Annals of Brazilian Academy of Sciences (2013) 85 (3): (Annals of Brazilian Academy of Sciences) Versi cetak ISSN 0001-3765

/ Versi online ISSN 1678-2690 www.scielo.br/aabc Polipida

aktif yang diisolasi dari ​Penicillium herirei
1​ 1​ 1​ 2
ANDREY MR MARINHO​ , PATRICIA SB MARINHO​ , LOURIVALDO S. SANTOS​ , EDSON RODRIGUES FILHO​
3
dan IZABEL CP FERREIRA​

1​Fakultas Kimia, Universitas Federal Pará, Jalan Augusto Corrêa Street, 01, 66075-110 Belém, PA, Brazil ​2​Departemen de

Chemistry, Universitas Federal São Carlos, Rod.

​ Washington Luiz Km 235, 13565-905 São Carlos, SP, Brasil ​3​Departemen

Analisis Klinis, Universitas Negeri Maringá, Av. Colombo, 5790, 87020-900 Maringá, PR, Brasil
Naskah diterima pada 15 September 2011; diterima untuk publikasi pada 10 Januari 2013
ABSTRAK ​Dalam karya ini kami melaporkan isolasi dengan metode klasik kromatografi enamdari
polibididaPenicillium herirei.​ Senyawa citreorosein (1), emodin (2), janthinone (3), citrinin (4), citrinin H1 (5) dan
dicitrinol (6) diidentifikasi dengan metode spektral 1d dan 2d NMR dan MS. Senyawa 1, 2 dan 3 diuji terhadap
bentuk promastigotes ​Leishmania brasiliensis ​dan 1 dan 2 juga diuji terhadap ​Escherichia coli​, ​Pseudomonas
aeruginosa d​ an ​Bacillus subtilis ​dan menunjukkan aktivitas yang baik.
Kata kunci​: poliketida, uji biologi, ​P. herchi​.
Korespondensi dengan: Andrey MR Marinho Email: andrey@ufpa.br
909-912seperti itu
PENDAHULUAN
Zatjuga dapat berguna bagi manusia,
Pencarian zat dengan aktivitas biologis yang bermanfaat bagi manusia adalah salah satu bidang yang
paling banyak dipelajari dalam sains secara keseluruhan . Selalu ada kebutuhan untuk memperbarui
gudang persenyawaan senyawa aktif karena parasit memperoleh resistensi terhadap obat yang sudah ada di
pasaran, serta munculnya penyakit baru.
Jamur adalah produsen metabolit sekunder yang baik, banyak dengan aktivitas biologis yang berguna
(Petrini et al. 1992, Jarvis dan Miller 1996, Li et al. 1998, Stierle et al. 1995).jamur endofit
Oleh karena itusangat penting untuk mempelajari aktivitas biologis zat yang diproduksi oleh jamur endofit.
Dalam tulisan ini kami melaporkan isolasi enam polyketides citreorosein (1), emodin (2), janthinone (3),
citrinin (4), citrinin H1 (5) dan dicitrinol (6) (Gambar 1). Senyawa 1, 2 dan 3 diuji terhadap bentuk
promastigote dari ​Leishmania brasiliensis ​dan 1 dan 2 juga diuji untuk aktivitas antimikroba.
Seringkali zat que menghasilkan dapat membantuinang
Bahandan Metode ​tanamanuntuk melawan infestasi lainnya oleh jamur, bakteri dan virus, bahkan membantu
dalam perkembangannya
L​eneral ​P​ROCEduRES
(Shittu et al.2009, Hamayun et al. 2009). Karena
spektrum IR diukur dalam BOMEN MB-102 spektrofotometer dalam pelet KBr. Data APCIMS diperoleh
dalam mode negatif menggunakan MICROMASS
An Acad Bras Cienc (​ 2013) ​85 ​(3)
910 ​ANDREY MR MARINHO et al.
 nggris) yang dilengkapi dengan tipe ion ESI / APCI
z-spray". 1​​ H dan 13​
​ C percobaan NMR

n Acad Bras Cienc ​(2013) ​85 ​(3)

Gambar 1 - ​polyketides diisolasi dari ​P. herirei​.

roleh dalam spektrometer BRUKER DRX-400

uker Daltonics, Jerman) dalam CDCl​3 dengan
​ TMS
agai standar internal.

