Anda di halaman 1dari 3

Introduction

Anomali anorektal meliputi spektrum malformasi yang memengaruhi usus terminal dan sistem lain
seperti sistem kemih, kerangka, dan kardiovaskular. Istilah "imperforate anus", yang telah diakui dari
waktu ke waktu, hanya mencerminkan penampilan yang paling menonjol dari entitas ini. Kira-kira satu
dari setiap 5.000 bayi baru lahir yang hidup menyajikan anomali anorektal 1-3. Embriologi usus terminal
normal, dan juga embriologi anomali anorektal, kontroversial dan terutama didasarkan pada teori yang
belum terbukti. Mengingat sulitnya memperoleh embrio manusia dengan anomali anorektal, studi
tentang embriogenesis mereka membutuhkan penggunaan model hewan percobaan 4. Selain
menunjukkan aspek morfologis saluran pencernaan, model hewan juga memungkinkan studi tentang
persarafan enterik intrinsik, otot lurik dan malformasi urologis dan kerangka. Model eksperimental
untuk anomali anorektal termasuk yang disebabkan oleh mutasi, yang terjadi secara spontan dan yang
disebabkan oleh obat-obatan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi model
eksperimental untuk anomali anorektal dan malformasi terkait yang disebabkan oleh etilen tiourea
(ETU).

Metods

Empat tikus hamil dari garis keturunan Wistar OUT-B EPM-1 (Rattus norvegicus albinus,
Rodentia Mammalia), berasal dari vivarium pusat Universitas Federal São Paulo, Escola Paulista
de Medicina, digunakan. Selama percobaan, hewan menerima pakan komersial dan air ad
libitum, di bawah kondisi lingkungan yang konstan suhu dan kelembaban, dengan 12 jam siang
dan malam siklus menggunakan cahaya buatan, dikendalikan secara otomatis. Setelah satu
malam kawin, hewan yang menunjukkan apusan vagina dengan adanya spermatozoid dianggap
berpotensi dibuahi. Ini dianggap sebagai hari ke nol (D0) kehamilan. Mulai saat ini dan
seterusnya, tikus disimpan di kandang individu. Pada hari ke 11 kehamilan (D11), tiga tikus
hamil menerima etilen tiourea (2imidazolidinethione C3H6N2S 98%, dari batch no. 24251089
dari Sigma-Aldrich, Brazil), diencerkan dalam air suling pada konsentrasi 1%, dengan dosis 125
mg / kg (12,5 ml / kg), dengan gavage intragastrik. Hewan keempat menerima air suling saja,
tanpa penambahan etilen tiourea, dengan volume 12,5 ml / kg. Sejak saat ini dan seterusnya,
hewan-hewan didefinisikan sebagai dua kelompok:

Kelompok kontrol (C): hewan yang menerima air suling saja, tanpa penambahan etilen tiourea (ETU)

Kelompok eksperimen (E): hewan (subkelompok E1, E2 dan E3) yang menerima ETU.

Pada hari ke 21 gestation, hewan hewan dikorbankan melalui hipoksia di ruang karbon dioksida, dan
menjalani laparotomi untuk mengangkat janin. Janin awalnya diperiksa secara eksternal untuk
menentukan jenis kelamin mereka dan apakah ada anomali anorektal dan / atau malformasi kolom dan
ekor tulang belakang. Setelah ini, dengan bantuan mikroskop, janin menjalani laparotomi eksplorasi
untuk mengkarakterisasi jenis anomali anorektal dan menyelidiki segala malformasi urologis.

Result

Jumlah janin yang diperoleh per tikus disajikan pada Tabel 1. Tidak ada janin dalam kelompok kontrol
yang menunjukkan anomali anorektal. Pada kelompok eksperimen, sembilan janin dari E1 (90%),
sepuluh janin dari E2 (91%) dan tiga janin dari E3 (30%) menunjukkan anomali anorektal. Model yang
digunakan memicu anomali anorektal pada 71% dari semua janin yang diteliti. Jenis anomali anorektal
yang ditemukan adalah: 14 malformasi kloaka (Gambar 1), empat fistula perineum dan empat fistula
uretra (Gambar 2-3) (Tabel 2).

