Binder1 PDF

ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
S K R IP S I :
M IMRON
PENETAPAN KADAR STEROID PADA DAUN

TANAMAN SOLANUM WRIGHTII BENTH
DALAM BERBAGAI INTERVAL W AKTU
M l L l k
PFkKl s r * k • •
UNIVERS1TAS A IR LA N G G A ’
SURA \
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA

SURABAYA
1991
SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

PENETAPAN KADAR STEROID

PADA DAUN TANAMAN SOLANUM WRIGHTII BENTH
DALAM BERBAGAI INTERVAL WAKTU
SKRIPSI
DIBUAT UNTUK MEMENUHI SYARAT MENCAPAI GELAR
SARJANA FARMASI PADA FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS AIRLANGGA
1991
o l eh
M. IMRON
05851075?
D isetujui oleh pembimbing

KATA P*^ GANTAR
Dengan memanjatkan p u ji syukur kehadirat Allah SWT

atas rahmat.dan hidayahNya yang telah dianugerahkan se-
hingga p en elitia n dan penulisan naskah sk rip si i n i , seba-
gai syarat untuk mencapai g e la r Sarjana Farmasi pada Fa-
kultas Farmasi u niversitas Airlangga dapat kami s e le s a i-
kan.
P en elitia n yang kami lakukan masih sangat terbatas
mengingat kemampuan kami sen d iri dan f a s i l i t a s yang ada.
Namun harapan kami semoga dari p en elitia n yang sangat se-
derhana i n i , membawa manfaat bagi kepentingan masyarakat
luas pada umumnya dan Ilmu Kefarmasian di Indonesia pada
khususnya.
Untuk it u pada kesempatan i n i kami sampaikan terima
kasih yang setulus-tulusnya kepada ;
- Bapak DR. Noor Cholies Z. dan Bapak DR. Gunawan Indra-
yanto yang telah meluangkan waktunya untuk membimbing
dengan penuh kesabaran dan kesungguhan h a ti serta membe
rikan saran, pengarahan dan bantuan m oril maupun mate-
r i i l sehingga dapat tereelesaikan tugas akhir i n i .
- Ketua jurusan B io lo g i Farmasi dan Kepala Laboratorium
Fitokomia, yang telah memberikan f a s i l i t a s untuk keper-
luan p e n e litia n .
- Kepala Kebun Raya Cabang purwodadi Pasuruan yang telah
memberikan bantuan tanaman solanum w r ig h tii Benth seba-
gai bahan p e n e litia n .

- Bapak DR. M. Zainuadin, Kepala Laboratoriurn Instrumen

yang telah menyediakan f a s i l i t a s selarna p e n e litia n .
- Ayah, ibu serta saudaraku, yang telah memberikan dukun£
an m oril maupun m a te r iil selama menyelesaikan pendidik-
an.
- Rekan-rekan mahasiswa serta semua pihak yang tidak da-
pat saya sebutkan eatu persatu, yang telah memberikan
bantuan dan dorongan eehingga tugas akhir saya i n i da-
pat terselesaikan .
Semoga amal balk yang telah diberikan kepada kami
akan mendapatkan balasan yang b e rlip a t dari Allah SWT.
Aniien.
Surabaya, Desember 1990
Penyusun
ii

DAFTAR IS I
Hal aman
KATA PENGANTAR ................................................................. i
DAFTAR IS I ........................................................................ iii
DAFTAR GAMBAR .................................................................. v ii
DAFTAR TABEL.................................................................... xi
DAFTAR LAMPI RAN ...............................................................x i i i
BAB I . PENDAHULUAN . . . . . .............................................. 1
BAB I I . TINJAUAN PUSTAKA .............................................. 6
1. Tinjauan umum tanaman Solanum . ............... 6
2. Solanum w rig h tii Benth .............................. 6
3. Steroid ......................................................... 7
3*1• Tinjauan tentang steroid ............. . 7
3*2* Biosintesa s t e r o i d ......... •••••••••• 8
3*3. Cara penetapan kadar stero id ......... 9
Solasodina • . . . . ........................................ 10
if.1. S ifa t fis ik a - kimia solasodina . . . 10
4*2. Biosintesa s o la s o d in a ............... .. 11
5. 'Tinjauan tentang s te r o l ............................ 11
6 . K lo r o fil ....................................................... 15
6. 1 . Ti-njauan tentang k lo r o f il .• • • • • • • • 15
6.2. Cara penetapan kadar k l o r o f il ........ 16
7. Kromatografi Lapisan Tipis ...................... 17
8 . Tinjauan tentang Densitometri . . . . . . . . . . 19
8.1. Analisa k u a lit a t if dengan Densito
metri ................................... 21
iii

Halaman
8.2. Analisa k u a n tita tif dengan Densi -
tometri .............................................. 21
BAB I I I . BAHAN, ALAT DAN METODE KERJA ...................... .....23
1. Banan ..................................................... ...
1.1. Bahan p en elitia n ............... ............. .....23
1.2. Banan kiuiia . . . . . ...............23
2. A la t-a la t ............... * .............. , ............. 23
3. Cara kerja ...................... . . . . . .................. 24
3.1. Penyiapan bahan penelitian 24
3 .2 . Cara ekstraksi ......................................24
3 .3 . Penetapan susut pengei*ingan ...............25
3 . 4 . penetapan kadar k l o r o f il ............... .....26
3.5# U ji K u a lita tif dengan Kromatografi
Lapisan H p is ...................... 26
3 .6 . Cara penetapan kadar s te r o l to ta l
dengan Densitometri . * .................. , 2?
3 *6 . 1 . pembuatan larutan baku ko
le s t e r o l 1000 ppm ........... 27
3.6*2. Penyiapan larutan sampel ..
3 .b .5 . Penentuan panjang gelombang
maksimum K olesterol dengan
Densitometri ........................ 28
3.6 .4 . Penetapan kadar s te r o l to
ta l dengan Densitometri . . . 28
3*7. Cara penetapan K a d a r solasodina
dengan Densitometri ...................... . 28
iv

Halaman
3 * 7 * 1 • pembuatan larutan baku so
lasodina 1000 ppn 28
3 * 7 *2 . penyiapan larutan sampel 29
3 * 7 *3 * penentuan panjang gelombang
maksimum solasodina dengan
Densitometri ................. . 29
3*7*4* penetapan kadar . solasodina
dengan Densitometri ............ 29
3*8* Analisa data .........................• * * . . * . 29
BAB XV. HASIL PiSNELITIAN....................* ......................... 32
1• H asil penyiapan bahan p en elitia n (penim
bangan dan penetapan susut pengeringan )
daun tanaman solanum w r ig h tii Benth da
lam berbagai in te rv a l waktu ..................... 32
2. H asil pemeriksaan fase . petroleum eter
dengan .Kromatografi .Lapisan T ip is ........... . 33
3* H aeil pemeriksaan fase kloroform dengan
Kromatografi Lapisan T ip is ...................... 3*f
H asil penetapan kadar s t e r o l to ta l de
ngan Densitometri ....................................... 35
Jf«1 . penentuan panjang gelombang maksi-
mum .................................. 35
4*2. Ha6i l penetapan kadar s te r o l to ta l
sampel fase petroleum e te r daun tua
Solanum w rig h tii Benth, pengambi -
lan I .................................................... 36
4*3* H asil penetapan kadar s te r o l to ta l
sampel fase petroleum e te r daun
muda Solanum w rig h tii Benth, pengam
bilan I ................................................

Halaman
4«4* Hasil penetapan kadar s te r o l to ta l
sampel fase petroleum eter daun tua
Solanum w rig h tii Benth, pengambi
lan XI .................................................. 53
4.5* Hasil penetapan kadar s te r o l to ta l
sampel fase petroleum e ter daun
muda Solanum w rig h tii Benth, Pengam
bilan I I .............................................. 60
5. H asil penetapan kadar k l o r o f i l to ta l da
un Solanum w rig h tii Benth dalam in te rv a l
waktu yang berbeda secara spektrofoto -
metri ........................................................... 67
6 . Pengolahan data . . . . . ...................... ................69
BAB V. PSMBAHASAN............................................................ 78
BAB V I. K£SIMPULAN ....................................................... .....8a
BAB V II. SARAH-SARAN..................................................... .... 83
EINGKASAN .......................................................................... .... 84
DAPTAR PUSTAKA ..................................................................... 67
LAHPIRAH ....................................... '........................................ 91
Vi

DAFTAR GAMBAR
Gambar ; Halaman
\• Daun dan Bunga dari tanaman Solanum w rig h tii
Benth ........... . 30
2. Tanaman Solanum w rig h tii Benth ............................ 31
3* H asil u ji Kromatografi Lapisan T ip is fase petro
leum eter daun solanum w rig h tii Benth dengan
pembanding k o le s te ro l ....................................... 33
if. H asil u ji Kromatografi Lapisan Tip is fase kloro
form daun Solanum w rig h tii Benth dengan pemban
ding solasodina ....................................................... j>L+
5* Hasil penentuan panjang gelombang maksimum stan

dart k o le s te ro l yang diukur pada panjang gelom
bang 370 nm sampai 700 nm secara D ensitom etri.. >5
6 * Kurva kromatogram dan luas area kromatogram ha
s i l pengukuran sampel fase petroleum eter daun
tua Solanum w rig h tii Benth, pengambilan I , pe-
ngusuran 1 ...................................................... . 37
7. Kurva baku larutan stanaart k o le s te ro l (ug) te r
hadap luas area pada pengukuran I penetapan ka
dar sampel fase petroleum e te r daun tua Solanum
w r ig h tii B e n th ...................... .................................. 36
8 . Kurva kromatogram dan luas area kromatogram ha
s i l pengukuran sampel fase petroleum e te r daun
tua Solanum w rig h tii Benth, Pengambilan I , pe
ngukuran XI .......................... ................................... ifO
9* Kurva baku larutan standart k o le s te ro l (ug) ter

hadap luas area pada pengukuran II penetapan ka
w rig h tii B e n th ......... .............................................. if!
v ii

Hal aman
10. Kurva kromatogram dan luas area kromatogram ha
tua Solanum w rig h tii Benth, Pengambilan I , Pe
ngukuran i l l ............. . ..................... >». ........... •. • 43
11. Kurva baku larutan standart k o le s te ro l (ug) ter
hadap luas area pada pengukuran I I I ■ penetapan
kadar sampel fase petroleum eter daun tua Sola
num w rig h tii B e n th .............................................. . 44
!£• Kurva kromatogram dan luas area krouatograra ha
muda Solanum w rig h tii Benth, Pengambilan I , pe
ngukuran I ............................... .......................... 47
dar sampel fase petroleum e ter daun muda Sola -
num w rig h tii B e n th .......................................... . 48
14* Kurva kromatogram dan luas area kroiaatogram ha
muda solanum w rig h tii Benth, PengamDilan I , pe
ngukuran I I .................... ......................................... 50
hadap luas area pada Pengukuran I I penetapan ka
dar sampel fase petroleum, e te r daun muda sola-
flfrm w rig h tii Henth .............................................. , . 31
16. Kurva kromatogram dan luas area kromatogram ha
tua Solanum w rig h tii Benth, Pengambilan I I , pe
ngukuran I ................................................................ 3^
17. Kurva baku larutan standart k o lestero l (ug) ter
w rig h tii Benth ......................................................... 55
v iii

Hal aman
18 . K u rv a k ro m a to g ra m dan lu a s a re a k ro m a to g ra m ha*-
e il p e n g u k u ra n sam pel fa se p e t r o le u m e te r daun
tu a S o la n u m w r ig h t ii B e n th , P e n g a m b ila n I I , Pe
n g u k u ra n I I ...................................................................................................................... 37
19 - K u rv a baku la r u t a n sta n d a rt K o le s t e r o l (u ^ ) te r
hadap lu a s a re a pada P e n g u k u ra n I I p e n e ta p a n ka
d ar sam pel fa se p e t r o le u m e te r daun tu a S o la n u m
w r iK h t ii B e n t h ............................................................................................................ .
2 0 . K u rv a k ro m a to g ra m dan lu a s a re a k ro m a to g ra m h a -
s il p e n g u k u ra n sam pel fa se p e t r o le u m e te r daun
m uda S o la n u m w r ia h t ii B e n th , p e n g a m b ila n I I , pe
n g u k u ra n I ..................................................................................................... 61
2 1 . K u rv a baku la r u t a n sta n d a rt k o le s t e r o l (u g ) te r
hadap lu a s a re a pada P e n g u k u ra n I p e n e ta p a n k a -
d ar sam p el fa se p e t r o le u m e te r daun m uda S o la
num w r ig h t ii B e n th ................................... . . . . . . . .................... . . . . 62
2 2 . K u rv a k r o a ia t o g r a m dan lu a s a re a k ro m a to g ra m h a -
s il p e n g u k u ra n sam pel fa se p e t r o le u m e te r daun
m uda S o la n u m w r iK h t ii B e n th , P e n g a m o ila n I I , Pe,
n g u k u ra n I I .................................................................. * ................................................ Sk
2 3 . K u rv a baku la r u t a n sta n d a rt k o le s t e r o l (u g ) te r
hadap lu a s a re a pada P e n g u k u ra n I I p e n e ta p a n ka
dar sam p el fa se p e t r o le u m e te r daun m uda s o la
num w r iR h t ii Ben th .............................................., , , .................... ......... • , 65
Zk* K u rv a w a k tu p e n g a m b ila n ( p u k u l) te rh a d a p kad ar
r a t a -r a t a s te ro l to ta l (m g /g ) d a ri sam pel daun
tu a ta n a m a n s o la n u m w r ig h t ii B e n th , p e n g a m b ila n
I 70
2 5 . K u rv a w a k tu p e n g a m b ila n ( p u k u l) te rh a d a p kad ar
r a t a -r a t a s te ro l to ta l (m g /g ) d a ri sam pel daun
tu a ta n a m a n S o la n u m w r ig h t ii B e n th , p e n g a m b ila n
II .......................... 71
ix

Halanan
26. Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap kadar
ra ta -ra ta s te ro l to ta l (mg/g) dari sampel daun
muda tanamc^. solanum w rig h tii Benth, pengambi
lan X .......................................................................... 72
27. Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap kadar
rata-rata s te ro l to ta l (mg/g) dari sampel daun
muda tanaman Solanum w rig h tii Benth, Pengambi
lan I I ........................................................................ 73
28. Histogram kadar ra ta -ra ta s te r o l to ta l dan. ka
dar ra ta -ra ta k l o r o f il to ta l dalam berbagai in
terva l waktu dari sampel daun tua tanaman Sola-
nua w riK h til Benth, Pengambilan I ..................* 74
29• Histogram kadar ra ta -ra ta s te r o l to ta l dan ka
dar ra ta -ra ta k l o r o f i l to ta l dalam berbagai in
te rv a l waktu dari sampel daun tua tanaman Sola
num w ria h tii Benth, Pengamoilan I I ..................... 75
30. Histogram kadar ra ta -ra ta s te r o l to ta l dan ka
dar ra ta -ra ta k l o r o f il to ta l dalam berbagai in
te rv a l waktu dari sampel daun muda tanaman So
lanum w rig h tii Benth, Pengambilan I ................... 76
31• Histogram kadar ra ta-rata s te r o l to ta l dan ka
dar ra ta-rata k l o r o f i l to ta l dalam oeroagai in
te rv a l waktu dari sampel daun muda tanaman So-
1anurn w rig h tii Benth, Pengambilan I I ................. 77
x.

