkubasi periode. Demikian pula, APC dan PE isi
tertinggi 0.47 ± 0.01 mg g-1 dan 222 ± 8,7 mg g-1, Masing-masing, di
medium yang sama pada hari yang sama; 10 mM natrium nitrat
memiliki nitrogen cukup untuk produksi pigmen. Dalam hal ini
media isi pigmen S. platensis beberapa lipatan yang lebih rendah
dibandingkan dengan 100 mM natrium nitrat.

3. Perubahan dalam prolin, piruvat, dan jumlah Kandungan

karbohidrat dengan berbeda natrium nitrat konsentrasi di S.
platensis
Prolin, piruvat, dan karbohidrat total isi S. platensis dengan
konsentrasi nitrat natrium yang berbeda terhadap waktu inkubasi.
prolin dan piruvat tertinggi isi diperoleh pada tanggal 12 inkubasi
(36,5 ± 1,3 umol g-1 dan 146 ± 7,0 mg g-1, Masing-masing) dalam
medium yang mengandung 100 mM natrium nitrat. Total
kandungan karbohidrat tertinggi 2,824 ± 0,1 mg g-1 dalam medium
yang mengandung 100 mM natrium nitrat pada hari ke-15 inkubasi.

4. Perubahan dalam aktivitas enzim asimilasi nitrat tergantung

konsentrasi nitrat natrium dalam S. platensis
Enzim pertama dari jalur asimilasi nitrat adalah NR.
Kegiatan yang diukur dengan masa inkubasi pertumbuhan media S.
platensis mengandung berbeda natrium nitrat konsentrasi.
 Maksimum kegiatan NR dan NiR diperoleh pada hari-hari 12 dan
10 inkubasi periode, masing-masing. NR dan NiR kegiatan tertinggi
diperoleh dalam medium yang mengandung 100 mM natrium nitrat
(102,36 ± 3,65 U mL-1 dan 600,83 ± 19,5 U mL-1. masing-masing).
Kegiatan NiR tertinggi sekitar 1,24 kali lebih tinggi dibandingkan
dengan kontrol (P <0,05).
GS bertanggung jawab untuk asimilasi awal amonium, dan
100 mM natrium nitrat menstimulasi aktivitas GS saat dibandingkan
dengan 10, 30, dan 60 mM natrium nitrat. Di Sebaliknya, 180 mM
natrium nitrat memiliki hambat efek pada aktivitas GS. GOGAT
adalah enzim terakhir dari GS / GOGAT jalur. Kegiatan GS dan
GOGAT yang diukur selama masa inkubasi dengan berbeda
konsentrasi natrium nitrat. Maksimum GS dan kegiatan GOGAT
ditentukan pada hari ke-12 dan hari ke-10 masa inkubasi, masing-
masing. Itu GS dan GOGAT kegiatan tertinggi yang diamati pada
medium yang mengandung 100 mM natrium nitrat (0,1084 ± 0.01 U
mL-1 dan 34,726 ± 1,3 U mL-1, Masing-masing).

5. Perubahan dalam penyerapan nitrat dan tingkat biomassa

kering dengan konsentrasi zat besi yang berbeda di S. platensis
Yang terbaik pertumbuhan, produksi pigmen, dan nitrogen
aktivitas enzim asimilasi dicapai dalam medium mengandung 100
mM natrium nitrat. Efek dari berbagai konsentrasi (10-100 M) besi
pada serapan nitrat dan tingkat biomassa kering di hadapan 100 mM
natrium nitrat. konsumsi Nitrat adalah lebih rendah dalam medium
besi-terbatas daripada di media lain. Pada hari ke-17 dari masa
inkubasi, eksternal konsentrasi nitrat adalah 44,37 ± 3,2 mM dalam
besi-terbatas sedang, sementara itu 22,98 ± 1,6 mM pada kontrol
media. Nitrat tidak benar-benar dikonsumsi dalam besi-terbatas
media. Biomassa kering tertinggi S. platensis (106.2 ± 7.1 mg mL-1)
Ditentukan dalam medium besi-cukup pada hari ke-14 masa
 inkubasi di hadapan 100 mM natrium nitrat sebagai sumber
nitrogen. Demikian pula, OD600 tertinggi dan tingkat protein
ditentukan dalam medium yang sama pada hari ke-14.

