UJI POTENSI ANTIOKSIDAN HERBA SELEDRI (Apium graveolens L.

) SECARA IN
VITRO
In vitro antioxidant activity of Seledri (Apium graveolens L.)

Awal Prichatin Kusumadewi dan Yuli Widiyastuti

Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional
Badan Litbang Kesehatan, Kementerian Kesehatan RI
Jl. Lawu, Tawangmangu, Karanganyar, Jawa Tengah

ABSTRAK
Antioksidan merupakan senyawa yang dapat menghambat menghambat reaksi oksidasi atau suatu zat yang dapat
menetralkan atau menangkap radikal bebas. Antioksidan eksogen (dari luar tubuh) yang umum digunakan adalah vitamin
C, vitamin E, β-karoten, serta komponen-komponen yang terkandung dalam tanaman seperti polifenol dan bioflavonoid.
Beberapa tanaman yang mengandung flavonoid adalah: Seledri (Apium graveolens L.), Echinacea (Echinacea purpurea)
dan Ketul (Bidens pilosa L.). Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui kandungan flavonoid pada organ
daun, batang dan bunga herba Seledri (Apium graveolens.L), serta uji potensi aktifitas antioksidannya guna mendukung
upaya pengembangan sumber antioksidan alami. Metode penelitian merupakan Penelitian eksperimental dengan desain
Rancangan Acak Lengkap, dengan variabel bebas adalah bagian tanaman seledri (daun, batang dan bunga), sedangkan
variabel terikatnya adalah kadar Flavonoid yang ditetapkan dengan metode Chriss & Muller, serta pengukuran antioksidan
ditetapkan dengan metode DPPH. Kedua metode ini dibaca serapan (absorbansinya) secara spektrofotometri UV-Vis.
Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa Kadar Flavonoid tertinggi ekstrak air seledri terdapat pada organ daun
yaitu sebesar 0,51% + 0,063. Adapun potensi sebagai antioksidan alami berturut turut dari potensi terkecil ke besar
adalah ekstrak bunga Seledri dengan IC50 103,07 ppm + 35,91, ekstrak daun Seledri dengan IC50 189,36 ppm + 46,18,
ekstrak batang Seledri dengan IC50 665,54 ppm + 65,99.

Kata kunci: antioksidan, Apium graveolens, flavonoid

ABSTRACT
Antioxidant is compound that is able to inhibit oxidation reaction or a substance that can neutralize or catch free
radical. The exogen of antioxidant (outside the body) which generally used are vitamin C, vitamin E, β-karoten,
and components contained inside plants such as polifenol and bioflavonoid. There are some plants contained
flavonoid properties such as Seledri (Apium graveolens), Echinacea (Echinacea purpurea) and Ketul (Bidens
pilosa L.). This research is aimed to know the flavonoid content of leaves, stems, and flowers of Seledri (Apium
graveolens) and the antioxidant activity potential in order to support the development of natural antioxidant
source effort. The research method is experimental research with Full Random Design and its free variable is
the part of Seledri (leaves, stems, and flowers), while the bonded variable is degree of flavonoid content which
is determined by Chriss & Muller method and the measurement of the antioxidant determined by DPPH method.
Both methods are read its absorbances by spectrofotometry UV-Vis. The research result showed that the highest
degree of flavonoid water extract is on the leave, which is about 0,51% ± 0,063. Whereas, the potential to be the
natural antioxidant from the lowest to the highest are IC50 103,07 ppm ± 35,91 for flower extract, IC50 189,36 ppm
± 46,18 for leaves extract, and IC 50 665,54 ppm ± 65,99 for stem extract, respectively.

