‘ORGANISMOS TRANSGENICOS

TRABAJO COLABORATIVO

ELABORADO POR:

DIEGO FERNANDO RODRIGUEZ J.: CODIGO: 16549341.

GRUPO: 203022_4

TUTOR DEL CURSO:

SANDRA PATRICIA MONTENEGRO

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

UNAD – CEAD – PALMIRA

 OCTUBRE – 2019

Estudio de caso

Marco, estudiante del curso Organismos Transgénicos, discutía con Felipe acerca de la
enzima poligalacturonasa, que digiere la pared celular vegetal. Marco comentó que es la
principal responsable por la maduración de frutos como el tomate y preguntó a Felipe qué se
podría hacer para retardar la maduración y evitar las pérdidas durante el almacenamiento.

Felipe anotó que conocía una técnica en la cual el gen que codifica la enzima citada, es
insertado de manera invertida en el genoma de una planta de tomate, biotecnología conocida
como "construcción anti-sentido". Esta transformación genética del tomate consiste en
insertar un gen en orientación opuesta a la normal, lo que determina un RNA (antisentido)
que se empareja con el RNA del gen homólogo normal de la planta. Esto dificulta la
traducción de este RNAm por los ribosomas y favorece su degradación. De esta manera se
puede anular o inhibir el fenotipo dependiente del gen que se quiere controlar.

1. ¿Cuál es el resultado de la transcripción de la cadena de ADN en sentido y de

la cadena de ADN en antisentido que se genera a partir del siguiente segmento
molde de ADN:
3'___ATTCGGC___TAAGCCG___TAAGCCG___5'(DNA)

R/

3'___ATTCGGC___TAAGCCG___TAAGCCG___5'(DNA)

5´___TAAGCCG___ATTCGGC___ATTCGGC___3´ gen natural

5´___UAAGCCG___AUUCGGC___AUUCGGC___3´ (RNA m del segmento molde de

DNA) en lugar de timina (T), el ARN usa uracilo (U)

3'___ATTCGGC___TAAGCCG___TAAGCCG___5' (RNA antimensajero)

 2. ¿Cómo ocurre la interacción entre las dos moléculas de RNA (sentido y
antisentido)? Apóyese de una imagen (citar mediante normas APA) que le permita
ejemplificar las interacciones moleculares que ocurren entre los nucleótidos de
ambas moléculas para lograr la conformación de la doble hélice de RNA (puentes
de hidrógeno). Explique la imagen.

Curtis Biología Capítulo 10. El flujo de información genética: los caminos del DNA a
la proteína. (Fig. 10-6. Transcripción del DNA ) Recuperado de:
http://www.curtisbiologia.com/node/114

TRANSCRIPCIÓN DEL DNA. En la región del promotor, punto de unión de la enzima

RNA polimerasa, la doble hélice de DNA se abre y, a medida que la RNA polimerasa
avanza a lo largo de la molécula de DNA, se separan las dos cadenas. Los ribonucleótidos,
que constituyen los bloques estructurales, se ensamblan en la dirección 5’ a 3’ a medida que
la enzima lee la cadena molde de DNA. Nótese que la cadena de RNA recién sintetizada es
complementaria, no idéntica, a la cadena molde a partir de la cual se transcribe; su
secuencia, sin embargo, es idéntica a la cadena codificante de DNA (no transcrita), excepto
por un detalle: en el RNA, la timina (T) se reemplaza por uracilo (U). El RNA recién
sintetizado se separa de la cadena molde de DNA

3. ¿Qué fenómeno ocurrirá como resultado del encuentro, en el citoplasma, entre

esos dos RNA (sentido y antisentido), determinados en el ítem anterior?, ¿cuál
sería la consecuencia para el proceso de traducción?
El ARN es el ácido ribonucleico de transferir el código genético. ... normal. al momento
que estos dos mensajeros se encuentran al mismo tiempo en el ... formado un ADN de
doble cadena y la traducción seria inhibido. Entre esos dos RNA... la enzima. . Su labor es
comunicar la información genética que procede del ADN.

Traducción: la maquinaria de producción de proteínas, llamada ribosoma, lee la secuencia

de ARNm y la traduce en la secuencia de aminoácidos de la proteína. El ribosoma
comienza en la secuencia AUG, luego lee tres nucleótidos a la vez. Cada codón de tres
nucleótidos especifica un aminoácido particular. Los codones de "parada" (UAA, UAG y
UGA) le dicen al ribosoma que la proteína está completa.

