See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/320508509

ANALISIS STRUKTUR SERAT SELULOSA DARI BAKTERI

Conference Paper · October 2017

CITATIONS READS

0 2,003

1 author:

Heru Suryanto
State University of Malang
70 PUBLICATIONS   85 CITATIONS   

SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

analisis dengan metode elemen hingga View project

Syntesis and characterization of bionanocomposite starch reinforced by nanoclay View project

All content following this page was uploaded by Heru Suryanto on 19 October 2017.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

Prosiding SNTT 2017 – Politeknik Negeri Malang Volume 3 – ISSN: 2476-9983

ANALISIS STRUKTUR SERAT SELULOSA DARI BAKTERI

Heru Suryanto

Jurusan Teknik Mesin, Fakultas Teknik, Universitas Negeri Malang

Email: heru.suryanto.ft@um.ac.id

Abstrak

Upaya ekstrak selulosa dari tanaman sangat membutuhkan energi dan memiliki potensi dalam merusak
lingkungan, sehingga diperlukan alternatif sumber selulosa yang dapat diperbarui dengan hasil yang lebih efisien
yaitu dengan produksi serat selulosa dari bakteri. Untuk itu penelitian ini bertujuan mengkarakterisasi struktur
selulosa dari bakteri dan dibandingkan dengan struktur selulosa dari tumbuhan. Metode yang digunakan adalah
pembuatan film serat selulosa bakteri yang diperoleh dari nata de coco komersial dengan cara pengeringan oven,
selanjutnya, dilakukan pengujian X-ray diffraction (XRD) dan pengamatan dengan kamera optik dan Scanning
Microscope Electron (SEM) dari serat selulosa bakteri serta dibandingkan dengan selulosa yang diekstrak dari
serat tanaman mendong. Hasil pengamatan morfologi menunjukkan serat selulosa bakteri memiliki diameter
rerata 75 nm. Analisis struktur dengan menggunakan XRD menghasilkan 3 puncak utama dari difraktogram pada
sudut diffraksi 14,2°, 16,7°, dan 22,4° dan kristalinitas serat selulosa bakteri diketahui sebesar 88% dan indeks
kristalnya sebesar 86,5%. Selulosa bakteri memiliki struktur selulosa I alpha sedangkan selulosa tanaman
memiliki struktur selulosa I beta.

