Bioquimica 11 Masa Proteica

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESINAL DE MEDICINA HUMANA
BIOQUIMICA Y NUTRICION
OBJETIVOS
Objetivo General:
Determinar los métodos para evaluar las proteínas del
compartimiento visceral mediante los niveles de Transferrina,
Prealbúmina, Proteínas totales y Albúmina en suero, que por su
relativamente corto tiempo de vida y las proteínas del
compartimiento somático ò esquelético la evaluaremos mediante
la relación entre la excreción de la creatinina urinaria en 24 horas
y la talla de la persona,así mismo mediante el Peso y la Talla se
evaluará la masa corporal total.
Objetivos Específicos:
 Aprender la importancia de la masa proteica visceral y
esquelética, y reconocer en qué consiste en relación a la
bioquímica.
 Aplicar adecuadamente los reactivos que intervienen en la

práctica.
 Realizar y verificar correctamente observaciones que actúen en

nuestras muestras, así como dicho instrumento.
INTRODUCIÓN:
Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares,
ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la vida.
Actúan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la
forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc.
La proteína más abundante en plasma es la albúmina. Una de sus
funciones más importantes es la de permitir el transporte de ácidos grasos,
hormonas esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre son
insolubles en medio acuoso. La concentración de albúmina en plasma
influye notablemente en el mantenimiento de la presión coloidosmótica,
lo que estaría relacionado con su relativamente bajo peso molecular y su
gran carga neta. En condiciones patológicas como pérdidas renales,
desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen presentarse
hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma múltiple,
endocarditis bacteriana y hemoconcentraciones de diversos orígenes, se
observan hiperproteinemias. En general, ambas situaciones se ven
acompañadas también por hipoalbuminemias. Los aumentos anormales
de albúmina son ocasionales y se relacionan casi siempre con
deshidratación que produce el consecuente aumento en el contenido
proteico del plasma. El análisis del nivel de proteínas en sangre es un
análisis que se realiza por separado o en una petición general de
bioquímico en la sangre. Mide la cantidad de proteínas presentes en el
suero. Las proteínas son un constituyente muy importante de las células y
los tejidos del cuerpo humano. Se componen de aminoácidos. Hay
diferentes tipos de proteínas con diferentes funciones, son así proteínas
los enzimas, algunas hormonas, la hemoglobina, el LDL (transportadora
de colesterol), el fibrinógeno, el colágeno, las inmunoglobulinas, etc. Las
proteínas totales del suero se pueden separar en dos grandes grupos la
Albúmina y las globulinas. La albúmina es la proteína de más
concentración en la sangre. La albúmina transporta muchas moléculas
pequeñas (bilirrubina, progesterona, y medicamentos), y tiene también
la función de mantener la presión sanguínea ya que favorece la presión
osmótica coloidal para mantener líquidos en el torrente sanguíneo y que
no pasen a los tejidos, manteniendo un equilibrio
EVALUACION DE LA MASA PROTEICA VICERAL

Y ESQUELETICA:
Evaluar el estado nutricional de un individuo consiste en síntesis en el
conocimiento de en qué grado las demandas bioquímicas, fisiológicas y
metabólicas están siendo cubiertas por la ingestión de nutrientes, por lo
que reflejará, si la ingestión, absorción y utilización de los mismos son
adecuadas a las necesidades del organismo teniendo en cuenta su
biodisponibilidad, pérdidas y las reservas. Es tal la preocupación que
existe de unos años a esta parte por el estado nutricional de los
individuos, como un indicador de salud, que desencadenó en la
búsqueda de parámetros que siendo fáciles de medir y de cálculo
simple, específicos, fiables, no invasivos y pocos costosos, puedan
utilizarse como indicadores nutricionales de forma rutinaria en la
práctica diaria. Es fácil entender que muy pocos parámetros van a
cumplir todas las condiciones anteriormente expuestas, por ello es
indispensable un profundo conocimiento de su metodología e
interpretación para que puedan ser utilizados de la forma más
conveniente.
La manera más adecuada de abordar la evaluación del estudio del

estado nutricional es realizarlo en forma gradual, donde el primer paso
sería conocer si existe algún
problema nutricional, para en
caso afirmativo proceder a una
valoración más específica,
determinando que
compartimentos corporales
pueden estar afectados. El primer
compartimento que debe ser
evaluado es el compartimento
graso, ya que las grasas son las
primeras reservas que el organismo
va a utilizar para aprovisionarse de
energía, y en un segundo nivel
recurrirá a otros sustratos como las
proteínas, pudiendo establecerse
finalmente el diagnóstico
nutricional.
La primera etapa abordable de

