MEC 201 Blok Konsep Patologi 1 Modul Praktikum

Praktikum Golongan Darah

Soegianto Ali, Francisca Tjhay, Ana Lucia Ekowati, William
Departemen Biologi Kedokteran – FKIK Unika Atma Jaya
Golongan darah ditentukan oleh adanya antigen pada permukaan eritrosit.
Telah diketahui ada sekitar 400 antigen golongan darah, yang banyak dibahas adalah
golongan ABO dan Rhesus. Macam-macam golongan darah lainnya, seperti: Lutheran, Kell,
Lewis, Duffy, Kidd, Diego, Bombay, MNS, dll.

Kepentingan golongan darah:

1. Pada transfusi darah
Pada umumnya, transfusi darah hanya dilakukan antara donor dan resipien dengan
golongan darah yang sama, kecuali dalam keadaan yang sangat spesifik maka golongan
darah O Rhesus negatif yang merupakan donor universal. Kondisi spesifik ini misalnya
pada kasus kebutuhan transfusi pada neonatus, kadang diberikan golongan darah O
dengan Rhesus negatif. Golongan darah AB merupakan resipien universal pada kasus
tertentu. Untuk donor perlu diperiksakan antigen ABH pada eritrositnya, sedangkan untuk
resipien diperiksakan zat anti A dan B dalam plasmanya. Antigen H sebenarnya
merupakan antigen dasar. Antigen A dan Antigen B merupakan hasil modifikasi dari
Antigen H. Orang dengan golongan darah O Bombay tidak memiliki Antigen H. Dalam
praktik kedokteran umumnya, kita menghindari pemberian golongan darah donor
Universal (O Rh negative) tanpa uji silang karena umumnya darah tersebut masih
mengandung serum yang mungkin membawa antibodi terhadap darah resipien.
2. Pada kedokteran forensik/kriminologi
Pada bayi-bayi yang tertukar di rumah sakit/masalah-masalah paternitas, mengaku anak
untuk menuntut warisan, antropologi, atau penelusuran etnik.
3. Pada transplantasi jaringan
Seringkali mencari jaringan donor berdasarkan kecocokan HLA untuk kasus tertentu
sangat sulit, sehingga pada beberapa kasus transplantasi, jaringan transplant yang
digunakan adalah yang sesuai golongan darah ABO dan Rhesusnya, terutama untuk
menghindari reaksi hiperakut transplantasi.
GOLONGAN DARAH ABO
Golongan darah ABO ditemukan oleh Dr. Karl Landsteiner pada tahun 1901 di Wina.
Ada empat macam golongan darah ABO, yaitu A, B, AB, dan O. Keempat golongan darah ini
ditentukan oleh tiga macam alel. Gen asli, yaitu gen H yang terletak pada lokus I
(isohemaglutinin). Gen H ini kemudian mengalami mutase (penambahan gugus gula) menjadi
gen A (N-Acetyl Galactosamine) dan gen B (Galactose) sehingga terdapat tiga alel yaitu A, B,
dan O (tanpa penambahan gugus gula). Gen-gen golongan ABO tersebut terletak pada lengan
panjang kromosom nomor 9. Antigen A terdapat pada golongan darah A, sedangkan antigen
B terdapat pada golongan darah B. Gen A dan gen B bersifat kodominan, sedangkan terhadap
gen O bersifat dominan. Golongan darah O tidak mempunyai antigen A dan antigen B, tetapi
mempunyai zat anti normal/natural/aglutinin dalam plasmanya yang terdiri dari zat anti A dan
anti B. Zat anti ini merupakan jenis IgM. Golongan darah A mempunyai zat anti B dalam
plasmanya, sedangkan golongan darah B mempunyai zat anti A. Golongan darah AB tidak

1
mempunyai zat anti normal dalam plasmanya. Bila zat anti A (golongan darah B) + antigen A
(golongan darah A) akan terjadi aglutinasi (penggumpalan). Demikian pula dengan golongan
darah B yang mempunyai antigen B bila dicampur dengan golongan darah A yang
mempunyai antigen A akan terjadi aglutinasi. Karena konsep aglutinasi inilah maka terkadang
kode genetic untuk golongan darah ABO disingkat sebagai I A, IB, dan IO (I merupakan
singkatan dari isoaglutinasi). Golongan darah O disebut donor universal karena dapat
diberikan kepada semua macam golongan darah, sedangkan golongan darah AB merupakan
resipien universal karena dapat menerima semua macam tipe golongan darah.