Tidak ada janin dalam kelompok kontrol yang menunjukkan malformasi kolom vertebra.
Namun, ini ditemukan pada 80% janin dalam kelompok eksperimen (semua janin dari E1 dan E2, dan
empat dari E3). Kelainan yang ditemukan adalah agenesis ekor (Gambar 4) atau ekor pendek (Tabel 3).
Tidak ada janin dalam kelompok kontrol yang menunjukkan perubahan struktur urologis. Di antara janin
dalam kelompok eksperimen, 35% mengalami perubahan. Hidronefrosis ureter (Gambar 5) ditemukan
pada lima janin, agenesis ginjal unilateral pada empat janin, hipoplasia ginjal kiri pada satu janin, dan
persistensi urachus (Gambar 6) pada satu janin (Tabel 4). Di antara janin dari subkelompok E1, ada
hubungan antara anomali anorektal dan malformasi kolom vertebral pada enam janin (60%) dan asosiasi
anorektal anomali dengan malformasi kolom vertebra dan malformasi urologis pada tiga janin 30%
Malformasi kolom saja terjadi pada satu janin (10%) (Tabel 5). Di antara janin dalam subkelompok E2,
ada hubungan antara anomali anorektal dan malformasi kolom vertebral pada empat janin (36%) dan
asosiasi anorektal anomali dengan kedua malformasi kolom vertebra dan malformasi urologis pada
enam janin (60%) . Satu janin menunjukkan malformasi kolom dengan kelainan urologis tetapi tanpa
anomali anorektal (9%) (Tabel 6). Di antara janin dalam subkelompok E3, ada hubungan antara anomali
anorektal dan malformasi kolom tulang belakang pada tiga janin (30%). Tidak ada hubungan anomali
anorektal dengan malformasi kolom vertebra dan malformasi urologis. Ada malformasi kolom saja pada
satu janin (10%) dan malformasi urologis saja pada satu janin (10%) (Tabel 7).

