Anda di halaman 1dari 9

BAB III

METODE PENELITIAN

1. Tanaman Kunyit (Curcuma longa Linn)


a. Klasifikasi Tanaman

Gambar 1. Daun Kunyit (Hapsoh dan Hasanah, 2011)


Divisio : Spermatophyta
Sub divisio : Angiospermae
Kelas : Monocotyledoneae
Ordo : Zingiberales
Famili : Zingiberaceae
Genus : Curcuma
Species : Curcuma longa Linn
(Hapsoh dan Hasanah, 2011)
b. Kandungan Kimia
Kunyit termasuk salah satu tanaman suku temu-temuan (Zingiberaceae)
yang banyak ditanam di pekarangan, kebun dan di sekitar hutan jati. Kunyit
dikenal sebagai penyedap, penetral bau anyir pada masakan dan juga sering
dimanfaatkan sebagai ramuan obat tradisional untuk menyembuhkan berbagai
penyakit. Saat ini kunyit sudah dimanfaatkan secara luas oleh industri makanan,
minuman, obat-obatan, kosmetik dan tekstil (Winarto, 2003).
Rimpang kunyit mengandung kurkuminoid (3-5%) yang terdiri dari
kurkumin dan turunannya yaitu desmetoksikurkumin dan bisdesmetoksikurkumin
(Puspa, 2017). Selain itu juga mengandung minyak atsiri yang terdiri dari alpha
beta tumeron, aril-tumeron, artumeron, alpha dan beta atlanton, kurkumol,
zingiberance (Jefrianto, 2016)

Gambar 2. Struktur Kurkumin dan Turunannya (Winardi et al, 2017)


c. Mekanisme Antiinflamasi
Tanaman herba kunyit diketahui memiliki efek sebagai antiinflamasi,
antioksidan, antidiabetes, antibakteri, antifungi, antiprotozoa, antivirus,
hipotensif, dan hipokolesteremik . mekanisme antiinflamasi pada kurkuminoid
secara umum yaitu dapat menghambat COX-2 dan PGE2 (Suryani et al, 2015)
Pada pasien RA, Kurkuminoid menghambat aktivasi faktor-κB nuklir,
yang mengarah pada penghambatan ekspresi gen sitokin proinflamasi (TNF-α dan
IL-1β), kemokin (seperti MCP-1) dan cyclooxygenase (COX) -2 yang mengubah
asam arakidonat menjadi prostaglandin (PG) seperti PGE2, PG sangat
mempotensiasi eksudat dengan menginduksi relaksasi otot polos arteriolar dan
meningkatkan suplai darah ke jaringan. Juga, baik COX-2 dan PGE2 menginduksi
aktivasi dan pertumbuhan fibroblas sinovial, yang berhubungan dengan
hiperplasia dan pembentukan pannus, dengan menghambat apoptosis (Ramadan et
al, 2011).
d. Uji Aktivitas Antiinflamasi secara in Vitro (Ramsewak et al, 2000)
Aktivitas Cyclooxygenase I (CO X-I) diukur dengan menggunakan
sediaan enzim (sekitar 0,46 mg protein / mL dalam 30 mM buffer Tris, pH 7,0),
dari ram vesikula seminalis. Sedangkan aktivitas siklooksigenase II (COX-II)
diukur menggunakan sediaan enzim dari lisat sel serangga dan diencerkan dengan
buffer Tris (pH 7) untuk menghasilkan konsentrasi akhir sekitar 1,5 mg protein /
mL. Uji siklooksigenase dilakukan pada suhu 37 ° C dengan memantau laju awal
oksigen menggunakan Instech micro oxygen chamber dan electrode. Setiap
campuran pengujian mengandung 0,6 mL 0,1 M Tris buffer (pH 7), 1 mmol fenol,
85 hemoglobin dan 100 µmol asam arakidonat. Larutan DMSO yang mengandung
senyawa murni atau DMSO saja (20 µL ditambahkan ke dalam chamber). Reaksi
dimulai dengan menambahkan 5 hingga 25 µg protein mikrosomal dalam volume
10-20 µl., Data direkam menggunakan Windows QuickLog untuk akuisisi data.
Berdasarkan hasil menunjukkan bahwa kurkumin I-III dapat menghambat
enzim COX-I pada konsentrasi 125 ug/ml yaitu 32, 38.5 and 39.2 % secara
berurutan. Selain itu, kurkumin I-III juga dapat menghambat enzim COX-II pada
konsentrasi 125 mg/ml yaitu 89.7, 82.5 and 58.9 % secara berurutan.
e. Uji Aktivitas Antiinflamasi secara in Vivo (Ramadan et al, 2011)
Pada uji aktivitas antiinflamasi secara in vivo dilakukan dengan
membandingkan aktivitas anti-inflamasi dari dua tanaman ini pada tikus yang
diinduksi arthritis adjuvant tikus (AIA). Kedua tanaman (dengan dosis 200 mg /
kg berat badan) secara signifikan menekan (tetapi dengan derajat yang berbeda)
kejadian dan keparahan artritis dengan meningkatkan / mengurangi produksi
sitokin anti-inflamasi / pro inflamasi dan mengaktifkan pertahanan sistem
antioksidan. Aktivitas antiinflamasi dari kunyit melebihi jahe dan indometasin
(obat anti-inflamasi non-steroid), terutama sejak hari pertama dimulai induksi
artritis. Persentase pemulihan penyakit oleh kunyit 4,6-8,3% dan 10,2% lebih
tinggi dibandingkan dengan jahe dan indometasin (P <0,05). Rimpang kunyit
lebih efektif dalam mengurangi respon imun inflamasi dan stres oksidasi dalam
model tikus RA daripada rimpang jahe dan indometasin. Oleh karena itu,
suplemen diet rimpang kunyit mungkin memiliki efek menguntungkan terhadap
perkembangan arthritis pada pasien RA.
2. Tanaman Kencur (Kaempferia galanga L.)
a. Klasifikasi Tanaman

