Anda di halaman 1dari 6

Mapping Jurnal Internasional

Chromatographic Characterization and GC-MS Evaluation of the


Judul Jurnal Bioactive Constituents with Antimicrobial Potential from the
Pigmented Ink of Loligo duvauceli
Kelompok 1
Fegita Hasania (821417036)
Maimun Datau (821417028)
Nama
Nur Rahma Dwi Cahya (821417047)
Kelompok
Rahmatia S Kaluku (821417013)
Yulan Suleman (821417005)
Zulkarnain marhaba (821417008)
Asisten
Abdullah Walangadi
Pembimbing
Smiline Girija, Veeramuthu Duraipandiyan, Pandi Suba
Penulis dan
Kuppusamy, Hariprasad Gajendran, and Raghuraman Rajagopal.
Halaman
Hal : 1-6
Penerbit Hindawi Publishing Corporation
Pendahuluan Karakterisasi konstituen bioaktif dari tinta berpigmen hitam
telah menghasilkan beberapa penjelasan kimia. Tinta dari
moluska telah menciptakan minat yang besar terhadap molekul
bioaktifnya dengan aktivitas antibakteri, antitumor,
antileukemik, dan antivirus yang menjanjikan. Tinta dikeluarkan
dari kelenjar tinta cumi-cumi Loligo duvauceli melalui saluran
tinta untuk melepaskan diri dari predatornya. Analisis
kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) dari Loligo sp. tinta
telah mengukur komponen kimianya sebagai L-DOPA dan
Dopamin.
Pigmen hitam ditemukan melanin dan proses melanogenesis
dijelaskan dalam kelenjar tinta Sepia sp. Tinta adalah campuran
kompleks organel, premelanosom, melanosom, butiran, bahan
protein (enzim), glukosamin, dan fosfolipid dalam suspensi.
Pada saat ekstraksi, campuran masih aktif yang membuat tinta
cocok untuk studi penelitian. Kelenjar tinta juga telah terbukti
mengandung berbagai enzim melanogenik seperti tirosinase,
tautomerase dopachrome, dan peroksidase. Tinta juga memiliki
berbagai peran utama dalam dunia pengobatan alternatif dan
telah berbagai aplikasi terapeutik. Meskipun ada laporan-laporan
ini, tidak ada minat yang cukup besar terhadap prosedur
pemurnian tinta L. duvauceli. Isyarat kimia potensial dalam tinta
cumi-cumi telah diidentifikasi dan diukur menggunakan fase
balik, tinggi kinerja, kromatografi cair (RP-HPLC). Sementara
itu biomolekul antimikroba aktif belum dikarakterisasi. Jadi
penelitian ini bertujuan untuk mengeksplorasi bioconstituents
aktif dari tinta dengan kromatografi kolom silika gel dan analisis
kromatografi gas-spektroskopi massa (GC-MS) untuk konstituen
antimikroba.
Metode 2.1. Persiapan Ekstrak Mentah.
Pengumpulan tinta dan ekstraksi pelarut kasar dari
konstituen dari tinta L. duvauceli dilakukan dengan metode yang
diikuti sebelumnya. Ekstrak kasar menjadi sasaran pemeriksaan
sterilitas setelah mengekspos ekstrak di bawah sinar UV selama
2 jam. 5 mg masing-masing ekstrak dicampur dalam kaldu
nutrisi steril dan diinkubasi selama 2 jam yang dilapisi ke agar
nutrien untuk diperiksa sterilitas ekstrak. Ekstrak disimpan pada
suhu 4∘C dalam botol kaca coklat. Aktivitas antimikroba dari
ekstrak kasar dilakukan dengan metode difusi sumur agar
konvensional. Ekstrak n-heksana telah mencetak dalam laporan
kami sebelumnya sifat antimikroba yang tinggi terhadap bakteri
klinis dan isolat jamur. Dengan demikian ekstrak n-heksana
dipilih untuk fraksinasi lebih lanjut dengan kromatografi kolom
silika gel.
2.2. Fraksinasi Kromatografi Ekstrak Heksana.
Pemisahan biomolekul aktif dari ekstrak n-heksana mentah
dilakukan dengan kromatografi kolom silika gel. Secara singkat,
10 gram ekstrak n-heksana mentah menjadi sasaran fraksinasi
menggunakan kolom gel silika. Ekstrak kasar diserap ke silika
gel (100-200 mesh, SISCO) dan dikromatografi menggunakan
sistem pelarut gradien langkah dari polaritas rendah ke tinggi.
Sistem pelarut awal adalah 100% n-heksana dan selanjutnya
polaritas meningkat dengan memvariasikan konsentrasi pelarut
dengan etil asetat (EtOAc). Gradien pelarut untuk kromatogram
adalah 100% heksana, 20: 80 EtOAc / Hex, 40: 60 EtOAc / Hex,
60: 40 EtOAc / Hex, 80: 20 EtOAc / Hex, 100% EtOAc, 100%
dietil eter, 20: 80 Etanol / EtOAc, 40: 60 Etanol / EtOAc, 60: 40
Etanol / EtOAc, 80: 20 Etanol / EtOAc, 100% Etanol, 20: 80
Air / EtOAc, 50: 50 Air / EtOAc, dan 100% Air. Untuk memilih
fase gerak terbaik untuk mengelusi fraksi, 5 �L dari setiap fraksi
terelusi terlihat pada TLC dan dijalankan dengan kombinasi
sistem pelarut. Dengan cara ini dipilih sistem pelarut yang