Genotip Fenotip Frekuensi Plasma_______

AA,AO A 42% zat anti B
BB,BO B 9% zat anti A
AB AB 3% -
OO O 46% zat anti A dan B

Sekarang telah diketahui adanya empat subgolongan darah A, yaitu A1, A2, A3, dan
A4. Dengan demikian terdapat pula empat sub alel golongan darah A, yaitu A1 s/d A4.
Dominansi dari alel-alel tersebut adalah A1 > A2 > A3 >A4.

GOLONGAN RHESUS
Golongan Rhesus ditemukan oleh Landsteiner dan Wiener pada tahun 1940. Eritrosit
kera (Maccaca rhesus) bila disuntikkan pada kelinci akan timbul anti-Rhesus. Anti Rhesus
tersebut akan mengaglutinasikan eritrosit semua kera Rhesus maupun eritrosit manusia, yang
berarti pada manusia ditemukan antigen yang mirip antigen Rhesus.
Pada sekitar 85% orang kulit putih juga terjadi penggumpalan eritrosit bila dilakukan
pemeriksaan dengan anti-Rhesus. Keadaan ini disebut dengan Rhesus positif, yang berarti
mereka mempunyai antigen Rhesus, sedangkan yang tidak menunjukkan reaksi aglutinasi
disebut Rhesus negatif, mereka tidak mempunyai antigen Rhesus. Hampir 100% penduduk
Asia bergolongan Rhesus positif. Menurut Fischer, ada tiga pseudo alel yang terangkai amat
berdekatan sehingga disebut sebagai complete linkage (gen C, D, dan E). Gen D dominan
menyebabkan Rhesus positif. Menurut Landsteiner, hanya dikenal genotip RR/Rr untuk
Rhesus positif, sedangkan untuk Rhesus negatif genotipnya rr.
Bila perkawinan seorang wanita Rhesus negatif (rr) dengan seorang laki-laki Rhesus
positif (RR/Rr) dan janinnya Rhesus positif, maka akan muncul suatu kelainan yang disebut
eritroblastosis fetalis. Hal ini dapat terjadi karena masuknya eritrosit anak yang mempunyai
antigen Rhesus ke dalam sirkulasi darah ibu lewat plasenta atau pada waktu lahir sehingga ibu
akan membuat zat anti-Rhesusnya yang termasuk dalam kelompok IgG sehingga mampu
melewati sawar darah plasenta. Zat anti yang terbentuk tersebut akan kembali ke dalam tubuh
janin sehingga akan terjadi reaksi dengan antigen Rhesus yang terdapat pada eritrosit anak dan
menimbulkan hemolisis serta aglutinasi. Keadaan ini merangsang fetus untuk membentuk sel-
sel darah merah baru sehingga banyak sel darah merah muda/eritroblas dalam darahnya, maka
kelainan ini disebut eritroblastosis fetalis. Pembentukan zat anti-Rhesus akan semakin
meningkat pada kehamilan anak-anak berikutnya sehingga penyakit yang ditimbulkannya
juga semakin berat sampai timbul kematian pada janinnya. Untuk mencegah terjadinya
eritroblastosis fetalis, dilakukan post-natal imunoprofilaksis sejak tahun 1970. Dengan
tindakan ini, insiden terjadinya berhasil ditekan dari 14% menjadi 1-2%. Dengan
diperkenalkannya ante-natal imunoprofilaksis, kejadiannya dapat ditekan lebih lanjut menjadi
0,1% (Gandhi et. al, 2018). Saat ini, eritroblastosis fetalis sudah dapat dicegah dengan
penyuntikan imunoglobulin anti-Rhesus ke dalam sirkulasi ibu yang siap merusak eritrosit
fetus yang masuk ke dalam darah ibu.
Pemeriksaan golongan darah ini merupakan contoh dari reaksi aglutinasi. Reaksi
aglutinasi pada pemeriksaan golongan darah berlangsung antara antibodi yang digunakan
untuk pemeriksaan dengan antigen pada permukaan eritrosit. Reaksi aglutinasi kadang tidak
langsung tervisualisasi, namun dalam pemeriksaan ini aglutinasi mudah divisualisasi
disebabkan sel eritrosit berperan dalam pembentukan Lattice dan memperbesar aglutinasi
sehingga mudah diamati.