estos estudios será la evaluación
del estado nutricional global, que
se basa en determinar mediante
medidas indirectas si las necesidades del organismo están siendo
cubiertas, pero como comentamos anteriormente, no identificaremos la
parte del cuerpo que puede encontrase afectada. Para este tipo de
evaluación recurriremos al análisis de la dieta, la determinación del
peso y a la capacidad de la repuesta inmune del organismo.
MARCO TEORICO:
MÉTODOS DE DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES
Los métodos para medir la concentración de proteínas totales (PT)
pueden clasificarse en:
1. Físicos:
• Absorbancia del enlace peptídico a 190 nm: se basa en la propiedad
que tiene el enlace peptídico de absorber a esa longitud de onda.
• Absorbancia de los aminoácidos aromáticos a 280 nm: su

principal limitación es que no todas las proteínas tienen la misma
proporción de estos aminoácidos, lo que le resta exactitud.
• Refractometría: método de elección, pero hoy en día en la práctica

clínica se está dejando de usar.
2. Químicos:
Reacción de Kjeldahl: considerado históricamente como el
método referencia.
Método de Lowry: se basa en la reducción del reactivo de
Folin-Ciocalteau provocada por el complejo unión peptídico-
Cu2+ en medio alcalino con la participación de restos fenólicos
(tirosilos).
Reacción de Biuret: se fundamenta en la formación de un
complejo, en medio alcalino, entre el Cu2+y los enlaces
peptídicos (absorción a 540 nm). En la práctica clínica, es una de
las metodologías más usada para el dosaje de PT.
Métodos turbidimétricos (precipitación con ácido
tricloroacético-TCA o sulfosalicílico)
Método de Bradford
En el Trabajo Práctico se determinará la concentración de

proteínas por el Método de Bradford.
Fundamento: es una técnica sensible que consiste en la medición
de la extinción provocada por el cambio en el espectro visible de un
colorante (Coomasie Blue G-250) cuando éste se une a las proteínas
(absorbiendo asía 595 nm). Esta unión se realiza a través de grupos
ionizados y se comprueba proporcionalidad con la concentración
de proteínas contenidas en la muestra.
La determinación del contenido proteico de una muestra requiere la

comparación del valor de absorbancia de la muestra con los
obtenidos a partir de cantidades conocidas de proteínas, con los
que se construye una curva de calibración: a mayor cantidad de
proteínas, mayor color desarrollado y por lo tanto,mayor absorbancia.
Recordar que esta proporcionalidad es sólo lineal hasta un cierto límite
de concentración.
La curva de calibración
Se requiere contar con un solución testigo de proteína de
concentración conocida (generalmente se utiliza albúmina sérica
bovina o inmunoglobulina G). Se preparan por lo menos 4 tubos testigos
con distintas cantidades de proteínas (T1, T2, T3 y T4) y otro tubo
denominado blanco (en el cual el volumen de la solución de proteínas
se reemplaza por agua). En forma simultánea, se procesan las
muestras incógnitas. Luego se agrega la misma cantidad del reactivo
de Bradford a cada tubo (dado que en definitiva se compara el
color desarrollado evidenciado por la absorbancia de la solución en
cada tubo, sus volúmenes finales deben ser iguales).
Protocolo ejemplo de determinación de proteínas porel

método de Bradford:
Una vez preparados los tubos, se lee la absorbancia de cada uno
de ellos a la longitud de onda de 595 nm. La absorbancia obtenida en
el tubo blanco debe ser restada a cada uno de los tubos restantes. Una
opción es calibrar el equipo con el tubo blanco: esto consiste en asignar
a la absorbancia del blanco, una lectura igual a cero. De esta manera,
automáticamente esta lectura es “restada” por el fotocolorímetro a

todas las muestras posteriormente leídas en el equipo. Los resultados
obtenidos se vuelcan en una tabla como la que sigue.
Con las absorbancias de los tubos testigos obtenidas en el

fotocolorímetro, se construye el gráfico de Absorbancia a 595 nm en función
de la cantidad de proteína (mg).
En el ejemplo, los tubos conteniendo testigos 4 y 5muestran una desviación de

la zona lineal de cumplimiento de la Ley de Lambert- Beer, motivo por el cual
no se consideran al trazar la recta promedio.
Para determinar la concentración de proteínas en la muestra (X), se interpolan

en la curva de calibración las absorbancia/s correspondientes a el/los tubo/s
que contenían la muestra. Así, sabiendo la cantidad de proteína (X)
contenida en el volumen de muestra utilizado en la medición, puede
calcularse la concentración proteica.
Bases clínicas de muestra :