Instrumen QuATTRO-LC (Waters, Manchester -

911 ​ISOLASI DARI AKTIF poliketida ​Penicillium herquei
M​ICROORGANISM
dan diinkubasi pada 25 ° C selama 24 jam. Setelah periode ini,
P. yang diwariskan t​ ermasuk dalam koleksi Laboratorium Biokimia Mikroorganisme Mikromolekul,
Departemen Kimia - Universitas Federal São Carlos dan diidentifikasi oleh nomor LaBioMi 019. Koleksi
ini berisi isolat dari ​Melia azedarach ​(Santos et al 2003).
Parasit yang bertahan hidup dihitung dalam ruang Neubauer dan dibandingkan dengan kontrol.
Pentamidine isethionate (Eurofarma​®​) digunakan sebagai obat kontrol positif dan dMSO sebagai kontrol
negatif. LD50 / 24 ditentukan oleh analisis regresi linier dari persentase penghambatan dengan 10%
kesalahan statistik.
C​uLTuRE OF ​P. herqueii ​di Rice dan poliketida Isolasi
The​NTIBACTERIAL ​B​IOASSAY
menunjukkan perubahan kerentananMikroorganisme untuk tes poliketida Empat puluh lima Erlenmeyer
Labu (500 ml) mengandung 90 gberas ( "Paman yang Pernah Berkunjung ini​®")​dan 75 ml suling
Apakah ditentukan oleh microbroth uji dilusi direkomendasikan oleh Sub-komite antijamur Apakah air per
termos diautoklaf selama 45 menit pada 121 ° C
Kerentanan Pengujian kubus US National Committee Kecil miselium berisi media PDA
Standar Laboratorium Klinik (NCCLS1997).P. ​herquei A​ pakah ditambahkan dalam 42 labu Erlenmeyer
dalam kondisi steril Tiga labu digunakan sebagai
HASIL DAN PEMBAHASAN ​kontrolSetelah 20 hari pertumbuhan pada 25 ° C, biomassa yang diperoleh
dimaserasi dengan diklorometana,
P​OLYKETIDES ​I​DENTIFIKASI
Etil asetat dan metanol Larutan diklorometana diuapkan. di bawah tekanan tereduksi, menghasilkan residu
kekuningan (24,2 g) Bagian dari residu ini (10,0 g) menjadi sasaran silika gel bertekanan rendah CC elu
ted dengan ​n-​heksana, etil asetat dan gradien metanol. Polaritas medium
Senyawa 1, 2 dan 3 diidentifikasi dengan analisis spektral 1d dan 2D NMR dan MS dibandingkan dengan
literatur dan menunjukkan kemiripan total dengan polyketides citreorosein (1), emodin (2) dan janthinone
(3) (Fujimoto et al 2004, Cohen dan Towers 1995, Marinho et al. Zat 4, 5 fraksi dielusi dengan etil asetat
berulang kali
dan data 6 1D dan 2D NMR dan MS konsisten dikromatografi pada silika gel CC dielusi
dengan citrinin, citrinin H1 dan dicitrinol, sebelumnya n-heksana, aseton dan gradien metanol. Akhirnya,
diisolasi oleh tim kami dari ​P. janthinellum ​(Marinir mereka menyediakan citreorosein polyketides (1),
dan Rodrigues Filho 2011). emodin (2), janthinone (3), citrinin (4), citrinin H1 (5) dan dicitrinol (6).
L​EISHMANICIDAL ​T​EST
L​EISHMANICIDAL ​A​SSAY
Zat 2 menghambat 50% parasit pada 320 μg / mL yang menunjukkan hasil yang menjanjikan. Namun,
subs-Promastigote bentuk ​Leishmania viannia tances
1 dan 3 menghambat sekitar 20% dan 22% ​braziliensis M ​ hOM / BR1987 / M11272 masing-masing adalah
parasit pada 320 μg / mL. Tampaknya tumbuh pada suhu 25 ° C dalam medium Drosophila Schneider,
metil hidroksilasi dalam zat 1 berkurang ditambah dengan 10% fetal calf serum (FCS). Sel
aktivitas di lebih dari 50%. Hasil yang diperoleh dikumpulkan pada fase logaritmik, diresuspensi dalam
uji leishmanicidal dengan zat 1, 2 dan 3 media segar, dihitung dalam ruang Neubauer dan
menunjukkan bahwa posisi C-3 dan C-6 harus dikurangi menjadi 4x10​6 ​sel / mL . The
dan teroksidasi, masing-masing, karena ada aktivitas, tes dilakukan in vitro. Zat ditambahkan
karena kedua posisi dioksidasi atau direduksi menjadi 320 μg / mL menjadi 0,125 μg / mL yang dilarutkan
dalam dMSO,
terdapat penurunan yang signifikan dalam aktivitas yang disajikan.
An Acad Bras Cienc (​ 2013) ​85 ​(3)
912 ​ANDREY MR MARINHO et al.
The​NTIMICROBIAL KEGIATAN
Aktivitas antibakteri dari citreorosein (1) diperiksa di hadapan ​E.c​ oli, ​P. aeruginosa d​ an ​B.s​ ubtilis.Hasil