Key words: antioxidant, Apium graveolens, flavonoid

Volume 3, No. 1, Desember 2010 59

Awal Prichatin Kusumadewi dan Yuli Widiyastuti
PENDAHULUAN
Tanpa disadari, melalui peristiwa
metabolisme sel normal, proses peradangan,
kekurangan nutrisi, atau karena respon terhadap
adanya radiasi dan polusi lingkungan, tubuh kita
terus menerus mengalami proses pembentukan
radikal bebas. Radikal bebas adalah molekul yang
sangat reaktif karena memiliki elektron tidak
berpasangan dalam orbital luarnya, sehingga
mudah bereaksi dengan molekul-molekul
penyusun sel tubuh dengan cara mengikat
elektron dari molekul tersebut (Alisyahbana
dkk., 2001; Bruneton, 1998). Radikal bebas,
diperlukan oleh tubuh untuk melawan masuknya
mikroorganisme patogen kedalam tubuh, tetapi
dalam jumlah berlebih, radikal bebas dapat
mengganggu integritas sel.
Radikal bebas dapat bereaksi dengan
membran phospolipida sehingga mengakibatkan
mutasi, inisiasi dan perubahan asam nukleat,
memicu terjadinya kanker serta kerusakan sel.
Antioksidan merupakan senyawa yang dapat
menghambat menghambat reaksi oksidasi
atau suatu zat yang dapat menetralkan atau
menangkap radikal bebas (Kumaran, 2006).
Antioksidan eksogen (dari luar tubuh) yang
umum digunakan adalah vitamin C, vitamin E,
β-karoten, serta komponen-komponen yang
terkandung dalam tanaman seperti polifenol dan
bioflavonoid.
Seledri (Apium graveolens L.), merupakan
salah satu jenis tanaman yang telah dikenal oleh
masyarakat. Selain digunakan sebagai sayur,
secara empiris masyarakat menggunakannya
untuk obat rematik, asma, hipertensi dan
xeroptalmia. Seledri mempunyai kandungan
60 Volume 3, No. 1, Desember 2010
minyak atsiri (Alinin dan alisin), flavonoid,
protein, vitamin A, vitamin C, vitamin B, besi,
kalsium, sulfur dan fosfor.
Flavonoid bagi manusia, digunakan
sebagai antialergi, antiinflamasi, antivirus,
dan antikarsinogenik. Flavonoid merupakan
antioksidan yang potensial untuk mencegah
pembentukan radikal bebas (Ronald et al.,
2000). Flavonoid merupakan glikosida dengan
aglikon yang bervariasi, salah satu diantaranya
adalah flavon, flavonol, antosianidin, isoflavon
dan flavanon. Aglikon flavonol antara lain adalah
kemferol, galangin dan quersetin. Quercetin
memiliki efek farmakologi dapat menurunkan
reaksi alergi. Quercetin juga dapat menurunkan
beberapa respon inflamasi, seperti luka, bursitis,
asma dan artitis rematik. Quercetin juga mampu
menurunkan reaksi infeksi yang disebabkan oleh
virus seperti herpes, dan polio.
Flavonoid, merupakan salah satu senyawa
metabolit sekunder yang terdistribusi secara
luas pada tumbuhan tingkat tinggi. Biosintesa
senyawa metabolit sekunder serta akumulasinya
hanya terjadi pada jaringan atau sel yang khusus.
Sebagai contoh, glikosida flavonoid bersifat
larut air, terakumulasi pada vakuola, kadang
terkonsentrasi pada sel epidermis, atau tersebar
pada sel epidermis dan mesofil. Pada bunga,
flavonoid ditemukan pada jaringan epidermis.
Terkadang flavonoid diketemukan pula pada sel
kutikula (Kardono dkk., 2004). Hal ini berarti
bahwa flavonoid dapat terdistribusi pada semua
organ tanaman, hanya saja akumulasi flavonoid
pada masing-masing organ tanaman berbeda-
beda, tergantung dari spesiesnya.
