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DUPLICACIÓN

TRANSCRIPCIÓN Y
TRADUCCIÓN
DEL DNA
1) Duplicación
2) Transcripción
3) Procesamiento de RNA
4) Traducción
DNA (Ácido desoxirribonucleico)

El ADN contiene aproximadamente 43,162 genes

21,306 codifican para proteínas

21,856 NO codifican para proteínas

Está dividido en exones e intrones:

Exones se transcriben

Intrones no se transcriben (hay excepciones)

En humanos aproximadamente el 50% del DNA es derivado de


elementos móviles de DNA (simbiontes genéticos)
DNA viral, de células
Procariotas, de mitocondrias
cloroplastos en eucariotas son
moléculas circulares.

Replicación

Topoisomerasa I
Topoisomerasa II

DNA nuclear en eucariotas

Topoisomerasa I
Replicación en theta
Bacterias
Mitocondrias
cloroplastos
Replicación semiconservativa del DNA

M. Meselson, W. F. Stahl, 1958


Hay varios replicones
A lo largo de la cadena de
DNA

Se tienen que identificar los sitios


de origen de la replicación
A-T
Duplicación de DNA 
(dirección 5’ ‐‐‐‐ 3’)

Incorrecto                                                                   Correcto
Duplicación

Cadena principal: síntesis
del extremo 5´ a 3´
Cadena rezagada:
Síntesis por medio de 
fragmentos de Okasaki

Para poder comenzar duplicación


se requiere de un origen, el complejo
ORC (origin recognition complex)
se encarga de esto, junto con las
proteínas MCM reconocen sitios ricos
en A-T. Se requieren además cargadores
de helicasas, topoisomerasas
Cdks y gemininas
DNA con “licencia” para
duplicarse
El cebador de la cadena
principal es sintetizado
por una DNA primasa
(elabora RNA)
Una vez elaborado el
cebador las DNA
polimerasas
(α, δ y ε) agregan los
dNTPs
Síntesis de los cebadores de
RNA para crear los fragmentos
de Okasaki
(Reiji Okasaki, 1968)
Helicasas: desenrrollan la doble hebra de DNA
Topoisomerasa I. se asocia con la helicasa para remover el estrés producido por
la torsión generada durante el desenrrollamiento de las hebras de DNA.

Primasas: sintetizan los cebadores de RNA tanto para los fragmentos de


Okasaki como para la cadena líder.

DNA polimerasa α (Pol α): agrega dNTPs al cebador formando un cebador


mixto RNA-DNA

DNA polimerasa  (Pol ): agrega dNTPs a la cadena hija de DNA. Esta forma
Un complejo con Rfc (factor de replicación C) y PCNA (antigeno de
proliferación nuclear) para desplazar el complejo primasa-Pol  después de
sintetizar el cebador.

Proteína de replicación A (RPA): se une a la cadena molde de DNA para


Mantenerla en una configuración óptima para ser copiada por Pol .

Ribonucleasa H y Fen I: remueven los rNTPs en el extremo 5’ de los


Fragmentos de Okasaki

DNA ligasa: une los fragmentos de Okasaki por medio de enlaces fosfoester
En dirección 5’---3’
RESUMEN DUPLICACIÓN DE DNA

7
5
Tetrahymena y Oxytricha
Secuencias 5’- TTAGGG-3’
Repetidas en tándem
Cientos o miles de veces

Las células se pueden dividir


Cierto número de veces
“Limite de Hayflick”
Leonard Hayflick, 1960

Humano 50 veces
Tipos de daño al DNA
Reparación del DNA  

1) La polimerasa es capaz de reconocer
Un nucleótido mutado
2) Escisión – corte del nucleótido dañado 
De la copia 1.
3) Resíntesis  de DNA
Las DNA polimerasas hacen una nueva copia
Usando como molde  a la cadena 2

4) Ligación – la DNA ligasa une el nucleótido
Reparado con la cadena de DNA
Reparación por escisión de bases               Reparación por escisión de nucleótidos
DNA
Gen – exones e intrones
Exones – codifican una proteína
Intrones – no codifican
Splicing – se codifica parte de un
intron – modifica el tamaño de la
proteína

RNA ribosomal se encuentra en el


ribosoma (Polimerasa I, nucleolo)
RNA mensajero entra en el ribosoma
(polimerasa II, nucleoplasma)
RNA transferencia – lleva el aminoácido
(polimerasa III, nucleoplasma)
Gen: Secuencia de ácidos nucleicos que es
necesaria para la síntesis de un producto funcional
(polipéptido o RNA)

Región codificadora: arreglos de nucleótidos que


codifican la secuencia aminoacídica de una
proteína

Secuencias de DNA requeridas para la síntesis de


RNA.

Regiones no codificadoras:

Sitios de anclaje y poliadenilación (poli A)

Sitios de empalme para RNA.


Regiones reguladoras.

Regiones de DNA no codificante que regulan la


expresión de genes adyacentes.

Proteínas reguladoras.

