STERILISASI ALAT DAN BAHAN

Oleh :
Arsita Tsania Maulinda
1714221019

ABSTRAK

Pada tanggal 12 September 2018 pukul 15.00 – 17.00 dilaksanakan praktikum

Sterilisasi Alat dan Bahan di Laboratorium Budidaya Periairan, Fakultas Pertanian
Universitas Lampung. Sterilisasi merupakan metode untuk membersihkan semua
bentuk kehidupan mikroorganisme. Tujuan dari praktikum ini adalah untuk
mengetahui jenis – jenis sterilisasi, cara – cara sterilisasi dan alat – alat yang
digunakan di dalam praktikum. Metode sterilisasi yang dapat digunakan ada 3
macam, yaitu sterilisasi fisik yaitu sterilisasi dengan cara pemanasan pada suhu
yang tinggi sepeti autoklaf, kemudian sterilisasi secara kimia yaitu sterilisasi yang
menggunakan senyawa kimia seperti alcohol 70%, dan yang terakhir sterilisasi
mekanik yaitu sterilisasi yang mengguakan penyaringan, seperti Chamberland
filter. Pada praktikum ini sterilisasi yang digunakan adalah metode dengan uap
bertekanan tinggi atau dengan menggunkan autoklaf. Cara kerja autoklaf adalah
dengan masukan air sampai batas sensor, kemudian dimasukan alat yang akan
disterilkan, mulai proses sterilisasi dengan menggunakan uap bertekanan tinggi
selama 15 menit dengan suhu 121 °C.