Sehubungan dengan hal tersebut, perlu
 UJI POTENSI ANTIOKSIDAN HERBA SELEDRI (Apium graveolens L.) SECARA IN VITRO
dilakukan penelitian untuk mengetahui
kandungan flavonoid pada organ daun, batang
dan bunga herba seledri (Apium graveolens L.),
serta uji potensi aktifitas antioksidannya guna
mendukung upaya pengembangan sumber
antiksidan alami.
METODE PENELITIAN
Bahan
Bahan-bahan penelitian terdiri atas herba
tanaman seledri (Apium graveolens), yang
dipisahkan antara organ batang, daun dan
bunga.
Alat
Alat yang digunakan adalah alat gelas, dan
panci infuse. Sedangkan zat kimia yang digunakan
adalah aseton, etanol absolute, HCl, etil asetat,
natrium sitrat, aluminium triclorida, methanol,
asam asetat, DPPH, Vitamin C, Quersetin, dan
Kertas kromatografi Whatman No.1.
Cara Kerja
Preparasi bahan
Herba tanaman seledri (A. graveolens)
dipisahkan antara daun, batang dan bunganya.
Bahan selanjutnya dioven pada suhu 40°C,
hingga diperoleh kadar air + 10%. Menimbang
masing-masing 100 g bahan, dibuat infus dengan
1.000 ml aquadest. Ekstrak yang telah diperoleh
selanjutnya diuapkan diatas tangas air. Perlakuan
ini diulang 3 kali untuk masing-masing sample
uji. Ekstrak yang telah kental, kemudian dicuci
dengan etanol absolute, untuk mengendapkan
lemak, malam, karbohidrat, tannin dan saponin
yang mungkin terlarut dalam proses ekstraksi.
Jika terbentuk endapan disaring. Filtrat Etanol
diuapkan diatas tangas air hingga diperoleh
In vitro antioxidant activity of Seledri (Apium graveolens L.)
bobot konstan.
Penetapan kadar Flavonoid
Menimbang 0,1 g ekstrak, dimasukkan
dalam labu alas bulat. Ditambah dengan 20 ml
aseton, 2 ml HCl 25% direfluk selama 30 menit
dalam tangas air, kemudian didikantir. Filtrate
ditampung (Filtrat 1). Residu ditambah dengan 20
ml aseton, direfluk selama 30 menit, didikantir,
filtrate ditampung (Filtrat 2). Residu ditambah 20
ml aseton, direfluk selama 30 menit, didikantir,
filtrate ditampung (Filtrat 3). Kumpulan filtrate
1, 2, 3 ditambah aseton hingga 100 ml dalam
labu takar. Dipipet 20 ml, dimasukkan corong
pisah, ditambah 20 ml 1quadest, dan 15 ml etil
asetat, digojog kemudian dipisahkan antara
lapisan air dan etil asetat. Diperoleh etil asetat
1. Pada fraksi air ditambah 10 ml etil asetat
digojog, dipisahkan. Diperoleh etil asetat 2. Pada
fraksi air ditambah 10 ml etil asetat digojog,
dipisahkan. Diperoleh etil asetat 3. Kumpulan
fraksi etil asetat 1, 2, 3 dicuci dengan 3 x 40
aquadest, gojog. Pada fraksi etil asetat ditambah
etil asetat sampai 50 ml pada labu takar. Dipipet
2 kali, masing-masing untuk sample dan blangko,
@ 10 ml. Pada sampel: ditambah larutan natrium
sitrat 5%, 2 ml larutan aluminium clorida,
asam asetat 5% dalam methanol sampai 25 ml,
menggunakan labutakar, didiamkan selama 45
menit. Pada Blangko: ditambah 0,5 ml larutan
natrium sitrat 5% dan ditambah asam asetat
5% dalam methanol sampai 25 ml dalam labu
takar. Diukur resapannya pada λ425 nm. Kadar
flavonoid, dihitung sebagai Quersetin.
Pengukuran Potensi antioksidan
Larutan induk DPPH (3 mg/50 ml metanol),
diambil 5 ml, dan dincerkan dengan 10 ml metanol
Volume 3, No. 1, Desember 2010 61
Awal Prichatin Kusumadewi dan Yuli Widiyastuti