DAFTAR TAB2I
Tabel : Halaman
1, Hasil penimbangan serbuk. dan penetapan susut pe
ngeringan daun tanaman Solanum w rig h tii 3enth da
lam berbagai in te rv a l waktu pengambilan ............. 32
2. H asil penetapan kadar s te r o l to ta l sampel fase
petroleum e te r daun tua Solanum w riK h tii Benth,
Pengambilan X pengukuran I dalam in te r v a l waktu
yang berbeda secara Densitometri .......................... 39
3* H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase
petroleum e te r daun tua Solanum w rig h tii Benth,
pengambilan X pengukuran I X dalam in te r v a l waktu
yang berbeda secara Densitometri .................... ^2
if. H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase
petroleum e te r daun tua Solanum w riK htii Benth,
Pengambilan I pengukuran m dalam .interval wak
tu yang oerbeda secara Densi tometri ..................... 1+5
5. H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase

petroleum e ter daun muda Solanum w riK h tii Benth,
Pengambilan I pengukuran I dalam in te rv a l waktu
yang berbeda secara Densitometri .......................... i+y
6 . H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase

petroleum e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth,
Pengambilan I pengukuran XX dalam in te r v a l waktu
yang berbeda secara Densitometri .......................... 52
Pengambilan I I pengukuran I dalam in te r v a l waktu
yang berbeda secara Densitometri .......................... %

pengambilan I I pengukuran I I dalara in te r v a l wak
tu yang berbeda secara Dentitom etri ............... . 59
xi

Halanaa
petroleum e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth
Pengambilan I I pengukuran I dalam in te r v a l wak
tu yang berbeda secara Densitometri ................. . 63
10'. E a sil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase
petroleum e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth
Pengambilan I I pengukuran I I dalam in te r v a l wak
tu yang berbeda secara Densitometri ................... 66
11. H asil penetapan kadar k l o r o f i l to ta l daun Sola-
nura... w rix h tii Benth dalam berbagai in te rv a l wak
tu yang berbeda secara spektrofotom etri, pengam
bilan I ....................................... .......................... 6?
12. H asil penetapan kadar k l o r o f i l to ta l daun Sola-
num w rig h tii Benth dalam berbagai in te r v a l wak
tu yang berbeda secara spektrofotom etri, Pengam
bilan I I ............................ ................................... 68

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiraa : Halaman
1. Skema biosintesa steroida ...................... . ............ . 91
2. Skema biosin tesa s o la s o d in a ....................... . . . . . . 92.
3* Skema ekstraksi ............................................ ..' 93
if. Contoh perbitungan kadar s te r o l ............. . . . . . . . . 9k
5 . Harga k oerisien k orela si ( r ) pada derajat keper-

cayaan 5% dan 1 % .............................. . 93
x iii

BAB. I
PlttiDAHULUAN
1 • Latar belakang masalah.

penggunaan Mormon steroid yang terus menerus me-
ningkat tahun demi tahun terutama untuk penggunaan kon
trasepsi o ra l dalam rangka program nasional keluarga be
rencana yang ditetapkan pemerintah sejak tahun 1^70 d i-
rasakan perlu usaha swasembada bahan dasar yang diperlu
kan sehingga dapat iku t serta mensukseskan program ke
luarga berencana. ( 1 )
Bahan-bahan baku untuk kontrasepsi ora l yang ber-
bentuk senyawa stero id dapat berasal dari hewan maupun
tumbuhan. Senyawa ste ro id yeing berasal dari tumbuhan da
pat berupa diosgenin, solasodina, s te ro l d ll* Sedangkan
senyawa ste ro id yang berasal dari hewan adalah k o leste
r o l, *sam eapedu. Sebagian produk-produk obat s te ro id
sekarang tergantung pada diosgenin yang d iis o la s i dari
tanaman Dioscorea s p . (2 ,3 )
Kebanyakan tanaman sebagai sumber bahan baku un
tuk kontrasepsi ora l tumbuh di daerah trop ik , hal in i
merupakan sesuatu yang menarik bagi Indonesia yang te r-
letak di daerah ik lim tropik, untuk dapat melihat pros-
pek bahan dasar hormon stero id yang tnungkin ada dan ba-
nyak tumbuh di negara i n i , (**)
Telah diketahui bahwa alkaloida yang terdapat pa-'
da tanaman solanum species mempunyai struktur molekul
dengan i n t i stero id sama halnya dengan diosgenin, misal

nya solan iarin a, tomatidina, solasodina. (4 ) Demikian

pula s te ro l yang terdapat pada tanaman mempunyai in ti
s te ro id dan diharapkan pula dapat memenuhi penyediaan
bahan dasar pembuatan hormon s te ro id . ( 5 )
Berdasarkan strukturnya stero id dapat dioagi men
ja d i dua golongan yaitu stero id dengan atom karbon ti
dak leb ih dari 21 yang diseout steroid sederhana dan
s te ro id yang memiliki atom karbon leb in dari 2 1 , m isal-
nya s te r o l, sapogenin, s te ro id a lk a lo id . ( 6 )
Telah dilakukan beberapa p en elitia n terhadap tana
man Solanum species dalam upaya untuk mengetahui kandu-
ngan solasodina. P en elitia n it u antara la in : Telek
dkk. menyatakan oahwa kadar solasodina ze r tin g g i pada
saat buah fiolanum mammofium l menjelang berwarna kuning
dan akan menurun dengan cepat setelah ouah berwarna ku
ning. (2 ) Tarigan P. telah berhasil membuat analisa
kandungan alk aloid a to ta l yang diperhicungkan sebagi so
lasodina pada buah Solanum khasianum Clark ternyata men
capai maksimum pada umur 10 minggu dan sesudahnya menu-
run pada umur 11 dan 12 minggu. (7 ) Wahjudi pada buah
Solanum w ri& htii Benth yang terdapat di Kebun Haya Ca-
bang purwodadi terdapat kandungan solasodina yang tin g-
g i pada buah dengan diameter 4»00 - 4,99 cm dan selan-
jutnya akan menurun pada diameter yang le b ih besar, d i
mana sebelumnya selama 12 minggu telah dilakukan penga-
matan terhadap bertambahnya diameter buah. ( 8 )

P en elitia n yang la in dari Handayani R. dan s u lfi

ah A* tentang percobaan induksi pembentukan solasodina
dengan meningkatkan kadar k l o r o f il pada kalus Solanum
w rig h tii Benth didapatkan kadar k l o r o f il sebanyak 0,3 -
0,5 mg/g berat kering dan kalus Solanum indicum L dida
patkan kadar k l o r o f i l 0 ,16 + 0,003 “ g/g berat kering di
laporkan tidak terd etek si adanya solasodina. (9 ,1 0 ) Se
dangkan p en elitia n lainnya terhadap kalus Solanum dulca
mara yang mengandung k l o r o iil sebanyak 0 ,1 + 0,002 ;
0 , 3 B + 0,05 ; 1,0 2 + 0,1 mg/g berat kering mengandung
solasodina 56 + 12 ; 130 + 30 ; 220 + *f0 ug/g berat ke
rin g dan kalus Solanum eleagnifolium Cav. terdapat kan-
dungan solasodina sebanyak 1,00 - 2 ,1 5 mg/g berat ke
rin g . ( 1 1 , 1 2 )
Berdasarkan laporan b a s il p en elitia n selanjutnya
pada daun Solanum species ternyata juga mengandung alka
lo id solasodina. (7 ) Sedangkan dari p en elitia n Chowdhu
ry , Prasad dan Aminuddin dilaporkan bahwa biosin tesa
a lk a lo id solasodina pada tanaman Solanum species ber-
langsung di daun, selanjutnya solasodina yang d ih a s il-
kan dipindah ke tempat penyimpanannya yaitu pada buah
atau tuber. (13)
Hasil p en elitia n Bake A. dan E ile r t U. pada kul-
tur kalus Solanum dulcamara menyatakan dalam proses bio
sintesa solasodina ternyata ada hubungan antara kadar
solasodina dengan d ife re n s ia s i s e l dan kadar k l o r o f i l .
Semakin banyak kadar k l o r o f il semakin meningkat solaso
dina yang didapatkan. ( 1 1 )

Dan dari h a sil p en elitia n Elsadig a .B. dan James

OUR. terhadap biosin tesa tomatin dilaporkan bahwa b io
sintesa tomatin berlangsung baik pada daun, akar maupun
buah. Dan berdasarkan h a sil p en elitia n dengan mengguna-
kan ra d io tra cer ternyata dari daun ditransport s te r o l
untuk selanjutnya d ib iosin tesa menjadi tomatin pada bu
ah. (14)
2. Permasalahan.
Dari h a sil p en elitia n pada kultur kalus Solanum
eleagnifolium Cav. dan kultur kalus Solanum dulcamara
dilaporkan dapat terbentuk solasodina. Akan te ta p i pada
p en elitia n yang dilakukan Handayani R. pada kultur ka-
lu s solanum w rig h tii Benth. yang berh asil aealngkatkan
kandungan k lo ro filn y a tetap tidak mampu membentuk so la
sodina. Ketidak mampuan kultur kalus Solanum w r ig h tii
Benth dalam membentuk solasodina diduga karena tidak
adanya s e l- s e l khusus tempat akumulasi sehingga solaso
dina yang terbentuk segera teru ra i.
Sedangkan menurut Chowdhury, Prasad dan Aminuddin
a lk a loid solasodina pada tanaman Solanum species d ib io
sintesa di daun, dan h a sil biosin tesa solasodina dipin-
dahkan ke buah sebagai tempat akumulasinya. Dan pada ta
naman solanum yang la in sep erti Solanum laciniatum . So
lanum nigrum solasodina yang dihasilkan juga diakumula-
s i pada daun. ( 7 ) Maka diduga mekanisme akumulasi sola
sodina pada tanaman solanum w rig h tii Benth berbeda de
ngan je n is Solanum yang la in .

Hal in i menarik untuk d i t e l i t i le b ih la n ju t ten-

tang aekanisme akumulasi pada tanaman Solanum w rig h tii
Benth yaitu h a sil biosintesa solasodina tersebut lang-
sung dipindahkan ks buah atau diakuuulasikan dahulu pa
da daun dan apakah akumulasi solasodina pada tanaman
ae-abutuhkan s e l- s e l dengan fungsi khusus sep erti pada
s e l- s e l buah. In i penting diketahui dalam rangka usaha
solasodina secara bioteknologi tanaman.
Untuk memecahkan masalah tersebut diatas dicoba
melakukan penetapan kadar senyawa ste ro id pada daun ta
naman Solanum w rig h tii Benth dalam berbagai in te r v a l
waktu tertentu yang dihubungkan dengan waktu sebelum
terjadinya fo to sin tesa , mulainya fo to sin tesa , saat ber-
langsungnya fo tosin tesa dan setelah proses fo to sin tesa .
Disamping it u ditetapkan pula kadar k l o r o f i l pada daun
untuk mengetahui kemungkinan pengaruh k lo r o f il terhadap
kadar solasodina pada daun tanaman Solanum w rig h tii
Benth..
3 . Tu.iuan p e n e litia n .
penelitian- in i bertujuan untuk mengetahui kadar
senyawa ste ro id pada daun. tanaman solanum w r ig h tii
Benth dalam in te r v a l waktu pengambilan pukul 06.00, 09.
00, 1 2 . 00, 1 5 . 00, 18.00 dan 2 1 . 00.

BAB I I
TINJAUAN PUSTAKA
1. Tin.iauan umum tanaman Solanum.

Solanum merupakan suatu marga tanaman yang besar,
jenisnya diperkirakan leb ih dari 1500 yang tersebar d i-
daerah tropik, sub tropik dari pantai sampai dataraaa
tin g g i pada ketinggian 2000 sampai 3000 m diatas permuka
an la u t, Indonesia sebagai negara tropik mempunyai ba-
nyak je n is solanum yang diperkirakan mencapai 71 jen is,.
sedangkan di Pulau Jawa diperkirakan terdapat 27 je n is .
Jenis solanum i n i banyak yang berguna dan mempunyai
n ila i ekonomi sebagai tanaman pangan atau tanaman hias,
teta p i sebagian besar jen is solanum dikenal sebagai tana
man l i a r yang mengandun^ racun yang dusebabkan oleh a l-
kaloidnya. A ikaloid yang terkandung dalam je n is solanum
tersebut terdapat dalam bentuk g lik o a lk a lo id , misalnya
solasodina, solamargina, solanina, solamarin dan lainnya
yang aglikonnya mempunyai i n t i steroid a. (15>l6)
2. Solanum w rig h tii Benth.

Solanum w rig h tii Benth merupakan pohon, daunnya
tunggal tersebar berbentuk jorong sampai bulat telu r,
berlekuk menyirip sampai bercangap menyirip dengan bulu-
bulu sep erti sikat pada permukaan daun. Lebar daun 5 -
52 cm, panjang 9-35 cm.
Tanaman Solanum w rig h tii Benth banyak terdapat duri
dan berbunga sepanjang tahun, mempunyai bunga majemuk
yang letaknya la t e r a l dan berbentuk terompet.

Warna bunga ungu dan setelah 3 sampai k hari berubah men

ja d i'p u tih kemudian gugur. Jumlah bunga pada tiap karang.
an bunga 7-10 kuntum. Bunga berkelamin dua dengan pan
jang tangkai bunga 1 -2 cm. Kelopak bunga tingginya 1 ,5 -
2 cm, mahkota bunga mempunyai tin g g i 5 -7 cm terbagi sam
pai dekat pangkal, kepala sa ri berwarna kuning.
Buahnya merupakan buah buni berbentuk bulat dengan
penampang 5-7 cm, warna buah hijau sedangkan b ijin y a ber
bentuk pipih dan berwarna cok lat. Kedudukan sistem atika
tanaman in i adalah : ( 16 )
ULvisi : Spermatophyta
Anak d iv is i : Angiospermae
Kelas : dcotyledon ae
Bangsa : Solanales
Suku ; Solanaceae
Marga ; Solanum
Jenis ; Solanum w rig h tii Benth
3. S tero id .
3 . 1 , Tin.iauan tentang s te r o id .
S teroid mencakup sejumlah besar kelompok senyawa
yang sangat penting peranannya dalam biokimia. Senyawa
steroid merupakan turunan dari perh idro- 1 , 2 -siklopen ta
nofenantrena, suatu molekul yang merupakan gabungan da
r i empat cincin, 3 dari sikloheksana dan satu dari s i-
klopentana. Keempat cincin tersebut d ib eri notasi de
ngan huruf A, B, C dan D. Atom karbon dari sistem se
nyawa stero id d ib eri nomor dari 1 sampai 17. Molekul-

8
induk jenuh dari senyawa ste ro id disebut gonan.