menunjukkan pemisahan senyawa yang paling menguntungkan.
Fraksi yang menunjukkan elusi senyawa serupa dikumpulkan
dan dipekatkan di bawah vakum di bawah 40∘C menggunakan
Heidolph, VE-11 Rotaevaporator selama 30 menit. Analisis
kromatografi lapis tipis kinerja tinggi (HPTLC) juga dilakukan
untuk fraksi aktif. Fraksi gabungan disimpan di bawah aliran
udara untuk memudahkan pengeringan. Fraksi terkonsentrasi
diperoleh dan dikenai pemeriksaan sterilitas sebagaimana
disebutkan sebelumnya. Fraksi aktif disimpan pada suhu 4∘C
dalam botol coklat kaca steril sampai digunakan untuk studi
bioaktivitas.
Hasil Ekstrak n-heksana yang mencetak aktivitas antimikroba yang
Penelitian tinggi pada fraksinasi kolom di atas silika gel menghasilkan total
8 fraksi. Elusi dengan Hex / EtOAc dalam rasio 4: 1
menghasilkan fraksi aktif. Fraksi aktif menjadi sasaran analisis
TLC, HPTLC, dan GC-MS. Profil TLC menunjukkan satu titik
dengan faktor retensi 0,76. Pelat yang sama menjadi sasaran
analisis HPTLC, dengan panjang gelombang pemindaian 254
nm. Kromatogram menunjukkan puncak tunggal yang diperoleh
sebagai data spektrum kalibrasi dengan tingkat kebisingan pada
0,072 mV, perangkat lunak CAMAG, dan dipindai dengan
SCANNER II [951012] dengan normalisasi area 83,91% yang
menunjukkan ekstraksi maksimum dengan Hex / EtOAc.
Bioassay antimikroba mengungkapkan bahwa fraksi aktif
memiliki aktivitas antibakteri yang tinggi terhadap organisme
uji. Ukuran zona diukur sebagai 18 mm untuk E. coli dan K.
pneumoniae, 16 mm untuk S. aureus, 23 mm untuk C. albicans,
dan 18 mm untuk L. acidophilus. Nilai MBC ditentukan sebagai
rata-rata 2,5 mg / mL untuk E. coli, K. pneumoniae, dan C.
albicans, 5 mg / mL untuk S. aureus dan L. acidophilus. Metode
papan checker mikroba (Gambar 3) menghasilkan tidak adanya
pertumbuhan di tempat yang diinokulasi dengan nilai MBC yang
ditentukan. Pengenceran sebelumnya yang menunjukkan
penurunan nyata dalam jumlah koloni ditentukan sebagai MIC
dan disimpulkan sebagai 1,25 mg / mL untuk E. coli, K.
pneumoniae, dan C. albicans dan 2,5 mg / mL untuk S. aureus
dan L acidophilus. Fraksi bioaktif pada analisis GC-MS
mengungkapkan kromatogram yang menunjukkan sembilan
puncak dengan bis (2-etilheksil) phthalate [BEHP] yang
memiliki persentase normalisasi area tertinggi (91%). Spektrum
massa ditemukan superimposable (> 93) dengan senyawa otentik
dari perpustakaan GC-MS.
Berdasarkan pada GC-MS analisis fraksi aktif secara struktural
dijelaskan sebagai bis (2-etilheksil) ftalat. Kromatogram juga
menunjukkan adanya senyawa minor lainnya seperti oktadekana
(0,29%), naftalena (0,13%), tetradekana (0,41%), pentadekana
(0,58%), heksadekana (1,02%), heptadekana (0,53%), dan
kolesterol (5,07%). Laporan analisis mengungkapkan adanya
turunan ftalat dan minyak atsiri minor lainnya yang mudah
menguap sebagai zat antimikroba yang kuat yang diekstraksi dari
tinta cumi-cumi.
Kesimpulan Penelitian ini telah menyarankan keberadaan biokonstituen
antimikroba dalam tinta cumi dengan studi fraksinasi kolom.
Analisis GC-MS juga membantu evaluasi senyawa utama dan
minor yang ada di dalamnya melalui data spektrum massanya.
Studi ini dengan demikian menyimpulkan efek sinergis dari
berbagai senyawa dalam tinta cumi terhadap sifat antimikroba
yang kuat. Senyawa terapeutik baru dari sumber laut baru seperti
tinta cumi akan banyak berguna dalam memberantas patogen
mikroba dan itu pasti akan membantu dalam kontrol dan
munculnya jenis yang resistan terhadap obat.
Chromatographic Characterization and GC-MS Evaluation
of the Bioactive Constituents with Antimicrobial Potential from
the Pigmented Ink of Loligo duvauceli merupakan jurnal yang
membahas tentang bagaimana cara fraksinasi dari tinta cumi-
cumi yang dilakukan dengan menggunakan metode kromatografi
Keterkaitan kolom (KKG) dengan pelarut 100% n-heksana dan selanjutnya
jurnal dengan dengan memvariasikan konsentrasi pelarut dengan etil asetat
praktikum (EtOAc). Keterkaitan dengan praktikum yang akan dilakukan
yaitu pada praktikum dilakukan juga metode fraksinasi untuk
sampel biota laut menggunakan metode yang sama dan untuk
melihat apakah hasil yang akan didapatkan dalam praktikum
sama dengan apa yang didapatkan dalam penelitian pada jurnal
tersebut.
Paraf Asisten
Pembimbing