Kata kunci : autoklaf, mikroorganisme,sterilisasi, uap

I. PENDAHULUAN Sterilisasi adalah proses yang sangat
1.1 Latar Belakang penting di dalam dunia
Mikrobiologi adalah ilmu yang muikrobiologi. Sterilisasi merupakan
mempelajari organisme yang proses menghilangkan segala jenis
berukuran sangat kecil sehingga organisme hidup, dalam hal ini
tidak dapat dilihat dengan mata adalah segala jenis mikroorganisme
telanjang melainkan harus baik itu protozoa, fungi, bakteri,
menggunakan bantuan mikroskop. mycoplasma, dan virus yang terdapat
Organisme yang sangat kecil ini pada suatu benda. Proses sterilisasi
disebut sebagai mikroorganisme atau membutuhkan biocidal agent ataupun
sering disebut mikroba ataupun jasad proses fisik untuk membunuh atau
renik. Saat ini mikrobiologi sangat menghilangkan mikroorganisme
berkembang luas pada berbagai tersebut.
bidang ilmu pengetahuan,misalnya
pertanian, industry, kesehatan, 1.2 Tujuan Praktikum
lingkungan hidup, bidang pangan Adapun tujuan dari praktikum ini,
bahkan antariksa. yaitu mahasiswa dapat melakukan
berbagai cara sterilisasi alat dan
bahan
II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Definisi Sterilisasi
Sterilisasi merupakan metode untuk
membersihkan atau semua bentuk
kehidupan mikroba. Pemanasan
paling sering digunakan untuk
membunuh mikroba, termasuk
terhadap spora yang sangat resisten.
Agen sterilisasi disebut sterilan.
Sterilisasi cairan dan gas biasa
menggunakan metode filtrasi.
Sterilisasi dapat diartikan
menghambat kemampuan
mikroorganisme untuk reproduksi.
Maka bahan yang steril mungkin
masih mengandung mikroba yang
masih utuh dan dapat melakukan
metabolim (Muwarni, 2015).
Sterilisasi merupakan pemasan yang
menggunakan uap panas atau udara
panas bertekanan tinggi. Sterilisasi
yang menggunakan oven yaitu
dengan temperature 170 – 180 °C.
Cara ini digunakan untuk
mensterilkan peralatan gelas.
Sterilisasi menggunakan uap panas
dengan tekanan tinggi dilakukan
dengan menggunakan alat yang
disebut autoklaf dengan temperature
121° C. Autoklaf digunakan untuk
sterilisasi badan dan peralatan
(Aryulina, 2010).
Sterilisasi merupakan proses
pembunuhan bakteri atau
mikroorganisme yang tahan terhadap
panas. Sterilisasi merupakan proses
pemasan dengan suhu, waktu, dan
tekanan tertentu. Biasanya pemasan
pada sterilisasi menggunakan suhu
yang tinggi yaitu 121 ° C dengan
waktu 15 menit ( Soeparno, 2011 ).
Sterilisasi dengan memakai udara
panas, sterilisasi dengan cara ini
dapat dilakukan dengan memakai
alat yang dinamakan hot air oven hot
air sterilizer, yang digunakan untuk
mensterilkan alat – alat dari gelas,
tetapi alat – alat dari logam pun bisa
disterilakan dengan alat ini. Alat –
alat yang sudah steril dan masih
terbungkus tersebut kemudian
disimpan dalam suatu tempat tertentu
yang sudah disediakan, dan
bungkusn akan dibuka bila alat – alat
hendak digunakan (Darmadi, 2008).
Strerilisasi adalah prosedur untuk
membunuh semua organisme hidup
termasuk endospore dan virus.
Autoklaf dapat digunakan untuk
sterilisasi dengan menggunakan uap
bertekanan tinggi. Temperature
tinggi dicapai ketika uap berada
dalam tekanan tinggi, seperti 121 °C
yang akan membunuh
mikroorganisme dalam jangka
pendek dibandingkan dengan
menggunakan panas pada atmosfer
biasa (James, 2008).
Sterilisasi merupakan tindakan yang
berlawanan dengan sanitasi, yang
merupakan suatu penghancuran total
bentuk kehidupan, khususnya
mikroorganisme termasuk spora
dengan menggunakan proses
kimiawi dan fisik. Dengan cara yang
tepat suatu disinfektan dapat
mencapai sterilisasi yang sempurna
(Hidayat, 2009 ).
Sterilisasi merupakan suatu proses
destruksi atau penghilangan
mikroorganisme secara total pada
bahan pangan yang disterilkan.
Proses sterilisasi dapat
menghilangkan kapang, khamir,
bakteri, spora, sehingga bahan
pangan dapat didistribusikan dan
disimpan pada temperature udara
normal dengan unsur simpan lebih
lama. Proses sterilisasi melibatkan
pnggunaan panas, radiasi, bahan
kimia atau proses pembersihan
secara fisik (Waziiroh, 2008).
2.2 Bentuk Bentuk Sterilisasi
Sterilisasi basah atau panas lembab
dilakukan menggunakan autokalf.
Sterilisasi tersebut menggunakan uap
air jenuh bertekanan 15lb/in² selama
15 menit pada suhu 121°C. autoklaf
digunakan untuk mensterilkan bahan
– bahan yang dapat ditembus oleh
kelembaban diantaranya ialah media
biakan, larutan, kapas, sumbat karet,
dan peralatan laboratorium. Bagi
media tertentu yang terurai bila
dipanaskan pada suhu 121°C,
sterilisasi dengan autokalf dilakukan
pada suhu dan tekanan yang lebih
rendah. Panas lembab sangat efektif
meskipun pada suhu yang tidak
begitu tinggi, karena mampu
mendenaturasikan atau
mengkoagulasikan protein pada
organisme hidup hingga organisme
tersebut dapat mati ( Lestari, 2017 ).
Sterilisasi menggunakan panas