Gambar 3. Rimpang Kencur (K. galanga L)


Divisio : Magnoliophyta
Sub divisio : Angiospermae
Kelas : Liliopsida
Ordo : Zingiberales
Famili : Zingiberaceae
Genus : Kaempferia
Species : Kaempferia galangal(Linn.)
Kencur (Kaempferia galangal L.) merupakan tanaman tropis yang banyak
tumbuh diberbagai daerah di Indonesia sebagai tanaman yang dipelihara. Kencur
merupakan salah satu jenis empon-empon atau tanaman obat. Tanaman kencur
yang tergolong dalam suku temu-temuan (Zingiberaceae) ini, juga termasuk
komoditas yang memiliki prospek pasar sangat baik. Sebab, kencur termasuk
bahan baku penting dalam industri seperti obat tradisional, kosmetika, obat herbal
terstandar, saus, rokok, bumbu, bahan makanan, dan minuman penyegar dalam
maupun luar negeri.
b. Kandungan Kimia
Rimpang kencur mengandung flavonoid, saponin dan minyak atsiri yang
dapat berfungsi sebagai antiinflamasi. Antiinflamasi pada kencur merupakan tipe
anti inflamasi non steroid. Flavonoid dapat menghambat jalur metabolisme asam
arakidonat, pembentukan prostalglandin dan pelepasan histamine pada radang.
Saponin bersifat seperti detergen diduga mampu berinteraksi dengan banyak
membrane lipid seperti fosfolipid yang merupakan perkusor prostalglandin
mediatormediator inflamasi lainnya. Minyak atsiri dapat menghambat agregasi
platelet dengan cara menghambat pembentukan tromboksan sehingga juga
berperan dalam efek antiinflamasi (Hasanah Aliya N, 2011).