6. Perubahan dalam produksi pigmen dengan berbeda Konsentrasi

besi di S. platensis
Klorofil a, Total karotenoid, dan isi BPK S. platensis
tumbuh di besi-terbatas, besi-cukup, dan-kelebihan besi berisi
media.
Dengan 100 mM natrium nitrat sebagai sumber nitrogen,
yang tertinggi klorofil dan jumlah karotenoid isinya 119,6 ± 8,5 mg
g-1 dan 36,87 ± 2,5 mg g-1, Masing-masing, di media besi cukup
pada hari ke-14. BPK tertinggi konten adalah 1,827 ± 0,1 mg g-1
dalam medium yang sama pada 12 hari masa inkubasi. Demikian
pula, tertinggi APC dan PE isinya ditentukan sama media pada hari
yang sama.

7. Perubahan dalam prolin, piruvat, dan jumlah Kandungan

karbohidrat dengan konsentrasi besi yang berbeda di S.
platensis
Di hadapan 100 mM natrium nitrat sebagai nitrogen
sumber, prolin, piruvat, dan isi total karbohidrat S. platensis dengan
konsentrasi besi yang berbeda dengan terhadap waktu inkubasi.
prolin dan piruvat maksimum isi diperoleh pada hari ke-12 inkubasi
di semua media pertumbuhan diuji. The prolin dan piruvat isi
tertinggi adalah 44,02 ± 3.6 umol g-1 dan 180,13 ± 16 mg g-1,
Masing-masing, dalam zat besi media yang cukup. Demikian pula,
total karbohidrat tertinggi konten diperoleh pada media yang sama
pada hari ke-15 dari masa inkubasi.
8. Perubahan dalam aktivitas enzim asimilasi nitrogen dengan
konsentrasi zat besi yang berbeda di S. platensis
Di hadapan 100 mM natrium nitrat sebagai nitrogen
sumber, NR dan NiR kegiatan S. platensis dengan berbeda
konsentrasi besi digambarkan pada. maksimum Kegiatan NR dan
NiR diperoleh pada tanggal 12 dan 10 hari masa inkubasi, masing-
masing, dalam semua diuji Media. NR dan NiR kegiatan tertinggi
yang dicapai dalam besi-cukup menengah (126,92 ± 9,2 U mL-1 dan
841,16 ± 61.4 U mL-1, Masing-masing). Dalam studi ini, semua
enzim berada di korelasi positif satu sama lain. Sebuah korelasi
positif terlihat antara kegiatan NR dan NiR (r = 0,997, P < 0.01)
terhadap konsentrasi besi yang bervariasi.
Bila dibandingkan dengan kontrol dengan 100 mM natrium
nitrat sebagai sumber nitrogen, besi 50 pM dirangsang Kegiatan GS
dan GOGAT; 10 dan 100 pM besi memiliki efek penghambatan
pada aktivitas enzim tersebut. Maksimum Kegiatan GS dan
GOGAT diperoleh pada tanggal 12 dan Hari ke-10 masa inkubasi.
GS tertinggi dan Kegiatan GOGAT diperkirakan mencapai 0,1301 ±
0,02 U mL-1 dan 46,18 ± 1,8 U mL-1, Masing-masing, zat besi
mencukupi menengah (Gambar 10). Setelah hari ke-10, kegiatan
mulai penurunan di semua media pertumbuhan. Sebuah korelasi
positif adalah ditentukan antara GS dan GOGAT kegiatan (r =
0,963, P <0,05). Korelasi positif ditentukan antara GS dan NR (r =
0,985, P <0,05) serta GS dan NiR (r = 0,985, P <0,05). Selain itu,
korelasi positif diperoleh antara GOGAT dan NR (r = 0,982, P
<0,05) dan antara GOGAT dan NiR (r = 0,992, P <0,01).

