Akademta ltol, 14 No.

4, Agustus 2010 Rama R, Sitinjak : Pemanfaatan Meristin dalam Teknlk Kuhur ,Iaringat

PEMANEAATAN MERISTEM DAI,AIVI TEKNIK KUUil,'R JARINGAN

Oteh

RamaR.Sitinjak
Dosen Kopertis Wilayah I dpk UNPN, Medon

Abstract

The aim of this article is to explain the utility of meristem on the technique of tissue culture. In this article,
meristem culture, implementqtion procedure of meristem culture, andfactors that in/luence success in meristem
eultire will be arplained. Meristematic dome tissue that is used to meristem culture is apical meristem or axillary
shoot meristem. The meristem *plants are used to decrease the eontaminated culture tissue and to get a number
of normal plants, as well as virus-free explants with the size about 0,1 * 0.5 mm. In the use of meristem culture, the
culture procedure must be implemented uactly, so that the result can be suitable to the purpose.

Keywords: meristem culture, lissue culture

I,PENDAHI]LUAN dalam kondisi bebas virus, dan meristern tumbuhan

Kultur jaringan tumbuhan meliputi beberapa
teknik yang memungkinkan bersama-sama untuk
memelihara secara aseptik organ, jaringan, sel-$el,
bahkan sel-sel tanpa dinding (protoplas) tumbuhan
dalam medium yang nutrisinya terkontrol. Kulrur
jaringan berdasarkan pada prinsip totipotensi, yaitu
bahwa setiap sel yang hidup mempunyai potensi
genetik untuk menghasilkan kembali organisme
keseluruhan (Harhnann er al., 1990). Kulturjaringan
tersebut mempunyai beberapa keuntungan antara
lain : tidak tergantung pada faktor'faktor
lingkungan, sistem produksinya dapat diatur, dan
dapat mengurangi penggunaan lahan (Wiendi et
a1.,1992).
Menurut Bhojwani andRazdan (1996) teknik
kulturjaringan memiliki potensi yang besar sebagai
suatu cara propagasi vegetatif bagi tanaman yang
ditinjau penting dari segi ekonomi. Regenerasi
tumbuhan dengan menggunakan teknik kultur
jaringan dapat dilakukan melalui jalur organogenesis
dan embriogenesis somatik, baik secara langsung
maupun tidak secara langsung.
Pada umumnya bagian tanaman yang lebih
responsif terhadap induksi regenerasi adalah jaringan
yang aktif membelah seperti meristem. Sel-sel '
meristem yang diregenerasi melalui embriogenesis
somatik, bersifat stabil secara genetik dan tidak
mudah termutasi seperti yang terj adi pada kalus. Oleh
karena itu, meskipun tanamanyang bebas virus telah
diperoleh dari kultur kalus, namun variasi somaklonal
dalam kalus membuat kultur meristem lebih baik
digunakan untuk sistem regenerasi tumbuhan (Bach
and Pawloska,2003). Teknik kultur meristem telatr
digunakan secara luas untuk perbanyakan klon dan
untuk mendapatkan turunan yang sama dengan induk
merupakan sistem yang amat baik untukpengawetan
plasma nutfah jangka panjang (Karttra, in Wetter and
Constabel, 1991).
Namun, yang menjadi masalahnya adalah
bagaimanakah pemanfaatan eksplan meristem dalam
teknik kultur jaringan tumbuhan? Sehubungan
deugan itu, maka dalam artikel ini akan dibahas
tentang kultur meristem, prosedur pela}sanaan kultur
meristem, dan faktor-faktor yang mempengaruhi
keberhasilan kultur meristem. Artikel ini bertujuan
untuk menjelaskan pemanfaatan eksplan meristem
dalam kultur jaringan tumbuhan.
ITPEMBAIIASAN
2.1. KulturMeristem
Meristi:m adalah jaringan yang bersifat
embrionik dalam tubuh tumbuhan, dan
merupakan asal dari jaringan pennanen. Sel-sel
baru yang terbentuk oleh meristem mengalami
berbagai diferensiasi sehingga terbentuk ciri-
ciri jaringan dewasa. Suatu meristem dapat
berasal dari satu sel atau dari sekelompok sel
@sau, 1 976). Jmingan meristem apikal tunas dan
akar berdiameter sekitar 0.I mm dengan panjang
sekitar 0.25 mm (Slack and Tufford, I 995),
Aktivitas meristematii< dari jaringan
meristem diatur oleh sinyal fisiologi dan
lingkungan, sehingga meristem tidak aktif pada
kondisi yang tidak menguntungkan, tetapi tetap
memiliki potensi untuk pertumbuhan (Fosket,
1994). Berdasarkan mah bidang pembelahan sel
padameristem, makajaringan ini dibagi atas dua
daerah, yaitu tunika yang terdiri dari lapisan
terluar yang menyelubungi kelompok sel di
bawahnya (korpus) (Gambar 1).

