1.

Meningkatkan Produksi
Karena pentingnya beberapa metabolit sekunder tanaman, upaya telah dilakukan
mempelajari kelayakan produksi mereka pada skala industri. Ini tidak selalu sederhana
proses karena sel-sel tanaman memiliki produktivitas yang relatif tidak stabil, sensitivitas
geser tinggi, tingkat pertumbuhan yang lambat, dan kebutuhan oksigen yang rendah [14].
Peningkatannya mencakup penggunaan bioreaktor berbagai ukuran dan fitur, dan kultur
suspensi sel adalah sistem kultur yang lebih baik memiliki beberapa keunggulan
dibandingkan dengan yang lain. Kesederhanaan, prediktabilitas, dan efisiensi tinggi di
mana metabolit dapat diisolasi dari biomassa atau media budidaya beberapa keunggulan
ini. Meskipun demikian, ada beberapa contoh penggunaan yang dibedakan jaringan
seperti pucuk dan embrio somatik [47].
Beberapa tonggak penting dalam produksi metabolit sekunder oleh kultur sel tanaman
adalah produksi shikonin [48] dan ginseng [49], dan contoh paling sukses proses
peningkatan mungkin adalah produksi taksol oleh Phyton Biotech Company (Jerman)
untuk memasok sebagian permintaan Perusahaan Bristol-Meyers Squibb selama tahun
2002 [50]. Phyton Biotech mengoperasikan fasilitas kultur sel tanaman cGMP terbesar di
Asia dunia yang dirancang untuk produksi Taxanes skala besar di 75.000 bioreaktor
ukuran L yang naik hingga 880.000 L per tahun [51]. Berberine, ginsenosides, shikonin,
scopolamine, dan Asam rosmarinic juga merupakan contoh metabolit sekunder tanaman
yang saat ini diproduksi di skala komersial
Beberapa faktor harus dipertimbangkan dalam meningkatkan produksi metabolit
sekunder menggunakan bioreaktor, yaitu optimalisasi kondisi kultur, pengukuran
produksi biomassa (terutama dengan kultur jaringan dan organ), dan sebagainya [52, 53].
Beberapa bioreaktor desain telah diuji dan digunakan untuk kultur sel tanaman. Beberapa
dari mereka seperti halnya reaktor tangki berpengaduk, reaktor kolom gelembung, reaktor
pengangkutan udara, dan reaktor pasang surut hanyalah perpanjangan dari kultur
mikroba. Untuk sel-sel tanaman dengan sensitivitas geser tinggi, Wang dan Zhong [54]
mengembangkan bioreaktor impeler sentrifugal yang didasarkan pada prinsip pompa
sentrifugal. "Reaktor gelombang" yang digerakkan secara mekanis, "" reaktor slug
bubble, " dan “reaktor arus bawah” juga memadai untuk sel sensitif tegangan geser tinggi
[14]. Di sisi lain, bioreaktor pengangkutan udara cocok untuk sel yang tidak terlalu peka
 terhadap geser untuk kultur akar berbulu dan adventif [14]. Pembaca yang tertarik dapat
menemukan yang lebih penting rincian tentang proses peningkatan dalam karya-karya
oleh Murphy et al. [14], Yue et al. [13], dan Isah et al. [3].
2. Sampel yang dipilih
Ada beberapa metabolit sekunder tumbuhan antara lain alkaloid, terpen, flavonoid, dan
glikosida, yang dapat diproduksi dengan menggunakan teknik kultur jaringan tanaman
strategi yang berbeda [3, 13, 14]. Dua contoh dipilih untuk dijelaskan dalam bab ini:
produksi senyawa antikanker yang penting dan produksi metabolit dari Lavandula spp.
2.1 Senyawa Antikanker
Seperti disebutkan sebelumnya dalam bab ini, lebih dari 60% obat antikanker secara
langsung atau tidak langsung berasal dari tanaman [7]. Pencarian senyawa antikanker
dari tanaman dimulai pada 1950 ketika alkaloid vinblastine dan vincristine dari
Catharanthus roseus (L.) G. Don dan podophyllotoxin dari Podophyllum spp.
ditemukan. Kanker Nasional Amerika Serikat Institute memprakarsai program
ekstensif pada tahun 1960 yang mengarah pada penemuan banyak kemotipe baru
dengan aktivitas sitotoksik [55], taxanes dan camptothecins menjadi beberapa contoh
[7]. Camptothecin, podophyllotoxin, taxol, vinblastine, atau vincristine adalah yang
paling penting senyawa antikanker yang diturunkan dari tanaman [19, 56]. Sebagian
besar senyawa dengan sifat antikanker adalah alkaloid, dan beberapa di antaranya
memiliki struktur yang kompleks, dengan beberapa cincin dan pusat kiral, dan oleh
karena itu, sintesis kimianya mahal [17]. Sel dan jaringan tanaman teknik budidaya
muncul sebagai metode alternatif yang ramah lingkungan untuk produksi metabolit
sekunder ini [17, 19].