Diskusi
Cyanobacteria umumnya dibudidayakan dalam media pertumbuhan
mengandung banyak mineral penting dan ion. Zarrouk ini menengah
adalah optimum untuk pertumbuhan S. platensis dan memiliki mineral
yang kaya dan konten ion, termasuk Ca, Mg, Mn, Zn, Cu, Mo, nitrat,
bikarbonat, dan sulfat (Öztürk Urek dan Tarhan, 2012). Nitrat adalah
elemen penting dan digabungkan dalam komponen struktural yang
paling penting, seperti protein. Selain itu, konsentrasi nitrat
mempengaruhi asimilasi nitrogen jalur dan aktivitas enzimatik (Perez-
Garcia et al., 2011). Sebagai faktor pembatas dalam pertumbuhan dan
produksi metabolit, besi adalah salah satu yang paling penting elemen.
Selain itu, itu merupakan unsur signifikan penting bagi metabolisme
nitrogen dan memberikan kontribusi asimilasi nitrogen enzim seperti
NR, NiR, dan GOGAT (Kaca et al., 2009). Pemanfaatan nitrat adalah
langkah pertama dalam asimilasi nitrogen dan pertumbuhan S.
platensis. Nitrat memiliki efek merangsang pada biomassa S. platensis.
Dalam investigasi kami dengan Media Zarrouk itu, hasil biomassa
kering dalam medium mengandung 30 mM natrium nitrat adalah sesuai
dengan hasil Tarko et al. (2012). Menurut hasil, nilai biomassa kering
di media yang mengandung kelebihan natrium konsentrasi nitrat (60,
100, dan 180 mM) hampir 2,0-2,5 kali lebih tinggi (P <0,05).
Umumnya, efek dari 10- 60 konsentrasi nitrat mM diselidiki dengan
nitrat enzim asimilasi S. platensis (Devriese et al., 2001; Jha et al.,
2007; Logeswaran et al., 2011). Kami diselidiki efek dari konsentrasi
natrium nitrat 10-180 mM pada enzim asimilasi nitrat dan beberapa
metabolit dalam S. platensis (Gamont) Geitler. Di hadapan 100 mM
natrium nitrat sebagai sumber nitrogen, konsumsi nitrat dihambat dalam
medium besi-terbatas. Pertumbuhan terbaik adalah dicapai dalam
medium besi cukup. Penyelidikan dari Milligan dan Harrison (2000)
menunjukkan bahwa kekurangan zat besi membatasi pertumbuhan
fitoplankton. Mirip dengan mereka hasil, dalam penelitian ini, tingkat
pertumbuhan paling lambat dicapai dalam medium besi-terbatas. Dapat
disimpulkan bahwa optimum Konsentrasi besi dapat merangsang
pertumbuhan S. platensis. Dalam penelitian ini, pertumbuhan terbaik,
tingkat pigmen dan metabolit, dan enzim kegiatan ditentukan dalam
media besi cukup menggunakan 100 mM natrium nitrat sebagai sumber
nitrogen.
Menurut hasil, isi pigmen S. platensis di hadapan 10 mM natrium
nitrat yang lebih rendah daripada di media kontrol; natrium 10 mM
kadar nitrat tidak dapat memberikan cukup nitrogen untuk produksi
pigmen alga. Produksi tidak mencukupi dari pigmen dapat dikaitkan
dengan struktur pigmen. Cincin porfirin struktur klorofil a mengandung
atom nitrogen seperti kelompok cincin dari PE dan APC. Oleh karena
itu, produksi pigmen membutuhkan cukup nitrogen dalam media
pertumbuhan. Pada hari ke-12 dari masa inkubasi, Konten BPK di
hadapan 100 mM natrium nitrat adalah 1,37 kali lebih tinggi daripada di
media kontrol (P <0,05). Selain itu, 180 mM natrium nitrat
menyebabkan penurunan isi BPK, klorofil, dan jumlah karotenoid di
semua media pertumbuhan bila dibandingkan dengan kontrol. Di
kehadiran 100 mM natrium nitrat sebagai nitrogen sumber, efek dari
konsentrasi yang berbeda dari besi produksi pigmen S. platensis
diselidiki. Menurut studi dari Milligan dan Harrison (2000), besi
merupakan faktor pembatas dalam produksi pigmen tersebut sebagai
klorofil a, Total karotenoid, dan phycobiliproteins. Iron pembatasan
menghambat aktivitas fotosistem. Dengan demikian, dalam zat besi
kondisi terbatas, penurunan produksi pigmen. Kami Penelitian yang
didukung temuan ini. Klorofil tertinggi dan isi total karotenoid
ditentukan dalam zat besi menengah yang cukup, dan mereka hampir