Bandas principales del proteinograma:
1. Pre-albúmina:
o Valor normal: 0,3 g/100 ml, incluye a la transtiretrina.
o La visualización depende de que todas las condiciones técnicas
sean las óptimas.
o Su disminución es un marcador sensible del estado nutricional
reacción inflamatoria.
o La presencia de esta banda no se informa.
2. Albúmina:
o Valor normal: 3,5-5,0 g/100 ml.
o Es la proteína más pequeña y con mayor número de grupos
cargados negativamente; esta característica le permite migrar
con mayor rapidez.
o Constituye una banda homogénea, puesto que se trata de una
única proteína, actúa como trasportador activo de diferentes
compuestos tales como ácidos grasos, pigmentos biliares,
hormonas esteroides, fármacos y otros.
o Es un reactante de fase aguda negativo, por lo que en estados
infecciosos agudos está disminuida.
o Estados asociados con hipoalbuminemia: estados de
malnutrición o malabsorción, enfermedad hepática severa (por
fallas en su síntesis) o aumento de su catabolismo, no se
conoce un estado patológico con hiperalbuminemia.
3. A1-globulina:
o Valor normal: 0,1-0,3 g/100 ml.
o Banda formada principalmente por: α1-antitripsina
(mayoritaria), glucoproteína ácida α1 u orososeromucoide,
transcortina y globulina fijadora de tirosina.
o Un aumento o disminución de esta banda se debe a un aumento

o disminución de α1-antitripsina (predomina en la fracción α1) -
α1-antitripsina:
o Cumple con el 90% de la acción antiproteásica del
organismo; es el inhibidor biológico de las enzimas proteolíticas
de los lisosomas). Es un reactante de fase aguda positivo.
o Aumento de α1-antitripsina: estrés, reactante de fase aguda,
tumores;
o Disminución de α1-antitripsina: estados de
malnutrición/malabsorción, enfermedad hepática severa, o
aumento de su catabolismo (procesos relacionados con la
disminución de cualquier proteína).
o Glucoproteína ácida α1: inhibe o inactiva a la
progesterona, es un reactante de fase aguda positivo.
o Transcortina: transporta 2/3 del cortisol y otros corticoides. El
cortisol circulante se une también (minoritariamente) a la
albúmina. La transcortina se sintetiza en el hígado.
Proteína fijadora de tiroxina: une T3 (triyodotironina) y T4 (tiroxina).

Las hormonas tiroideas circulantes se unen también a la prealbúmina.
o Tanto la transcortina como la proteína fijadora detirosina

aumentan en el embarazo y tras la administración de estrógenos.
4. A2-globulina:
o Es una fracción heterogénea, valor normal: 0,5-0,75 g/100 ml.
o Está integrada por: haptoglobina, α2-macroglobulina y
ceruloplasmina.
- haptoglobina:
o Su función es captar hemoglobina (Hb): La formación del

complejo Hb-haptoglobina impide que la pequeña cantidad de
Hb liberada por hemólisis normal intravascular sea excretada por
orina, evitando así el efecto tóxico de la Hb libre y la pérdida de
Fe.
o Es un reactante de fase aguda positivo, (aumenta en estados