Kata kunci : kristalinitas, nata de coco, selulosa bakteri, struktur, XRD

1. Pendahuluan menurunkan daerah amorf, menghasilkan

Pada dekade terakhir, bahan-bahan alam khususnya
serat telah diaplikasikan dalam bentuk biokomposit
untuk berbagai peralatan teknologi. Serat alam
selulosa telah mampu memperbaiki sifat-sifat
komposit pada komposit matrik termoplastik dan
thermoset untuk aplikasi struktur dan non struktur.
Keunggulan pengunaan serat alam dibandingkan
serat sintetis dalam komposit adalah harga murah,
mudah dipisahkan, kemampuan biodegradasi,
densitas rendah, dan dapat diperbarui (Li, et al
(2007); Mu, et al (2009)).
Selulosa adalah polimer alami yang paling
melimpah di dunia dan sebagian besar ada di
tanaman yang lebih tinggi seperti juga pada
protozoa, ganggang, dan bakteri (Musa, et al (2016).
Berbagai bentuk selulosa memiliki banyak kegunaan
seperti sebagai pengganti lemak dan zat penggembur
dalam makanan rendah kalori, seperti pengubah
tekstur, pengemulsi, dan pemanjang. Dalam produk
makanan diperoleh sebagai pulp dari bahan berserat
seperti kayu atau kapas dan dapat digunakan dalam
aplikasi farmasi penguat untuk matrik polimer
hidrophobik, implan biomedis dan komposit
material (Lavanya, et al (2015)).
Banyak peneliti menggunakan selulosa
sebagai filler komposit polimer dalam bentuk
nanofibril ataupun selulosa nanokristal. Nanokristal
ini disiapkan dari serat dengan menghancurkan serat
ekstraksi sampai pada proses hidrolisis asam yang
17
nanopartikel kristal yang sangat tinggi (Zhang, et al
(2013)). Namun proses ini membutuh energi yang
tinggi sehingga menjadikan proses menjadi mahal.
Untuk mengatasi itu, dikembangkan metode
preparasi nanoselulosa dari bakteri yang dapat
menggantikan nanofibril selulosa tanaman dengan
lebih mudah (Esa, et al (2014)). Hal ini tentunya
akan membawa pada kelestarian lingkungan
tanaman.
Penelitian terhadap selulosa yang disintesis
oleh mikroorganisme memperoleh banyak perhatian.
Beberapa bakteri mampu mensintesis nanofibril
selulosa bakteri (BC) dalam bentuk nata melalui
polimerisasi molekul glukosa yang diubah menjadi
rantai β-1,4-glukan di bagian dalam BC (Iguchi, et
al (2000)). Produk selulosa bakteri yang paling
sering dijumpai adalah nata de coco yang dihasilkan
dari fermentasi air kelapa dengan menggunakan
Acetobacter xylinum. Dalam kondisi kultur statis,
bakteri ini menghasilkan gel tebal atau pellicle yang
memiliki sifat unik seperti kemurnian tinggi,
kristalinitas tinggi, sifat mekanik yang luar biasa dan
kemampuan untuk membentuk lembaran membran
homogen. Lembaran berukuran nano ini memiliki
biokompatibilitas yang sangat baik dan struktur
halus. Selain itu, serat BC memiliki sifat mekanik
yang sangat baik dan kapasitas menahan air yang
tinggi, kekuatan tarik tinggi dan biodegradable. Hal
tersebut membuatnya berpotensi diterapkan dalam
berbagai penelitian ilmu polimer, bahkan telah
Prosiding SNTT 2017 – Politeknik Negeri Malang
banyak aplikasi di kertas, tekstil, dan industri
makanan, dan sebagai biomaterial dalam kosmetik
dan obat-obatan. Oleh karena itu perlu eksplorasi
untuk mempelajari struktur serat selulosa bakteri dan
membandingkannya dengan struktur serat selulosa
dari tanaman.
2. Metode
Penelitian ini merupakan penelitian eksplorasi
untuk memperoleh gambaran struktur dari serat
selolosa dari bakteri. Adapun alir dari kegiatan ini,
ditunjukkan pada Gambar 1.
Gambar 1. Diagram alir proses
2.1 Bahan
Bahan penelitian berupa bakterial selulosa yang
telah diproduksi secara komersial dalam bentuk nata
de coco, sedangkan selulosa pembanding digunakan
selulosa yang diekstraksi dari serat mendong.
