Spektrofotometer UV visible adalah metode analisis yang didasarkan pada pengukuran penyerapan

cahaya monokromatik oleh senyawa tidak berwarna didekat jalur spektrum ultraviolet (200-380nm).
Metode analisis fotometrik berdasarkan pada hukum Bouger-Lambert-Beer, yang menetapkan bahwa
penyerapan suatu larutan berbanding lurus dengan konsentrasi analit. Prinsip dasar dari pengoprasian
spektrofotometer yang meliputi wilayah UV terdiri dari cahaya interval panjang gelombang tertentu
melewati sel pada pelarut dan jatuh ke sel fotolistrik mengubah energi radiasi menjadi energi listrik yang
diukur dengan galvanometer.

operasi spektrofotometer yang meliputi wilayah UV terdiri dari cahaya interval tertentuSpektroskopi UV-
Visible didasarkan pada landasan teori yang kuat, lebih selektif, efisien, cepat dan metode analitik
reproducible yang dapat dikembangkan. Secara umum ada dua teknik analisis yaitu berapa banyak analit
dalam sampel (analisis kuantitatif) dan analit apa yang ada dalam sampel (analisis kualitatif) .Area di
bawah metode kurva adalah “area di bawah dua titik pada spektrum campuran berbanding lurus dengan
konsentrasi senyawa penting" sangat cocok untuk senyawa yang tidak terdapat puncak yang tajam atau
spektrum luas yang diperoleh. Analisis farmasi dengan Spektroskopi UV-Visible terdiri dari prosedur yang
diperlukan untuk menentukan "identitas, kekuatan, kualitas dan kemurnian" suatu senyawa.

Gugus yang menyerap sinar UV/Vis dinamakan gugus kromofor. Warna molekul yang intensif dinamakan
auxokrom tetapi tidak menyerap secara signifikan di wilayah 200-800nm, tetapi akan mempengaruhi
spektrum kromofor yang melekat. Kelompok auksokromik yang paling penting adalah OH, NH2, CH3 dan
NO2 dan sifat-sifatnya bersifat asam (fenolik) atau basa.

Instrumen radiasi sinar UV/Vis meliputi

1. Sumber (UV dan Visible)

2. Selektor panjang gelombang (monokromator)

3. Wadah sampel

4. Detektor

5. Pemroses sinyal dan pembacaan

Penggunaan spektrofotometer UV/VIS lebih banyak digunakan untuk pengujian dibandingkan

identifikasi. Kemampuan untuk menghitung konsentrasi yang sangat kecil (dari urutan 0,0001 mol dm-3)
dengan akurasi ekstrim. Hal tersebut merupakan hal penting, karena pada absorbansi larutan untuk
pengukuran kuantitatif karena keterbatasan instrumen dan interaksi zat terlarut yang bisa menyebabkan
penyimpangan dari hukum Beer-Lambert.

Kandungan jejak logam seperti mangan dalam baja, bisa ditentukan dengan terlebih dahulu mereaksikan
sampel dengan memasukkan logam ke dalam larutan sebagai ion. Ion kemudian dikomplekskan atau
dibuat untuk bereaksi sehingga berada dalam bentuk yang dapat diukur - misalnya mangan sebagai ion
manganat (VII)