Strukturnya adalah sebagai berikut : (I / )
Struktur molekul in t i stero id
3.2. B iosintesa s te r o id .
Steroid alam dapat diperoleh melalui . rangkaian
transformasi kimia dari triterp en la n o stero l dan s ik lo
a rten o l. Tahap awal biosintesa ste ro id alam pada umum-
nya berasal dari asam asetat ke la n o stero l atau ke s i-
k loarten ol melalui asam mevalonat dan squalen. (18)
Biosintesa steroid dan derivatnya dapat diketahui
dengan mempelajari produksi k o le s te r o l. pembentukan ko
le s t e r o l dianggap sebagai mekanisme umum dari biosin te
sa stero id ,
Pada ion karbonium, mempunyai muatan p o s it if pada
atom C20 yang s ta b il oleh karena hilangnya dua hidrida
(17 20 ; 13 17) dan hilangnya m etil (14 13 ; 8 14). Se
bagai h asil migrasi muatan p o s it if ke atom Cg dan le -
pasnya sebuah proton dari atom mungkin terbentuk sa
lah satu cincin siklopropan 9 » 10 , 19 dari s ik lo a rte -
nol atau terbentuk ikatan rangkap 8, 9 dari lanoste
r o l. Perubahan pada senyawa la n o stero l yaitu dari atom
C^q ke steroid dengan atom (k o le s te r o l) melibatkan
lepasnya 3 gugus,metil dan hilangnya ikatan rangkap.

9
Serangkaian reaksi in i dapat berlangsung tergantung pa

da organisme, akibatnya sejumlah h a sil antara teraasuk
zim osterol telah d iis o la s i sehingga dapat mewakili ber
macam-macam transformasi. Adapun ja lu r biosin tesa ste
roid yang dimulai dari asam asetat kemudian terbentuk
senyawa antara squalen dapat d ilih a t Lampiran I . (19)
3 .3. Cara penetapan kadar s te r o id .

penetapan kadar stero id dapat dilakukan dengan
berbagai cara, antara la in berdasarkan adanya gugus
yflhidroksi pada atom Cj dan adanya ikatan rangkap. pada
atom C^ dan C^. Cara-cara tersebut antara la in :
. - Reaksi Liebermann-Burchard.
Metode i n i berdasarkan terbentuknya warna hijau ha
s i l penambahan pereaksi asam asetat anhidrat dan
asam s u lfa t.
- K olorim etri.
Pada metode i n i didasarkan atas h a sil reaksi dari
penambahan pereaksi asam asetat, a s e t il k lorid a dan
seng k lorid a yang menghasilkan warna yang ditentukan
pada 328 mu.
- F erri klorida k o lo rim e tri.
Etigunakan campuran f e r r i klorid a dan asam s u lfa t ter
bentuk warna purple dengan larutan asam aseta t.
- Tekhnik pemisahan.
- Metode la in .
Dapat digunakan Gravim etri. (20)

10
4. Solasodina.
4 .K S ifa t fis ik a - kimia solasodina.

Dalam tanaman jen is solanum, solasodina terik a t
dalam bentuk glikosidanya dengan gula, gugus gula da
pat berupa glukosa, galaktosa dan rhamnosa. Solasodi
na sebagai aglikon dari solasonin, soladamin, solara-
dixin dan lainnya. Solasodina mempunyai rumus molekul
C27*^3^2N’ dengan bobot molekul ^ 13 >62 . (21 )
Struktur molekul solasodina

Solasodina mempunyai nama la in : (17)
- Solankarpidina
- Solanidina-s
- purapuridina
- S p iro s o l- 5-e^ - 3 yS-ol
- Solasod -5-en- -o l
Pengkristalan dengan alkohol encer atau dioksan
mempunyai jarak lebur 197° - 198° C. Larutan solasodi.
na dalam alkohol bereaksi a lk a lis terhadap kertas lak
mus, harga PKb 6 ,30. Solasodina mempunyai kelarutan
yang berbeda. Larut bebas dalam bensena dan kloro-

11
form. Larut dalam alKOhd dan aseton, s e d ik it la ru t

dalam a ir dan praktis tidak la ru t dalam e te r . ( 2 1 )
4«2. B iosintesa solasodina.

t
Jalur biosintesa solasodina yang merupakan ke
lanjutan dari proses biosintesa steroid ( Lampiran-
I ) , dimana setelah terbentuk K o lestero l kemudian
dilanjutkan pembentukan solasodina dapat d ilih a t pa
da Lampiran IX. (22)
5 * Ttn.iauan ten tang s t e r o l.

S te ro l adalah senyawa stero id yang mempunyai
ran tai camping yang cukup panjang, yang te rik a t pada
Ci^# Senyawa in i biasanya mengandung 27 6ampai 29 a-
tom karbon*
S te ro l masih merupakan bahan yang diperoleh da
r i binatang (sebagai hormon seks, asam empedu) teta p i
akhir-akhir in i sejumlah besar senyawa s te r o l telah
d id etek si dari jaringan tanaman, yang dapat dijumpai
dalam bentuk bebas, e te r atau glikosidanya. ( 20 )
S te ro l atas dasar asalnya dapat digolongkan y a i
tu ;
- Zoosterol, s te r o l yang berasal dari hewan, misalnya
k o le s te ro l*
- f i t o s t e r o l , s te r o l yang berasal dari tanaman, mieal
nya. stigm asterol, beta s it o s t e r o l.
- M ikosterol, s te ro l yang berasal dari jamur, misal -
nya erg o s te ro l, zymosterol, asam eburicoat*

12
K o lestero l adalah senyawa s te r o l dengan atom

karbon sebanyak 27 yang merupakan ste ro id hewani,yang
terdapat paling banyak dan dijumpai dalam setiap ja -
ringan hewan, yang merupakan bahan antara yang diper-
lukan dalam biosin tesa hormon s te ro id . Adapun s if a t
kelarutannya adalah tidak la ru t dalam a ir teta p i la -
rut dalam kloroform dan metanol. Sedangkan rumus ba-
ngunnya adalah sebagai berikut : ( 20 , 2 3 )
Kampesterol adalah senyawa s te r o l dengan atom

karbon sebanyak 28, banyak terdapat pada minyak gan-
dum, minyak kacang merah dan la in - la in . Adapun s ifa t
kelarutannya adalah tidak la ru t dalam a ir te ta p i la
rut dalam kloroform dan metanol. SedangKan rumus ba-
ngunnya adalah sebagai berikut : ( 23 , 2*0
M i i &-
pLRfUS'lAKAAN
-UN1VERS1TAS A IR LA N G G A "
s U RABAY A

Stigm asterol adalah s te r o l dengan atom karbon
sebanyak 29 , pertama k a li d iis o la s i dari kacang bun -

c is , juga terdapat dalam kacang Kedelai yang diguna -
kan untuk tujuan kom ersiil yang penting. (20,24).
Adapun s if a t kelarutannya adalah tidak la ru t dalam
a ir teta p i la ru t dalam kloroform dan metanol. Sedang-
kan rumus bangunnya adalah sebagai berikut : ( 23 , 24 )
S ito s te r o l adalah senyawa s te r o l dengan atom

karbon sebanyak 29 * banyak terdapat dalam tanaman mi-
salnya gandum, jagung, kapas, te ta p i palin g banyak di
jumpai dalam tanaman adalah beta s it o s t e r o l. Dalam ba
nyak obat diketahui bahwa s ito s te r o l adalah campuran
dari - s it o s t e r o l (stigm ast 5-en -3 ^ 0 1 ) (c 29 h50o)
dan beberapa s te r o l jenuh. Campuran tersebut te r d ir i
dari 95# to ta l s te r o l dan tidak kurang dari Q95% ste
r o l tak jenuh dihitung sebagai - s t is t e r o l. Senyawa
i n i merupakan zat warna putih, tidak berbau, tidak be
rasa dan praktis tidak la ru t dalam a ir te ta p i la ru t
dalam kloroform dan metanol. Sedangkan rumus bangun -
nya adalah sebagai berikut : ( 17 , 23 , 24 )

14
Dari perbedaan rumus bangun senyawa-senyawa ste

r o l tersebut aiatas, maka dapat diketahui tingkat ke-
larutan dari masing-masing senyawa* K o lestero l mempu-
nyai atom karbon berjumlah paling s e d ik it, sehingga
k o le s te ro l mempunyai kelarutan yang leb ih tin g g i. Un
tuk kampesterol walaupun jumlah atom karbonnya leb ih
s e d ik it daripada 6tigm asterol, akan te ta p i pada s t ig
mas te r o l ada ikatan rangKap pada CpP dimana ikatan
tersebut mudah patah membentuk tip e pregnan yang mem
punyai s i f a t kelarutan dalam senyawa semi polar le b ih
tin g g i daripada kampesterol. Sedangkan untuk s it o s t e
r o l s i f a t kelarutanny^ paling k e c il dibanding ketiga
s t e r o l tersebut diatas, hal in i disebabkan karena s i
to s te r o l mempunyai atom karbon yang le b ih panjang.
Melihat hal tersebut diatas, maka s te r o l mempu
nyai kegunaan yang luas dalam dunia pengobatan teru-
tama untuk bahan pembuatan hormon seks yang digunakan
sebagai obat kontrasepsi. Kegunaan la in misalnya un
tuk anti in flam asi, anti a ler& i, rhematoid a rth ith is
dan asma.

15
b• K l o r o f i l .
6 .V. Hn.iauan ten tang k l o r o f i l .

K lo r o fil merupakan k a ta lis penting dalam fo to
aintesa dan pada umumnya terdapat sebagai pigmen hi
jau dalam jaringan tanaman yang mengalami io to s in te
sa. K lo r o fil terdapat dalam k lorop last dalam jumlah
agak besar, sering berikatan kuat dengan protein te
tapi cepat terekstraksi dari cairan lemak dengan a-
ceton atau e te r.
Secara kimia, k l o r o f i l t e r d ir i dari i n t i por
phyrin (t e t r a p y r r ile ) yang membentuk khelat dengan
magnesium pada pusat dan ikatan hidrokarbon panjang
(p h y ty l) sebagai ran tai samping yang melekat mela
lu i asam carbon l i e group.
Paling s e d ik it ada lima macam k l o r o f i l pada
tanaman, dimana semuanya mempunyai struktur dasar
yang sama teta p i menunjukkan v a r ia s i dalam pelekat-
an a l i f a t i s sebagai ran tai samping pada i n t i porph£
r in . K lo r o fil a dan b paling banyak terdapat pada
tanaman tingkat tin g g i, paku, lumut sedangkan kloro
f i l c sampai e hanya didapatkan pada algae. ( 25 )
Karbohidrat merupakan h a s il dari fo to sin tesa ,
sebuah proses b io lo g i yang mengubah energi e le k tro -
magnetik menjadi energi kimia. Dalam tanaman hijau
fotosin tesa t e r d ir i dari dua rea k si. Reaksi pertama
disebut juga reaksi cahaya, yang mengubah energi e-

16
lektromagnetik menjadi energi kimia. Reaksi yang

la in adalah reaksi enzimatik yang mempergunakan e -
n ergi dari reaksi cahaya yang mengubah karbondioksi,
da menjadi gula. In i stoma disebut sebagai reaksi'
gelap. H asil dari kedua tip e reaksi diatas biasanya
disimpulkan secara sederhana dalam persamaan seba
gai berikut : (26)
2H2 0 + C02 + caiiaya-~2E2lii— (CH2 0) + HÔ + 0a
6*2. Cara penetapan kadar k l o r o f i l .

Ada beberapa cara penetapan kadar k l o r o f i l an
tara la in :
- Dua gram bahan diekstraksi dua k a li dengan aceton
60% (volume akhir 10 m l), gunakan homogeniser (Ul
tr a -tu rra x ). Konsentrasi diUKur pada panjang ge
lombang 645 nm dan 663 nm dengan menggunakan per
samaan Arnon Cited in Jacobi (1974). (11)
- Bahan segar ditumbuk dalam m ortir atau dimasukkan
kedalam maaerator dengan menambahkan aceton atau
metanol berlebih sampai semua warna pada jaringan
te rle p a s . Tambahkan kalsium karbonat untuk rnenja-
ga terbentuknya pheophytin dan saring ekstrak pa
da penyaring Buchner, b ila s dengan aceton yang ba
ru sampai tak berwarna* Ekstrak dan h a s il pembila
san ukur volumenya dan simpan di r e fr ig a t o r . Ten-
tukan sadarnya dengan spektrofotom etri. Kadar klo

17
r o f i l dapat oihitun& dengan persamaan :
Total k l o r o f i l (mg/1) = 2 0 ,2 + 8,02 A ^

dimana :
A645 *Ab63 adalah a*>sorban pada panjang gelom

bang 645 nm dan 663 nm.
K lo r o f il dapat aibedakan dengan pembentukan
kompleks dengan UV dan kurva absorpsinya dapat di
amati. K lo r o fil menunjukkan puncak mayor diatas
625 nm, puncak minor antara 500 nm dan 600 nm. Un
tuk k lo r o t il a dan b, puncak panjang gelombangnya
663 nm dan 645 nm, sedangkan untuk k l o r o f i l c dan
d pada 630 nm dan 668 nm. ( 2 5 )
7. Kromatografi Lapisan T ip is *
Kromatografi lapisan t ip is merupakan suatu cara
yang dapat digunakan untuk memisahkan komponen zat da
r i campurannya* Mekanisme proses pemisahan pada kroma
t o g r a fi lapisan t ip is ada beberapa macam yaitu :
- secara adsorpsi
- secara p a r tis i
- secara pertukaran ion
- filtr a s i
Dari berbagai mekanisme tersebut yang palin g sering
digunakan adalah mekanisme proses pemisahan secara ad
sorp si, mekanismenya dapat dijelaskan sebagai berikut.
Apabila campuran zat diteteskan pada lempeng %
se diam, maka mula-mula semua za t akan diadsorpsi o-
leh fase diam* Oleh karena kekuatan adsorpsi antara

18
molekul zat berbeda-beda maka apabila dilakukan elua-

s i dengan fase gerak akan te r ja d i pemisahan dari cam-
puran tersebut. Molekul-molekul zat yang diadsorpsi
paling lemah oleh fase diam akan terbawa oleh fase ge
rak ke atas sehingga memberikan noda paling atas* Se
dangkan molekul-molekul zat yang diadsorpsi palin g ku
a t oleh fase diam akan memberikan noda yang paling ba
wah.
Fase diam yang digunakan bermacam-macam. Salah
satu cara pembuatan fase diam adalah :
Mula-mula fase diam dibuat suspensi, kemudian d ira ta -
kan di atas lempeng kaca, p la s tik ataupun a l u m in ium,
Selanjutnya fase diam diaktifkan dalam oven dengan su

hu 100° - 200° C selama 30 sampai 60 menit.
Sebagai fase gerak dapat digunakan pelarut tung
ga l atau campuran, beberapa macam pelarut disesuaikan
dengan campuran zat yang dipisahkan. Fase gerak mempu
nyai fungsi membawa molekul-molekul zat sehingga da
pat te rja d i pemisahan sempurna.
Untuk menunjukkan komponen zat yang dipisahkan
tersebut, dapat digunakan lampu UV atau menggunakan
pereaksi penampak noda yang sesuai. Dari kromatogram
h a s il pemisahan yang diperoleh, dapat diketahui warna
yang te r ja d i, kemudian dihitung harga fif nya. Harga
Rf yaitu perbandingan jarak yang ditempuh oleh noda
dan jarak yang ditempuh oleh fase gerak.