2.2 Pembentukan film selulosa bakteri
Film selulosa bakteri diperoleh dengan cara
melakukan penekanan pada produk nata de coco
sehingga kandungan airnya berkurang dan menjadi
pipih selanjutnya dikeringkan dengan suhu 80°C
selama 3 jam dalam oven. Setelah kering, film di uji
lebih lanjut.
2.3 Ekstraksi selulosa tanaman
Serat mendong diperoleh dengan ekstraksi dari
batang mendong secara mekanis dengan dipukul-
pukul selanjutnya bagian seratnya diambil. Serat
dicuci dengan air suling beberapa kali dan
dikeringkan dalam oven (redLINE oleh Binder,
Model RE 53) pada suhu 80°C selama 24 jam.
Kemudian, serat dipotong menjadi potongan-
potongan kecil (panjangnya kira-kira 5 mm).
Selanjutnya, dilakukan tahap dewaxing yaitu
merendam dalam campuran toluena/etanol (2:1 v/v)
yang mendidih dalam Soxhlet selama 6 jam. Serat di
de-wax kemudian disaring, dicuci dengan etanol
selama 30 menit dan dikeringkan. 50 g mendong
18
Volume 3 – ISSN: 2476-9983
dihancurkan menggunakan mesin blender (Nasional,
Indonesia) lalu disaring menggunakan filter 60
mesh. Serbuk mendong kering dicelup
menggunakan campuran pelarut organik, toluena,
dan etanol, dengan perbandingan 4: 1 (v/v) dalam
perangkat Soxhlet untuk menghilangkan minyak
atau lilin. Serbuk yang sudah dihilangkan wax-nya
dicuci dengan etanol dan dikeringkan pada suhu 70
°C dalam oven. Setelah de-lignifikasi, 10 g serbuk
tersebut dikeringkan dan direndam dalam larutan
NaOH 500 mL dengan konsentrasi 60% selama 4
jam pada suhu 80°C dan kemudian dibilas dengan
aquades. Selanjutnya, selulosa diambil dan dicuci
dengan menggunakan air suling berulang kali
sampai larutan memiliki pH netral. Selulosa
dikeringkan dan dikeringkan dalam oven pada suhu
50°C selama 3 jam. Selulosa dikelantang
menggunakan larutan hidrogen peroksida 5%
dengan pH 12 pada suhu 70°C selama 3 jam.
Selulosa diambil dan dicuci dengan air suling
sampai pH netral. Ulangi proses dengan suhu yang
sama dengan menggunakan perlakuan hidrogen
peroksida selama 6 jam dan diulang lagi dengan
selama 5 jam. Selulosa dikeringkan dan dikeringkan
di tempat terbuka pada suhu 60°C selama 3 jam.
2.4 Pengamatan morfologi
Morfologi struktur selulosa dari bakteri
diamati dengan menggunakan Scanning Electron
Microscope (SEM) (FEI, Inspect-S50 type) dengan
tegangan 10.00 kV. Sebelum proses sem dilakukan,
spesimen di lapisi dengan lapisan emas setebal 10
nm dengan metode sputtering (sputter coater, SC7-
620 Emitech).
2.5 Analisis struktur dengan X-ray diffraction
Struktur selulosa dianalisis menggunakan X-
ray diffraction (PanAnalytical X-Pert Pro
Diffractometer) pada kondisi temperatur kamar
dengan radiasi CuK ( = 1.54 Å). Film BC kering
digunakan sebagai sampel uji analisis X-ray
diffraction. Intensitas radiasi CuK direkam pada
sudut 2 dalam rentang sudut 5 sampai 50 dengan
pertambahan 0.02 tiap langkah dengan tegangan 40
kV dan arus 30 mA. Indeks kristalinitas (CI) dan
derajat kristalinitas (%Cr) dari BC dihitung dengan
metode empiris Segal (Suryanto, et al (2014)), yaitu.
(1)
(2)
Dimana I(002) adalah intensitas puncak terbesar
yang sesuai dengan bidang pada sampel dengan
indeks Miller (0 0 2) pada sudut 2 dalam kisaran
22-23 derajat yang mewakili bahan kristal dan I am
adalah intensitas minimum difraksi dari bahan non-
kristalin, yang diambil pada sudut sekitar 18 derajat
Prosiding SNTT 2017 – Politeknik Negeri Malang
di lembah di antara puncak, mewakili bahan amorf
dalam serat selulosa
3. Hasil dan Pembahasan
Sepotong nata de coco putih sepanjang 20 cm,
lebar 20 cm dan tebal 1,5-2 cm dapat diperoleh
setelah melalui proses fermentasi air kelapa selama
