UNIVERSIDAD MILITAR NUEVA GRANADA

Permeabilidad de la membrana

1. FACULTAD O UNIDAD ACADÉMICA: (11) Ciencias Básicas y Aplicadas

2. PROGRAMA: (12) Biología Aplicada

3. ASIGNATURA: (13) Biología General

4. SEMESTRE: (14) I

5. OBJETIVOS: (15)

 Familiarizarse con los conceptos de difusión, ósmosis y solución hipotónica, isotónica e hipertónica
 Reconocer los procesos de plasmólisis y deplasmólisis en células vegetales.

6. COMPETENCIAS A DESARROLLAR: (16)

 Medir tiempos de procesos biológicos.

 Desarrollar las habilidades metodológicas necesarias para el trabajo en laboratorio
 Interpretar los resultados de experimentos biológicos simples que permiten estudiar indirectamente
fenómenos biológicos complejos

7. MARCO TEORICO: (17)

El modelo de la estructura de la membrana más comúnmente aceptado es el "mosaico fluido", propuesto

por Sanger y Nicolson en 1972. En este modelo, la bicapa lipídica está compuesta por fosfolípidos, de
manera que las colas hidrofóbicas, no polares se dirigen hacia adentro y las cabezas polares apuntan
hacia afuera, en dirección del medio acuoso. En este modelo, las proteínas no son capas estáticas como
se había propuesto antes, sino que están entremezcladas con los lípidos, produciendo un mosaico. La
bicapa lipídica tiene una estructura fluida en la que las proteínas se mueven horizontalmente. Algunas
proteínas penetran la bicapa lipídica total o parcialmente, otras, se asocian con la membrana sin
internarse en ella.

El contenido de las células está encerrado en membranas de permeabilidad selectiva. Esta permeabilidad
puede ser alterada por las condiciones ambientales.

En muchas células, como las células de las hojas de Elodea, la membrana plasmática es permeable al
agua. El movimiento del agua hacia el interior y exterior de la célula ocurre por difusión, un proceso de
movimiento molecular desde una región de alta concentración a una de menor concentración, debido a la
energía cinética que poseen las moléculas. La difusión del agua a través de una membrana en respuesta
a un gradiente de concentración, se llama ósmosis. Cuando una célula vegetal es colocada en agua, el
agua fluye hacia adentro por ósmosis. Entonces, el volumen de la célula aumenta, causando que la
membrana plasmática se expanda hasta la pared celular rígida. La presión osmótica aumenta hasta
que el flujo neto de entrada de agua permanece igual al flujo neto de salida de agua, es decir alcanza el
equilibrio.

En el caso de una célula animal, como un eritrocito, las consecuencias de la presión osmótica son
diferentes. El agua penetra en la célula, pero debido a que no existe una pared celular, la célula se hincha
hasta que explota, un proceso conocido en la célula sanguínea como hemólisis.

7.1 Tipos de soluciones de acuerdo a la concentración del soluto

El uso no autorizado de su contenido así como reproducción total o parcial por cualquier persona o entidad, estará
en contra de los derechos de autor
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Tanto el citoplasma, como el medio que baña la célula, son soluciones acuosas El agua es el solvente y
las proteínas, azúcares y otros compuestos, son los solutos. La concentración del soluto se define
como el número total de moléculas disueltas sobre la unidad de volumen. Los términos hipertónico,
hipotónico e isotónico se utilizan para describir las concentraciones relativas de dos soluciones. Una
solución se llama hipertónica, si la concentración de sus solutos es mayor que la concentración de
solutos de otra solución, en este caso, la célula. Si la concentración de soluto fuera de la célula es menor
que dentro de ésta, la solución externa se llama solución hipotónica. Una solución con la misma
concentración de solutos que la célula, se llama solución isotónica.