19
of - n2 d§-
= 3 a r a E “y a 5 g " H r i e m p u H * ’o I e E " T a i e ™ g e r a E ’
’
Setiap za t dengan fase gerak dan fase diam tertentu

mempunyai harga Rf terten tu pula. ( 2 7 , 29 )
8 . Tln.lauan ten tang Densitom etri.

Densitometri merupakan metode optik yang dapat
digunakan untuk analisa k u a lit a t if dan k u a n tita tif
z a t atau campuran za t setelah dipisahkan te rle b ih da-
hulu, antara la in dengan tekhnik kromatografi lapisan
t i p i s . Metode i n i didasarkan pada pengukuran cahaya
yang diserap atau diemisikan oleh molekul senyawa da
lam noda kromatogram.
Pengukuran konsentrasi dapat dilakukan dengan
cara sebagai berikut ;
1. Membandin&kan transmisi sinar tampak yang melewati
noda sampel dengan noda pembanding pada kromato -
gram. Cara in i hanya untuk noda-noda yang berwarna
atau diwarnai dan lapisan t ip is dibuat dari lem -
peng kaca yang tembus cahaya dan harus benar-benar
homogen.
2* Membandingkan serapan sinar lembayung u ltra atau
sin ar tampak yang dipantulkan dalam noda bahan a-
tau sampel dengan noda pembanding pada kromatogram.
Untuk mendapatkan h a s il yang paling baik, maka la
pisan yang dipakai. adalah s ilik a g el tanpa kalsium

s u lfa t sebagai pengikat dan tanpa bahan yang ber-

20
flu oresen si*

3* Membandingkan absorpei flu oresen si sinar yang di -
pantulkan oleh noda dan noda pembanding (untuk ba
han yang b e rflu o ro s e n s i).
Metode Densitometri in i berbeda dengan metode
spektrofotom etri, dimana medium yang dipakai pada me
tode Densitometri b e r s ifa t tidak homogen dimaksudkan
yang sela in menyerap juga menghamburkan cahaya (s c a t
te r in g ), sehingga hubungan antara serapan dengan kon-
sen trasi tidak menunjukkan hubungan yang l i n i e r seper
t i yang ditunjukkan oleh hukum Lambert-Beer pada metg,
de spektrofotom etri. ( 28 , 30 , 3 1 )
Teori yang banyak digunakan dalam metode Densi
tom etri adalah te o r i Kubelka-Munk. (29,31,32,33)
Adapun hukum Kubelka-Munk :
- - g ji- - = (S + K) j + S i
-fz ~ " = (S + K) i + Sj
Keterangan hukum Kubelka-Munk ;

i : in ten sita s cahaya dengan arah tegak lurus
meninggalkan permukaan lapisan t ip is ,
j : in ten sita s cahaya dengan arah tegak lurus
menuju permukaan lapisan t ip is .
K : fa k tor penyerapan untuk tiap satu-satuan
teb al lapisan t ip is .
S : fak tor penghamburan untuk tiap satu-satuan
tebal lapisan t ip is .

21
Untuk harga X = 0, maka perbandingan in te n s ita s caha

ya yang dipantulkan ( l R) dengan in ten sita s cahaya
yang datang ( t ) disebut reflek ta n (AD) . Sedangkan
O K
harga X = x, maka perbandingan in ten sita s cahaya yang
meninggalkan lapisan t ip is ( I ^ ) dengan in te n s ita s ca
haya yang datang ( I Q) disebut transmitan (A ^ ). Secara
matematik hubungan tersebut dapat dinyatakan sebagai
berikut :
= ar
/ *o = AT
8 .1 . Analisa k u a lit a t if dengan Densitom etri.

Ada dua cara analisa k u a lit a t if dengan Densi
tometri yaitu :
- Atas dasar harga "distan ce 11 (ja ra k ) noda kromato
gram sampel dibandingkan dengan noda kromatogram
pembanding,
- Atas dasar panjang gelombang maksimum, yaitu pan
jang gelombang pada saat harga serapannya maksi -
mum.
Apabila zat yang dianalisa mempunyai panjang
gelombang maksimum sama dengan panjang gelombang
maksimum pembanding, maka kemungkinan zat tersebut
sama dengan zat pembanding. ( 3 3 )
8.2. Analisa k u a n tita tif dengan Densitom etri,

pengguaaan Densitometri untuk tujuan analisa
k u a n tita tif didasarkan atas pengukuran kerapatan

22
op tik noda kromatogram. Kerapatan opcik tersebut di

nyatakan dengan luas area noda kromatogram. perhi -
tungan kadar suatu zat yang d ian alisa dilakukan de
ngan cara membandingkan luas area sampel dengan lu -
as area pembanding, dengan catatan oahwa huoungan
antara luas area dengan konsentrasi telah d ilin ie r -
kan dengan perkalian suatu fa k tor yang telah diatur
oleh sistem didalam a la t Densitometer. (30,31)

BAB I I I
BAHAN, ALAT DAN MKTODE KjSRJA
1• Bahan.
1.1. Bahan P e n e litia n .

Bahan p en elitia n yang digunakan adalah daun ta
naman Solanum w rig h tii Benth yang diperoleh dari Ke-
bun Raya Cabang Purwodadi pasuruan.
1.2. Bahan Kimia.

- petroleum eter p.a
- Aseton
- Klorororm p.a
- Metanol p.a
- A3 am s u lfa t pekat
- Asam k lorid a 2 N
- Natrium hiaroksida 10%
- Heksana p.a
- i£ til asetat
- Kalsium karoonat
pereaksi Dragendorf Spray
- K iesel Gel 60 F
2. A la t - a la t .
- Satu set a la t reflu ks
- TLC Scanner Shimadzu CS-930
- Bejana kromatografi ____ -
Oven
- Botol timbang

24
3* Cara ker.ia*
3 .1 . penyiapan bahan p e n e litia n .

- pengumpulan daun : d ip ilih daun dengan C r ite r ia :
- Daun muda : 4 sampai 5 daun dari daun pa
lin g ujung.
- Daun tua : 6 sampai 10 daun dari daun pa
lin g ujung.
- Waktu pengambilan : Daun diambil secara acak dari
dua tanaman pada in te rv a l waktu sbb. ;
- Sampel pertama diambil pukul 06*00
- Sampel keaua diambil pukul 09.00
- Sampel k etiga diambil pukul 12.00
- Sampel keempat diambil pukul 15*00
- Sampel keliina diambil pukul 13.00
- Sampel keenam diambil pukul 21*00
Bahan-bahan yang telah dikurapulkan kemudian di
keringkan dengan sinar matahari, kemudian d ig ilin g
atau diserbuk dan diayak.
3*2. Cara ek stra k si.

Ditimbang dengan t e l i t i 3,000 gram serbuk ke-
rin g, kemudian dimasukkan kedalam labu d e s tila s i >0
ml. D irefluks dengan 23 ail petroleum e te r selama dua
jam. Setelah itu disaring dengan corong Buchner, U l
tra t yang didapatkan dikumpulkan sedangkan residu d i
reflu ks kembali dengan 25 oil petroleum e te r. Ekstrak-
diulang masing-aasing tiga k a li selama dua jam#

25
E llt r a t yang didapatkan ( rase petroleum e te r )

dilakukan u ji k u a lit a t if dan dilanjutkan u ji kuanti-
t a t i f , sedangkan residunya d ireflu k s kembali dengan
25 ml aseton. Ekstraksi diulang masing-masing selama
dua jam.
P i l t r a t yang didapatkan ( fase aseton ) dipisah
kan sedangkan residunya d ih id ro lis a dengan asam klori.
da 2 N, didihkan dan selanjutnya dinetralkan dengan
natrium hiaroksida 10%. Setelah n etral disaring de
ngan corong Buchner dan f i l t r a t yang didapatkan dieks
traksi dengan kloroform menggunakan corong pisah. j^ks
trak si dengan kloroform dilakukan pula terhadap r e s i
du h a s il h id ro lis a . Residu h a sil h id ro lis a in i ditarn-
bah sejumlah tertentu kloroform sehingga residu te r
sebut terendam. Setelah die^straksi selama dua jam ma
ka disaring melalui corong Bucnner. J jlltra t yang dida
patkan dicampur dengan f i l t r a t h a sil h id ro lis a dan
akhirnya campuran f i l t r a t i n i ( fase kloroform ) d ila
kukan u ji k u a lit a t if dan selanjutnya u ji k u a n tita tif.
Untuk le b ih jelasnya ekstraksi tersebut dapat d ilih a t
pada Lampiran H I . (33)
3.3^ Penetapan susut pengeringan.

Bi timbang 0,500 gram serbuk daun, kemudian dirna
sukkan kedalam krus porselin yang sudah ditimbang
konstan. Setelah it u dipanaskan di lemari pengering

pada suhu 105° C sampai bobot konstan. (34)

26
3*4« Penetapan kadar k l o r o f i l *

Ditimbang 0,100 gram serbuk daun dan dimasukkan
kedalam beker glas 100 ml, kemudian tambahkan aseton
kedalamnya sampai semua warna pada jaringan terlep as.
Tambahkan kalsium karbonat, saring ekstrak dengan co
rong Buchner, masukkan kedalam labu ukur 100 ml* Bi-
la s dengan aseton sampai tak be'rwarna dan tambahkan
aseton sampai ga ris tanda. Kemudian diukur absorpsi-
nya pada panjang gelombang 663 nm dan 645 nm dengan
s e l satu cm. Kadar k l o r o f il dapat dihitung dengan per
samaan :
Total k lo r o f il (mg/1) = 20,2 + 8,02
dimana :
' ^Lan ^645 adalah absorpsi pada panjang gelombang
663 nm dan 645 nm* ( 26 )
3«5» U.ii k u a lit a t if dengan Kromatografi Lapisan T ip is .

Larutan fase gerak dimasukkan kedalam bejana
kromatografi yang dindingnya telah d ila p is i dengan
kertas saring, bejana ditutup dan dioiarkan sampai je
nuh.
F lit r a t h a sil ekstraksi ditotolkan pada lempeng

K iesel Gel 60 F 254 dengan menggunakan mikropipet, ke
muoian lempeng dimasukkan bejana krom atografi, d ielu -
asi dengan fase gerak yang telah dijenuhkan. Setelah
fase gerak mencapai batas yang telah ditentukan lem
peng diangkat kemudian dikeringkan pada suhu kamar

27
agar fase geraknya menguap. Setelah it u disemprot de

ngan penampak noda. Untuk penampak noda b ila yang d i
gunakan asam s u lfa t pekat ; metanol, setelah disem-
protkan lempeng dipanaskan pada suhu 105° C selama l e
bih kurang 10 menit. Biamati warna noda yang . tarnpak
dan dihitung harga Hf nya. Untuk mengetahui je n is se
nyawa steroida digunakan pembanding. U ji kromatografi
lapisan t ip is dilakukan terhadap :
- Fase petroleum e te r, fase gerak yang digunakan ;
heksana : e t i l asetat = 7 :3
penampak noda = Asam s u lfa t pekat : metanol = 1:1
- Fase kloroform , fase gerak yang digunakan ;
Kloroform ; metanol = 19:1
penampak noda = pereaksi Dragendorf Spray
3 .6 . Cara penetapan kadar s te ro l to ta l dengan Densitome -

tr i.
3 .6 .1 . Pembuatan larutan baku k o le s te ro l 1000 ppm.

Ditimbang dengan seksama 0,100 gram k oleste
r o l, kemudian dilarutkan dengan kloroform dalam be-
ker gla ss, larutan dipindahkan kedalam labu ukur
100 ml la lu ditambah kloroform sampai garis tanda.
3 .6 .2 . Penyiapan larutan sampel.

Ekstrak kering dari sampel dilarutkan dengan
Kloroform secukupnya kemudian dipindahkan kedalam
labu ukur 5 secara k u a n tita tif, selanjutnya d i
tambah kloroform sampai garis tanda.

28
3 *6 .3» Penentuan pan.iang gelombang maksimum k o le s te ro l de

ngan Densitometri,
Noda dari standart k o le s te ro l y«tng dihasilkan
dari penyiapan kromatografi lapisan t ip is sep erti
3 « 5 * tersebut diatas dilakukan pengukuran harga ab-
sorpsinya pada panjang gelombang 370 nm sampai 700
nm. Panjang gelombang maksimum cJi tun jukkan oleh har
ga absorpsi te rtin g g i atau puncak kromatogram yang
paling tin g g i.
3.6.4* Penetapan kadar s te ro l to ta l dengan D ensitom etri,

Pada setiap lempeng ditotolkan larutan pemban
ding k o le s te ro l seoanyak empat t i t i k dan larutan
sampel sebanyak enam t i t i k . Setelah dielu asi dengan
eluen heksan : e t i l asetat = 7 :3 , aikeringkan pada
suhu kamar dan disemprot dengan penampak noda asam
s u lfa t pekat ; metanol = 1:1. Selanjutnya dikerin g-
kan dalam lemari pengering, kemudian diamati luas
area dari masing-masing noda kromatogram pada pan
jang gelombang maksimum dengan k o e fis ie n (SX) = 3
dimana merupakan h a sil p en elitia n 11 p o sisi l i n i a r i -
zer " untuk mendapatkan hubungan yang l i n i e r antara
konsentrasi dengan luas area kurva.
3.7. Cara penetapan kadar solasodina dengan Densitom etri.
3*7.1. Pembuatan larutan baku solasodina 1000 ppm.