Proteínas que regulan las actividades de otros genes,


actúan uniéndose a las regiones reguladoras de DNA o
Interfiriendo las acciones de otras proteínas
RNA
RNAm: Encargado de llevar la información necesaria para fabricar
una proteína (5% ARN total)

RNAr: forma parte de los ribosomas (80% del total)

RNAt: es el mas pequeño, encargado ded transferir los aminoácidos


A la cadena polipeptídica en formación

RN@s p_qu_ños

RNA nuclear pequeño: interviene en la maduración del RNAm

miRNA: reconocen RNAm y lo silencian

siRNA: pueden ser endógenos o exógenos, degradan RNAm


El RNA se sintetiza en dirección 5’ -------3’
La cadena de DNA que sirve de molde se denomina cadena patrón
La otra cadena de DNA se denomina cadena codificante
El RNA se lee en dirección 5’ ------3’
SITIOS PROMOTORES DE LA TRANSCRIPCIÓN
Factores de trascripción (TFs)
PASOS DE LA TRANSCRIPCIÓN
INICIACIÓN

1) Polimerasa se une a la
secuencia del promotor en
DNA de doble cadena
“Complejo cerrado”
Se necesitan factores de
transcripción (TFIID, GTF)

2) Polimerasa abre la doble


cadena de DNA cerca del
sitio de transcripción,
formando una orquilla de
transcricpción. “Complejo
abierto”. (14 PB).
Sitios promotores: secuencia de nucleótidos
Que definen el sitio de iniciación de la 3) Polimerasa cataliza la unión
transcripción (CCAAT, TATA) fosfodiester de dos
Nucleotidos tri-fosfato (rNTPs)
iniciales.
PROLONGACIÓN
4) Polimerasa avanza
rio abajo (3’ – 5’)
sobre la cadena
molde abriendo el
DNA y adicionando
nucleótidos para el
crecimiento del
RNA.

TERMINACIÓN
5) En el sitio de paro de
transcripción, la
polimerasa libera al
RNA completo y se
disocia del DNA.
RNA primario o
transcripto primario
PROCESAMIENTO DE RNA
SPLICING ALTERNATIVO

En eucariotes superiores este mecanismo es importante


para la producción de diferentes formas de una proteína
(isoformas)
RNA mensajero - Codón – triplete de nucleótidos –
codifican para un aminoácido
RNA transferencia – anticodón – complementario al
codón –transferencia de un aminoácido
RNA ribosomal se une al RNAm
Efecto de las mutaciones (inserciones o deleciones) en el marco de lectura
hace que se transgiverse el mensaje
Marcos de lectura con mutaciones positivas y negativas junas no alteran
mucho el mensaje

(Crick y Brenner, 1961)


El código genético no se superpone
Cada nucleótido es parte de uno y solo un triplete

Crick y Brenner, 1961


Código genético 43= 64 tripletes
RNA DE TRANSFERENCIA

Bases modificadas

D= dihidrouracilo
T=ribotimina
Ψ=pseudouridina
Activación de aminoácidos

Aminoácido activado
t-RNA cargado
Estructura de los ribosomas en procariotes y eucariotes
Iniciación
Se requiere la presencia
de factores de iniciación
eIFs (eIF1, eIF2, etc)
eIF2 se une a GTP y este
se une al tRNA met, todo
esto se une a subunidad
pequeña del ribosoma

Este complejo se une a RNAm


reconoce el cap 5’ (eIF4F)
y se ensambla a la subunidad
grande para comenzar la
traducción

Sitio de reconocimiento
del ribosoma, secuencia
de Shine-Dalgarno
Elongación

EF-Tu y EF-Ts= factores


de elongación que están
unidos a GTP
Continuación elongación

A C

EF-G-GTP= factor de desplazamiento


Terminación
Modelo circular de polisomas para la síntesis de proteínas

En este arreglo un RNA


mensajero es leído por varios
Ribosomas

Cada uno sintetiza de manera


Independiente un polipéptido
Eucariotes
Los genes que se expresan en los diferentes tipos de
células influyen sobre las funciones y formas que estas
células o grupo de ellas tiene.
Las células pueden cambiar el conjunto de genes que se expresan
en respuesta a cambios en el medio ambiente (señales de otras
células) el punto mas importante del control de la expresión es el
inicio de la transcripción

El DNA contiene regiones reguladoras que controlan la transcripción

Simples: actúan como interruptores


Complejas: actúan como microprocesadores que responden a señales
reprimiendo o activando la transcripción de los genes vecinos.

Regiones reguladoras

Fragmentos cortos de DNA de secuencias definidas


Proteínas reguladoras que se unen al DNA:
Las proteínas reguladoras reconocen y se unen a secuencias de
nucleótidos específicas en el DNA sin tener que abrir La doble
cadena, esto sucede en los zurcos mayores.

La union de las proteínas reguladoras se falicita


debido a la geometría del DNA , algunos
zurcos Son mayores o menores a 36°.
Cuando las proteínas se unen causan que la
doble hélice de DNA se distorsione.

Estas proteínas pueden llegar a unirse a


segmentos tan grandes de DNA que
Pueden abarcar dos vueltas de la doble
hélice
Homeodominios
Son una clase de proteínas que
se unen a secuencias de
nucleótidos especiales
denominadas genes selectores
homeóticos

Dedos de Zinc
Proteínas reguladoras que tiene
uno o más átomos de zinc como
parte de su estructura, el zinc une
dos partes de la estructura de la
proteína que tienen conformación
plegada.
Zipper de Leucina
Dímero que reconoce secuencias de
Nucleótidos en ambas cadenas de DNA

Homodímeros; ambas cadenas iguales

Heterodímeros: cadenas diferentes

En eucariotes la región de control de la expresión génica consiste de:


Un sitio promotor donde se ensamblan los factores de trascripción y la
Polimerasa.
Secuencias reguladoras a las cuales se unen las proteínas reguladoras
para controlar el ensamblaje del sitio promotor.
Las proteínas reguladoras pueden formar complejos que en unos casos
activan la transcripción y en otros la reprimen, estas no son
necesariamente represoras o activadoras, su función depende de la
actividad del complejo del cual forman parte.