Diterbitkan Kopertis Wlayah I 56

Akademla Vot. t4 No' 4, Agustus 2010 Rana R, StttnJak : Penunfaatan Merlstlm dalam Teknik Kultur Jaringan

dengan ataaol 7 0o/o, Kemudian dicelupkan

dalam larutan natium hipoklofit lYo atau

dalam larutan pemutih 50% selama 5 l0 -
menit. Ke dalam larutan desinfektan ini
boleh ditambahkan TWeen 20 atau Tlveen
80 (0,01%). Setelah itu dicuci 5 - 6 kali
dengan air aquades steril (Dodds and
Roberts,1995).
B, Pemotongan ujung meristem
Ganrbar l. Diagram apeks pucuk Pisum (kapri).
Pemotongan harus dilakukan secara
,{. Gambar Yang menunjukkan sel'
aseptik. Hilangkanlah lapisan daun bagian
B. Bagian tafsiran dari (A). (Esau, 1976)
luar dengan pisau steril sampai puncak
meristem terlihat. Ambillatr bagian puncak
Bidang pembelaharurya terutama antiklinal. Dalrn
meristem tersebut, kemudian anamlah pada
korpus, pembelatran terjadi ke semua arah. Ini
medium agar. Inkubasikan kultur meristem
dikenal dengan teori tunika korpus @sau 1976).
tersebut dalam lemari pertumbuhan dengan
Sruktur jaringan apikal tunas memiliki primordia
daun dan daun-daun muda, tersusun dari sel-sel
-
suhu 15 240C (Modifikasi Sh6rwood,
leeo.
yang tidak dapat dibedakan, tetapi ummnya
dikelompokkan menj adi zona'zona yang bertcdr
23. Faktor yang Mempengaruhi Keberhasilan
beda(Kartha, 1981).
yag digmrke KulturMeristem
Jaringan meristematik
untuk kultur meristem dapat bcnryo n€ristan Beborapa faktor yang dapat
apikal atau meristem tunas aksiler (Ilutmmn et
mompengaruhi koberhasilan kultur merisrem
ai., tggO). Eksplan meriste'm digualon untuk
dalam rogenerasi kultur jaringan, diantaranya
mengurangi jaringan kultur terkontaminasl
uloran.eksplan meristem, jenis media tumbuh,
(Sherwood, 1996) dan mendryarko sejumlah jenis dan konsentasi zat pengatur tumbuh, dll.
tanaman normal, serta dapat dijadikan eksptm
Ukuran meristom hmas akan menentukan
yang bebas virus dengan ukuran rmtuk kultu
kemampuannya untuk bertahan dalam medium
sekitar0.I -0.5 mm(ChrmdKrz, 1990). S€p€rti
hara walaupun pada kondisi optimum. Apabila
yang dinyatakan oleh Harffiann et (1990) a[ pucuk meriste'm diisolasi bersama daun primordia
meristem dengan ukuran 0.10'0.15 mm dapat
dan bagian jaringan prokambiumnya, daya
mengeliminasi I 00% virus. Penelitian yang telah
hid'upnya lebih besar. Untuk kebutuhan
berhasil mendapatkan klon jatre bebas bakteri
perbanyakan, umumnya menggunakan meristem
dan virus adalah yang telah dilakukan oleh
bersama daun primordiannya. Sebaliknya,
Mariska and Syahid (199a).
apabila tujuannya untuk menghilangkan infeksi
Selain untuk mengeliminasi virus, dari
virus sistemik, meristem harus bebas dari daun
penelitian yang menggunakan kultur meristem
primordia dan ukuran pucuk tidak boleh
juga dapat diperoleh pengetahuan tentang
melampaui 0, I - 0,5 mm (Chu and Kurtz, 1990;
peranan nutrisi dan hormon terhadap
Rout et al., 1 998).
diferensiasi serta pertumbuhan embrio somatik
Medium MS ternyata bermanfaat untuk
maupun tunas melalui organogenesis, selain itu
kulflr rneristem dari berbagai spesies tumbuhan.
dapat juga diaplikasikan untuk menyimpan
Pada kultur meristem dari empat genotip Tiriticam
plasma nutfah (Sahrawat and Chand, 2001).
aestivum L. potensi regenerasinya rata-rata 80
Meskipun meristem ukurannya kecil, namun
- 90% apabila dikulhrkan di dalam medium MS
telah berhasil dilakukan regenerasi pada yang mengandung 2 dan 4 mglL 6-
meristem apikal tunas Tliticam aestiwmL. ii (BAP) dengan
benzylaminopurin berkombinasi
vitr o (Ahmad et aL, 20A), Anonas comosra (L.)
0,5 mglL asun 2.4-diklorofenoksiasetat (2,4-D)
Merr. (Akbar et al., 2003), Ip o m o e a b at at as (L.)
(Ahmad et al., 2002). Demikian juga
Lam. (Hettiarachchi, 1988), Gentiana mikropropagasi kultur meristem Zingiber
pneumonanthe L. (Bach and Pawlowska, 2003),
ofictnales cv.\S,, diperlukan medium MS padat
dan Zingiber fficinale cv. VrS,, @out et aL, (Murastrige and Skoog, I 962) yang ditambahkan
1998).
4,0 mglL BAB 1,0 mg& asam indol'3- asetat
(tAA), dan 100 mg& adenin sulfat. Namrm untuk
2.2. Prosedur Pelaksanaan Kultur Meristem
memperoleh plantlet normal dapat diperoleh
A. Perryiapan iaringan steril cukup dengan medium % MS Yang hanYa
Bagian puncak tunas dipotong sepanjang
ditambatrkan 1,0 mg/L asam indole-3-butirat
3 - 5 cm dari tanaman asalnya. Lalu dibilas