Penentuan Golongan Darah

 Persiapan
- Persiapan penderita: tidak memerlukan persiapan khusus
- Prinsip: reaksi antigen-antibodi berupa penggumpalan (aglutinasi)
- Alat dan bahan:
 Darah yang diambil dari ujung jari tangan
 Serum yang terdiri atas:
o serum anti-A biasanya berwarna biru atau hijau
o serum anti-B biasanya berwarna kuning
o serum anti-AB biasanya berwarna merah muda/tak berwarna
o serum anti-D (Rhesus) biasanya tidak berwarna/bening
o Perlu diperhatikan bahwa zat warna ini adalah tambahan, sehingga produsen berbeda
mungkin menggunakan warna yang berbeda, walau demikian umumnya warna ini
standar universal untuk memudahkan penggunaannya.
 Pen Lancet
 Lancet 26G
 Kapas beralkohol (alcohol swab)
 Kartu golongan darah
 Plastik kartu golongan darah

 Prosedur Pemeriksaan
1. Pengambilan darah
a. Lokasi pengambilan darah: ujung jari tangan kanan/kiri.
b. Masukan lancet 26G ke dalam pen lancet.
c. Atur kedalaman lancet dengan memutar skala yang ada pada pen lancet.
d. Usapkan kapas beralkohol pada salah satu ujung jari tangan kanan/kiri.
e. Tusukkan pen lancet ke ujung jari.
2. Pemeriksaan dengan cara slide
a. Pada kartu golongan darah yang telah berisi identitas, teteskan 1 tetes serum anti-
A di kolom “anti: A”, 1 tetes serum anti-B di kolom “anti: B”, 1 tetes serum anti-
 AB di kolom “anti: AB”, dan 1 tetes serum anti-D (anti Rhesus) di kolom “anti:
Rh”.
b. Pada masing-masing serum teteskan 1 tetes darah yang akan diperiksa, campurkan
dengan cara menggoyangkan ke depan dan ke belakang, sambil diamati adanya
gumpalan (aglutinasi) berupa titik-titik halus seperti pasir yang akan terjadi.
c. Pengamatan dilakukan dalam waktu 2 menit setelah percampuran serum dan
darah yang akan diperiksa.
d. Kesalahan dapat terjadi dalam pembacaan secara kasat mata karena gumpalan
yang terjadi bisa sangat halus dan tidak terlihat, pastikan secara mikroskopik.

Hal yang harus diperhatikan

- Masing-masing serum tidak boleh tercemar oleh serum yang lain.
- Kalau hasil pengamatan aglutinasi meragukan, maka dapat diamati di bawah
mikroskop.

 Intepretasi Hasil

Aglutinasi terjadi pada Penilaian

Anti-A Anti-B Anti-AB Anti-D Golongan Rh
Darah
+ - + + A Positif
- + + + B Positif
+ + + - AB Negatif
- - - - O Negatif
Alat dan Bahan untuk Penentuan Golongan Darah

Kartu golongan darah Plastik kartu golongan darah

Alcohol swab Berbagai jenis serum

Lancet disposable
 DAFTAR PUSTAKA

1. Westhoff CM, Storry JL, Shaz BH, Human Blood Groups Antigens and Antibodies in
Hoffman R, Benz EJ, Silberstein LE, et. al. (eds). Hematology: Basic Principles and
Practice, 7th Ed (2018), Elsevier, Philadelphia, pp 1687-1701 (downloadable from
Clinical Key).
2. Aoyagi K, Ashihara Y, Kasahara Y. Immunoassays and Immunochemistry in McPherson
MA, Pincus MR, (eds). Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory
Methods, 23rd ed (2017), Elsevier, St. Louis, pp 862-889 (downloadable from Clinical
Key).
3. Gandhi MJ, Strong DM, Whitaker BI, Petrisli E. A brief overview of clinical significance
of blood group antibodies. Immunohematology. 2018 Jan; 33(1):4-6.