7.2 Efecto de sustancias no electrolíticas

Los alcoholes, como otras sustancias no-electrolíticas, penetran las células por transporte pasivo, es
decir, la fuerza directriz es el gradiente de concentración. La tasa de penetración está determinada por
factores tales como la solubilidad de la sustancia en los lípidos de la membrana, el tamaño molecular, la
estructura de la molécula y la presencia de grupos hidroxilo (-OH), los cuales tienden a formar puentes de
Hidrógeno y a permanecer en la solución acuosa. El estudio de permeabilidad de los alcoholes se basa
en los estudios clásicos de Overton, en el que las hojas de Elodea se exponen a diferentes alcoholes, los
cuales están en una solución isotónica de sucrosa, para poder seguir sólo, el efecto del alcohol. Los
alcoholes que penetran rápidamente, establecerán concentraciones iguales a ambos lados de la
membrana plasmática casi inmediatamente, entonces, no causarán ningún efecto visible en las células. Si
el alcohol entra despacio, durante algún tiempo la concentración del alcohol será un poco más alta fuera
de la célula, que dentro. Durante este intervalo, el flujo neto de agua será hacia el exterior, causando una
disminución en el volumen de la célula, pero a medida que vaya entrado el alcohol también entrará agua
por ósmosis y el volumen inicial de la célula se recuperará. El tiempo que transcurre desde la exposición
inicial al alcohol hasta que el efecto de la recuperación del volumen de la célula es visible corresponde
aproximadamente al tiempo requerido para la penetración del alcohol.

8. MATERIALES, REACTIVOS, INSTRUMENTOS, SOFTWARE, HARDWARE O EQUIPOS: (18)

En el laboratorio:

- Microscopio de luz
- Soluciones de sucrosa 0.2M, 0.3M, 0.4M y 0.5M
- Soluciones de sucrosa-alcohol: metanol, etanol, 1-propanol, propilenglicol y glicerol, 0.4 M, en una
solución de sucrosa isotónica.
- Goteros
- Termómetro

Del estudiante:

- Láminas y laminillas
- Hojas de Elodea frescas y en buen estado
- Reloj o cronómetro

9. PRECAUCIONES CON LOS MATERIALES, REACTIVOS, INSTRUMENTOS Y EQUIPOS

UTILIZAR : (19)

Para el uso del microscopio, tenga en cuenta las normas para su correcta utilización.

10. CAMPO DE APLICACIÓN: (20)

Los conceptos de ósmosis y difusión son fundamentales para la comprensión de los seres vivos y su
relación con el agua. Por ejemplo, la fisiología de los organismos marinos y dulceacuícolas está
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dominada por las leyes físicas que determinan el movimiento de las moléculas de agua a través de las
membranas.

11. PROCEDIMIENTO, METODO O ACTIVIDADES: (21)

11.1 Difusión

Llene las dos terceras partes de un beaker con agua, colóquelo sobre el mechero y caliéntelo hasta que
alcance los 50ºC aproximadamente. Colóquelo sobre la mesa cuidadosamente. Llene otro beaker del
mismo tamaño con la misma cantidad de agua, cuya temperatura sea de 4ºC aprox. En cada uno de los
beakers adicione una gota de azul de metileno. Mantenga los beakers sobre una superficie estable sin
agitar. Mida el tiempo que toma el colorante en cada uno de los beakers, en producir una solución
homogénea. Explique.

11.2 Observación de los efectos de diferentes concentraciones de sucrosa en el volumen de

células vegetales

Prepare un montaje húmedo de una hoja de Elodea en una solución de sucrosa 0.6 M. Para esto tome
una hoja de una rama sana y elimine el exceso de agua. Colóquela sobre una lámina, con el haz hacia
arriba, adicione dos gotas de solución de sucrosa y cúbrala con un cubreobjetos. Examine al microscopio
la preparación, escoja un área apropiada de observación y observe qué ocurre. Determine si el volumen
de las células aumenta, disminuye o sigue igual respecto a la pared celular (que es invariable). Dibuje
una célula identificando la pared celular, la membrana plasmática, cloroplastos y si es posible el núcleo
núcleo.