Diterbitkan Kopertis lllilayah I 57

Atudemta Vol. 14 No. 4, Agustus 2010
et al., 1998). MoiurutEndress (1994)
0BA) (Rout
kombinasi sitokinin dan auksin hanya
menghasilkan perhrmbuhan tunas. Akan tetapi
dalam banyak hal, sitokinin, auksin dan asam
giberelat tampaknya diperlukan untuk
pengembangan tumbuhan nomal. Narrun pada
kultur meristem tidak menutup kemungkinan
berhasil juga pada medium lain. Demikian juga
jenis zat pengatw tumbuh dapat berpenganrh
pada potensi regenerasi kultur meristem. Seperti
pada kultnr meritem Gentiana pneumonanthe
L. lebih efektif diregenerasi dalam medium MS
yang ditambalkan 2,4'D daripada Picloram.
@ach and Pawlowskq 2003). Jadi keberhasilan
kultur meristem dalam regenerasi tumbuhan
normal tidak hanya tergantung kepada jenis
media, komposisi medium, jenis dan konsentasi
zat pengatur tumbutr, serta konilisi linghmgan
yang tepat, tetapi juga pada ukuran meristem
tunas eksplan.
II[,PENUTTJP
Eksplan meristem yang digunakan dalam
kultur jaringan dapat berupa meristom apikal atau
meristem tunas aksiler. Kulnr meristem ini digtmakan
untuk mengurangi jaringan lnrltur terkontaminasi dan
mendapatfan s.jumUn-t"o.rrn normal, serte dapat
dijadikan eksplan yang bebas virus, Dolam
pemanfaatan eksplan meristem pada kultur jaringan
harus perlu diperhatikan prosedur pelaksanaan kulnr
meristem tersebut, sehingga dalam regenerasi kultur
meristem dapat berhasil sesuai dengan tujuannya.
Apabita tujuannya untrk menghilangkan infe'lsi virus
sistemik, maka ukuran kultur meristem sekitar 0,1
0,5rml
DAFIARPUSf,AI(A
Ahmad,A., H. Zhong, W. Wang, andM.B. Sticklen.
2002. Shoot apical meristem: In vitro
regeneration and morphogenesis in wheat
(Tiitiam aestivumL.). Invirro Cell. Dev Biol.
Plant 38: 163-167.
Akbar, M.A., B.K. Karmakar, and S.K. Roy.2003.
Callus induction and high-frequency plant
regeneration of pineapple (Ananas comosut
(L,)Merr). PlantTissueCult. 13 (2): 109-116.
Bach, A. and B. Pawlowska. 2003. Somatic
embryogenesis tn Gentiana pneumonanthe
L. Acta Bio. Crac. Seriei B ot.45 Q):79'86.
Diterbitkan Koryrtis Wilayah I 58
Rama R. SitinJak : Penunfaatan Meristim dalan Teknik Kultur Jaringan
Bhojwani, S.S. and M.K. Razdan . l99 6. Plant tissue
culture: Theory and practice. Elsevier
Amsterdam, Oxford, New Yorlq Toltyo.
ChrL I.Y.B. and S.L. KurE. 1990. Micropropagationof