Ditimbang dengan seksama 0,100 gram solasodi
na, kemudian selanjutnya dilakukan sep erti 3 * 6 . 1 .

29
3 .7 .2 . Penyiapan larutan sampel.

Dilakukan sep e rti 3*6.2.
3 .7 .3 . Penentuan pan.lang gelombang maksimum solasodina de

ngan D ensitom etri.
Digunakan standart solasodina, selanjutnya di
lakukan s ep erti 3 « 6 . 3 »
3 . 7 . 4 . penetapan kadar solasodina dengan Densitom etri.

Pada setiap lempeng ditotolkan larutan pemban
ding solasodina sebanyak empat t i t i k dan larutan
sampel enam t i t i k . Setelah d ielu a si dengan eluen
kloroform ; metanol = 19:1, dikeringkan pada suhu
kamar dan disemprot dengan penampak noda Dragenaorf
Spray. Kemudian diamati luas area dari masing-ma
sing noda kromatogram pada panjang gelombang maksi
mum.
3*8* Analisa data.

Dari data luas arae Kromatogram larutan baku
yang didapat, ditentukan persamaan garisnya dimana
x = jumlah (ug) larutan baku dan y a luas area kroma
togram. persamaan ga ris yang didapat y = Bx + A. Jum
lah (ug) larutan sampel dapat d ic a ri setelah dimasuk
kan kedalam persamaan ga ris i n i , dimana y = luas area
larutan sampel sehingga didapatkan jumlah (ug) laru
tan sampel sebagai x.

Gambar 1. Daun dan Bunga dari tanaman

Solanum w rig h tii Benth.

31
Gambar 2. Tanaman solanum w r ig h tii Benth.

/
BAB IV
HASIL PENELITXAN
1. HaslX penyiapan bahan p en elitia n ( penimbangan serbuk.

penetapan susut pengeringan ) daun tanaman Solanum wrieh.
t i i Benth dalam berbagal in te r v a l waktu.
Hasil penimbangan serbuk dan penetapan susut pengeringan
daun tanaman Solanum w riK h tii Benth dalam berbagai in te r
val waktu pengambilan dapat d ilih a t pada T a b el 1 ,
Tabel 1
Hasil penimbangan serbuk dan penetapan susut pengeringan
daun tanaman Solanum w rig h tii Benth d^lam berbagai in te r
va l waktu pengambilan.
pengambilan I Pengambilan I I
VSTP KD BSB SP BSK BSB. SP BSK
(pukul) (gram) (# ) (gram) (gram) (# ) (gram)
06.00 tua 3,001 9,581 2,7153 3,001 10,421 2,6883
muda 3,002 10,339 2,6910 3,000 10,020 2,6994
09.00 tua 3,002 9,960 2,7030 3,001 10,379 2,6895
muda 3,001 9,419 2,7183 3,001 10,379 2,6895
12.00 tua 2,999 10,040 2,6979 3,001 10,579 2,6635
muda 3,001 10,978 2,6716 3,001 9,960 2,7021
15.00 tua 3,001 9,381 2,7135 3,002 10 ,442 2,6885
muda 3,002 9,820 2,7072 3,002 9,960 2,7030
18.00 tua 3,002 10,178 2,6965 3,000 10,220 2,6934
muda 3,001 9,381 2,7117 3,002 9,562 2,7150
21 .00 tua 3,001 10,359 2,6901 3,001 10,241 2,6937
| muda 3,000 9,780 2,7066 3,001 9,381 2,7195
Keterangan ;
WP = tfaktu pengambilan ; KD = K r ite r ia daun ; BSB = Berat ser
buk basah; SP = Susut pengeringan ; BSK = Berat serbuk kering.
32

/
33
2 . Hasil pemeriksaan fase petroleum e te r dengan Kromatogra

i i Laplsan 2i.pis.
Hasil pemeriksaan fase petroleum eter dengan Kromatogra
f i Lapioan H p is dapat d ilih a t pada Garabar 3«
o4.o© os-oo w o o ie.oo iJoc ak.oo ia-» u-oo<
Gambar 3* H asil u ji Kromatografi Lapiean Ttpis fase petro

leum e te r daun Solanum w rlg h tii Benth dengan pem
banding k o le s te ro l«
Fase gerak = Eekean : e t i l asetat (7 :3 )
penampak noda = Asam s u lfa t pekat ; metanol
( 1:1 )
St = K o lestero l ( warna noda = ungu merah,
Rf = 0,71 )
S = Sampel ( warna noda = ungu merah ,
Rf = 0,71 )

3*+
3* H asil pemeriksaan fase kloroform dengan Kromatografi

Lapisan 21 p is ♦
H asil pemeriksaan fase kloroform dengan Kromatografi
Lapisan T ip is dapat d illh a t pada Gambar 4 .
Gambar i*. H asil h ji Kromatografi Lapisan ELpis fase kloro

form daun Solanum w r ig h tii Benth dengan pemban-
ding solasodina,
Fase gerak = Kloroform : metanol (1-9:1)
penampak noda = Dragendorf Spray
St = Solasodina ( warna noda = ungu merah )
S = Sampel

35
i+. H asil penetapan kadar s te r o l to ta l dengan Densitom etri.
i f . l . Penentuan pan.iang gelombang maksimum.

Dari h a s il penentuan panjang gelombang maksimum de
ngan menngunakan pembanding k o le s te ro l didapatkan pan
jang gelombang maksimum yaitu 393 nm. Hasil dapat d i-
lih a t pada Gambar 5*
Gambar 3
H asil penentuan panjang gelombang maksimum standart
k o le s te ro l yang diukur pada panjang gelombang 370 nm
sampai 700 nm secara. Densitometri*
t?* **¥

36
4 .2 . H asil penetapan. kadar s te r o l to ta l sainpel fase petro

leum e te r daun tua Solanum. w ri^ h tii Reath- Penaambi-
lan_X.
H asil penetapan kadar s t e r o l to ta l sampel fase petro
leum eter daun tua Solanua vjri.ghtii Benth, pengaznbi-
lan I yang dilakukan pengukuran tig a k a li dengan men^
gunakan standart k o le s te ro l ( jumlah penotolan seki-
tar 2 ug, 4 ug, 6 ug, 10 ug, 12 ug dan 14 ug ) dapat
d ilih a t pada Garnbar 6 , 7, a, 9, 10 dan 11 serta Tabel
2 , 3 dan 4»

37
Gambar b
Kurva kromatogram dan luas area krotnatogram h asil penûku-
ran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w ri;,h tii
Benth ( pengambilan I , putcul 06.00, 09.00, 12.00, 15-00,
18.00 dan 21.00 pada Pengukuran I .
t 7 10
i Jl K
5
4 A 8
*V l*\ 11
3 »' ! : 1 Ir!
2 Ii ' ■
i| I ! f |
I\
1 I
A I i|
M
'
! !
II
A. /\ M ! M .‘ r f r M •
'U KJ -IW
U ' - »i0
NO.
io
7,r-i
li
i2
\-
.! ' - I
ii
'A O
10 13
Keterangan :
1, Z 9 3> 5 = Standart k o le s te r o l.
7, 8 , 9> 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15.00
dan 18.00)
M I L I K
ferpustakaaw
•UNIVERSLTAS A1RLANGGA"
SURABAYA
33
Gambar 7
Kurva baku larutan standart k o le s te ro l (ug) terhadap luas
area pada pengukuran I penetapan kadar sampel fase petro
leum e te r daun tua solanum w rig h tii Benth.
Kurva baku i n i didapatkan dari data luas area kroma-

togram Gambar 6 dari a la t Densitometer dengan persamaan ga
r is re g re s i sbb. ;
y = 2697,1129x + 21b5,bl02
r = 0 ,9 9 ^
r tabel = 0,tt78
<* = 5%

/
39
Tabel 2
H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase petroleum
e te r daun tua Solanum w rig h tii Benth, Pengambilan X pengu
kuran I dalam in te rv a l iwaktu yang berbeda secara Densitome
t r i.
Waktu Juwlah s te ro l Kadar s te r o l to ta l

pengambilan to ta l dalam sampel
(pukul) (ug) * (mg/g)
06,00 12 , 000^ 1,4742

09.00 14,2899 1,0573
12.00 8,8923 0 ,6240
15.00 7,7122 0,9474
18.00 12,5918 1 ,5566
Catatan :
* Didapatkan dari persatnaan ga ris re g re s i pada Gambar 7
( contoh perhitungan lih a t lampiran 4 )

Gambar 6
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram h a sil pengUKU-
ran sampel fase petroleum eter daun tua Solanum w rig h tli
Benth ( Pengambilan I , pukul 06.00, 09-00, 12.00, 15.00,
18.00 dan 21.00 ) pada pengukuran I I .
i !
Al l j
\J \J y - " ' J \J \J V— 0...
.-c>. ;oo
i i
! aHE MO, 1
NO. V Pus, HKf-H MSfiK

n. i
?'ri, £
41. t i , 92
■.1?
1 j , ?•> 45?40 67 r
116,6
131.8 3*43.3, 63
i >•-;f, t h
!G7&L
Keterangan :
i» 2 . 3 , k Standart k o le s te r o l.
5, 6, 7, 8, 9, 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 21.00)

Gambar 9
Kurva baku larutan standart K o lestero l (ug) terhadap luas
area pada Pengukuran I I penetapan kadar sampel fase petro
leum e te r daun tua solanum w ria h tii Bentlu
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma-

togram Gambar 8 dari a la t Densitometer dengan persamaan ga
r ie re g re s i sbb. :
y = 2309 ,b 908x + 2746,3815

r = 0,9903
r tabel = 0.»50
<b= 5*

Tabel 3
H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sarapol fase petroleum
e te r daun tua Solanua w riK h tii Benth, pengambilan I pengu
kuran I I dalam in te rv a l waktu yang berbeda secara Densitc-
a e t r i.
Waktu Jumlah s te ro l Kadar s te r o l to ta l

(pukul) (u g)* (mg/S)
06.00 8,1614 1,5075

09.00 11,2521 1,0407
12.00 18,6572 0,8b44
15.00 9,7803 1,2014
18.00 12,8785 1,5920
21.00 7,7087 1,4328
Catatan :
* ddap&tkan dari persamaan g a ris re g re s i pada Gambar 9
(. contoh perhitungan lih a t lampiran 4 )

/
Gambar 10
Kurva kromatogram dan luas area krornato^ram h a sil penguku-
ran sampel fase petroleum e te r daun tua Solanum w riK h tii
Benth ( Pengambilan I , pukul 06.00, 09.00, 12*00, 15.00,
18.00 dan 21.00 ) pada pengukuran I I I .
I.CQ—j L_ *.««>*
7
A
2 r| m iM I n a If n |K
, A i w U U - J l I! !\ n !\jp .
1.-:
Keterangan :
1, 2, 3i 4 = Standart k o le s te ro l.
5, 6, 7, 8, 9, 10 =s Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 21.00)

Gambar 11
area pada Pengukuran I I I penetapan kadar sampel fase petro
leum e te r daun tua solanum w rig h tii Benth*
.1I I )/ill --------
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma

togram Gambar 10 dari a la t Densitometer dengan persamaan
g a ris re g re s i sbb. :
y = 2l63,1Mt5x - 335,7^1
r = 0,9952
r tabel = °>950

45
Tabel 4
H asil penetapan Kadar s te r o l to ta l sampel t'ase petroleum
e te r daun tua Solanum w rig h tii Renth, Pengambilan I pengu-
kuran I I I dalam in te r v a l waktu yang berbeda secara Densito
m etri*

(pukul) (U g)* (mg/S)
06.00 6,6059 1,2172

09.00 6,3806 1,1803
12.00 10,9185 0,8094
15.00 6,6406 1,2236
13.00 8,6442 1,6029
21 .00 5,2419 1,9486
Catatan :
* Didapatkan dari persamaan g a ris re g re s i pada Gambar 11

t
46
4«3* H asil penetapan kadar s te r o l to ta l sampel fase petro

leum e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth. Pengambi-
lan I .
H asil penetapan kadar s te r o l to ta l sampel fase petro
leum e ter daun muda Solanum w rig h tii Benth, Pengambi
lan I yang dilakukan pengukuran dua k a li dengan rneng-
gunakan standart k o le s te ro l ( jumlah penotolan seki-
tar 2 ug, 6 ug, 10 ug dan 14 ug ) dapat d ilih a t pada
Gambar 12, 13, 14 dan 15 serta Tabel 5 dan 6.

k7
Gambar 12
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram h a sil penguku
ran sampel fase petroleum e ter daun mud^ Solanum w ri^ h tii
Benth ( Pengambilan X, Pukul Ob.00, 09.00, 12.00, 15.00,
18.00 dan. 21.00 ) pada Pengukuran I .
_r-.o-ar*
_ I , Oi'O
J \
:^ -lA 1..-V"7 .1! i ,

V - U •" 1
. -0 .
Lf\Ht NO, 1
HO. i1 PCS. Hl*.—

11. S' 9W4 1,
.1 3U-;-'J j 0 h",
40, 1 ?0’.\^4 fX; 12.
55 >; 16.
70. 3 16.
!-,S, "ii'’o'*1 i 9,
161. 1 i5S9i:i r4 11.
11?. 6 1k*3;:- S.0 10,
Cl 1<•:!*1i'“*r 1 l".
C' 5.4
10 144 » 3
'■J1HL ii:..-il 1
Keterangan :
U 2, 3, k Standart k o le s te ro l.
5» 6, 7, 8, 9, 10 Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 21.00)

48
Gambar 13
area pada Pengukuran I penetapan. kadar sampel fase p etro
leum e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth.
32,0
30,0
A 2G,0
• 26,0
i
J 2't,0
!i 23,0
"£> 20,0
‘ 13,0
I 16,0
W
3 1£*»°
1 2 ,0
10,0
6, 0
6;.o
4.0
,JumL-ih ( ) ------- ►

ga ris re g re s i sbb. :
. y = 22I9,4502x - 2278,0236
r = 0,9976
r tabel = ° » 950
</■= 5#

Tab e l 5
Easil penetapan kadar sterol total sampel fase petroleum
eter daun muda Solanum wriahtii Benth, Pengambilan I pengu
kuran I dalam interval waktu yang berbeda secara Densitome
tri.
Waktu Jumlah sterol Kadar sterol total

pengambilan total dalam sampel
(pukul) (u g)* (mg/s)
06.00 8,6524 0,8038

09.00 15,5297 0,7 H I
12.00 9,9885 0,3739
15.00 8,6825 0,5345
18.00 5,1S56 0,6374
OJ
o•
o
5,9819 0,7367
Catat&n :
* Didapatkan dari persamaan ga ris re g re s i pada Gambar 13
( contoh perhitungan lin a t lampiran 4 )

50
Gambar H
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram h a sil penguku

ran sampel fase .petroleum e te r daun muda Solanum w rig h til
Benth ( pengambilan I , pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15.00 ,
18.00 dan 21.00 ) pada Pengukuran IX.
!\
11
5 7 8
i\ 10
i'
i
i n !\
I I i •l i. •'\J
i A'. V — ' ■-/
\ V|-
i .t
HO, V.POS.
n 1.4
i I'-:.4y £ . •?
1,1
Jt f
v?i I?o£i 1.1
C'pO
i lb 1 7343 u2 10,3
131 i£ 5,6
1-i':i b- 7
UIhit 1i"31'<9. 6
Keterangan :
1, 2, 3, 4 = Standart k o le s te r o l.
5> 6, 7, 8, 9> 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 21.00).