14 hari dan selanjutnya dipotong sesuai dengan
kebutuhan. Dalam kondisi ini, kandungan air di
dalam nata de coco masih sangat tinggi (Gambar
2a). Oleh karena itu, untuk menjadikannya dalam
bentuk lembaran polimer, nata de coco perlu ditekan
dan dikeringkan pada suhu 80°C untuk mendapatkan
nata de coco dalam bentuk film tipis (Gambar 2b).
Permukaan film ditemukan terdiri dari banyak senar
terjalin yang menghasilkan struktur seperti jaringan
yang terbentuk dari fibril halus yang saling tumpang
tindih membentuk lapisan pita selulosa yang
berorientasi secara acak. Pita ultrafine selulosa
mikroba, panjangnya berkisar antara 1 sampai 9 µm,
membentuk struktur retikulasi padat, distabilisasi
oleh ikatan hidrogen yang luas. Derajat polimerisasi
berkisar 2000 sampai 6000 bahkan dapat mencapai
20000 sedangkan derajat polimerisasi tanaman
berkisar 13000 sampai 14000 (Bielecki, et al
(2005)).
Morfologi dari selulosa bakteri tergantung dari
metode kultur yang berbeda dengan bakteri yang
berbeda. Bakteri bisa menghasilkan flocky asterisk-
like BC atau solid sphere-like BC (Bi, et al (2014).
Gambar SEM dari film BC ini menunjukkan bahwa
nata de coco terdiri dari serat selulosa dengan
diameter rata-rata sekitar 70 nm dengan panjang
beberapa mikrometer (Gambar 2c). Morfologi dari
serat nano selulosa bakteri dicirikan oleh jaringan
fibril interkoneksi yang mengandung ikatan dan
agregasi dan membentuk struktur tiga dimensi
seperti ditunjukkan pada Gambar 2c dengan ukuran
rongga atau lubang pori yang bervariasi. Lubang ini
cocok untuk matriks dalam suatu sistem komposit.
Namun, keberadaan pori-pori bisa menjebak air dan
melemahkan struktur yang menyebabkan kekuatan
tarik menurun (Pa’e, et al (2014)).
19
Volume 3 – ISSN: 2476-9983
Gambar 3 menunjukkan hasil difraksi dengan sinar
X yang menunjukkan struktur dari serat selulosa.
Difraktogram serat selulosa dari bakteri
menghasilkan 3 puncak difraksi pada sudut 2:
14,2°, 16,7°, dan 22,4° sedangkan serat selulosa dari
tanaman mendong menghasilkan 4 puncak difraksi
pada sudut 2: 14,9°, 16,5°, 22,6°, dan 34,5°. 3
puncak difraksi awal terkait dengan bidang kristal
1ī0, 110, and 002 (Vicente, et al (2017)) sedangkan
puncak difraksi terakhir dari serat tanaman
menunjukkan bidang kristal 040 (Suryanto, et al
(2017)).
Bagian amorf dari struktur serat selulosa
ditunjukkan oleh lembah difractogram antara dua
puncak, dengan daerah pada 2 sekitar 18°. Struktur
selulosa ditunjukkan oleh puncak difraksi dalam
kisaran antara 22 dan 23 yang merupakan
karakteristik dari selulosa asli (selulosa I) (Le
Troedec, et al (2008)). Oleh karena itu, puncak jenis
struktur selulosa yang dihasilkan dari bakteri
merupakan selulosa I. 2 puncak difraksi terdepan
menunjukkan tipe lain dari selulosa I dimana untuk
struktur selulosa Iβ memiliki puncak sudut difraksi
14,9 dan 16,7 sedangkan struktur selulosa I
memiliki puncak sudut difraksi 14,3dan 16,8
(Cheng, et al (2011)). Mengamati puncak sudut
difraksi dari serat selulosa bakteri menunjukkan
bahwa puncak dengan intensitas tinggi terdapat pada
sudut 14,2° sedangkan puncak dengan intensitas
rendah terdapat pada 16,7° sehingga struktur dari
selulosa bakteri sampel lebih merujuk pada struktur
selulosa I alpha. Struktur selulose I alpha adalah
triclinic dengan dimensi sel a = 0,674 nm, b= 0,593
nm, c= 1,036 nm (sumbu rantai), = 117 °, β= 113°,
 = 81°, dan satu residu selobiose per unit sel
dengan unit volume sel adalah 0.3395 nm3 dan
densitas 1,582 cm-3. Untuk selulosa dari serat
mendong diketahui memiliki struktur selulosa I beta
dengan a = 0.801 nm, b = 0,817 nm, c = 1,036 nm