1,12 kali lipat lebih tinggi dibandingkan dengan daerah kontrol (P
<0,05). Namun, total terendah karotenoid dan klorofil a isi diperoleh
dalam Kondisi besi-terbatas. BPK merupakan pigmen selular dan
mengandung atom nitrogen dalam strukturnya. Dengan demikian,
dalam zat besi kondisi terbatas, produksi biomassa terbatas
mempengaruhi Produksi BPK, dan penurunan tingkat nya (Milligan dan
Harrison, 2000). Penyelidikan kami telah sesuai dengan hasil ini. Isi
phycobiliprotein terendah ditentukan dalam kondisi besi-terbatas ketika
dibandingkan dengan kontrol.
Prolin mengandung gugus imino. Oleh karena itu, nitrogen
konsentrasi media pertumbuhan sangat penting untuk biosintesis nya.
Ini berasal dari L-glutamat dengan kelompok reaksi (Nelson et al.,
2008). Hal ini menunjukkan bahwa Konsentrasi nitrogen dan asimilasi
proses yang sangat penting untuk produksi prolin. Menurut hasil,
kandungan prolin tertinggi terdeteksi di medium mengandung 100 mM
natrium nitrat. Hal ini dapat dikorelasikan dengan produksi biomassa
optimum dalam media ini. Itu kandungan biomassa tertinggi organisme
mungkin berisi jumlah terbesar dari komponen struktural seperti amino
/ asam imino. Di hadapan konsentrasi yang berbeda dari besi, produksi
prolin tertinggi ditentukan di media besi cukup menggunakan 100 mM
natrium nitrat sebagai sumber nitrogen.
Total karbohidrat dan piruvat isi mempengaruhi asimilasi nitrat.
Karbon dan nitrogen metabolisme sangat terkait satu sama lain. Energi
yang tersedia dari siklus TCA digunakan untuk reaksi enzimatik
sebagai transpor elektron. Selain itu, piruvat mendukung TCA siklus
sehingga mempengaruhi konsentrasi 2-oksoglutarat. 2-oksoglutarat
mengubah glutamat dengan Reaksi transaminasi, dan ini mempengaruhi
GS / GOGAT jalur. Dapat disimpulkan bahwa 2-oksoglutarat dan
piruvat berperan sebagai regulator alosterik untuk GS dan Kegiatan
GOGAT. Dalam studi ini, 100 mM natrium nitrat tersedia nitrogen yang
cukup untuk produksi metabolit, sedangkan 10 mM natrium nitrat tidak
efektif. Dalam kehadiran konsentrasi yang berbeda dari besi, tertinggi
konten piruvat organisme ditentukan dalam zat besi menengah yang
cukup, dan itu hampir 1,23 kali lebih tinggi bila dibandingkan dengan
kontrol (P <0,05). Demikian pula, 50 pM besi dirangsang total produksi
karbohidrat, dan Total kandungan karbohidrat tertinggi diperkirakan
pada zat besi media yang cukup. Itu hampir 1,25 kali lipat lebih tinggi
dari itu kontrol (P <0,05).
 Setelah serapan nitrat ke dalam sitoplasma, NR dan NiR bekerja
untuk mengurangi ke amonium (Perez-Garcia et al., 2011). Investigasi
dari cyanobacteria menunjukkan bahwa NR dan NiR bekerja sama
dalam transformasi katalisasi nitrat ke amonium (Fernandez dan
Galvan, 2007). Di reaksi pertama, nitrat diubah nitrit oleh NR, dan,
berurutan, NiR mengkatalisis reduksi nitrit menjadi amonium (Perez-
Garcia et al., 2011). Konsentrasi nitrat mempengaruhi aktivitas
enzimatik dalam asimilasi nitrat dalam cyanobacteria (Sood et al, 2002;.
Ali et al, 2007;.. Jha et al, 2007; Logeswaran et al., 2011). Menurut
hasil, aktivitas NR tertinggi ditentukan pada tanggal 12 masa inkubasi
dalam medium yang mengandung 100 mM natrium nitrat. Itu 2.14 kali
lebih tinggi bila dibandingkan dengan kontrol (P <0,05). Mungkin 100
mM natrium nitrat adalah konsentrasi optimum untuk aktivitas NR
antara konsentrasi nitrat natrium diuji. Namun, 180 mM natrium nitrat
menghambat aktivitas NR, dan itu menunjukkan Penurunan perkiraan
2.71 kali dibandingkan dengan aktivitas dalam 100 mM natrium nitrat
(P <0,05). The NiR tertinggi Kegiatan diperoleh dalam medium yang
mengandung 100 mM natrium nitrat dan 1,24 kali lebih tinggi bila
dibandingkan dengan kontrol (P <0,05). Logeswaran et al. (2011)