infecciosos agudos).
o Su disminución se asocia a cualquier estado patológico que
curse con hemólisis intravascular debido a un aumento de su
consumo (anemia hemolítica, etc). - α2-macroglobulina:
o Está aumentada fisiológicamente en el embarazo y en niños
(dada su función relacionada con el desarrollo). -
ceruloplasmina:
o Participa en el metabolismo del hierro y el Cu++, ya que una
molécula puede fijar hasta 8 átomos de Cu++, es un reactante
de fase aguda positivo, y aumenta en tumores y leucemias.
o La deficiencia congénita de ceruloplasmina desarrolla la
enfermedad de Wilson.
5. β-globulinas:
o Valor normal: 0,6-1,1 g/100 ml
o β1-globulina: incluye a la transferrina y la hemopexina.
o β2-globulina: incluye a C3 - transferrina:
o Es una proteína que fija Fe (cada molécula puede fijar 2 Fe).
o Es un reactante de fase aguda negativo, pero además siempre
que disminuya la albúmina, disminuye β1 (excepto en el
embarazo) por disminución de la transferrina.
o En procesos con déficit de Fe (por estimulación de la síntesis
de su proteína transportadora) aumenta sus niveles, al igual que
en el embarazo; - Hemopexina:
o •Ffija y transporta al grupo hemo liberado de la Hb en la
hemólisis, cuando está saturada su capacidad de captación
por la haptoglobina. - C3:
o Participa del sistema del complemento.
o Un reactante de fase aguda positivo y disminuye (además
de las situaciones generales) y en enfermedades autoinmunes
(LES, AR).
6. γ-globulinas:
o Es una zona heterogénea
o Si la muestra es plasma, aparece en esta región (post-
β2 o g-rápida) una banda homogénea que
corresponde al fibrinógeno (0,3 g/100 ml), esto
constituye una interferencia y debe pedirse nueva
muestra (suero);
o Está constituido mayoritariamente por
inmunoglobulinas (sin embargo es importante recordar
en la búsqueda de algún componente monoclonal
que éstas proteínas pueden migrar desde α2 hasta el
punto de siembra), incluye:
o IgG: monómero de 160 kDa, se reconocen 4
subclases, es la mayoritaria, puede atravesar la
placenta y es la principal inmunoglobulina en la
respuesta inmune secundaria;
o IgA: se puede encontrar como monómero, dímero o
trímero, media la inmunidad de mucosas;
o IgM: es una inmunoglobulina pentamérica, asimétrica,
de PM hasta 1000 kDa, no atraviesa la placenta y es
la inmunoglobulina que media la respuesta inmune
primaria;
Desarrollo experimental :
MATERIALES
o Espectrofotómetro.
o Tubos de ensayo
o Pipetas.
o Agua destilada.Reactivo EDTA/Cu: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l
en NaOH 875 mmol/l y alquil aril polièter (AAP).
o •Reactivo BCF: solución de Bromo Cresolsulfon Ftaleìna (en
polioxietilèn lauril éter).
o • Micropipetas.
MÉTODO
Se procede por administrar las determinadas cantidades sugeridas para
cada uno de los tubos de reactivo que son dos, continuación se
aplicaran distintas cantidades que variaran de acuerdo a la indicación
del cuadro representado, el cual se distingue debido a las excepciones
que se acentúan dependiendo de las sustancias tanto en suero como en
orina. Se procede a mezclar cada sustancia aplicada en los diferentes
tubos, y, se lleva a baño maría a 37 °C durante 11 minutos y 30 segundos
y se leerá ante el espectrofotométro a 600 nm colocando en la celda
cada determinada muestra de cada uno de los tubos en el caso del
experimento A que consta de suero, a diferencia del experimento B que
trabajamos con orina el cual se incuba a temperatura ambiente y
durante 20 minutos.
• Reconocer cada uno de los materiales a utilizar.
• Seguir de manera rigurosa las cantidades establecidas por el
profesor en el cuadro de la pizarra, de lo contrario puede afectar a la
experiencia.
• Los estudiantes se turnan ante todos los miembros de la mesa para
realizar éste procedimiento.
• Con ayuda de la otra pipeta empezamos a utilizar cada una de las
soluciones añadiéndola de forma exacta para que cada uno de los
tubos que ocuparan las muestras.
• Se lleva a cabo el proceso de determinar la diferencia ante el
reconocimiento de masa visceral y esquelética en ambos experimentos.
Resultados :
Experimento A
DETERMINACIÓN DE PROTEINAS TOTALES Y ALBÚMINA EN
SUERO
Fundamentos del método:

Determinación de Proteínas Totales:
Los enlaces peptìdicos de las proteínas reaccionan con el ión cùprico,
en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con máximo de
absorción a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la concentración
de proteínas totales en la muestra.
Determinación de Albúmina:
La albúmina reacciona específicamente (sin separación previa) con la
forma aniónica de la Bromo Cresolsulfon Ftaleìna (BCF), en presencia de
un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de
absorbancia a 625 nm respecto al blanco de reactivo, es proporcional
a la cantidad de albúmina presente en la muestra.
Procedimientos:
DETERMINACIÓN DE PROTEINAS TOTALES
Blanco Standard Muestra
Reactivo 3ml 3ml 3ml
Agua destilada 30uL - -
Standard - 30uL -
Muestra - - 30uL
Mezclar por agitación. Incubar por 11min y 30 s. Leer en espectrofotómetro a 546nm.
𝐴 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝐶𝑎𝑙𝑐𝑢𝑙𝑜 ⋮ ×𝑛
𝐴 𝑠𝑡𝑎𝑟𝑑𝑎𝑟𝑑
0.573
× 6 = 7.67
0.448
DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA
Reactivo 3.1ml 3.1ml 3.1ml
Agua destilada 10uL - -
Standard 1.83uL 20uL -
Muestra - - 20uL
Mezclar por agitación. Incubar por 25 s. Leer en espectrofotómetro a 600nm.
1.948
× 5 = 3.32
1.83
Experimento B
DETERMINACIÓN DE CREATININA URINARIA
Fundamentos del método:
La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado,
previa desproteinización con ácido pícrico, obteniéndose un
cromógeno que se mide a 510 nm.
Procedimiento:
DETERMINACIÓN DE CREATININA URINARIA

Standard - 0.5ml -
Orina Diluida - - 0.5ml
Agua destilada 1ml 0.5ml 0.5ml
Reactivo 1 2ml 2mL 2ml
Reactivo2 0.5ml 0.5ml 0.5ml
Mezclar por agitación. Incubar por 20 min. Leer en espectrofotómetro a 510nm.
0.093
× 2 = 1068.96
0.174
Resultados:
Las proteínas totales se solicitan frecuentemente en una analítica

rutinaria. Proporcionan una información general sobre el estado
nutricional, por ejemplo si se ha sufrido una pérdida de peso injustificable
recientemente. También se solicita junto con otras pruebas para
proporcionar información si se presentan síntomas sugestivos de
alteración hepática o renal, o si se sospecha la existencia de un trastorno
de la médula ósea o para investigar la causa de una retención anormal
de líquido en los tejidos (edema).
Los resultados de las proteínas totales se suelen interpretar junto con los
de otras pruebas y pueden porporcionar al médico información acerca
del estado general del individuo en relación a la nutrición y/o a la
existencia de trastornos que afecten a órganos vitales como el hígado y
el riñón. Si los niveles de proteínas totales están alterados, será necesario
realizar otras pruebas para alcanzar el diagnóstico.Unos niveles bajos de
proteínas pueden sugerir una enfermedad hepática, una enfermedad
renal o un trastorno en el que las proteínas no se digieren o no se absorben
adecuadamente a nivel intestinal. Pueden observarse concentraciones
disminuidas de proteínas en malnutrición severa y en trastornos que
causan malabsorción, como enfermedad celíaca o enfermedad
inflamatoria intestinal Pueden observarse niveles elevados de proteínas
totales en procesos inflamatorios o infecciosos crónicos como hepatitis
víricas o infección por el VIH. Niveles elevados de proteínas también
pueden asociarse a trastornos de la médula ósea como el mieloma
múltiple
Cuestionario :
1.- Con los datos obtenidos en los experimentos, realizar la
valoración nutricional de dicha persona sabiendo que es
varón, pesa 60 Kg, su talla es 1,56 m y su volumen urinario en
24 horas fue de 1000 ml.
Hombre:
- Peso: 60 kg
- Talla: 1.56 m
- C x U: 1000 ml
 Relación C x U 24h/Talla
1000
= 641.02
1.56
DESNUTRICIÓN
 Relación Peso/Talla
60
= 38.46
1.56
NORMAL
 Proteínas totales
0.573
× 6 = 7.67
0.448
NORMAL
 Albúmina
1.948
× 5 = 5.32
1.83
NORMAL
2.- ¿Cómo hubiera sido la valoración nutricional en el caso que

la persona hubiera sido mujer?
Mujer:
- Peso: 60 kg
- Talla: 1.56 m
- C x U: 1000 ml
 Relación C x U 24h/Talla
1000
= 641.02
1.56
BAJO
 Relación Peso/Talla
60
= 38.46
1.56
ELEVADO
 Proteínas totales
0.573
× 6 = 7.67
0.448
NORMAL
 Albúmina
1.948
× 5 = 5.32
1.83
NORMAL
3.- Mencione las características generales de las proteínas y su

