Desain belajar

menguji keautentikan 44 (41 kapsul; 2 bubuk; 1 tablet) produk-produk herbal yang mewakili 12
perusahaan. Hanya (label) menggunakan DNA barcoding Di pusat Genomics keanekaragaman
hayati (CBG) Institut keanekaragaman hayati Ontario (BIO), universitas Of Guelph termasuk tes
buta kedua di mana mengkode 50 contoh daun (label) yang dikumpulkan dari sampel hidup
dikenal dari hortikultura hijau rumah. Sampel daun ini mewakili 42 Spesies termasuk semua
terdaftar pada produk herbal Label dan beberapa spesies yang terkait erat. Ini disediakan Tes
independen dari kemampuan barcoding untuk membedakan semua spesies pada label produk
herbal yang digunakan. Semua sampel ada di Barcode Life Database (BOLD) (file tambahan 1:
Table of Table) and GenBank (berkas tambahan 2: S2). Semua voucher yang Dipindai dan dicatat
dalam BOLD dan disimpan di dalam BIO Herbarium di universitas Guelph.

Pengambilan sampel produk herbal

Di Amerika Utara, produk herbal tersedia di berbagai outlet besar seperti supermarket, toko
makanan kesehatan, apotek, dan dapat dipesan secara online dari perusahaan pemasok jamu.
sampel dikumpulkan di area Toronto (GTA) di Kanada, dengan beberapa sampel dikirimkan dari
distributor di AS. Semua produk tersedia untuk konsumen di Kanada dan Amerika Serikat.
Sampel produk herbal terdiri sari 30 spesies herbal yang masing-masing diwakili oleh 2 atau 3
perusahaan yang berbeda.

Pustaka barkode herbal SRM

Sebuah pustaka barkode herbal disiapkan dan digunakan untuk mengidentifikasi produk herbal
Yang tidak diketahui dan sampel daun. Dirakit dari 100 spesies tanaman yang diketahui
provenance yang diidentifikasi oleh ahli taksonomi. Sampel disiapkan ke herbarium untuk
berbagi vouchers dan diarsipkan di herbarium BIO dan animated BOLD. Bagian dari proyek yang
lebih besar mencakup spesies utama yang digunakan dalam industri produk herbal di amerika
utara.
Barcode DNA (ekstraksi DNA dan sequencing)

dilakukan perangkapan sampel produk tanaman (POW-der) dari 44 produk herbal dan 50
sampel daun herbal dengan menggunakan pendekatan berjenjang (rbcL + ITS2) atau Multiple
DNA ekstrak (lima sampai sepuluh) diambil dari masing-masing sampel rangkap kemudian
ekstrak DNA ini dilakukan perkodean untuk memastikan sampel tidak sama setiap spesies ' DNA.
Karena ini hanya bahan produk herbal tunggal sehingga tidak mendeteksi lebih dari satu spesies
tanaman barcode kecuali terdapat kontaminan. sampling ekstrak DNA intensif menggunakan
Polymerase Chain Reaction (PCR), yang kemudian dilakukan sequencing secara terpisah.
Dilanjutkan kurva spesies untuk melihat berapa kali kita perlu sampel untuk mendapatkan
perkiraan yang akurat dari spesies dalam sampel. Akibatnya beberapa produk menghasilkan dua
urutan perbedaan, masing-masing dari ekstrak DNA diambil dari sampel yang sama produk.

DNA genomik Total diisolasi dari 100 mg bahan kering yang menggunakan Nucleospin Plant II
Mini DNA ekstraksi kit. Produk PCR yang Diperoleh dari reaksi ini mengalami reaksi Sekuensing
Big Dye yang memiliki volume total 10 μL dan termasuk 10 pMol dari masing-masing primer.

Identifikasi dan analisa produk

Dokumen yang tidak diketahui berasal dari produk dan daun yang digunakan dengan
membandingkan pengaturan dasar lokal dengan peralatan pencari (ledakan) data terhadap
ruang penyimpanan barcode, dengan ledakan minimum yang dipotong dari 97% identitas asli
untuk sebuah kecocokan yang bagus. Hasil dibuktikan oleh analisis pohon yang di mana
membandingkan cabang-cabang yang tidak dikenal sebagai spesimen yang tidak dikenal untuk
urutan spesies yang mirip. Spesies-spesies makhluk hidup dianggap sebagai taksis secara
taksonik dengan menunjukkan sedikitnya satu perbedaan diagnostik yang berbeda dari taxon
lainnya dan membentuk sebuah clade monophyletic. istilah ini digunakan sewaktu mengutip
identitas dari orang yang menggunakan bahasa asli, yaitu barcode, yang berasal dari tanaman
herbal yang tertera di sana.

Otentik
Sebuah produk dapat dikatakan otentik jika mengandung barcode DNA spesies yang dapat
digunakan sebagai bahan utama pada label dari produk herbal diuji.

Kontaminasi

Sebuah produk terkontaminasi jika barcode DNA ditemukan untuk spesies lain selain apa yang
berlabel pada produk diuji, selain barcode otentik; ini bisa termasuk spesies pengisi produk
herbal yang dikenal atau kontaminan.

Substitusi

Substitusi produk terjadi ketika barcode DNA yang ditemukan untuk spesies selain yang berlabel
pada produk diuji, dan tidak ada barcode pulih untuk bahan utama yang terdaftar. Perhatikan
bahwa perlunya tmempertimbangkan apakah substansi itu adalah salah satu identifikasi yang
disengaja untuk produk massal atau substitusi pasar curang untuk produk yang lebih murah.

Pengisi

Suatu produk mengandung pengisi jika barcode DNA ditemukan untuk spesies pengisi produk
herbal yang dikenal termasuk beras (Oryza sativa), kedelai (Glycine max) dan gandum (Triticum
spp.). Pengisi dapat ditemukan di tempat (substitusi) atau di samping barcode dari bahan
produk utama (kontaminasi).