digunakan Media Zarrouk yang berisi 30 mM natrium nitrat sebagai
kontrol dan bertekad variasi dalam asimilasi nitrat aktivitas enzim
dengan kondisi pertumbuhan yang berbeda di S. platensis Strain PCC
7345. hasil Pengendalian NiR danKegiatan NR didukung hasil aktivitas
spesifik kami di media yang sama. Dalam studi ini, kegiatan NR dan
NiR yang beberapa kali lebih tinggi dalam medium yang mengandung
100 mM natrium nitrat. Setelah pengurangan nitrat, asimilasi amonium
dikatalisis oleh jalur GS / GOGAT. GS mengkatalisis produksi
glutamin, dan mengkatalisis GOGAT produksi glutamat (Lu et al,
2005;. Vanoni dan Curti, 2005). Menurut hasil, aktivitas GS naik
dengan konsentrasi nitrat meningkat hingga 180 mM. Itu GS dan
GOGAT kegiatan tertinggi dicapai pada medium yang mengandung 100
mM natrium nitrat. Mereka adalah 1,2 dan 1,6 kali lebih tinggi, masing-
masing, jika dibandingkan dengan kontrol (P <0,05), dan 180 mM
natrium nitrat menghambat GS dan GOGAT kegiatan. Medium
pertumbuhan mengandung 100 mM natrium nitrat optimum untuk nitrat
asimilasi S. platensis (Gamont) Geitler. Zarrouk ini medium yang
mengandung 30 mM nitrat tidak cukup untuk kegiatan enzim asimilasi
nitrat tertinggi, beberapa metabolit, dan parameter pertumbuhan.
Di hadapan 100 mM natrium nitrat sebagai nitrogen sumber, efek
dari konsentrasi yang berbeda dari besi yang diselidiki di NR, NiR, GS,
dan kegiatan GOGAT S. platensis . Struktur NR dan NiR mengandung
Fe-Scluster. NR memiliki [4Fe-4S] klaster sedangkan NiR memiliki 1
[4Fe-4S] klaster selain 1 atom besi dari heme kelompok (Kaca et al.,
2009). Oleh karena itu, kebutuhan zat besi dari NiR lebih dari
persyaratan NR. Dengan demikian, besi suplementasi dan kelaparan
mempengaruhi NiR signifikan. Hasil kami telah sesuai dengan
informasi ini, dan besi lebih efektif pada NiR dari NR. Dalam penelitian
ini terendah NR dan NiR kegiatan ditentukan dalam zat besi kondisi
terbatas. NR dan NiR kegiatan tertinggi diperoleh dalam medium besi-
cukup, dan mereka hampir 1,24 dan 1,4 kali lebih tinggi, dibandingkan
dengan kontrol (P <0,05). Selain itu, gizi besi adalah juga dipengaruhi
oleh jalur GS / GOGAT. Tertinggi Kegiatan GS ditentukan dalam
medium besi-cukup. Namun, aktivitas GS itu menurun secara drastis
dalam zat besi media terbatas. Struktur GOGAT juga berisi [3Fe-4S]
klaster (Kaca et al., 2009). The GOGAT tertinggi Kegiatan ditentukan
dalam medium besi-cukup, dan itu hampir 1.33 kali lipat lebih tinggi
dibandingkan dengan daerah kontrol (P <0,05). Namun, aktivitas
GOGAT terendah diperoleh pada media besi-terbatas dan itu sekitar
1.93 kali lipat lebih rendah dibandingkan dengan kontrol (P <0,05).
Kesimpulannya, tertinggi NR, NiR, GS, dan GOGAT kegiatan
ditentukan dalam medium yang mengandung 50 pM besi di hadapan
100 mM natrium nitrat. Ini Penelitian ini bertujuan untuk mencapai
 enzim tertinggi kegiatan dengan menggunakan konsentrasi yang
berbeda dari natrium nitrat dan besi. Hasil penelitian menunjukkan
bahwa aktivitas enzim dan pertumbuhan, metabolit, dan pigmen tingkat
beberapa lipatan lebih tinggi menggunakan 100 mM natrium nitrat di
hadapan 50 pM besi. Kami mencapai yang terbaik enzim asimilasi
nitrat kegiatan di bawah kondisi ini. Aktivitas enzim yang lebih tinggi
dapat mengakibatkan jumlah yang lebih besar dari asam amino, seperti
glutamin dan glutamat, yang memiliki bioteknologi, industri, dan
biokimia penting. Selain itu, Konsentrasi besi 50 pM dan 100 mM
natrium nitrat pertumbuhan alga dirangsang dan isi beberapa metabolit
seperti protein, prolin, piruvat, karbohidrat total, dan pigmen
antioksidan fitur (phycobiliproteins, jumlah karotenoid, dan klorofil a).
Isi tinggi dari ini metabolit dan senyawa di S. platensis dapat membuat
sebuahsumber makanan yang kaya.