kering bekerja melalui proses
oksidasi. Salah satu metode paling
sederhana dari sterilisasi panas
kering adalah pemanasan secara
langsung (flaming). Metode tersebut
sering dilakukan di laboratorium
mikrobiologi, yaitu pada saat akan
dan setelah pengambilan isolate
bakteri menggunakan mate ose. Mata
ose dipanaskan diatas api nyala,
sampai menjadi merah. Prinsip yang
sama dilakukan pada saat membakar
bahan – bahan yang terkontaminasi
bakteri (Muwarni, 2015).
Metode yang sederhana untuk
mensterilkan adalah dengan alcohol
70% atau 95%. Larutan ini dapat
berfungsi sebagai bahan sterilisasi
yang baik. Hasil penelitian
menunjukan bahwa penambahan 5ml
alcohol 70% perliter media tidak
menimbulkan efek yang merugikan
pada kultur. Sterilisasi permukaan
pada ruang kerja laboratorium juga
dapat dilakukan dengan melap
permukaan tersebut dengan alcohol
70% atau 90% (Yuliarti, 2010).
Sterilisasi panas lembab dapat
dilakukan dengan penggunaan
autoklaf (uap bertekanan) dan
penggunaan uap langsung
(tindalisasi/ sterilisasi fraksi).
Sterilisasi paans kering dapat
dilakukan dengan oven (udara panas)
dan pembakaran. Panas lembab
sangat efektif meskipun pada suhu
yang tidak begitu tinggi, karena uap
air berkondensasi pada bahan –
bahan yang disterilkan, dilepaskan
panas sebanyak 636 kalori pergram
uap air pada suhu 121° C. panas ini
nantinya akan mendenaturasikan atau
mengkoagulasikan protein pada
organisme hidup dan dengan
demikian akan mematikan mikroba.
Dibandingkan dengan panas lembab,
panas kering kurang efisien dan
membutuhkan suhu lebih tinggi serta
waktu lebih lama untuk sterilisasi
(Pratiwi, 2008).
Salah satu elemen penting dalam
sterilisasi dengan menggunakan uap
autoklaf atau dengan adanya lembab
dan penembusannya ke dalam bahan
yang telah disterilkan. Sebagai
contoh, organisme pembentuk spora
dalam medium anhidrat tidak
dibunuh oleh suhu sampai 121°C (
suhu yang biasanya digunakan dalam
autoklaf bahkan setelah pemanasan
sampai 45 menit ). Untuk alasan ini,
autoklaf merupakan metode yang
tidak cocok untuk mensterilkan
minyak, produk yang dibuat dengan
basis minyak, atau bahan – bahan
lain yang mempunyai sedikiit
lembab atau tidak sama sekali. Pada
umumnya suhu yang lebih tinggi dan
waktu pemaparan yang dibutuhkan
saat proses dilakukan dengan uap
dibawah tekanan. Saat sterilisasi
dibawah uap panas dipaparkan pada
suhu 121 °C selama 12 menit adalah
efektif. Sterilisasi panas kering
membutuhkan pemaparan pada suhu
150° C sampai 170° C selama 1 – 4
jam (Bhima, 2010).
Sterilisasi panas kering adalah
konduksi panas yang menyebabkan
koagulasi protein sel. Sterilisasi ini
tidak dapat digunakan pada bahan
karet dan plastic. Biasanya
diaplikasikan untuk sterilisasi alat
bedah dan alat gelas. Untuk bahan
yang berminyak, untuk serbuk yang
tahan pemanasan seperti ZnO, serta
untuk bahan yang rusak bila terpapar
uap air ( menjadi basah ). Sterilisasi
panas kering dilakukan dalam oven
pada suhu 160 - 170°C selama 2 – 3
jam (Indra, 2008).
Metode penyaringan berbeda dengan
metode pemanasan. Sterilisasi
dengan metode pemanasan dapat
membunuh mikroorganisme tetapi
mikroorganisme yang mati tetap
berada pada material tersebut,
sedagkan sterilisasi dengan metode
penyaringan mikroorganisme tetap
hidup hanya dipisahkan dari
material. Bahkan filter / penyaringan
adalah sejenis porselin yang berpori
yang dibuat khusus dari masing –
masing pabrik (Hikma, 2014).
III. METODOLOGI
PRAKTIKUM
3.1 Waktu dan Tempat
Praktikum Mikrobiologi laut dengan
materi Sterilisasi Alat dan Bahan ini
dilaksanakan pada Hari Rabu,tanggal
12 September 2018 Pukul 15.00-
17.00 WIB di Laboratorium
Budidaya Perairan gedung (lab k)
Fakultas Pertanian Universitas
Lampung.
3.2 Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada praktikum
ini antara lain cawan petri, autoklaf ,
tabung reaksi, kertas layang-layang,
bunsen, oven dan plastik tahan
3.3 Cara Kerja
Cara kerja pada praktikum ini adalah
: akan naik jika suhu hampir
1. Sterilisasi Basah
a. Hubungkan autoklaf ke sumber
listrik
b. Tekan power dan switch
(dibelakang unit)
c. Tekan tombol open untuk
membuka wheel
d. Masukkan air sesuai kebutuhan,
minimal sampai batas sensor pada
rak paling bawang
e. Atur suhu dan waktu dengan
memutar tombol ke kanan (Max) dan
kekiri (Min)
d. Setelah pengaturan selesai tekan
PUSH (start)
panas.
e. Untuk melihat proses yang terjadi
tekan tombol MAIN. Pressure gauge
mendekati suhu yang telah d i setting
(panas)
f. Setelah selesai alarm akan
berbunyi
g. Buka penutup pressure pelan-pelan
sampai keluar asap
h. Tekan open jika kondisi suhu
sudah menurun
2. Sterilisasi Kering
a. Bungkus alat/bahan yang akan
disterilkan dengan kertas layang-
layang
b. Masukan alat/bahan yang akan
disterilkan kedalam oven
c. Sterilisasi dilakukan pada suhu
200°C selama 2 jam