Taxanes dari Taxus spp., Alkaloid indole terpenoid dari C. roseus, camptothecin dari
Camptotheca acuminata Decne di antara spesies lain, dan podophyllotoxin dari
Podophyllum dan Linum spp. adalah senyawa utama yang diproduksi dengan
menggunakan pendekatan bioteknologi (Tabel 1). Untuk produksi taxane, kultur
suspensi sel adalah yang paling pasti sistem budaya yang memadai. Namun, beberapa
penelitian menunjukkan jaringan yang berbeda lebih memadai daripada sel yang tidak
berdiferensiasi untuk menghasilkan senyawa antikanker lainnya. Untuk Misalnya,
tanaman utuh C. acuminata mengandung sekitar 0,2–5 mg / g berat kering (DW)
 camptothecin sedangkan kalus dan kultur suspensi hanya menghasilkan 0,002-0,004
mg / g DW atau lebih rendah [57]. Kultur akar rambut juga telah terbukti menjadi
pilihan yang baik untuk produksi sekunder in vitro metabolit sebagai alkaloid indol
karena tingkat diferensiasi sel yang lebih tinggi dan peningkatan stabilitas genetik
atau biokimia. Akar berbulu dari Ophiorrhiza pumila Champ. Ex Benth menunjukkan
kapasitas tinggi untuk memproduksi camptothecin (0,1% DW), meskipun kultur kalus
gagal menghasilkan senyawa ini [58].
Beberapa peneliti telah fokus pada studi yang bertujuan untuk mengoptimalkan
pertumbuhan biomassa kondisi dan penerapan strategi bioteknologi untuk
meningkatkan hasil produksi senyawa antikanker. Dengan memanipulasi faktor
empiris yang terkait dengan kultur sel dan organ tumbuhan, telah dimungkinkan
untuk meningkatkan hasil produksi. Beberapa faktor telah dioptimalkan, seperti
nutrisi, sumber karbon, pengatur pertumbuhan tanaman, atau budaya lingkungan
kondisi, dan beberapa pemilih biotik dan abiotik telah diuji. Penelitian juga dilakukan
berfokus pada penjelasan dan pengaturan jalur biosintesis dan bertujuan
meningkatkan hasil produksi senyawa antikanker sebagai taxanes [41] dan alkaloid
indol [59] oleh menggunakan pemilih untuk mengaktifkan gen yang terlibat dalam
jalur metabolisme. Terlepas dari semua kelebihannya menghasilkan senyawa
antikanker dengan menggunakan sel tanaman dan teknik kultur jaringan dan
Kemajuan yang signifikan dalam beberapa tahun terakhir, contoh-contoh produksi
antikanker tanaman senyawa pada tingkat industri langka. Seperti yang disebutkan
sebelumnya dalam bab ini, yang terbaik contoh sukses adalah produksi taxanes oleh
perusahaan Jerman Phyton Biotech [51]. Teknik kultur sel dan jaringan tanaman juga
telah diterapkan untuk perbanyakan beberapa tanaman antikanker. Perbanyakan in
vitro memungkinkan multiplikasi massa yang cepat dari tipe-benar tanaman dalam
rentang waktu singkat yang sangat penting dalam kasus yang terancam punah jenis.
Beberapa contoh yang baru dipilih terdiri dari tanaman yang memproduksi antikanker
penting, senyawa camptothecin [60, 61] dan podophyllotoxin [62, 63].
2.2 Metabolit Lamiaceae spp
Keluarga mint (Lamiaceae) mengandung sekitar 236 genera dan lebih dari 7000
spesies distribusi kosmopolitan [64]. Beberapa genus yang paling penting adalah
Hyptis, Lavandula, Nepeta, Salvia, Scutellaria, Thymus, dan Teucrium. Spesies dari
keluarga menghuni berbeda ekosistem alami, dan banyak yang sudah dibudidayakan.
Sebagian besar spesies termasuk dalam ini keluarga aromatik (memiliki minyak
esensial) dan banyak digunakan dalam pengobatan tradisional untuk menyembuhkan
berbagai gangguan. Mereka juga memiliki nilai ekonomi yang tinggi karena
penggunaannya dalam kuliner atau sebagai tanaman hias, dan untuk kosmetik,
penyedap, pewangi, wewangian, pestisida, dan aplikasi farmasi [65]. Banyak
Lamiaceae mengandung tingkat fenolik yang tinggi mungkin merupakan kelompok
metabolit sekunder paling relevan yang disintesis oleh tanaman untuk efek promosi
kesehatan mereka [64]. Di antara senyawa fenolik, asam rosmarinic adalah hadir
dalam jaringan banyak spesies ini yang digunakan sebagai penanda kimia keluarga
[64, 66, 67]. Pada beberapa spesies, senyawa ini terakumulasi sebagai fenolik utama
senyawa pada konsentrasi di atas 0,5% berat kering [64]. Beberapa spesies di
Lamiaceae keluarga juga dapat mengakumulasi asam fenolik tingkat tinggi,
flavonoid, atau fenolik terpene [64]. Ada beberapa senyawa fenolik sebagai asam
carnosic dan clerodendranoic yang eksklusif dari keluarga ini [68, 69]. Pembaca yang
tertarik dapat menemukan yang terbaik tinjauan umum tentang karakterisasi fitokimia
dan efek biologis dari spesies Lamiaceae dalam Trivellini et al. [64].