1.2.2. Ammonium (NH4+)

Ammonium adalah ion yang apabila dengan sodium hidroksida
akan menghasilkan ammonia. Kation monovalen (NH4+) dapat
dipandang sebagai produk reaksi ammonia ( suatu basa lewis ) dengan
ion hidrogen. Ion ammonium mempunyai simetri tetrahedral. Sifat
kimia garam ammonium acap kali serupa dengan garam logam alkali
yang setara. Ammonium mempunyai bentuk dalam fase cair. Dalam
SNI kadar ammonium yang diperbolehkan hanya sebesar 0,1 mg/l.

1.2.1.1 Metode Analisa NH4+

Metode penetapan kadar (NH4+) adalah dengan :
1. Metode Nessler
Kadar ammonium dapat diukur dengan menggunakan
metode. Dimana metode nessler dengan cara menggunakan
reagen Nessler dan larutan garam Rochelle. Dimana warna
sampel dibandingkan dengan warna larutan standart (NH4+)
 atau larutan stock ammonium. Warna sampel yang paling
mendekati warna larutan stock ammonium itulah yang
paling tinggi kadar ammoniumnya. Prinsip penentuan
(NH4+) adalah (NH4+) dengan reagen Nessler akan menjadi
warna kuning kecoklatan, dan warna ini dapat diukur dengan
spektrofotometer pada panjang gelombang 425 nm. Dapat
dihitung dengan deret standart yang telah diketahui kadarnya
dan dihitung secara regresi linier.
2. Metode Rochelle
Dimana garam Rochelle dibuat dengan cara melarutkan
50 ml KNaTartrat dalam 100 ml aquades.
3. Metode Ion Kromatografi.
Dalam metode ini menggunakan metode ion
kromatografi dengan kondisi pengukuran untuk ammonium
menggunakan kolom Dionex Ion Pac CS, sebagai eluen
larutan methyl sulfonic acid 18 mM, detektor Conductivity
DX 5000 pada temperatur 400C. Untuk mengetahui unjuk
kerja metode ini dilakukan penentuan presisi metode dengan
cara mengukur contoh air limbah sebanyak 6 kali
pengulangan.
4. Metode Phenat/indophenol
5. Metode Bispyrazolone

1.2.2.2 Kelebihan dan Kelemahan Metode Analisis NH4+

Kelebihan dari metode nessler adalah dimana waktu dan
pengerjaannya lebih singkat, karena hanya membandingkan
warna sampel dan warna larutan stock NH4+ , sedangkan
kelemahan metode Nessler adalah hasil yang diperoleh tidak
akurat, karena hanya membandingkan warna saja.
1.2.3. Penanggulangan Kelebihan/Kekurangan Kadar NH4+
Jika kelebihan kadar ammonium dapat ditanggulangi dengan cara :
1. Memanfaatkan enceng gondok. Enceng gondok dalam perairan dapat
mengurangi kadar ammonium dalam air yaitu dengan cara
berdasarkan umur dan lama kontak. Jika berdasarka umur yaitu
dengan menggunakan enceng gondok yang tua dan muda dalam air.
Tapi jika dengan lama kontak yaitu dengan lama waktu perlakuan
yaitu dengan waktu 2 hari, 4 hari, 6 hari. Jadi dapat dilihat
bagaimana penyerapan NH4+ selama 2 hari, 4 hari, 6 hari dan
pengaruh penyerapan NH4+ terhadap enceng gondok yang tua dan
muda.
2. Menggunakan sistem pengolahan dengan cara adsorpsi. Sistem
operasi yang dipergunakan adalah batch dan kontinyu. Sedangkan
adsorbat (kontaminan) yang dipergunakan adalah limbah artifisial,
yaitu larutan ammonium klorida. Pada sistem batch, terdapat empat
variabel bebas yang divariasikan, yaitu : pertama, konsentrasi sorbat,
terdiri dari 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 40 ppm, 80 ppm, dan 100 ppm.
Faktor yang kedua adalah waktu kontak, terdiri dari 2 jam, 4 jam, 6
jam, 24 jam, dan 48 jam. Sedangkan faktor yang ketiga yaitu
perlakuan awal adsorben: dengan pemanasan dan penambahan asam.
Faktor terakhir yaitu jenis adsorben yang digunakan: bentonit dan
kaolin.

