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CÓDIGO: P-QB-GU-10.002.

025
GESTIÓN DE LABORATORIOS
VERSIÓN: 0.0
ESTRUCTURA DE AMINOÁCIDOS Y Página 1 de 2
PRECIPITACIÓN DE CASEÍNA

OBJETIVO

Discutir las características estructurales de los aminoácidos, el concepto de pH o


punto isoeléctrico, mediante la precipitación de la caseína.

ALCANCE

El estudiante al finalizar la práctica estará en la capacidad de manejar el concepto


de punto isoeléctrico de una proteína y su relación con el pH del medio en el que
se encuentra.

GENERALIDADES

INTRODUCCIÓN

Los aminoácidos se caracterizan por contener un grupo amino, un grupo carboxilo,


un átomo de Hidrógeno y un radical R, que los diferencia entre si. En condiciones
fisiológicas, los grupos amino se hallan protonados (-NH3+) y los grupos ácidos,
como bases conjugadas (COO-). Las proteínas, por su parte, son polímeros de
aminoácidos que se enlazan mediante la interacción entre el grupo carboxilo de un
aminoácido y el grupo amino de otro.

Aunque las proteínas se encuentran como mezclas complejas, es posible separar


unas de otras al variar el pH de la solución. Cuando alguna de ellas alcanza el
denominado pH isoeléctrico, es decir, cuando su carga neta es cero, precipita y
puede separarse. En la leche coexisten diversas proteínas, entre ellas, la Caseína,
una fosfoproteína cuyo pH isoeléctrico es alrededor de 4.7, por lo que al disminuir
el pH hasta ese valor, ella precipita. Las demás proteínas permanecen en el
líquido sobrenadante.

PROTOCOLO

En un vaso de precipitados, caliente 50 ml de leche hasta una temperatura de


40oC aproximadamente y proceda a la adición, gota o gota, con agitación y
calentamiento constantes, de Ácido Acético 2 M, hasta cuando el pH sea 4.7.
Enfríe la suspensión a temperatura ambiente, déjela reposar y filtre.
Lave el precipitado con 20 ml de una mezcla 1:1 de Etanol y Éter Etílico y luego
séquelo con toallas de papel. El precipitado corresponde a la proteína Caseína.
¿Podría, a partir de sus resultados, calcular el contenido de Caseína en un litro de
leche?
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DISCUSIÓN

1. ¿Cómo pueden clasificarse los aminoácidos? Examine las características


comunes de cada grupo, compare los diferentes radicales de cada
aminoácido y familiarícese con su estructura.

2. ¿Qué se entiende por pH o punto isoeléctrico de un aminoácido o una


proteína? ¿Por qué, en dicho punto, las especies precipitan? ¿Qué es lo
que permite que los aminoácidos actúen como reguladores de pH de los
fluídos biológicos?

3. Experimentalmente, ¿Cómo diferenciaría usted entre un aminoácido


aromático y otro que no lo es? Indague al respecto y diseñe un breve
protocolo de laboratorio para la respectiva experimentación.

BIBLIOGRAFÍA

 HERRERA, Emilio. Elemento de Bioquímica. México: Interamericana-


McGraw-Hill, 1993.

 LEHNINGER, Albert. Biochemistry. 2nd ed. New York: Worth Publishers,


1975.

 STRYER, Lubert. Bioquímica. 4 ed Trad. J. Macarulla. Barcelona, 1995.

Blanca Lucía Adriana Valencia C. Carmen Elena


ELABORÓ: REVISÓ: APROBÓ:
Ospina Giraldo Johannes Delgado O. Mier Barona

Auxiliares de Coordinadora de
CARGO: Profesora Asociada CARGO: CARGO:
Laboratorio Laboratorio

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