clasificación.
Las proteínas deben su importancia biológica al número de funciones

que desempeñan, entre las que podemos citar:
A. Catalíticas; la práctica totalidad de las regiones biológicas están

catalizadas por enzimas específicas, de las que existen unas 2.000
distintas en cada célula. Todas ellas son proteínas.
B. Reguladoras; hormonas peptídicas como la insulina (que regula el
metabolismo de la glucosa), la hormona del crecimiento o
paratiroidea (que regula el metabolismo del calcio y del fósforo).
C. Estructurales; forman parte de las membranas celulares, los
microtúbulos, cilios, etc. Son parte importante de las uñas, piel,
etc.
D. Transporte; como la hemoglobina que transporta oxígeno por la
sangre.
E. Acumulación de sustancias; como la ovoalbúmina de la clara del
huevo y la caseína de la leche, que actúan como proteínas de
reserva.
F. Movimiento; la contracción muscular se debe a la interacción de
filamentos proteicos de actina y miosina.
G. Defensa inmunitaria; las inmunoglobulinas dan lugar a los
anticuerpos, que se forma como respuesta a la presencia de
sustancias extrañas o antígenos, a los que aglutinan o precipitan.
Las proteínas pueden clasificarse en tres grupos, en función de su

forma y su solubilidad.
 Proteínas fibrosas: las proteínas fibrosas tienen una estructura
alargada, formada por largos filamentos de proteínas, de forma
cilíndrica. No son solubles en agua. Un ejemplo de proteína fibrosa
es el colágeno.
 Proteínas globulares: estas proteínas tienen una naturaleza más o
menos esférica. Debido a su distribución de aminoácidos
(hidrófobo en su interior e hidrófilo en su exterior) que son muy

solubles en las soluciones acuosas. La mioglobina es un claro
ejemplo de las proteínas globulares. Estas se clasifican en:
 Hélice alfa: esta estructura se desarrolla en forma de espiral

sobre sí misma debido a los giros producidos alrededor del
carbono beta de cada aminoácido. La mioglobina es un
claro ejemplo de proteína de hélice alfa.
 Hoja plegada beta: cuando la cadena principal se estira al
máximo, se adopta una configuración conocida como
cadena beta. La tenascina es un ejemplo de las proteínas
hoja plegada beta.
 Alfa/beta: Las proteínas que contienen una estructura
secundaria que alterna la hélice alfa y la hoja plegada beta.
Un ejemplo de proteína alfa/beta es la triosa fosfato
isomerasa. Esta estructura es conocida como un barril TIM. La
helicoidal alterna y los segmentos de hoja plegada beta
forman una estructura de barril cerrado.
 Alfa + Beta: En estas proteínas, la hélice alfa y la hoja plegada
beta se producen en regiones independientes de la molécula.
La ribonucleasa A es un ejemplo de proteína alfa + beta
 Proteínas de membrana: son proteínas que se encuentran en

asociación con las membranas lipídicas. Esas proteínas de
membrana que están embebidas en la bicapa lipídica, poseen
grandes aminoácidos hidrófobos que interactúan con el entorno
no polar de la bicapa interior. Las proteínas de membrana no son
solubles en soluciones acuosas. Un ejemplo de proteína de
membrana es la rodopsina. Debes tener en cuenta que la
rodopsina es una proteína integral de membrana y se encuentra
incrustada en la bicapa. La membrana lipídica no se muestra en
la estructura presentada.
4.- ¿Qué son las globulinas y cuáles son sus clases?

Las globulinas son un grupo de proteínas insolubles en agua que se
encuentran en todos los animales y vegetales.
Entre las globulinas más importantes destacan las:
 Seroglobulinas (de la sangre).