Gambar 4. Struktur Kimia Ethyl Cinnamate

Gambar 5. Struktur Kimia Ethyl-p-methoxycinnamate


c. Mekanisme Antiinflamasi
Kencur (Kaempferia galanga L.) banyak digunakan sebagai bahan baku
obat tradisional (jamu), fitofarmaka, industri kosmetika, penyedap makanan dan
minuman, rempah, serta bahan campuran saus, rokok pada industri rokok kretek.
Secara empirik kencur digunakan sebagai penambah nafsu makan, infeksi bakteri,
obat batuk, disentri, tonikum, ekspektoran, masuk angin, sakit perut (Pujiharti,
2012). Kencur juga juga memiliki bermacam-macam kegunaan lain, diantaranya
sebagai antibakteri, antifungi, analgesik, anti-inflamasi, antioksidan, antivirus,
antihipertensi, antikarsinogenik, antinosiseptif, antituberkulosis dan larvasida.
Minyak atsiri rimpang kencur juga digunakan sebagai bahan parfum, obat-obatan,
dan untuk aromaterapi inhalan dan pijat untuk mengurangi kecemasan, stres, dan
depresi (Kumar, 2014).
d. Uji Aktivitas Antiinflamasi In Vitro
Efek penghambatan siklooksigenase dari EPMC diuji dengan
menggunakan kit uji penghambatan siklooksigenase (COX). Secara singkat,
COX-1 dan COX-2 diinkubasi secara terpisah dengan sampel uji (EPMC dan
indometasin, masing-masing dalam konsentrasi 200 μg / mL) selama 15 menit
dalam tabung reaksi dan ditambahkan asam arakidonat. Campuran reaksi
diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam penangas air selama 2 menit. Ini diikuti
dengan penambahan asam klorida encer dan larutan stannous chloride jenuh ke
dalam campuran reaksi masing-masing tabung reaksi untuk menghentikan reaksi.
Setelah inkubasi 18 jam, campuran reaksi diambil pada pelat mikro yang dilapisi
IgG anti-kelinci. Prostaglandin antiserum dan prostaglandin tracer (antibodi
prostaglandin yang dihubungkan dengan asetil cholinesterase) ditambahkan ke
dalam wells microplate. Setelah beberapa kali dicuci, pereaksi Ellman
ditambahkan ke dalam wells dan absorbansi cahaya dicatat pada kisaran panjang
gelombang 405 hingga 420 nm.
Hasil menunjukkan bahwa EPMC dapat menghambat COX-1 dan COX-2
dengan persen inhibisi sebesar 42.9% dan 57.82%. sedangkan standar obat
sebagai control positif yaitu indometasin dapat mneghambat COX-1 dan COX-2
dengan persen inhibisi sebesar 82.8% dan 54.6%. Hasil IC50 EPMC terhadap
COX-1 dan COX-2 yaitu 1.12 µM and 0.83 µM. sedangkan indometasin yaitu
0.33 µM dan 0.51 µM.
e. Uji Aktivitas Antiinflamasi In Vivo
Uji aktivitas anti-inflamasi pada ekstrak, fraksi, dan sub-fraksi K. galanga
diuji oleh edema kaki belakang tikus yang diinduksi karagenan. Hewan
dipuasakan selama 12 jam sebelum percobaan namun tetap diberi minum. Tikus
dibagi menjadi enam kelompok hewan masing-masing (n = 6). Uji in vivo efek
anti-inflamasi dilakukan dalam empat tahap, yaitu: dengan ekstrak kasar
(petroleum eter, kloroform, ekstrak metanol dan air), fraksi (fraksi 1, 2 dan 3),
sub-fraksi (sub-fraksi) 1 dan 2) dan EPMC yang terisolasi. Pada setiap tahap,
kelompok perlakuan terdiri dari tikus yang diberi ekstrak / fraksi / sub-fraksi /
EPMC, obat indometasin (kontrol positif) dan 1% tween 80 dalam air suling
(kontrol negatif). Tepat 1 jam setelah pemberian oral, 0,1 mL karagenan 1%
disuntikkan ke daerah sub-plantar kaki belakang kanan. Ketebalan kaki belakang
kanan tikus kemudian diukur menggunakan mikrometer sebelum percobaan dan
