pengecatan negatif

1. Ambil 2 kaca obyek. Teteskan satu tetes tinta cina atau nigrosin pada bagian ujung kanan

salah satu kaca obyek.

2. Sentuhkan ose pada biakan bakteri, kemudian campur dengan tinta cina atau nigrosin di atas

kaca obyek.

3. Salah satu sisi kaca obyek yang lain diletakkan pada campuran tinta dan bakteri (atau

campuran nigrosin dan bakteri) sehingga tersebar pada seluruh sisi.

4. Gesekkan kaca obyek sebelah kiri, sehingga campuran tinta dan bakteri (atau campuran

nigrosin dan bakteri) membentuk lapisan yang tipis sekali.

5. Selanjutnya preparat dikering-anginkan. Preparat tidak boleh dipanaskan diatas api.

6. Periksa dengan mikroskop perbesaran kuat dan diberi minyak imersi. Bila teknik pewarnaan

dilakukan dengan benar, maka mikroorganisme terlihat transparant dengan latar belakang

gelap.

c. Pengecatan gram

1. Buat preparat ulas, kemudian fiksasi di atas api.

2. Beri larutan kristal violet selama satu menit.

3. Cuci denagn air.

4. Beri larutan lugol selama 1 menit.

5. Beri larutan pemucat selama 10-20 detik. Perhatikan waktu pemucatan, karena pemucatan

terlalu lama akan memberikan hasil pewarnaan yang menyimpang.

6. Cuci dengan air.

7. Beri larutamn safranin selama 15 detik.

8. Cuci dengan air, kemudian keringkan dengan kertas saring.

9. Periksa dengan mikroskop pemberasan kuat dan di beri minyak imersi.