Senyawa fenolik umumnya diproduksi sebagai mekanisme pertahanan atau sebagai
respons terhadap kondisi lingkungan yang penuh tekanan [9]. Aktivasi mekanisme
perlindungan ini dengan menerapkan Stimulus stres dapat digunakan sebagai strategi
untuk meningkatkan produksi senyawa fenolik dalam sel tanaman dan kultur organ
[70]. Baru-baru ini, beberapa upaya dilakukan produksi metabolit sekunder oleh
beberapa spesies Lamiaceae (terutama fenolik) menggunakan kultur jaringan tanaman
khususnya menerapkan elisitasi sebagai strategi untuk mencapai yang lebih tinggi
hasil produksi [64]. Studi-studi ini terutama melibatkan penggunaan pemilih kimia
seperti jasmonic asam (atau metil jasmonat), atau pemilih fisik seperti UV-B dan
ozon (O3), untuk meningkatkan produksi banyak senyawa sebagai konstituen minyak
atsiri, fenilpropanoid, flavonoid, dan asam fenolik. Secara keseluruhan, hasil
menunjukkan bahwa pemilih ini memiliki efek langsung pada peningkatan produksi
fenolik [64].
Studi yang direvisi menunjukkan bahwa sejumlah besar studi melaporkan
peningkatan produksi asam rosmarinat setelah elisitasi kultur beberapa Lamiaceae,
seperti Coleus, Lavandula, dan Salvia genera [64, 66, 71]. Beberapa penelitian
melaporkan peningkatan rosmarinic produksi asam melalui penerapan elisitor (Tabel
2). Elicitation dengan asam jasmonic menginduksi peningkatan 4,6 kali lipat produksi
asam rosmarinic dalam suspensi sel L. officinalis L. kultur [72], dan elisitasi dengan
metil jasmonate menginduksi peningkatan 3,4 kali lipat dalam C. Forskohlii (Willd.)
Briq. kultur akar rambut [73]. Produksi senyawa ini juga meningkat (2,3-lipat) dalam
daun Rosmarinus officinalis L. setelah 14 hari paparan UV-B [74]. Baru saja, asam
rosmarinic menarik perhatian para ilmuwan karena jangkauan biologisnya yang luas
kegiatan, seperti anti-inflamasi, antioksidan, peningkatan kognitif, chemoprotection
kanker efek, antara lain [71]. Pada tahun-tahun terakhir, ada banyak kemajuan dalam
produksi bioteknologi dari senyawa ini tetapi produksi skala besar masih
membutuhkan optimasi lebih lanjut. Pemahaman molekuler dari biosintesis dan
aplikasinya alat rekayasa metabolik sangat penting untuk meningkatkan produksi
bioteknologi.

Kesimpulan dan prospek

Sel tumbuhan dan teknik kultur jaringan adalah sistem yang menarik untuk budidaya
yang luas berbagai metabolit sekunder, termasuk alkaloid penting dengan sifat
antikanker dan fenolat bioaktif. Alternatif ini memberikan cara yang berkelanjutan,
berkelanjutan, ekonomis, dan produksi metabolit sekunder yang layak, tidak
tergantung pada kondisi geografis dan iklim, yang sangat berguna untuk produksi
spesies yang berisiko. Meskipun ada kemajuan besar di daerah ini dalam beberapa
dekade terakhir, dalam beberapa kasus, produksi terjadi pada hasil yang sangat
rendah, dan ada banyak kesulitan dalam meningkatkan produksi, dan keberhasilan
komersial terbatas tercapai. Pengetahuan yang tidak lengkap tentang jalur biosintesis
molekul bioaktif membatasi peningkatan hasil produksi. Memanfaatkan teknik
biologi molekuler modern muncul sebagai alternatif yang perlu dimanfaatkan untuk
meningkatkan efisiensi produksi oleh rekayasa jalur biosintesis (s) dari molekul
dalam sel tanaman. Juga menjanjikan pemilih baru dan agen permeabilisasi seperti
coronatin atau siklodekstrin. Produksi dari molekul bioaktif dalam endofit juga
muncul sebagai alternatif yang menarik, meskipun sampai saat ini, tidak ada
eksploitasi komersial yang dilaporkan.