 Las lactoglobulinas (de la leche).
 Las ovoglobulinas (del huevo).
 La legumina.
 El fibrinógeno.
 Los anticuerpos (gamma-globulinas).
5.- Describa los métodos de dosaje tanto químicos como

enzimáticos para proteínas totales, albúmina, globulina y
creatinina.
Los métodos para medir la concentración de proteínas totales (PT)

pueden clasificarse en:
1. Físicos:
 Absorbancia del enlace peptídico a 190 nm: se basa en la

propiedad que tiene el enlace peptídico de absorber a esa
longitud de onda.
 Absorbancia de los aminoácidos aromáticos a 280 nm: su principal
limitación es que no todas las proteínas tienen la misma proporción
de estos aminoácidos, lo que le resta exactitud.
 Refractometría: método de elección, pero hoy en día en la
práctica clínica se está dejando de usar.
2. Químicos:
 Reacción de Kjeldahl: considerado históricamente como el
método referencia.
 Método de Lowry: se basa en la reducción del reactivo de Folin-

Ciocalteau provocada por el complejo unión peptídico-Cu2+ en
medio alcalino con la participación de restos fenólicos (tirosilos).
 Reacción de Biuret: se fundamenta en la formación de un
complejo, en medio alcalino, entre el Cu2+ y los enlaces
peptídicos (absorción a 540 nm). En la práctica clínica, es una de
las metodologías más usada para el dosaje de PT.
 Métodos turbidimétricos (precipitación con ácido tricloroacético-
TCA o sulfosalicílico)
 Método de Bradford
Método de Biuret
 Se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+y

los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico.
1Cu2+seacompleja con 4 NH. La intensidad de coloración es
directamente proporción a la cantidad de proteínas (enlaces
peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que
pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy
baja y sólo se recomienda para la cuantificación de proteínas en
preparados muy concentrados (por ejemplo en suero).
Método de Bradford
 Se basa en la unión de un colorante, Comassie Blue G-250

(también Serva Blue) a las proteínas. El colorante, en solución
ácida, existe en dos formas una azul y otra naranja. Las proteínas
se unen a la forma azul para formar un complejo proteína-
colorante con un coeficiente de extinción mayor que el colorante
libre. Este método es sensible (1-15 µg), simple, rápido, barato y
pocas sustancias interfieren en su determinación. Entre las
sustancias que interfieren están los detergentes y las soluciones
básicas.

Bioquimica 11 Masa Proteica

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Bioquimica 11 Masa Proteica

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

 Aplicar adecuadamente los reactivos que intervienen en la

 Realizar y verificar correctamente observaciones que actúen en

EVALUACION DE LA MASA PROTEICA VICERAL

La manera más adecuada de abordar la evaluación del estudio del

La primera etapa abordable de

• Absorbancia de los aminoácidos aromáticos a 280 nm: su

• Refractometría: método de elección, pero hoy en día en la práctica

En el Trabajo Práctico se determinará la concentración de

La determinación del contenido proteico de una muestra requiere la

Protocolo ejemplo de determinación de proteínas porel

automáticamente esta lectura es “restada” por el fotocolorímetro a

Con las absorbancias de los tubos testigos obtenidas en el

En el ejemplo, los tubos conteniendo testigos 4 y 5muestran una desviación de

Para determinar la concentración de proteínas en la muestra (X), se interpolan

Bases clínicas de muestra :

o Un aumento o disminución de esta banda se debe a un aumento

Proteína fijadora de tiroxina: une T3 (triyodotironina) y T4 (tiroxina).

o Tanto la transcortina como la proteína fijadora detirosina

o Su función es captar hemoglobina (Hb): La formación del

o Es un reactante de fase aguda positivo, (aumenta en estados

Fundamentos del método:

Blanco Standard Muestra

Las proteínas totales se solicitan frecuentemente en una analítica

2.- ¿Cómo hubiera sido la valoración nutricional en el caso que

3.- Mencione las características generales de las proteínas y su

Las proteínas deben su importancia biológica al número de funciones

A. Catalíticas; la práctica totalidad de las regiones biológicas están

Las proteínas pueden clasificarse en tres grupos, en función de su

(hidrófobo en su interior e hidrófilo en su exterior) que son muy

 Hélice alfa: esta estructura se desarrolla en forma de espiral

 Proteínas de membrana: son proteínas que se encuentran en

4.- ¿Qué son las globulinas y cuáles son sus clases?

 Seroglobulinas (de la sangre).

5.- Describa los métodos de dosaje tanto químicos como

Los métodos para medir la concentración de proteínas totales (PT)

 Absorbancia del enlace peptídico a 190 nm: se basa en la

 Método de Lowry: se basa en la reducción del reactivo de Folin-

 Se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+y

 Se basa en la unión de un colorante, Comassie Blue G-250

Anda mungkin juga menyukai