Fig. 11-14. MECANISMO DEL NMD. Durante el procesamiento del mRNA, diversas
proteínas se unen cerca de cada unión exón-exón conformando un complejo EJC
(exonjunction complexo complejos de unión a exones). (a)Si el mRNA no contiene
codones de terminación prematuros, esas proteínas son desplazadas por el ribosoma en la
primera ronda de traducción. (b)Por el contrario, si existen codones de terminación
prematuros, por ejemplo UAA, el ribosoma no podrá desplazar esas proteínas. Esto activa
el mecanismo de NMD (nonsense-mediated mRNA decay)y provoca la pérdida del CAP y
la desadenilación (pérdida de la cola poli-A), lo que produce la degradación del mRNA

4. ¿Cuál es el número EC (Enzyme Commission numbers) correspondiente a la

enzima poligalacturonasa? Mencione el enlace químico que hidroliza la enzima
poligalacturonasa.

a. Los números EC (Enzyme Commission numbers) son un esquema de clasificación

numérica para las enzimas, con base en las reacciones químicas que catalizan. Cada código
de enzimas consiste en las dos letras EC seguidas por 4 números separados por puntos.
Estos números representan una clasificación progresivamente más específica

La poligalacturonasa es una enzima hidrolasa (EC 3.2.1.15, CAS 9032-75-1 ), endo o

exoglucanasa, que inicia el corte hidrolítico por el extremo no reductor del polímero de
pectina, su sustrato, especialmente la de bajo metoxilo. Se encuentra en algunas bacterias,
hongos y levaduras, fundamentalmente fitopatógenos, y es de mucha aplicación en la
industria del zumo. La poligalacturonasa se encuentra en los frutos de plantas como el
tomate.
b. Las enzimas poligalacturonasas [poli(1,4-α-Dgalacturonido)] glicanohidrolasa
hidrolizan los enlaces α-1,4 glicosídicos entre residuos de ácido Dgalacturónico adyacentes,
y actúan específicamente en el homogalacturonano o en las “partes lisas” de la molécula de
pectina /16/. Su ataque ocurre al azar, promoviendo una rápida disminución del peso
molecular de la pectina (25-360 kDa) con una mínima liberación de extremos reductores.
/2/ Son la clase más abundante y estudiada de enzimas pécticas, encontrándose
ampliamente distribuidas en plantas y microorganismos

5. Con esta tecnología la transformación genética es realizada de modo que la

expresión del "gen anti-sentido" ocurra sólo en los tejidos del ovario floral.
¿qué ventajas tiene para el productor agrícola que el gen anti-sentido se
exprese únicamente en el tejido de ovario floral?

Ventajas

 La expresión del gen de poligalacturonasa está regulada por el desarrollo en tomate.

La expresión está restringida a la maduración de frutos y resultados en una
acumulación rápida de ARNm de PG a niveles que puede representar 1-2% del
ARNm total en frutos rojos maduros.
 Se ha demostrado un aumento correspondiente en la enzima PG inmunológicamente
y por la actividad enzimática. Ademas la poligalacturonasa [PG; poli (1,4-a-D-
galacturonide) glycanhydrolase, EC 3.2.1.15] (3-5). PG está involucrado en la
degradación de la pared celular y es la enzima más ampliamente estudiada
involucrada en la maduración.
 En los experimentos presentados aquí, la síntesis constitutiva de ARN antisentido
PG en plantas de tomate transgénicas de manera efectiva inhibió la acumulación de
ARNm PG y enzimático actividad durante la maduración de la fruta. Este resultado
demuestra la Aplicación de la tecnología de ARN antisentido a la inhibición de un
gen vegetal endógeno a nivel de toda la planta.
 Los La reducción específica en la actividad de PG proporciona una fenocopia de
Mutantes deficientes en PG útiles para definir las funciones de la enzima durante la
maduración de la fruta.
 6. ¿Cuál es la principal ventaja para los productores de tomate que utilicen estas
plantas transgénicas?

Se ha demostrado un aumento correspondiente en la enzima PG inmunológicamente y por

la actividad enzimática. En los experimentos presentados aquí, la síntesis constitutiva de
ARN antisentido PG en plantas de tomate transgénicas de manera efectiva inhibió la
acumulación de ARNm PG y enzimático actividad durante la maduración de la fruta.

La expresión del gen de poligalacturonasa está regulada por el desarrollo en tomate. La

expresión está restringida a la maduración de la fruta y da como resultado una rápida
acumulación de ARNm de PG a niveles que puede representar 1-2% del ARNm total en
frutos rojos maduros.

El nivel de estado estacionario de PG mRNA en frutos de maduración de 1416-1 se redujo

en un 90% del nivel en fruta

Este resultado demuestra la Aplicación de la tecnología de ARN antisentido a la inhibición

de un gen vegetal endógeno a nivel de toda la planta.

Bibliografía

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Sección 3 - Los genes en acción: estructura, expresión y control de la información genética.
Recuperado de:
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Poligalacturonasa Tomado de: https://es.wikipedia.org/wiki/Poligalacturonasa
Número EC (2013) Tomado de:
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meros%20EC%20(Enzyme%20Commission,las%20reacciones%20qu%C3%ADmi
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