setelah 1, 2 dan 3 jam pemberian karagenan. % inflamasi dihitung menggunakan
rumus berikut:
% inflamasi = (A - B) / B × 100
Dimana A = tebal kaki, 3 jam setelah edema yang diinduksi karagenan; B =
Ketebalan kaki sebelum edema yang diinduksi karagenan.
Hasil menunjukkan bahwa % inflamasi yang dicatat pada tikus yang diberi
dosis EPMC murni bertingkat. Meskipun signifikan ketika dibandingkan dengan
kontrol (p <0,05), % inflamasi yang pada tikus dengan EPMC 100 mg / kg tidak
jauh berbeda dari kontrol (13,3% inhibisi), hal ini menunjukkan bahwa dosis ini
sebagai konsentrasi penghambatan minimum. (MIC) karena penurunan dosis
cenderung menghasilkan efek yang tidak signifikan. Namun, peningkatan dalam
dosis EPMC terlihat menghasilkan % inhibisi tergantung dosis (p <0,01; p
<0,001).
Daftar Pustaka
• Winarto. 2003. Khasiat dan Manfaat Kunyit. Agromedia Pustaka. Jakarta
• Jefrianto, J., 2016. Uji Efek Antiinflamasi Kombinasi Astaxanthin Dan Ekstrak Rimpang
Kunyit (Curcuma Domestica Val.) Terhadap Hitung Jenis Neutrofil Pada Tikus Putih
Galur Wistar. Jurnal Mahasiswa Fakultas Kedokteran Untan, 5(1).
• PUSPA, L.A., 2017. PENGARUH BAGIAN BAHAN DAN METODE PRA
PENEPUNGAN TERHADAP KADAR KURKUMINOID PADA TEPUNG KUNYIT
(Curcumae domestica Vahl) DENGAN METODE UPLC (Ultra Performance Liquid
Chromatography) (Doctoral dissertation, Fakultas Teknik Unpas).
• Winardi, S., Christy, T.W., Showiantari, S., Lestari, S.D., Machmudah, S. and Kusdianto,
K., 2017, June. Curcurmin Micronization from Temulawak (Curcuma Xanthorrhiza)
Extract Using Supercritical Co2 as Anti-Solvent. In Seminar Nasional Teknik Kimia
Kejuangan (p. 04).
• Suryani, S., Wahyuni, W. and Benny, F., 2015. Uji Efek Antiinflamasi secara In Vivo
Nanopartikel Kurkumin yang Diformulasikan menggunakan Metode Reinforcement
Gelasi Ionik. Pharmauho, 1(1).
• Abdelwahab, S.I., Hassan, L.E.A., Sirat, H.M., Yagi, S.M.A., Koko, W.S., Mohan, S.,
Taha, M.M.E., Ahmad, S., Chuen, C.S., Narrima, P. and Rais, M.M., 2011. Anti-
inflammatory activities of cucurbitacin E isolated from Citrullus lanatus var. citroides:
role of reactive nitrogen species and cyclooxygenase enzyme
inhibition. Fitoterapia, 82(8), pp.1190-1197.
• Ramsewak, R.S., DeWitt, D.L. and Nair, M.G., 2000. Cytotoxicity, antioxidant and anti-
inflammatory activities of curcumins I–III from Curcuma longa. Phytomedicine, 7(4),
pp.303-308.
• Ramadan, G., Al-Kahtani, M.A. and El-Sayed, W.M., 2011. Anti-inflammatory and anti-
oxidant properties of Curcuma longa (turmeric) versus Zingiber officinale (ginger)
rhizomes in rat adjuvant-induced arthritis. Inflammation, 34(4), pp.291-301.
• M. I. Umar, M. Z. Asmawi, A. Sadikun et al., “Bioactivity-guided isolation of ethyl-p-methoxycinnamate, an
anti-inflammatory constituent, from Kaempferia galanga L. extracts,” Molecules, vol. 17, no. 7, pp. 8720–
8734, 2012.

• Hasanah, Aliya N, Fikri Nazarudin, Ellin Febrina, Ade Zuhrotun. 2011. Analisis
Kandungan Minyak Atsiri dan Uji Aktivitas Anti Inflamasi Ekstrak Rimpang Kencur
(Kaempferia galangal L.). Jurnal Matematika dan Sains Vol 16 No 3. Program Studi
Farmasi Fakultas MIPA ITB. Bandung.
• TULAINY, I., 2016. 1 PENGARUH AUKSIN (2, 4 D) DAN AIR KELAPA TERHADAP
INDUKSI KALUS PADA RIMPANG KENCUR (Kaempferia galanga L (Doctoral
dissertation, UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO).

Anda mungkin juga menyukai