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan didapatkan hasil sebagai berikut :
4.1 Hasil Pengamatan
Hasil yang didapat pada praktikum sterilisasi alat dan bahan adalah :
No. Nama Alat dan Bahan Fungsi
1. untuk menyemprotkan
air/alcohol dan sebagai wadah
larutan alcohol

Sprayer
2. Untuk menjepit alat

Penjepit
3. Untuk menghomogenkan media
larutan agar

Erlenmeyer
4. Digunakan sebagai pemanas atau
sterilisasi pada alat

Bunsen
5. Untuk pembiakan
mikroorganisme dalam medium
cair

Tabung Reaksi
6. Untuk mengikat plastic tahan
panas saat autoclave

Karet Gelang
7. Untuk memindahkan biakan dari
media satu ke media yang
lainnya

Jarum Ose
8. Untuk wadah atau media bahan

Cawan Petri

9. Untuk meratakan biakan yang

akan diamati dan dibiakkan

Spreader
 10. Untuk membungkus alat dan
bahan yang akan disterilkan

Kertas Bekas Laporan

11. Untuk membungkus alat dan
bahan yang sudah dibungkus
ketas dan akan dimasukkan ke
dalam autoklaf

Plastik Anti Panas

12. Untuk mensterilisasi suatu benda
menggunakan uap bersuhu dan
bertekanan tinggi (1210C, 15
lbs) selama kurang lebih 15
menit
Autoclaf
13. untuk melakukan inokulasi
mikrobiologi