51
Gambar 15
area pada Pengukuran XI penetapan kadar sampel fase petro
leum e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth.
Kurva baku in i didapatkan dari data luas area kroma-

y = 2055,7094* - 1257,0021
r = 0,9993
r tabel = 0 .9 5 0
& = 3%

5a
Tabel 6
H asil penetapan kadar s te r o l to ta l sampel fase petroleum
e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth, Pengambilan I pengu
kuran IX dalam in te rv a l waktu yang berbeda secara Densito
met r i .
Waktu Juralah s te ro l Kadar s te r o l to ta l

(pukul) (uiO* (mg/g)
06.00 10,0299 0,9318

09.00 16,3090 0,7500
12.00 10,9754 0,4108
15.00 9,3398 0,5750
18.00 5,3501 0,6576
o•
o
<3
6,3341 0,7801
Catatan :

53
4 .4 . H asil penetapan kadar s te r o l to ta l sampel fase petro-

leum e te r daun tua;, solanum w rig h tii Benthf Pengambi
lan I I .
H asil penetapan kadar s te r o l total- sampel fase petro
leum e te r daun tua Solanum w rig h tii Benth, Pengambi
lan I I yang dilakukan pengukuran dua k a li dengan m»n£
gunakan standart k o le s te ro l ( jumlah penotolan sek i-
tar 4 ug, 6 ug, 10 ug dan 14 ug ) dapat d ilih a t pada
Gambar 16, 17, 18 dan 19 serta Tabel 7 <ian 8 .

5**
Goubar. 16
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram h a s il penguku

ran sampel fase petroleum e te r daun tua Solanum w rig h tii
Benth ( pengambilan I I , pukul Ob.00, 09*00, 12.00, 15*00,
18.00 dan 21.0 0 ) pada pengukuran I .
a .
....1
2 \ 10
i \
>jJ- K
jO. j : o »S -1. 7
LANE f* 0 - t
NO. V P L -: - RRE N'lRf*. V
f "i ' ~
1 21, 1 . ••«, h.f-'i 7.. t
z 1 . 35 4. 4
.Jt 51. 1 . 15 (.
4 ^ **i [;• 1 O'? 11.
5 i-jf' | 1 ?:iU 3 3 . 4i'i 12.
•3-;. r, 1*083 •5 ? 11. i
ill. 1 31362 . 39 1 ?. "7
1 2 =:. 19228 . 1 i' 11. £
Q in , 1 22440 . 7-1 • 13. i~i
10 156. t. 664 ?. . 5? 4, 0
TDK L 162023 ' *
Keterangan :
1, 2, 3, 4 = Standart k b l^ s te ro l.
6 , 7, 8, 9, 10 » Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 2 1 . 00 )

55
Gambar 1?
area pada Pengukuran I penetapan kadar sampel fase petro
leum e te r daun. tua Solanum w rig h tii Banth.
Luas area
Kurva baku i n i didapatkan dari data luas area kroma

y = 1330,3935* - 538,5620
r = 0,9990
r tabel = 0,950
d -= 5%

56
Tabel 7
H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase petroleum
e te r daun tua Solanum w rig h tii Benth, pengambilan I I pengu
kuran. I dalam in te rv a l waktu yang berbeda secara Densitome
tr i.
Waktu Ju.*alah s te ro l Kadar s te ro l to ta l

(pukul) (u g)* (mg/g)
06.00 15,5833 1,9322

09.00 H.7491 1,3710
12.00 23,9785 1,1169
15.00 14,8578 1,1053
18.00 17,2725 1,6032
o.
o
c\i
5,3970 2,0036
Catatan ;
* Didapatkan dari persamaan g a ris re g re s i pada Gambar 1?
( con.toh perhitungan lih a t lampiran 4 )

57
Gambar 18
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram h a s il penguku-
ran sampel fase petroleum e te r daun tua Solanum w rig h tii
Benth ( Pengambilan. IX , pukul 06.00, 09.00, 12,00, 15.00,
18*00 dan. 21*00 ). pada Pengukuran I I .
5, 6 , 7, 8, 9, 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,

15*00, 18.00 dan 2 1 . 00 )

58
Gambar 19
Kurva baku larutan standart k o le s te ro l (us) terhadap luas
area pada Pengukuran I I penetapan kadar sampel fase petrg
leum e te r daun tua Solanum w r ig h tii Benth.

y s 749,6668x + 6^0,1238
r = 0,9838
r tabel = °*950
= 5%

59
Tabel 8
H asil penetapan kadar s te r o l to ta l sampel fase petroleum
e te r daun tua Solanum w rig h tii Benth, Pengambilan I I pengu
kuran I I dalam in te r v a l waktu yang berbeda secara Densito
met r i .

(pukul) (ug)* (mg/s)
06.00 14,3914 1,7844

09.00 24,4706 1,5164
ia .oo 12,8 14 2 0,9550
15.00 15,6588 1,4561
18.00 5,2496 1,9490
C\j
o.
o
8,4495 3,1368
Cata tan :

60
4.5. H asil penetapan kadar s te r o l to ta l sampel fase petro

leum e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth. PeaKambi-
H asil penetapan kadar s te r o l to ta l sampel fase petro

leum e te r daun muda Solanum w rig h tii Benth, Pengambi
lan XX yang dilakukan pengutcuran dua k a li dengan men£
gunakan standart k o le s te ro l ( jumlah penotolan sek i-
tar 2 ug, 6 ug, 10 ug, 12 ug dan 14 ug ) dspat d i l i -
hat pada Gambar 20, 21, 22 dan 23 serta Tabel 9 dan
10 .

61
Gambar 20
Kurva kromatogram dan luas area kromatogram h a sil pen&uKu-
ran sampel fase petroleum e te r daun muda Solanum v/riahtii
Benth ( pengambilan I I , pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15*00,
18.00 dan 21.00.) pada Pengukuran I .
... l A j y m m m m
>r:<•. 0 lOO. f> 'tTO.O 194.6
" no. i
NO. V pi.'r, h RE r Hh PK
1 i , -1
4?5.12S 9.5
5:>17.3C 6.i
41. 9 8 . 9"? 10.6
4 ji ,4 1 28 59 . 6 f:' 15,2
5 *?c c-t-
72 4 4 1.'. ■ 1 1 * 10.6
7 , f- 13335.3* ‘ 15.7
1^.4 10574.32 12.4
lit, 4 9432.^5 11.2
1 7 1. 4 r' 3 7?. t*:3 8. 7
10 145.5 ?229.^3 8.5
lOTHL 244 * 1 . 6
Keterangan :
1, 2, 3, 4 = Standart k o le s te r o l.
5, 6 , 7, 6, 9, 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
1 5 . 00, 18.00 dan 2 1 . 00 ) .

62
Gambar 21
area pada Pengukuran I penetapan kadar sampel fase petro
leum eter daun muda Solanum w rig h tii Benth.
•a
cG
0>
U
W
3
.J
Kurva baku i n i didapatkan dari data luas area kroma

ga ris re g re s i sbb* :
y = 1021,6292 x - 1282,7637
r = 0,9986
r tabel = °>950
+ = 5*

63
la b el 9
H asil penetapan. kadar s te r o l to ta l sampel fase petroleum
eter daun muda Solanum. w r ig h tii Benth, pengambilan I I pe-
ngukurazi I dalam in te r v a l waktu yang berbeda secara Densi-
tom etri.

(pukul) (ug)* (ms/g)
06.00 10,0412 1,8599

09.00 14,3086 1,3300
12.00 11,5669 1,0702
15.00 10,5373 1,2995
18.00 a ,4733 1,5605
21.00 8,3316 3,0636
Catatan :

Gambar 22
Kurva kromatograia dan luas area kromatogram h a sil penguku
ran sampel fase petroleum e ter daun muda Solanum w riK htii
Benth ( pengambilan XI, pukul 06.00, 09.00, 12.00, 15.00,
18.00 dan 21.00 ) pada pengukuran I I .
Keterangan :
1* 2, 3, 4 = Standart k o le s te r o l.
5* 6, 7, 8, 9* 10 = Sampel (pukul 06.00, 09.00, 12.00,
15.00, 18.00 dan 21.00).

65
Gambar 23
area -pada Pengukuran I I penatapan kadar sampel fase petro
lsum eter daun muda solanum w rig h tii Benth.

to^ram Gambar 22 dari a la t Densitometer dengan persamaan
garis re g re s i sbb. :
y = 1230,0605x - 23,334
r =0,9995
r tabel = °»9 5 0
= n

66
Tabel 10
H asil penetapan. kadar s te r o l to ta l sampel fase petroleum
e te r daun muda Solanum wr i g h t i i Benth, Pengambilan I I pe
ngukuran I I dalam in te r v a l waktu yang berbeda secara Densi
tom etri.
Waktu Jumlah s te r o l Kadar s t e r o l to ta l

(pukul) (ug)* (mg/g)
06.00 9,8906 1,8320

09.00 13,4750 1,2526
12.00 10,8868 0,8058
15.00 9,6050 1,1845
18.00 7,1924 1,3246
o•
rvj
6,6399 2,441 6
Catatan ;
( contoh perhitungan lih a t lampiran if )

67
5. H asil penetapan kadar k l o r o f i l to ta l daun Solanum wri

t i i Benth dalam in te rv a l waktu yang berbeda secara spek
trol'o tom etri.
H asil penetapan kadar k l o r o f i l to ta l dari daun Solanum
w rig h tii Benth secara spektrofotom etri aalarn berbagai
in te rv a l waktu yang berbeda dapat d ilih a t pada 'label 11
untuk pengambilan sampel I dan Tabel 12 untuk pengambi
lan sampel I I .
Tabel 11
H asil penetapan kadar k l o r o f i l to ta l daun Solanum wriah
t i i Benth dalam berbagai in te r v a l waktu yang berbeda se
Cara sp ek trofotom etri , pengambilan X.
Waktu K r it e r ia Kadar rata^rata

pengambilan daun . k l o r o f i l to ta l
(pukul) (mg/g)
06.00 tua 1 ,3854

muda 1 ,k7kd
09.00 tua 1,6526
muda 1,8637
12.00 tua 1,3899
muda 1,7747
15.00 tua 2,0398
muda 2,1959
18.00 tua 1,7186
muda 1,689V
o
c\j
o«
tua 1,9676
muda 2,0258

68
Tabel 12
H asil penetapan kadar k l o r o f il to ta l daun Solanum wriKh
t i i Benth dalam berbagai in te rv a l waktu yang berbeda se
cara spektrofotom etri, pengambilan I I .
Waktu Kriteria Kadar rata-rata

pengambilan daun klorofil total
(pukul). (mg/g)
06.00 tua 1,4438

muda 1,6106
09.00 tua 1,6738
muda 1,7328
12.00 tua 1,1183
muda 1,4618
15.00 tua 1,8270
muda 1,9339
18.00 tua 1,4186
muda 1,7219
tua
fvj
o•
o
1,8291
muda. 1,9094

69
6. Pengolahan data.
Untuk mengetahui p r o l'il perbedaan kadar s te r o l to ta l
dari sampel fase petroleum eter daun tua maupun daun mu
da Solanum w rig h tii Benth dalam berbagai in te r v a l waktu
maka dapat d ilih a t pada Gambar 24 , 25* 26 dan 27.
Sedangkan untuk melihat p r o f i l kadar k l o r o f i l to ta l dan
kadar s te r o l to ta l dari sampel daun tua maupun daun mu
da Solanum w rig h tii Benth dalam berbagai in te r v a l waktu
dapat d ilih a t pacta Gambar 28, 29, 30 dan 31.

70
(mg/g)
total
sterol
rata«rata
Kadar
Gambar Z k* Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap

kadar ra ta -ra ta s t e r o l to ta l (mg/g) dari
sampel daun tua tanaman Solanum w r ig h tii
Benth, pengambilan l «

71
2,8 -
2 ,6 -
2 ,4 ’
£mg/g)
2 ,2 -
2,0 -
total
1,8 -
sterol
1 ,6 -
1,4 '
rata-rata
1,2 '
1,0 •
0,8
Kadar
. '
0,6 -
0,4 '
0,2 -
03.00 06.00 09.00 12.00 15.00 18.00 21.0 0

Waktu pengambilan (pukul)
Gambar Z5 • Kurva waktu pengambilan (pukul) terhadap

kadar ra ta -ra ta s t e r o l to ta l (mg/g) dari
sampel daun tua tanaman Solanum w rlK h tli
Benth, Pengambilan X I•

(mg/g)
total
sterol
rata-rata
Kadar 7^
Waktu pengambilan (p u k u l)
Gambar z£>♦ Kurva waktu pengambilan (p u k u l) terhadap

kadar r a t a - r a t a s t e r o l t o t a l (mg/g) d a r i
sampel daun muda tanaman Solanum w r ig h t i i
Benth, Pengambilan I .

73
(mg/g)
total
sterol
rata-rata
Kadar /
Waktu pengambilan. (p u k u l)
Gambar 27* Kurva waktu pengambilan (p u k u l) terhadap

kadar r a t a - r a t a s t e r o l t o t a l (mg/g) d a r i
sampel daun muda tanaman Solanum w r lK h t ll
Benth, Pengambilan I I .

?k
06.00 09.00 12,00 15.00 18.00 21,00

Gambar 28. Histogram kadar ra ta -ra ta s t e r o l to ta l

(£222) dan kadar ra ta -ra ta k lo r o i'il to
ta l ( C I), dalam berbagai in te r v a l wak
tu dari sampel daun tua tanaman solnnnm
w rig h tii Benth, Pengambilan I .