Jika kekurangan kadar ammonium dapat ditanggulangi dengan cara :

1. Memperbanyak kandungan ammonia dalam air karena ammonia
dalam air membentuk ammonium.
2. Ammonia dapat berswa-ionisasi menghasilkan ammonium.
 BAB II
ALAT DAN BAHAN

2.1 Alat
Adapun alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah:
1. Labu Nesler 50 ml : 8 buah
2. Pipet Tetes : 1 buah
3. Pipet Volume 25 ml : 1 buah
4. Pipet Volume 10 ml : 1 buah
5. Bola Karet : 2 buah

2.2 Bahan
Adapun bahan yang diperlukan dalam praktikum ini adalah:
1. Larutan Stok (NH4 Cl) : (0 ml;1ml; 2ml;3ml ;4ml )
2. Larutan Pereaksi Nesler : 1 ml
3. Larutan Garam Rochelle : 1 ml
4. Air limbah tahu : 25 ml
5. Air sumur : 25 ml
6. Air amos : 25 ml
7. Aquadest : Secukupnya
 BAB III
PROSEDUR KERJA

1. Dipipet 25 ml sampel kedalam labu Nesler 50 ml.

2. Kemudian ditambahkan 1 ml larutan garam Rochelle dan 1 ml pereaksi
nessler.
3. Lalu ditambahkan aquadest sampai tanda garis dan biarkan sampai 5 menit.
4. Lakukan prosedur yang sama terhadap larutan stok (1 ml ; 2 ml ; 3ml ; 4 ml)
kedalam masing-masing labu Nesler 50 ml.
5. Kemudian bandingkan warna antara sampel dengan hasil penambahan pada
larutan stock.
 BAB IV
GAMBAR PERCOBAAN

Gambar 1: Warna sampel setelah penambahan larutan garam Rochelle dan

Pereaksi Nessler

Gambar 2: Warna larutan stock NH4+

 BAB V
DATA PENGAMATAN

Table 5.1 Penetapan Kadar 𝐍𝐇𝟒+

No Sampel Volume Pereaksi Garam Aquadest
(ml) Nessler Rochelle
(ml) (ml)
1 Air limbah tahu 25 1 1 Secukupnya
2 Air sumur 25 1 1 Secukupnya
3 Air amos 25 1 1 Secukupnya
4 Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 0 1 1 Secukupnya
5 Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 1 1 1 Secukupnya

6 Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 2 1 1 Secukupnya

7 Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 3 1 1 Secukupnya

8 Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 4 1 1 Secukupnya

Perubahan warna sampel :

1.) Air limbah tahu
Air Limbah Tahu + Larutan Garam Rochelle Larutan Putih Susu
Larutan Putih Susu + Pereaksi Nessler Larutan Kuning
Larutan Kuning + Aquades Larutan Kuning

2.) Air Sumur

Air Sumur + Larutan Garam Rochelle Larutan Bening
Larutan Bening + Pereaksi Nessler Larutan Bening
Larutan Bening + Aquades Larutan Bening
3.) Air Amos
Air Amos + Larutan Garam Rochelle Larutan Bening
Larutan Bening + Pereaksi Nessler Larutan Bening
Larutan Bening + Aquades Larutan Bening

4.) Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 0 ml + Garam Rochelle Larutan Bening

Larutan Bening + Pereaksi Nessler Larutan Kuning
Larutan Kuning + Aquadest Larutan Kuning Muda Sekali

5.) Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 1 ml + Garam Rochelle Larutan Bening

Larutan Bening + Pereaksi Nessler Larutan Kuning
Larutan Kuning + Aquadest Larutan Kuning Muda Sekali