Haga preparaciones individuales de hojas de Elodea en soluciones de sucrosa 0.2 M, 0.3 M, 0.4 M y 0.5
M, siguiendo el mismo procedimiento del primer montaje. Examine cada preparación periódicamente
durante cinco minutos. En cada preparación, anote si ha ocurrido disminución, aumento o no cambio del
volumen de la célula. Haga ilustraciones a 400x de una célula típica de cada concentración. Determine
cuales soluciones son hiper, iso o hipotónicas respecto a las células de elodea.

El fenómeno de cambio de volumen de las células puede ser temporal. Para observar este fenómeno
remueva el cubreobjetos de una de las muestras donde observó disminución del volumen de la célula.
Cuidadosamente elimine la solución de sucrosa y adicione dos gotas de agua destilada. Después de un
minuto, coloque el portaobjetos sobre la hoja y examine al microscopio durante 5 minutos. Haga una
ilustración de este fenómeno.

11.3 Velocidad de la penetración de algunos alcoholes

En el experimento se ensayarán los siguientes alcoholes: metanol, etanol, 1-propanol, propilenglicol y

glicerol. La concentración de cada alcohol es 0.4 M en una solución de sucrosa aproximadamente
isotónica. Haga montajes de una hoja de Elodea con la superficie superior hacia arriba, elimine el exceso
de agua y adicione dos gotas cada una de las soluciones de alcohol-sucrosa que va a ensayar. Anote la
hora a la que el montaje se preparó. Examine las células al microscopio hasta que observe cambios del
volumen de la célula. Si en 5 minutos estos no ocurren, asuma que no van a ocurrir. Anote el resultado.
Si ocurre pérdida del volumen de la célula determine si esta es leve, moderada o severa. A continuación
determine si el fenómeno opuesto (recuperación del volumen inicial de la célula) ocurre y mida el tiempo
que este toma. Si ésta no ocurre en 10 minutos asuma que no va a suceder.

De acuerdo a sus observaciones, en el informe de laboratorio determine el orden de velocidad con la cual
penetran los alcoholes ensayados, del rápido al más lento. Dibuje la estructura química de los alcoholes
que utilizó en el experimento, y teniendo en cuenta la estructura de los alcoholes proponga una hipótesis
que explique los resultados.

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11.4 Preguntas

 ¿Qué cree usted que sucedería si se repite el experimento de la difusión en un beaker pero usando
una sustancia no soluble en el líquido (por ejemplo una gota de aceite). Explique su respuesta.
 De acuerdo a los componentes y estructura de la membrana, que tipo de sustancias se esperaría que
pudieran permear la membrana y cuales no?
 Cuándo una célula de Elodea ha perdido volumen debido a que se encuentra en una solución
hipertónica ¿qué contiene el espacio entre la membrana plasmática y la pared celular?
 Explique brevemente porqué los procesos que implican difusión de sustancias son lentos.

12. RESULTADOS ESPERADOS: (22)

Se espera que los estudiantes puedan familiarizarse con los fenómenos de ósmosis y difusión, así como
los conceptos de solución hipértonica, hipotónica e isotónica, mediante un ejemplo experimental. Por otro
lado, esta práctica permitirá que mejoren sus habilidades prácticas para el trabajo en el laboratorio.

13. CRITERO DE EVALUACIÓN A LA PRESENTE PRÁCTICA (23)

Quiz antes de la práctica e informe de laboratorio, en donde se espera observar ilustraciones de .

14. BIBLIOGRAFIA: (24)

 Adaptado de: Bregman, A. Laboratory Investigations in Cell and Molecular Biology. 1996. Revised
Third Edition. John Wiley-Sons Edition.
 Ville C. A.. 1996. Biología. Séptima Edición. Mc. Graw Hill. Bogota.
 Curtis, H. y Barnes, N.S. 1993. Biología. Quinta Edición. Editorial Médica Panamericana.

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