75
3.0
2,8
2,6
2.4
2,2
(mg/g)
2 .0
1, 8
rata-rata
1,6
1.4
1,2
Kadar
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0
06.00 09.00 12.00 15.00 18.00 21.00
Gambar* 29. Histogram kadar ra ta -ra ta s te r o l to ta l

) dan kadar rat&*rata k l o r o f i l to
ta l ( 1 \\ dalam berbagai in te r v a l vak-
tu dari sampel daun tua tanaman Solanum
w riR h til Benth, Pengambilan I I .

76
3.0
2,8
2,6
2.4
2,2
(mg/g)
2.0
1,8
rata-rata
1,6
1.4
1,2
Kadar
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
Gambar 30 . Histogram kadar ra ta -ra ta s t e r o l to ta l

) dan kadar ra ta -ra ta k l o r o f i l to
ta l ((_ .J) dalam berbagai in te r v a l wak
tu dari sampel daun muda tanaman Sola
num w r ig h tii Benth, Pengambilan I .

77
3.0
2,8
2,6
2.4
2,2
( S/Sm)
2 .0
1,8
1,6
1.4
« 1,2
•3
3 i,o
0,8
0,6
0,4
0,2
Waktu pengambilan (p u k u l)
Gambar 3-1 • Histogram kadar r a t a - r a t a s t e r o l to ta l

) dan kadar r a t a - r a t a k l o r o f i l to
ta l ( I n dalam b erb a ga i i n t e r v a l wak
tu d a r i sampel daun muda tanaman s o la
num w r iK h t ii Benth, Pengambilan I I .

BAB V
PiMBAHASAN
Dalam p en elitia n i n i digunakan bagian daun karena

berdasarkan h a sil p en elitia n terdahulu terhadap tanaman
Solanum species dilaporkan bahwa biosin tesa solasodina ber
langsung di daun dan h a s il biosin tesa solasodina tersebut
dipindah ke ouah sebagai tempat akumulasinya. (13) Dan ber
dasarkan p e n e litia n selanjutnya dilaporkan pada daun Sola
num species juga mengandung alk aloid a solasodina. (7 ) Se-
hingga dengan mengetahui kadar solasodina pada aaun diha -
rapkan dapat mengetahui waktu terjadin ya biosin tesa solaso
dina, akumulasinya serta ke«ndungan solasodina pada daun ta
naman Solanum w rig h tii Benth* Dan dengan membedakan antara
daun tua dan daun muda dimaksudkan untuk mengetahui kemung
kinan pengaruh perbedaan kadar k l o r o f i l terhadap kandungan
solasodina.
Ekstraksi ternadap serbuk daun dilakukan tig a tahap.
Pada tahap pertama digunakan pelarut petroleum e te r yang
diharapkan dapat menarik za t-za t yang dapat la ru t dalam pe
troleum e te r s ep erti s te r o l, leuiak dan l i l i n .
Tahapan selanjutnya adalah ekstraksi aengan aseton.
Setelah dilakukan ekstraksi dengan aseton untuk membebas -
kan solasodina dari ikatan dalam bentuk glikosidanya ( g l i
koalkaloida ) , dilakukan h ld ro lis a dengan asam k lorid a 2 H
sehingga didapatkan solasodina dalam bentuk bebasnya dan
gu la. Setelah it u dilakukan penetralan dengan penambahan
78

79
natrium hidroksida 10% sampai mendekati pH sepuluh untuk

mempertahankan solasodina dalam bentuk bebasnya sehingga
mempermudah penarikan solasodina selanjutnya dengan pela-
rut yang le b ih polar ya itu kloroform.
Ekstraksi dengan kloroform dilakukan balk terhadap
f i l t r a t dari h a s il h io ro lis a maupun residunya, oimana diha
rapkan akan aiaapatkan solasodina sebanyak-banyaknya (agar
eKstraksi sempurna).
Dari h a s il u ji k u a lita tir dengan kromatografi la p i-
san t ip is terhadap fase kloroform ternyata tidak terdetek-
s i aaanya solasodina* Hal in i mungkin karena tidak adanya
s e l- s e l knubus pada daun sebagai tempat akumulasi solasodi
na sep erti pada s e l- s e l buah. Sedangkan dari h a s il p e n e li-
tian Tarigan p. terhadap Solanum species yang la in d ilap or
kan pada daun didapatkan kandungan solasodina. (7 ) Maka di
duga mekanisme akumulasi solasodina pada tanaman Solanum
w rig h tii Benth berbeda dengan je n is tanaman Solanum yang
lainnya. Dan dari h a sil p en elitia n Agus S. yang sedang ber
langsung terhadap ranting tanaman Solanum w rjg h til Benth
oilaporkan bahwa solasodina didapatkan pada pukul 12.00,
15*00, 18.00 dan 21*00. B erarti pada waictu tersebut solaso
dina yang d ib iosin tesa ui daun kemungkinan segera aipindah
kan ke buah sebagai tempat akumulasi melewati ranting.
Sedangkan dari h a s il penetapan kadar k l o r o f il dida
patkan peningkatan dan penurunan kadar k l o r o f i l pada in te r
va l waktu pengambilan pukul 06.00, 09*00, 12 *00, 15*00,
18.00 daa 21*00. Dan pada sampel daun yang mengandung k lo-

50
r o f i l yang tin g g i tetap tidak didapatkan kandungan solaso

dina. Hal in i tidak menunjukkaa hubungan antara kadar k lo
r o f i l dengan. solasodina s e p e rti p en elitia n Bnke a. dan
E Llert U. yang melaporkan pada kultur kalus Solanum dulca
mara dimana semakin. banyak kadar k l o r o f i l semakin mening-
kat kadar solasodina yang didapatkan. (11) Dan juga dari
h a s il penetapan kadar s te r o l tidak didapatkan hubungan an
tara kadar s te ro l to ta l dengan kadar k l o r o f i l yang didapat
kan s ep erti te r lih a t pada histogram ( Gb. 28, 29, 30 dan
31 ) . B era rti kemungkinan k lo r o f il hanya berpengaruh lang-
sung terhadap proses I'otosintesa, dimana dengan tingginya
kadar k l o r o f i l diharapkan proses fotosin tesa akan ■mening-
kat tetap i belum tentu d iik u ti proses biosin tesa senyawa
metaboli't sekunder yang meningkat pula.
H asil u ji k u a lit a t if dengan kromatografi lapisan t i
pis terhadap fase petroleum eter didapatkan bercak noda da
r l sampel daun yang berwarna ungu merah setelah disemprot
dengan penampak noda asam s u lfa t pekat : metanol ( 1;t ) .
Dan senyawa yang berh asil d iid e n tifik a s i adalah senyawa go
longan s te r o l, sebab warna dan harga Rf dari noda sampel
sama dengan pembanding k o le s te r o l. Setelah dilakukan pengu
kuran kadar s te r o l to ta l dengan Densitometer didapatkan ha
s i l yang berbeda dari berbagai in te rv a l waktu pengambilan.
Kadar s te r o l to ta l terendah didapatkan pada sampel dengan
pengambilan pukul 12.00 dan kadar s te ro l to ta l te r tin g g i
didapatkan pada-sampel dengan pengambilan pukul 21.00, hal
i n i te r ja d i baik terhadap sampel daun tua maupun.-. sajnpel

81
daun. muda. Terjadinya penurunan kadar s te r o l to ta l . pada

sampel dengan pengambilan pukul 12,00 kemungkinan disebab-
kan karena adanya proses biosin tesa senyawa la in s e p e rti
diosgenin, solasodina yang merabutuhkan . _senyaw^. go^Longan
s te r o l untuk proses biosintesanya yang kemungkinan berlang
sung setelah proses foto sin tesa sek ita r pukul 12.00. Dan
terjadinya peningkatatt kadar s te r o l to ta l pada sampel de
ngan pengambilan pukul 21.00 kemungkinan disebabkan telah
berakhirnya proses biosin tesa senyawa la in tersebut yang
memerlukan senyawa golongan s te ro l untuk proses -biosintesa
nya seningga te rja d i peningkatan kadar s te r o l t o t a l. K«.-
mungkinan la in adanya perbedaan kadar s te ro l to ta l tcarena
adanya mekanisme transport senyawa s te ro l dari daun ke ba-
gian la in dari tanaman untuk d ib iosin tesa menjadi senyawa
yang la in misalnya solasodina pada berbagai in te rv a l wak
tu yang berbeda.
■ Maka dugaan la in tidak terdeteksinya solasodina pada
daun tanaman Solanum w rig h tii Benth karena kemungkinan iada^
nya transport senyawa s te ro l dari daun ke bagian la in dari
tanaman s ep erti buah, akar, ranting maupun batang yang se-
lanjutnya senyawa s te r o l tersebut dibiosin tesa menjadi so
lasodina. Hekanisme i n i serupa dengan mekanisme biosintesa
tomatin dimana dari daun ditransport s te r o l yang selan ju t-
nya d ibiosin tesa menjadi tomatin pada buah. (14)

BAB VI
KESIMPULAtf
D a ri h a s il p e n e lit ia n yang te la h ailakukan dapat d±-
simpulkan ;
- pada daun tanaman Solanum w r ig h t li Benth. tid a k te r d e te k -
e i adanya so la so d in a dengan u j i K rom atografi Lapisan £L-
p is .
- pada daun tanaman Solanum w r ig h t ii Benth didapatkan ka
dar r a t a - r a t a s t e r o l t o t a l terendah sebesar 0,3924 mg/g
pada sampel dengan pengambilan pukul 12.00 dan kadar ra
ta -ra ta s te r o l t o t a l t e r t in g g i seb esar 2,7526 mg/g pada
sampel dengan pengambilan pukul 21*00.
82

BAB V I I
SABAN. - SARAN.
D ari h a s i l . p e n e l i t i a n yang te la h dilakukan dapat d i -
ajukan saran seb aga i b e rik u t ;
- P e r lu dilakukan p e n e lit ia n le b ih la n ju t ten tang kandung-
an senyawa s t e r o i d pada daun tanaman, Solanum w r ig h t ii
Benth untuk m em pelajari b io s in te s a s o la s o d in a le b ih la n
ju t .
83

RINGKASAH
Telah dilakukan p en elitia n terhadap daun tanaman

Solanum w rig h tii Benth yang dilakukan pengambilan pada bu
lan Maret dan A p ril 1990 dari Kebun Raya Cabang Purwodadi
Kabupaten Pasuruan, Jawa Timur.
Daun diambil dengan berbagai in te r v a l waktu pengambi
lan yaitu pukul 06.00, 09 . 00 , 12.00, 15.00, 15.00 dan pu
kul 21.00. pengambilan daun dibedakan antara daun yang mu
da dan daun tua. Daun yang diperoleh dibersihkan dari koto
ran, dikeringkan dengan sinar matahari, ditumbuk dijadikan
serbuk kemudian diayak dan dilanjutkan ek strak si.
Ekstraksi dilakukan dengan tig a pelaru t, yaitu petro
leum e te r , aseton dan kloroform . DLtimbang 3,000 gram ser-
buk daun Solanum w r ig h tii Benth, kemudian dimasukkan keda-
lam labu d e e t ila s i 30 ml. D ireflu ks dengan 25 ml petroleum
e te r selama dua Jam. setelah it u disaring dengan corong
Buchner, f i l t r a t yang didapatkan dikumpulkan sedangkan re-
s i du direflu kfi kembali dengan 25 ml petroleum e te r . Eks-
traksi diulang tig a k a li masing-masing selama dua jam.
F L ltra t yang didapatkan (fa s e petroleum e te r ) dilaku
kan u ji k u a lit a t if dan dilanjutkan dengan u ji k u a n tita tif.
Residu d ireflu k s kembali dengan 25 ml aseton selama dua
jam kemudian disaring melalui Corong Buchner, f i l t r a t d i-
tampung, residu d ireflu k s kembali dengan 25 ml aseton. Eks
tra k si dengan aseton i n i diulang tig a k a li masing-masing
selama dua jam.
84

85
Resiau h a s il ekstraksi dengan aseton d ih drolisa de -

ngan asam k lo rid a 2 N, dididihkan dan selanjutnya d in etra l
kan dengan natrium hidroksida 10%. setelah n etra l disaring
dengan corong Buchner dan f i l t r a t yang didapatkan dieks -
tra k si dengan kloroform menggunakan corong pisah. Ekstrak
s i dengan kloroform dilakukan pula terhadap residu h a s il
h id r o lis a . Residu h a s il h id ro lis a i n i ditambah sejumlah
tertentu kloroform sehingga residu tersebut terendam. Sete
lah diekstraksi selama dua jam make*. d isarin g m elalui co -
rong Buchner. F i l t r a t yang didapat dicampur dengan f i l t r a t
h a s il h id ro lis a dan akhimya campuran f i l t r a t (fa s e k loro
form in i dilakukan u ji k u a lit a t if.
Dilakukan penetapan susut pengeringan. bertujuanuntuk

memperhitungkan senyawa ste ro id yang d is e lid ik i dengan per
nyataan prosentase dari bobot kering bahan. BLtimbang ser
buk daun 0,500 gram kemudian dimasukkan kedalam krus porse
l i n yang sudah ditimbang konstan. Kemudian dipanaskan di
lemari pengering pada suhu 105° C sampai bobot konstan.
Dilakukan pula penetapan kadar k l o r o f i l dengan menim
bang 0,100 gram serbuk daun dan dimasukkan kedalam beaker
glass 100 ml, tambahkan aseton kedalamnya sampai warna pa
da jaringan te rle p a s . Tambahkan kalsium karbonat, saring
ekstrak, masukkan labu ukur 100 ml. B ilas dengan aseton
sampai tidak berwarna dan tambahkan aseton sampai g a ris
tanda. BLukur absorpsinya pada panjang gelombang 66> nm
dan 645

86
Dari h a s il u ji k u a lit a t if dengan Kromatografi Lapis

an El.pis terhadap fas© kloroform, ternyata tidak terdetek-
s i adanya solasodina. Eluen yang digunakan adalah kloro -
form : metanol <19 : 1) dengan penampak noda Dragendorf
spray.
Pada u ji k u a lit a t if dengan Kromatografi Lapisan T i
p is terhadap fase petroleum e te r digunakan eluen heksan :
e t i l asetat ( 7 : 3 ) dan penampak noda asam s u lfa t pekat :
metanol (1 : 1 ), didapatkan noda kromatogram yang berwarna
ungu merah s e p e rti ditunjukkan standart k o le s te r o l. Sete -
lah dilakukan pengukuran harga Bf nya, kemudian d ila n ju t -
kan penetapan kadar s te r o l totalnya dengan Densitom etri.
H asil pengukuran fase petroleum e ter secara kuantita
t i f dengan Densitometri menunjukkan h a s il dimana te rja d i
penurunan kadar s t e r o l to ta l dari pengambilan pukul 06.00
sampai pukul 12.00, kemudian te r ja d i penlngkatan kadar ste
r o l to ta l la g i sampai pukul 21.00.