Laminar Air Flow

4.2 Pembahasan kedalam bentuk sterilisasi fisik,

Menurut Aryulina (2010), Sterilisasi
merupakan pemasan yang
menggunakan uap panas atau udara
panas bertekanan tinggi. Hal ini
sesuai dengan praktikum yang kita
laksanakan, yaitu sterilisasi dengan
menggunakan uap panas bertekanan
tinggi atau alat tersebut disebut
dengan autoklaf. Jenis sterilisasi
terdapat 3 macam, yaitu sterilisasi
fisik, sterilisasi kimia, sterilisasi
mekanik. Proses sterilisasi
menggunakan autoklaf termasuk
dikarenakan dia menggunakan uap
yang berasal dari air yang dimasukan
ke dalam autoklaf. Alat – alat yang
disterilisasi diantaranya cawan petri
dan tabung reaksi. Cawan petri
dilapisi dengan kertas terlebih dahulu
agar kemungkiinan alat itu pecah
sedikit. Kemudian dilapisi kembali
dengan plastic tahan panas agar tidak
ada udara yang masuk. Setelah itu
proses sterilisasi dilakukan dengan
autoklaf menggunakan suhu 121 ° C
selama ± 15 menit.
Proses sterilisasi menggunakan suhu cukup singkat. Dan juga pada suhu
121°C dikarenakan suhu tersebut tersebut bertujuan untuk membunuh
merupakan suhu yang optimal untuk endosprora, yaitu sel yang diproduksi
membunuh mikroorganisme secara oleh bakteri dan dimana sel tersebut
menyeluruh dengan waktu yang juga resisten terhadap pemanasan.
V. PENUTUP Darmadi. 2008. Infeksi Nosocomial
Problematika dan
5.1 Kesimpulan Pengendaliannya. Salemba
Kesimpulan yang didapat dari Medika. Jakarta.
praktikum Sterilisasi Alat dan Bahan, Hidayat. 2009. Metode Penelitian
yaitu sterilisasi merupakan proses Keperawatan dan Teknik
Analisis Data. Salemba
membersihkan atau membunuh
Medika. Jakarta.
mikroorganisme yang menempel Hikma, Nur, dkk. 2014. Potensi
pada alat – alat. Jenis – jenis Limbah Cair Tempe Secara
sterilisasi terbagi menjadi 3 macam, Mikrobiologis Sebagai
yaitu sterilisasi kimia, sterilisasi Alternatif Penghasil Biogas.
Jurnal Biocelebes. Vol 8:1.
fisik, dan sterilisasi mekanik. Pada
Indra. 2008. Mikrobiologi dan
praktikum ini menggunakan Parasitologi. Citra Aditya
sterilisasi fisik, yaitu sterilisasi Bakti. Bandung.
menggunakan alat bernama autoklaf James, Joyce, dkk. 2008. Prinsip –
dan suhu yang optimum untuk Prinsip Sains Untuk
Keperawatan. Erlangga.
membunuh mikroorganisme dengan
Jakarta.
menggunakan suhu 121°C . Lestari, Purwaning Budi. 2017.
5.2 Saran Mikrobiologi Berbasis Inkury.
Gunung samudera. Malang.
Saran pada praktikum ini adalah agar
Murwani, Sri. 2015. Dasar – Dasar
praktikan lebih memperhatikan lagi Mikrobiologi Veteriner.
apa yang dijelaskan oleh asisten Universitas Brawijawa Press.
sehingga dapat mengerti apa yang Malang.
dijelaskan oleh asisten. Dan untuk Soeparno,dkk. 2011. Dasar
Teknologi Hasil Ternak.
proses sterilisasi dilakukan dengan
Fakultas Peternakan
baik dan benar sehingga tidak ada Universitas Gadjah Mada.
lagi mikroorganisme yang masih Yogyakarta.
tertingga di alat – alat. Pratiwi, Sylvia. 2008. Mikrobiologi
Farmasi. Erlangga. Jakarta.
DAFTAR PUSTAKA Waziiroh, Elok, dkk. 2008. Proses
Aryulina, Diah.dkk.2010. Biologi termal pada pengolahan
SMA dan MA untuk kelas X. pangan. Universitas Brawijaya
Erlangga. Jakarta. Press. Malang.
Yuliarti, Nurheti. 2010. Kultur
Bhima. 2010. Mikrobiologi Umum. Jaringan Skala Rumah Tangga.
Universitas Muhammadiyah. Lily Publisher. Yogyakarta.
Malang.