dibandingkan dengan yang diperoleh untuk emodin (2) dalam kondisi yang sama (Tabel I). Secara umum,
citreorosein kurang aktif daripada emodin, kecuali terhadap ​E. coli​, yang berhenti tumbuh dalam media
yang mengandung 31,25 μg / mL dari
spektral 1 MS dan NMR 1d dan 2d. Senyawa 1, 2 dan 3 diuji terhadap bentuk promastigote ​Leishmania brasiliensis
dan 1 dan 2 juga diuji terhadap ​Escherichia coli​, ​Pseudomonas aeruginosa d​ an ​Bacillus subtilis ​dan menunjukkan
aktivitas yang baik.
Kata kunci​: poliketida, uji biologis, ​P. her36.​
PUSTAKA
C​oheň ​PA ​dan ​t​owers Hng. 1995. ​Antrakuinon dari ​Tabel I
Heteroderma obscurata. Phytochemistry 40: 911-915. ​perilaku pertumbuhan bakteri di hadapan
F​uJIMOTO ​H​ ​N​ ​EN​ akamura, ​The​KUYAMA ​E d​ an ​saya​ ​FS​ HIBASHI. ​senyawa 1 dan 2 pada konsentrasi yang berbeda.
2004. ​Enam fitur imunosupresif dari Ascomycete, zopfiella longicaudata, ditemukan dalam skrining ​konsentrasi yang
Studidimonitor oleh aktivitas imunonodulasi. Chem ​c [μg / ml] dari
E. coli P. aeruginosa B. subtilis
Pharm Bull 52: 1005-1008. ​senyawa uji
H​AMAYUN ​M E​ T AL. 2009. ​Cladosporium sphaerospermum sebagai ​1 2 1 2 1 2 500 = = = = = =
endofit yang mempromosikan pertumbuhan tanaman baru dari akar Glycine max (L.) Merr. Dunia J Microbiol Biotechnol 25:
627-632. ​250 = + = = - =
J​Arvis ​BB ​& ​M​Iller JD. 1996. ​Produk Alami, Kompleksitas ​125 = + = = + -
dan Evolusi. Dalam: DIVERSITAS FITOKEMEMIK DAN
62,50 = + = + - 31,25 = + + - + -
REDUndANCY DALAM INTERAKSI EKOLOGI. New York: Plenum Press, hlm. 265-293.L​Saya ​JY​ ​S​ ​RS​IDHU, -atau ​dan​F, ​M​ESS
​ AN ​ST​ ROBEL GA. 1998. ​15.63 + + + - + +
WM D
Induksi produksi takson dalam endofit ​7,81 + + + + - + +
jamur - Periconia sp dari Torreya grandifolia. J Ind Microbiol Biotechnol 20: 259-264. ​= efek bakterisida, - efek bakteriostatik, +
tidak aktif.
M​ARINhO ​AMR D ​ AN ​RO
​ dRIGuES ​FL​ ubang E. 2011. ​Dicitrinol, Citrinin Dimer, Diproduksi oleh Penicillium janthinellum.
UCAPAN TERIMA KASIH
Helv Chim Acta 94: 835-841. M​ARINhO AMR, ​RO ​ dRIGuES ​FL​ ubang ​Dan​ SANTOS ​LS D
​ AN
Para penulis mengucapkan terima kasih kepada Yayasan Amazon
M​OITINhO MLR. 2005. ​Polyketide yang aktif secara biologis yang diproduksi oleh Penicillium janthinellum diisolasi sebagai
Research Support Paraense (FAPESPA), Yayasan Dukungan Penelitian Negara Bagian São Paulo
(FAPESP), Dewan Nasional
jamur endofit dari buah-buahan Melia azedarach. J Braz Chem Soc 16: 280-283. NCCLS ​- ​N​ational ​C​omite UNTUK ​C​LINICAL ​L
S​tandardsABORATORY. 1997. ​Metode untuk Dilusi danAntimikroba ​Pengembangan
Ilmiah dan Teknologi(CNPq),
Koordinasi Peningkatan Tenaga Kependidikan Tinggi (CAPES) danKementerian Kesehatan
Tes Kerentananuntuk Bakteri yang Tumbuh Secara Aerobik, NCCLS Menyetujui Standar M7-A4, Wayne, PA.​ETRINI ​The​P,
S​IEBER ​TN​ ​T​TOT ​L ​DAN ​V​ ​The​IRET. 1992. ​Ekologi, produksi metabolit, dan pemanfaatan substrat dalam ​(MS) untuk dukungan
keuangan.
jamur endofit. Toksin Alami 1: 185-196.​SANTOS RMG, ​R​OdRIGuES ​F​lubang ​E​ ​R​OCHA ​WC ​DAN
RINGKASAN
T​EIXEIRA MFS. 2003. ​Jamur endofit dari Melia azedarach. Dunia J Microbiol Biotechnol 19: 767-770.
Dalam karya ini kami melaporkan isolasi
S​HITTU ​Ho​ ASTROvERdE ​DCM​C, ​N​mencetak ​NR ​dan ​r​ ​J​OBB. 2009. ​Interaksi tanaman-endofit melindungi tomat terhadap ​metode
kromatografi klasik dari enam
polyketide Verticillium yang mematikan. Tanaman 229: 415-426 ​dari ​Penicillium herchi​. Senyawa citreoseine (1), emodin
(2) janthinona (3), citrinin (4), citrinin
S​TIERLE A, ​S​TROBEL ​GA​ ​S​TIERLE ​D​ ​G​Rothaus P
​ ​dan ​B​IGNAMI C. 1995. ​Pencarian untuk mikroorganisme penghasil takol di antara
jamur endofit dari pacific ​h1 (5) dan dicitrinol (6) diidentifikasi dengan metode
yew, Taxus brevifolia. J Nat Prod 58: 1315-1324.
An Acad Bras Cienc (​ 2013) ​85 ​(3)