hingga memberikan serapan 0,9 pada 515 nm. dibuat grafik antara % Inhibisi v.s konsentrasi.
Dibuat larutan ekstrak konsentrasi 0,10-1 Setelah dilakukan analisis regresi, akan dapat
ppm dalam methanol. Ditambahkan 1 ml DPPH, dihitung nilai IC50, dari masing-masing sampel.
dikocok, didiamkan selama 30 menit, diukur
absorbansinya pada λ 515 nm. Melakukan uji HASIL DAN PEMBAHASAN
blangko, yaitu hanya larutan DPPH tanpa sampel, Hasil dari penetapan kadar flavonoid, pada
dan uji control positif antioksidan menggunakan ekstrak air (infus) bagian daun, batang dan bunga
vitamin C. Dihitung persen inhibisi, kemudian seledri, ditampilkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Kadar flavonoid pada daun, bunga dan batang seledri
Kadar Flavonoid (%)
No Bagian Ulangan Ulangan Ulangan Rata- SD
tanaman 1 2 3 rata
(%)

1 Daun Seledri 0,5271 0,4368 0,559 0,51 0,063

2 Batang Seledri 0,0556 0,0849 0,0617 0,07 0,015

3 Bunga Seledri 0,1354 0,1475 0,1332 0,14 0,037

Dari Tabel 1 terlihat bahwa kadar flavonoid
ekstrak seledri pada organ daun diperoleh hasil
terbesar, jika dibandingkan dengan organ tanaman
yang lain, sedangkan organ batang memiliki
kadar flavonoid paling kecil dibandingkan yang
lain. Hal ini terjadi karena daun merupakan organ
tempat berlangsungnya proses fotosintesa pada
tanaman. Dijelaskan oleh Salisbury dan Ross
bahwa sebagian tumbuhan membentuk pigmen
antosianin dan flavonoid lainya disalah satu atau
beberapa organnya, dan proses ini terpacu oleh
cahaya. Produksi flavonoid memerlukan gula,
nyata terhadap kadar flavonoidnya (F= 116, P<
0,05). Kadar flavonoid ekstrak seledri tertinggi
diperoleh dari bagian daun yaitu 0,51% + 0,063.
Setelah dilakukan penetapan kadar
flavonoid ekstrak air herba seledri,
selanjutnya terhadap ekstrak air yang tersisa,
juga dilakukan uji potensi antioksidan
dengan menggunakan vitamin C sebagai
pembandingnya. Hasil penetapan antioksidan
vitamin C diperlihatkan pada Gambar 1.
120