(sumbu rantai),  = β = 90,0°,  = 97,3 °, dan dua
residu selobiose per unit sel dengan unit volume sel
adalah 0,6725 nm3 dan densitas 1,599 cm-3 (Heiner,
et al (1995); Suryanto, et al (2014)).
Prosiding SNTT 2017 – Politeknik Negeri Malang
Gambar 2. Membran nanoselulosa dari nata de coco pada kondisii basah (A) dan pada kondisi kering
(B) serta pengamatan film dengan SEM (C).
Gambar 3. Difraktogram serat selulosa yang diperoleh dari bakteri dan mendong
Pembentukan struktur selulosa bakteria
dipengaruhi oleh kondisi kulturnya. Disamping
dipengaruhi oleh jenis bakteri yang memproduksi
(Bi, et al (2014)), kultur dalam reaktor maupun
kultur statik juga mempengaruhi dimana kultur
statik cenderung menghasilkan selulosa I alpha
(Zhou, et al (2007)). Disamping itu, proses
pengeringan dari produk selulosa bakteri juga
tergantung dari metode pengeringannya (Pa’e, et al
(2014)).
Puncak ketiga dari pola difraksi selulosa serat
tanaman adalah pada sudut 34,5º dengan intensitas
rendah. Puncak ini menunjukkan seperempat
panjang unit selobiose dan timbul dari pengaturan
sepanjang arah serat. Hal ini sensitif terhadap
penyelarasan rantai menjadi fibril (Cheng, et al
(2011)). Disamping itu, sudut diffraksi ini
20
Volume 3 – ISSN: 2476-9983
merupakan pengindeks dari struktur monoklinik dan
dianggap umum di semua selulosa asli dari sumber
tanaman (Clair, et al (2006)).
Dari difraktogram, derajat kristalinitas dan
indeks kristalin dari bakterial selulosa yang
ditentukan dengan menggunakan persamaan Segal
(persamaan 1 dan 2) menghasilkan derajat
kristalinitas sebesar 88% dan indeks kristalin sebesar
86.5%. Ini sangat sesuai dengan derajat kristalinitas
dari selulosa bakteri yang berkisar 87-90% (Pa’e, et
al (2014)). Bila dibandingkan dengan serat selulosa
dari tanaman mendong yang memiliki derajat
kristalinitas berkisar 83,5% dan indeks kristal
berkisar 85%, maka kristalinitas selulosa bakteri
lebih tinggi yang menunjukkan bahwa serat selulosa
yang dihasilkan bakteri memiliki tingkat kemurnian
yang lebih tinggi dan proses untuk menghasilkan
Prosiding SNTT 2017 – Politeknik Negeri Malang
kemurnian ini lebih mudah dibandingkan dengan
memurnikan serat dari tanaman, sehingga proses
produksi serat selulosa melalui bakteri akan lebih
menjanjikan karena hasil yang diperoleh lebih
murni, biaya proses pemurnian lebih rendah dan
waktu pembentukan selulosa lebih singkat.
4. Kesimpulan dan Saran
Hasil analisis menunjukkan bahwa struktur
serat selulosa yang dihasilkan oleh bakteri dalam
produk nata de coco adalah berupa selulosa alpha
sedangkan serat selulosa dari tanaman mendong
adalah selulosa beta. Kemurnian dari serat selulosa
produk dari bakteri lebih baik dibandingkan dengan
serat selulosa dari tanaman sehingga dimasa depan
sangat baik untuk dikembangkan sebagai penghasil
selulosa yang lebih murah dan efisien untuk
berbagai aplikasi teknik material.
Untuk pengembangan lebih lanjut maka dapat
dilakukan proses ekstraksi nanofiber selulosa dari
bakteri agar dapat dikembangkan lebih lanjut
sebagai penguat dari produk komposit disamping itu
juga perlakuan kimia yang perlu dilakukan untuk
memperbaiki kompatibilitas serat selulosa dalam
matrik polimer.
Daftar Pustaka:
Bi, J.-C., Liu, S.-X., Li, C.-F., Li, J., Liu, L.-X.,
Deng, J., Yang, Y.-C. (2014): Morphology and
structure characterization of bacterial
celluloses produced by different strains in
agitated culture. J. Appl. Microbiol. 117,
1305–11.
Bielecki, S., Krystynowicz, A., Turkiewicz, M.,
Kalinowska, H., Bielecki, S., Krystynowicz,
A., Turkiewicz, M., Kalinowska, H. (2005):
Bacterial Cellulose. In: Vandamme, E.J., De