DAFTAR PUSTAKA
1. Su tarjadi, (1986), Usaha Eksplorasi Sumber S teroid dari

Tumhuhan, Simposium P en elitia n Tumbuhan Obat V dan Ex p o
Jamu 1986, Surabaya, h a l. 1-8.

2 . Telek, K .L ., (1977), Economic Botany 51. pp. 120-128.
3* Anonim, (1982), Sinopsis seminar Nasional Produksi Ba-
han Baku Kontrasepsi Oral, BKKBN, Jakrta, h al. 1-3*
if. Hakim, A. Tatang., (1973), Prospek A lk a loid Sebagai Sum
bar Bahan Baku Hormon Steroid di Indonesia, Simposium
P en elitia n Tanaman Obat I . Bagian Farmakologi Departe-
men F is io lo g i dan Farmakologi FKH IPB, h a l, 103-109.
5. Berndt, (1982), S ito s te r o l and Stigm astorol as Precur
sor fo r production o f Contraceptives, Sinopsis Seminar
Nasional Produksi Bahan Baku Kontrasepsi Oral, rkkbn ,
Jakarta, p. 77.
6. Isnaeni, (1986), Optimasi Pertumbuhan Kalus dan Id e n ti-
fik a s i S teroid dari Solanum mammosum L ., Thesis. Univer
s ita s Airlangga Surabaya, h a l. 1-9, 37-39, 99.
7. Tarigan P ., (.1980), Beberapa Aspek Kimia Sapogenin d i-
In d on esia ( Dalam Ranska Mencari Bahan Baku S ta r o ld ) ,
penerbit Alumni Bandung.
8. Wahjudi, (1983), Pengaruh Diameter Buah solanum wrigh -
t i i Benth Terhadap Kadar Solasodina, S k rip s i. Fakultas
Farmasi, Dniversitas Airlangga Surabaya.
87

9* Handayani R ., (1990), Percobaan Induksi Pembentukan So

lasodina pada Kultur Kalus Solanum _w r ig h tii Benth ,
S k rip si. Fakultas Farmasi, U niversitas Airlangga Sura
baya.
10. Sulfiah A ., 0989)> Ueaha percobaan Induksi pembentu-
kan Solasodina pada Kalus Solanum indicum L ., S k rip s i.
Fakultas Farmasi, U niversitas Airlangga Surabaya.
11. Emke A*, E ile r t U., (1986), S tero id a l A lk aloid s'an TLs
sue Cultures and Regenerated Plants o f Solanum dulca
mara. Plant C ell Reports 5. pp. 31-34.
12. N ig r a , H.M., e t a l . , (1987), P ro d u ction o f s o la s o d in a
by C a l li from D iff e r e n t P a rts o f Solanum e le a g n ifo liu m
Cav., P la n t C e ll R eports 6. pp. 135-137.

13* Chowdhury A .R ., Prasad R.N. and Aminuddin., (1979) ,
Quart J . Crude Drugs R e s ., 17, (3 -4 ), PP. 137-138.
14. E ls a d ig A .E ., and James G .R ., (1983), B io s y n th e s is and

D egradation o f -Tom atihe in D evelop in g Tomato F r u its ,
P h y to ch em istry. V o l. 24, N o. 2, G reat B r it a in , pp. 253-
257.
15. Backer C .A ., and Bakhuizen Van Den Brink R .C ., (1963),
Flora o f Java. V ol. 2, Angiospermae, N.V.P. Noordhoof-
Groningen-The Netherlands, pp. 472, 474*
16. Lawrence G.H.M., (1951), Taxonomy o f V ascu lar P la n t s .
The M acm illan Company, pp. 676, 693-694.
17. Xkan R . , (1969), N a tu ral P ro d u cts. Academic p re s s , Lon

don, New York and San F ra n s is c o , pp. 103-112.

89
18* Manitto P ., (1981), B io s in te s is o f Natural Products,

E llis Horwood Lim ited, England, p« 314*
19 . T yler V .E ., Brady L .R ., Robbers J .E ., (1976), Pharma
cognosy. seventh e d itio n , Lea and Febiger, p h ilad el -
phia, pp. 197-212.
20* Higuchi, Hanssen B., (1961), Pharmaceutical Analysis ,
In terscien ce Publishers, John Wiley & Sons, Mew York -
London - Sydney, pp. 119-125.
21. Windholz M., e t a l . , (197b), The Merck Index. An Ency

clopedia o f Chemical and Drugs, nine e d itio n , Merck
and Co in c . Rahway New York USA.f &*+83»
22. Indrayanto G., (1983), Steroide und Triterpene in Z e ll
Kulturen, Fakultat Fur Chemie und pharmazie, der Eber
hard- K a rls-U n iversita t zu Tubingen, p. , DLsserta-
tio n .
23. Fessenden R .J ., Fessenden J .S ., (198*0, Klmla Q-rganik
J i l i d dua. Edisi Kedua, Penerbit Erlangga, Jakarta ,
h a l. W - « 0 .
2i*. Anonym, (1968), Merck index. An Encyclopedia o f Chemi
cal Drugs, eigh t e d itio n , Merck and Co in c . Rahway New
York USA.
25« Harborne J .B ., (1982), Phytochemical Methods , Chapman
and H all, London, Toppan Company, Lim ited, Tokyo Japan
pp. 20if-208.
26. Claus E .P ., Tyler V .E ., Brady L .R ., (1970), Pharmacog

nosy. sixth e d itio n , Lea and Febiger, Philadelphia ,
PP.

90
27* Heftman E ., (1975)» Chromatography, th ird e d itio n , Van

Nostrand Reinhold Company, New York, Cincinati Toron
to, London , Melbourne, pp. 81-82, 638-648*
28. Stahl E ., (1969)* Thin Layer Chromatography. Springer
In tern a tion a l Student, second e d itio n , Springer, Ver-
la g , B erlin , Heidelberg, New York.
29* Tauchstone, J . f sherma, J. (ED) , (1979), Densi tome try
in Thin Layer Chromatography, John W illey and. Sons ,
New York, pp. 18-22.
30. Shimadzu Corporation, Instrumental Manual, shimadzu Du
a l Wavelength Thin Layer Chromato Scanner, Japan.
31. Mulya Muhammad, (1981), Pemakaian 11 Thin Layer Chroma
to-Scanner " Untuk Analisa K u a n tita tif, Buie tin ISFI ,
Jatim, Tahun ke XV, 1, 2, h a l. 8-12.
32. Bambang Soekarjo, Siswandono, (1980), Analisa Kuantita
t i f Dengan Kromatografi Lapisan H p is , Buietin ISFI ,
Jatim, Tahun ;ke X II, 1, 2, h a l. 8-12.
33* Indrayanto G., V oelter and E. Reinhard., (1983), Stero
id Und Triterpen in Z e ll Kulturen, Chemiker Zaitung ,
107, 7/8 , pp. 23 8-239.
34. Farmakope Indonesia. (1979)> Edisi I I I , Departemen Ke-
sehatan Republik Indonesia, h al, 807.

Lampiran 1 •
Asaa asetat — ^ A s e t i l Ko A ----------^-A setoasetil ko A
Asam mevalonat ^-------Hidroksi m etil g lu t a r il Ko A
4/
Asam-5 phosphomevalonat------- Âsam pirophobpho-3 Phospho
m evalonat
1
•3 is o pentenil pirophosphat
3 ,3 d im e t il a l i i pirophosphat
vv'
•Geranil piroph osph at
F a r s o n il piroph osph at — ^ S q u a le n
L
n
Oksido squalen
ion karbonium interm ediat
S ik lo a r te n o l
vV
L a n o s te ro l - ^ K o le s t e r o l
B io s in te s a s te r o id a

92
Lampiran 2«
Squalen------ ^ S q u a le n ,-----^ C y c lo a r te n o l ^ 2 4 -M e th y le n
2 ,3 -S x p o x id c y c lo a r te n o l
I
C y c lo eu ca len o l
O b t u s if o lio l
Lophenol^----- 24-Me th yle n lo p h e n o l 2 4 -X th y lid en

lo p h en ol
C h o le s te rin
Ni/
Zk-Me thylen
X
is o fu c o s t e r in
c h o le s t e r in
nk nU
26-H ydroxy- Campesterin S it o s t e r in
c k o le s t e r in
N/
B r a s s ic a s te r in S tigm a 6 terin
26 Amino-,}6 ^-,20/- 26-, 16^8-,20^-

dihydroxycholesterin Trihydroxycholesterin
si/
S olasod in a D losgen in
B io s in te s a s o la so d in a

93
Serbuk kering daun

Solanum w rig h tii Benth
+ petroleum eter
d ire flu k e Z jam (3 k a li)
Fase petroleum e ter Residu
u ji kuali- + aseton
ta tif d ireflu k s
Z jam
'V O k a li)
S te ro l
Vk
Fase aseton Residu
__________ l _ - _
u ji kua h id ro lis a h id ro lis a
l i ta tif HC1 Z N, HC1 Z N,
Ekstraksi Ekstraksi
Glikosida kloroform kloroform
s te rin
Fase kloroform
Fase kloroform Fase a ir u ji k u a li-

ta tif
u ji kua
l i ta tif
S tero l S teroid a lk a lo id
Skema ekstraksi

94
Lampiran 4*
Contoh perhitungan kadar s t e r o l.

Sesuai dengan Gambar 14, sampel serbuk daun pengam-
btlan pukul 06.00 muda, Pengambilan I dan pengukuran I I di
dapatkan data ebb. :
Luas area ; 19361,62
Dengan persamaan ga ris re g re s i :
y = 2055,709*** - 1257,0021
maka didapatkan jumlah s te r o l to ta l = 10,0299 ug.
jumlaJa penotolan dari sampel daun muda = 20 u l.
Jaai dalam 5 ^1 ekstrak :
5000 ul
- x 10,0299 ug
15 ul
= 2507,^75 ug.
Kadar s te r o l to ta l dalam 2,6910 gram serouk daun kering ;
2507,475 . 10-3 mg
2,6910 g
= 0,9318 mg/g.

9.5
Lampi ran 5.
HARGA KOiiFISIEN KORELASI ( r ) PADA. DJ3RAJAT KKPERCAYAAN

5# DAN \%
DFGREES O f 5 1 DECREES Or 5 1
Ffttl&OM (Of) PE RC EN T PERCENT F R E E D O M (Df) rCRCEHT WtCSNl
1 .997 1 COO 24 .368 .*95

2 .950 .990 25 .391 .487
3 .878 -T59 26 .374 .478
4 .811 .917 27 .367 .470
5 .754 .874 28 .361 .463
6 .707 .634 29 ,355 .456
7 .666 .798 30 .349 .449
8 .622 .765 35 .525 .418
9 .602 .735 40 .304 .393
JO .576 .708 48 .288 .372
11 .553 .684 50 .273 .354
12 .532 .661 60 .250 .325 '
13 -5M .641 70 .232 .302
14 .497 .623 eo .217 .283
15 .4*2 .606 90 .205 .267
16 .466 .590 100 .195 .254
17 .456 .575 125 .174 .228
is .444 .561 150 .159 .208
19 .433 .549 200 .138 .181
20 .423 .537 300 .113 .148
31 .413 .526 400 .098 .128
22 .404 .515 500 .088 .115
23 .396 .505 >000 .062 .081
HLkutip d a r i : R it e c h e l WA. Handbook o f Basic
P h a rm a cok in etic. 2n<* Ed, 1980.

Binder1 PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Binder1 PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

ADLN – PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

PENETAPAN KADAR STEROID PADA DAUN

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

PENETAPAN KADAR STEROID

D isetujui oleh pembimbing

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

KATA P*^ GANTAR

Dengan memanjatkan p u ji syukur kehadirat Allah SWT

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

- Bapak DR. M. Zainuadin, Kepala Laboratoriurn Instrumen

Surabaya, Desember 1990

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

5* Hasil penentuan panjang gelombang maksimum stan

9* Kurva baku larutan standart k o le s te ro l (ug) ter

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

e il p e n g u k u ra n sam pel fa se p e t r o le u m e te r daun

d ar sam pel fa se p e t r o le u m e te r daun tu a S o la n u m

s il p e n g u k u ra n sam pel fa se p e t r o le u m e te r daun

d ar sam p el fa se p e t r o le u m e te r daun m uda S o la ­

num w r ig h t ii B e n th ................................... . . . . . . . .................... . . . . 62

s il p e n g u k u ra n sam pel fa se p e t r o le u m e te r daun

m uda S o la n u m w r iK h t ii B e n th , P e n g a m o ila n I I , Pe,

dar sam p el fa se p e t r o le u m e te r daun m uda s o la ­

num w r iR h t ii Ben th .............................................., , , .................... ......... • , 65

Zk* K u rv a w a k tu p e n g a m b ila n ( p u k u l) te rh a d a p kad ar

r a t a -r a t a s te ro l to ta l (m g /g ) d a ri sam pel daun

r a t a -r a t a s te ro l to ta l (m g /g ) d a ri sam pel daun

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

5. H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase

6 . H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase

3. H asil penetapan kadar s te ro l to ta l sampel fase

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

5 . Harga k oerisien k orela si ( r ) pada derajat keper-

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

1 • Latar belakang masalah.

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

nya solan iarin a, tomatidina, solasodina. (4 ) Demikian

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

P en elitia n yang la in dari Handayani R. dan s u lfi

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

Dan dari h a sil p en elitia n Elsadig a .B. dan James

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

Hal in i menarik untuk d i t e l i t i le b ih la n ju t ten-

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

1. Tin.iauan umum tanaman Solanum.

2. Solanum w rig h tii Benth.

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

Warna bunga ungu dan setelah 3 sampai k hari berubah men

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

induk jenuh dari senyawa ste ro id disebut gonan.

Struktur molekul in t i stero id

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

Serangkaian reaksi in i dapat berlangsung tergantung pa

3 .3. Cara penetapan kadar s te r o id .

SKRIPSI Penetapan Kadar Steroid Pada Daun Tanaman Solanum M. Imron

d ar sam p el fa se p e t r o le u m e te r daun m uda S o la

dar sam p el fa se p e t r o le u m e te r daun m uda s o la

A645 Ab63 adalah a>sorban pada panjang gelom

Untuk harga X = 0, maka perbandingan in te n s ita s caha

34« Penetapan kadar k l o r o f i l

agar fase geraknya menguap. Setelah it u disemprot de

3 *6 .3» Penentuan pan.iang gelombang maksimum k o le s te ro l de

3 .7 .3 . Penentuan pan.lang gelombang maksimum solasodina de