floriculture crops. P. 127-159. Vol.5. InP.Y.
Ammirato et al. (ed) Handbook of plant cell
culture. McGraw-Hill, Sydney, Tokyo,
Toronto.
Dodds. J.H., and L.W. Roberts. 1995. Experiments in
plant tissue culture. Cambridge Univ. Press,
USA.
Endress. R. 1994. Plant cell biotechnolory. Springer-
Verlag, Berlir; Heidelberg.
Esau, K. 1976. Plant anatomy. Wiley Eastern Ltd, New
Delhi, Bangalore, Bombay, Calcutta.
Fosket, D.E. 1994. Plant growth and development A
molecular approach. Academic Press, Inc,
Sanb Diego, New York, Boston, London,
Sydney, Tokyo, Toronto.
llafimann, H.T., D.E. Kester, and F.T. Davies. 1990.
Plant propagation: Principles and practices.
Fifttr edition. Prentice-Hll International Inc,
EnglewoodCliffs.
Hettiarachchi, A. I 988. Tissue culture and meristem
culture in sweet potato (Ipomoea batatas Q.)
.[am. ARC Ttaining, Sri Langka.
-
Kartha, K,K. 1981. Meristem culture and
cryopreservation methods and applications.
p. l8l-209. InT.A. Thorpe (ed.) Planttissue
culture: Mothods and applications in
agricultur. Academic Press.' Inc, Montrea,
Sydney, Tokyo.
Mariska,I. and S.F. Syahid. 1994. Propagation of
gingerthroughmeristemculture. J.Indust.
Crops. Res.7 (1): l-6.
Rout, G.R., P. Das, S. Goel, and S.N. Raina. 1998.
Genetic stability of micropropagated plants
of ginger. Bot. Bull. Acad. SirL 39: 23-27 .
Sahrawat, A.K. and S. Chand. 2001. Continuous
somatic embryogenesis and plant
regeneration from hypocotyl segments
P s orale a corylifoli a Lim, an endangered and
medicinally important fabaceae plant. Curr. Sci
81 (t0):1328-1331.
Atudcmla Yol. 11 No, 4, Agustut 2010 Raru R, St@ak : Pcnunfmtaa Mcrktlm dalam Tcknlh Kultur Jarlngan

Shenpoo4 J.L. 1995. Virus-froc plan8. p. 135-l45.In

RA. Dixon and R.A. Gonzalos (od") Plm cell
culturc: Apractical approach. Sepond odidou
Orford Univ. Pres, Oxforrd, Nav Yst, Tolr:ro.

Slach S.A. andL.A. Tufford. 1995. Mlristonqthrc

for virus elimination. p. lll7"l27, In A.L.
Gamborg and GC. Phillips (c4) Pld Ccll,
Tissue and Or$an Culturo. Spring*,VcL&
Berliru Heidelberg, New York

UE€ndi, N.M.A. Wattimena, GA. dm Gruwa, Ltrl.

. 1992 Produksi senyawa mohbolit sfufu
dengan kultur jaringau. Dalem: Biotdq@i
tanaman. Depdikbud Difektord Poailidihm
Tinggi Pusat Antar Univcrsiht IPB.EOSG,
p.169-2t9.

Dllerblllcan Kopertis Wilayah I 59