Baets, S., Steinbüchel, A. (Eds.), Biopolymers
Online. Wiley-VCH Verlag GmbH & Co.
KGaA, Weinheim, Germany.
Cheng, G., Varanasi, P., Li, C., Liu, H.,
Melnichenko, Y.B., Simmons, B.A., Kent,
M.S., Singh, S. (2011): Transition of cellulose
crystalline structure and surface morphology
of biomass as a function of ionic liquid
pretreatment and its relation to enzymatic
hydrolysis. Biomacromolecules 12, 933–41.
Clair, B., Alméras, T., Yamamoto, H., Okuyama, T.,
Sugiyama, J. (2006): Mechanical Behavior of
Cellulose Microfibrils in Tension Wood, in
Relation with Maturation Stress Generation.
Biophys. J. 91, 1128–1135.
Esa, F., Tasirin, S.M., Rahman, N.A. (2014):
Overview of Bacterial Cellulose Production
21
Volume 3 – ISSN: 2476-9983
and Application. Agric. Agric. Sci. Procedia 2,
113–119.
Heiner, A.P., Sugiyama, J., Teleman, O. (1995):
Crystalline cellulose Ialpha and Ibeta studied
by molecular dynamics simulation. Carbohydr.
Res. 273, 207–223.
Iguchi, M., Yamanaka, S., Budhiono, A. (2000):
Bacterial cellulose — a masterpiece of nature
’ s arts. J. Mater. Sci. 35, 261–270.
Lavanya, D., Kulkarni, P., Dixit, M., Raavi, P.,
Krishna, L. (2015): Sources of cellulose and
their applications- A review. Int. J. Drug
Formul. Res. 2, 19–38.
Le Troedec, M., Sedan, D., Peyratout, C., Bonnet,
J.P., Agnes, S. (2008): Influence of various
chemical treatments on the composition and
structure of hemp fibres. Compos. Part A 39,
514–522.
Li, X., Tabil, L.G., Panigrahi, S. (2007): Chemical
Treatments of Natural Fiber for Use in
Natural Fiber-Reinforced Composites: A
Review. J. Polym. Environ. 15, 25–33.
Mu, Q., Wei, C., Feng, S. (2009): Studies on
Mechanical Properties of Sisal Fiber / Phenol
Formaldehyde Resin In-Situ Composites.
Polym. Compos. 30, 131–137.
Musa, A., Ahmad, M.B., Hussein, M.Z., Mohd
Izham, S., Shameli, K., Abubakar Sani, H.,
(2016): Synthesis of Nanocrystalline Cellulose
Stabilized Copper Nanoparticles. J.
Nanomater. 2016, 1–7.
Pa’e, N., Hamid, N., Khairudin, N., Zahan, K., Seng,
K., Siddique, B., Muhammad, I. (2014): Effect
of Different Drying Methods on the
Morphology , Crystallinity , Swelling Ability
and Tensile Properties of Nata De Coco. Sains
Malaysiana 43, 767–773.
Suryanto, H., Fikri, A.A., Permanasari, A.A.,
Yanuhar, U., Sukardi, S. (2017): Pulsed
Electric Field Assisted Extraction of Cellulose
From Mendong Fiber ( Fimbristylis
globulosa) and its Characterization. J. Nat.
Fibers 1–10 (inpress).
Suryanto, H., Irawan, Y.S., Marsyahyo, E., Soenoko,
R. (2014): Effect of Alkali Treatment on
Crystalline Structure of Cellulose Fiber From
Mendong (Fimbristylis globulosa) Straw. Key
Eng. Mater. 594–595, 720–724.
Suryanto, H., Marsyahyo, E., Irawan, Y.S., Soenoko,
R. (2014): Morphology, Structure, and
Mechanical Properties of Natural Cellulose
Fiber from Mendong Grass (Fimbristylis
globulosa). J. Nat. Fibers 11, 333–351.
Vicente, A.T., Araújo, A., Gaspar, D., Santos, L.,
Marques, A.C., Mendes, M.J., Pereira, L.,
Fortunato, E., Martins, R. (2017):
Optoelectronics and Bio Devices on Paper
Powered by Solar Cells. In: Nanostructured
Solar Cells. InTech.
 Prosiding SNTT 2017 – Politeknik Negeri Malang Volume 3 – ISSN: 2476-9983

Zhang, Y., Nypelö, T., Salas, C., Arboleda, J.,
Hoeger, I.C., Rojas, O.J. (2013): Cellulose
Nanofi brils: From Strong Materials to
Bioactive Surfaces. J. Renew. Mater. 1, 195–
211.
Zhou, L.-L., Sun, D.-P., Wu, Q.-H., Yang, J.-Z.,
Yang, S.-L. (2007): Influence of culture mode
on bacterial cellulose production and its
structure and property. Wei Sheng Wu Xue
Bao 47, 914–7.

22

View publication stats