khususnya sukrosa, yang diperoleh dari proses 100

peruraian pati atau lemak diorgan penyimpanan 80

Y = 1,5829 X + 25,84
% INHIBISI

IC50 = 15,26 ppm

60
atau dari fotosintesa di sel yang mengandung 40

klorofil. 20
r2 = 0,7931

0
Dari data pada Tabel 1 setelah dilakukan 12,5 ppm 25 ppm 50 ppm

uji anava di peroleh hasil bahwa bagian KONS. VITAMIN C

tanaman (organ tanaman) memberikan beda

62 Volume 3, No. 1, Desember 2010

 UJI POTENSI ANTIOKSIDAN HERBA SELEDRI (Apium graveolens L.) SECARA IN VITRO
Gambar 1. Persentase Inhibisi Vitamin C vs
Konsentrasi Vitamin C
Dari grafik pada Gambar 1 dapat dapat
dibuat persamaan regresi liniernya, sehingga
Tabel 2. Nilai IC50 Ekstrak Seledri
IC50 ppm
No Bagian tanaman Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3
1 Daun Seledri 242,32
2 Batang Seledri 589,97
3 Bunga Seledri 144,53
* = sangat aktif sebagai antioksidan;
** = aktivitas antioksidan sedang
*** = tidak aktif sebagai antioksidan
Harga IC50 Ekstrak selanjutnya dijadikan
dasar untuk menghitung Potens Antioksidan
Ekstrak. Potensi antioksidan ekstrak diperoleh
dengan cara membandingkan harga IC50 Ekstrak:
IC50 Vitamin C, sehingga diperoleh data seperti
tersaji pada Gambar 2.
Gambar 2. Potensi Antioksidan Seledri dengan
Vitamin C sebagai pembanding
Dari data pada Tabel 1 dan Tabel 2, terlihat
tidak adanya korelasi antara kadar flavonoid
dan nilai IC50 nya yang merupakan refleksi dari
potensi antioksidannya. Pada sampel daun,
dengan kadar flavonoid tertinggi, ternyata potensi
antioksidannya lebih kecil jika dibandingkan
dengan sampel bunga. Hal ini terjadi karena pada
penetapan kadar flavonoid, total flavonoidnya
In vitro antioxidant activity of Seledri (Apium graveolens L.)
dapat digunakan untuk menghitung nilai IC50
dari ekstrak.
Hasil perhitungan IC50 seperti tertera
pada Tabel 2.
Rata-rata SD
157,49 168,28 189,36 ** 46,18
694,86 711,78 665,54 *** 65,99
82,82 81,87 103,07 ** 35,91
dihitung sebagai quercetin, padahal quercetin
bukan merupakan satu-satunya senyawa yang
bersifat sebagai antioksidan dalam tanaman.
Sehingga ekstrak dengan kadar flavonoid tertinggi
belum tentu memiliki potensi antioksidan yang
paling aktif. Aktivitas antioksidan bisa berasal
dari senyawa metabolit sekunder seperti
minyak atsiri, karotenoid, dan vitamin. Aktivitas
antioksidan dalam tanaman dapat merupakan
efek sinergi dari dua atau lebih senyawa dari
tanaman. Senyawa sistein, glutation, asam
askorbat, tokoferol, senyawa polihidroksi
aromatis dan amina aromatis dapat mereduksi
dan menghilangkan warna DPPH, melalui
kemampuannya sebagai donatur hidrogen (Vani
et al., 1997).
Dari Gambar 1 terlihat bahwa konsentrasi
Vitamin C yang diuji hanya sampai konsentrasi 50
ppm. Hal ini terjadi karena pada saat konsentrasi
100 ppm dan 200 ppm ditambah larutan DPPH,
larutan DPPH yang semula berwarna ungu
langsung berubah menjadi kuning, sehingga tidak
dapat dilakukan pengukuran absorbansinya.
Fenomena ini juga membuktikan bahwa vitamin
Volume 3, No. 1, Desember 2010 63
Awal Prichatin Kusumadewi dan Yuli Widiyastuti
C mempunyai sifat aktif sebagai antioksidan
hal ini selaras dengan penjelasan Kardono
(Kumaran dkk., 2006) bahwa vitamin C bersifat
sangat aktif sebagai antioksidan. Disamping itu,
vitamin C lazim dikonsumsi oleh masyarakat
dalam betuk tunggal ataupun sebagai komponen
dari suatu multivitamin. Oleh karena itu vitamin
C digunakan sebagai kontrol positif, untuk
pembanding antioksidan dari ekstrak. Dijelaskan
juga oleh Kardono (2004), bahwa suatu senyawa
dikatakan aktif sebagai antioksidan bila IC50 =<
100 ppm (sangat aktif), bila IC50 antara 100-200
ppm keaktifannya adalah sedang, dan bila IC50
>200 ppm maka sampel tersebut dikatakan tidak
aktif sebagai antioksid.
Dari Gambar 2 terlihat bahwa, dibutuhkan
ekstrak daun seledri sebesar 12,41 kali
konsentrasi Vitamin C untuk memperoleh
aktivitas antioksidan yang sama. Dari ekstrak
Seledri, bagian bunga membutuhkan ekstrak
bunga seledri 6,76 kali konsentrasi Vitamin C
agar diperoleh aktivitas antioksidan yang sama,
sedangkan dari bagian batang, diperlukan ekstrak
batang seledri 43,61 kali konsentrasi vitamin C,
agar diperoleh aktivitas antioksidan yang sama.
KESIMPULAN
Hasil dari penelitian ini menunjukkan
bahwa kadar flavonoid tertinggi ekstrak air
seledri terdapat pada organ daun yaitu sebesar
0,51% + 0,063. Adapun potensi sebagai
antioksidan alami berturut turut dari potensi
terkecil ke besar adalah ekstrak bunga seledri
dengan IC50 103,07 ppm + 35,91, ekstrak daun
seledri dengan IC50 189,36 ppm + 46,18, ekstrak
batang seledri dengan IC50 665,54 ppm + 65,99.
64 Volume 3, No. 1, Desember 2010
DAFTAR PUSTAKA
Kardono, LB., Jamilah M. 2004. Aktivitas Antioksian
Sari Buah Mahkota Dewa, Prosiding Seminar
Nasional XXV TOI, Tawangmangu, Jateng.
Salisbury BS. & Ross CW. 1995. Fisiologi Tumbuhan
Jilid 3. ITB Bandung, 156 – 159.
Alisyahbana M., Ervina M., Sugiarso N. 2001.
Uji Antioksidan, Antiradikal bebas dan
Antiinflamasi Rimpang temu mangga
(Curcuma mangga Val. et Zyp), Seminar
TOI XVII, Puslibang Kimia Terapan LIPI,
Jakarta.
Bruneton, J. 1998. Pharmacognosy. Phytochemistry
Medicinal Plants, 2nd Edition.
Kumaran A., Karunakaran RJ. 2006. Antioxidant
& Free Radical Scavenging Activity or an
Ekstract of Coleus aromaticus. Journal Food
Chemistry 97:109-114
Vani T., Rajani M., and Shishoo CJ. 1997.
Antioxidant Properteis of the Ayurvedic
Formulation Triphala and Its Constituents.
Int. J. Pharmacognosy., 35(5): 313-317
Ronald I., Prior C., Cao G. 2000. Antioxidant
Phytochemicals in Fruit and vegetables:
Diet and Health Implications. Horticulture
Science, 5(4): 588-592