6.) Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 2 ml + Garam Rochelle Larutan Bening

Larutan Bening + Pereaksi Nessler Larutan Kuning
Larutan Kuning + Aquadest Larutan Kuning Muda

7.) Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 3 ml + Garam Rochelle Larutan Bening

Larutan Bening + Pereaksi Nessler Larutan Kuning
Larutan Kuning + Aquadest Larutan Kuning Muda

8.) Larutan stok (𝑁𝐻4 𝐶𝑙) 4 ml + Garam Rochelle Larutan Bening

Larutan Bening + Pereaksi Nessler Larutan Kuning
Larutan Kuning + Aquadest Larutan Kuning Muda
 BAB VI
PENGOLAHAN DATA

6.1. Perhitungan Kadar NH4+

- Larutan Stock 1 ml
𝒎𝒍 𝒙 𝒑𝒑𝒎
Kadar NH4+ (ppm) = 𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆 𝒔𝒂𝒎𝒑𝒆𝒍
𝟎,𝟏𝒎𝒍 𝒙 𝟓 𝒑𝒑𝒎
= 𝟐𝟓 𝒎𝒍

= 0,02 ppm

- Larutan Stock 0,2 ml

𝒎𝒍 𝒙 𝒑𝒑𝒎
Kadar NH4+ (ppm) = 𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆 𝒔𝒂𝒎𝒑𝒆𝒍
𝟎,𝟐𝒎𝒍 𝒙 𝟓 𝒑𝒑𝒎
= 𝟐𝟓 𝒎𝒍

= 0,04 ppm

- Larutan Stock 0,4 ml

𝒎𝒍 𝒙 𝒑𝒑𝒎
Kadar NH4+ (ppm) = 𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆 𝒔𝒂𝒎𝒑𝒆𝒍
𝟎,𝟒𝒎𝒍 𝒙 𝟓 𝒑𝒑𝒎
= 𝟐𝟓 𝒎𝒍

= 0,08 ppm

- Larutan Stock 0,6 ml

𝒎𝒍 𝒙 𝒑𝒑𝒎
Kadar NH4+ (ppm) = 𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆 𝒔𝒂𝒎𝒑𝒆𝒍
𝟎,𝟔 𝒎𝒍 𝒙 𝟓 𝒑𝒑𝒎
= 𝟐𝟓 𝒎𝒍

= 0,12 ppm

- Larutan Stock 0,8 ml

𝒎𝒍 𝒙 𝒑𝒑𝒎
Kadar NH4+ (ppm) = 𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆 𝒔𝒂𝒎𝒑𝒆𝒍
𝟎,𝟖 𝒎𝒍 𝒙 𝟓 𝒑𝒑𝒎
=
𝟐𝟓 𝒎𝒍
 = 0,16 ppm

6.2. Reaksi
NH4+ + C4H4KNaO64H2O Na(NH4)C4H4O6 4H2O ↓ + K
Amonium garam rochelle garam amonium rochelle kalium

Na(NH4)C4H2O6 4H2O + 2K2HgI4 + NaOH HgOHg(NH2)I ↓ + 7I- +

garam amonium rochelle P.Nessler natrium hidroksida (larutan kuning muda)
C4H2KNaO64H2O + 3K+ + Na+ + 3H+
 BAB VII
KESIMPULAN DAN SARAN

7.1. Kesimpulan
Berdasarkan hasil praktikum, maka dapat disimpulkan bahwa :
ada kandungan NH4+ (ammonium) di dalam sampel yaitu pada sampel air
dorsmeer, yakni dengan kandungan 0.32 ppm.

7.2 Saran
Praktikan lebih teliti lagi dalam melakukan percobaan ataupun analisa,
khususnya pada penggunaan reagensia dan larutan stock yang akan dipakai.
 DAFTAR PUSTAKA

Astuti, Sri Amd. Penuntun Praktikum Teknologi Pengolahan Air dan Limbah
Industri. Medan : PTKI, 2014.

Esen, Merve. Nitrate and iron nutrition effects on some nitrate assimilation
enzymes and metabolites in Spirulina Platensis, 2014.

http://teknologikimiaindustri.blogspot.com/2011/02/ammonium-metode-analisis-
nh4.html
 LAMPIRAN

Tabel. Persyaratan Mutu Air Minum dalam Kemasan

Standar Nasional Indonesia, No.01-3553-2006