Discussion

Embriologi malformasi anorektal adalah subjek yang kontroversial. Sulit untuk mempelajari hal ini pada
manusia karena kelangkaan janin dengan anomali anorektal. Oleh karena itu, ada kebutuhan untuk
model hewan 4. Model eksperimental untuk anomali anorektal termasuk yang disebabkan oleh mutasi,
yang terjadi secara spontan dan yang disebabkan oleh obat-obatan. Model yang paling klasik dan tertua
adalah yang dijelaskan oleh Danforth, yang dikenal sebagai "mouse ekor pendek Danforth" 5. Ini adalah
mutasi alami yang menghadirkan serangkaian malformasi, dan di antaranya adalah anus imperforate.
Baru-baru ini, seekor tikus dengan mutasi yang melibatkan "landak sonik" ditemukan. Ini adalah molekul
pensinyalan yang melakukan berbagai peran dalam pengembangan vertebrata, dan yang menunjukkan
anus imperforata dalam fenotipe 6. Hewan-hewan ini sulit diperoleh dan sangat mahal. Terjadinya
malformasi anorektal secara spontan tidak jarang terjadi pada hewan peliharaan, terutama di antara
babi, dengan insidensi sekitar 0,2%. Mereka menunjukkan kesamaan dengan malformasi pada manusia,
tetapi dengan tingkat malformasi terkait yang rendah. 7. Dengan melintasi hewan yang terkena, Hori et
al diperoleh insiden 62% dari keturunan yang menyajikan anorektal anomali. Keuntungan dari model ini
adalah dalam ukuran hewan, yang memungkinkan studi anatomi dan histologis yang lebih mendalam.
Namun, itu adalah model yang membutuhkan waktu pengembangan yang lama untuk mendapatkan
keturunan yang terkena dampak, selain usia kehamilan yang lebih lama dan jangka waktu yang lebih
lama hewan-hewan ini perlu disimpan dalam vivarium. Pemanfaatan obat penginduksi pada tikus kecil
seperti tikus dan tikus adalah teknik yang paling umum. Masa kehamilan singkat (21 hari) dan hewan-
hewan ini mudah dipelihara di vivarium. Selain itu, bujukan oleh obat mudah dilakukan, karena satu-
satunya prosedur yang digunakan adalah pemberian obat dengan cara pembilasan. Obat yang paling
banyak digunakan adalah turunan vitamin A 9 dan ETU. Derivatif vitamin A hanya memberikan efek pada
tikus, sedangkan ETU hanya memberikan efek pada tikus. Pemanfaatan tikus memungkinkan studi janin
yang lebih besar, yang merupakan keuntungan. Khera, pada tahun 1973 10, dan Ruddick & Khera, pada
tahun 1975 11, menerbitkan hasil dari percobaan di mana administrasi ETU (produk degradasi dari
fungisida etilen-bis-tiokarbonat) menjadi tikus dan kelinci yang hamil mampu menyebabkan anomali di
berbagai organ tubuh. janin yang dihasilkan. Potensi untuk menginduksi anomali anorektal dipelajari
oleh Hirai & Kuwabara, pada tahun 1990 12. Data yang diperoleh menunjukkan bahwa dosis ideal untuk
menginduksi anomali anorektal adalah 125 mg / kg. Anomali yang paling sering ditemukan adalah fistula
rektourethral pada pria dan fistula rectocloacal pada wanita. Studi lain, seperti yang dilakukan oleh Qui
et al 13-14 dan Yuan et al 15, menggunakan obat ini pada dosis yang sama dan mencapai hasil yang
sama, sehingga menunjukkan kemampuan reproduksi metode ini. Mekanisme untuk tindakan ETU tidak
mapan. Qui et al 13 menyarankan bahwa ETU dapat menyebabkan gangguan pada mekanisme aksi dari
molekul pensinyalan “sonic landak”. ETU adalah obat yang mudah didapat yang lebih murah daripada
turunan vitamin A, sehingga memudahkan pemanfaatan tikus, dan karenanya hewan-hewan ini menjadi
subjek penelitian kami. Selain kejadian anomali anorektal, kami juga menyelidiki keberadaan malformasi
kolom urologis dan vertebra. Ini adalah malformasi yang paling sering dikaitkan dengan anomali
anorektal pada manusia, dengan kejadian berkisar antara 20 hingga 54% dan 13 hingga 50%, masing-
masing 1-3. Kami memperoleh insidensi keseluruhan 71% untuk anomali anorektal. Asosiasi dengan
malformasi lain juga ada: malformasi kolom vertebral pada 80% janin dan malformasi urologis pada 35%
janin. Insiden anomali anorektal sebanding dengan apa yang telah ditemukan dalam penelitian lain,
berkisar antara 55 hingga 85% 12-15. Tingkat kejadian ini kurang dari apa yang diperoleh dengan
menggunakan turunan vitamin A, dari mana 95% keturunannya menunjukkan malformasi 16. Jenis-jenis
anomali yang ditemukan mirip dengan yang ditemukan pada spesies manusia, tetapi dengan insiden
yang berbeda. Dalam model kami, perubahan kloaka adalah tipe yang paling sering, sedangkan pada
manusia ini adalah tipe yang paling langka 1-3. Insiden 80% kelainan pada kolom tulang belakang agak
lebih rendah daripada yang ditemukan oleh penulis lain, yang telah melaporkan agenesis ekor atau ekor
rudimenter pada 100% janin, yang 48 hingga 70% memperlihatkan myeloschisis. Kami tidak menemukan
ini pada hewan kami 12,14,15. Perubahan rologi, yang pada spesies manusia terjadi pada 13 hingga 50%
pasien, terjadi pada 35% janin kita. Kelainan utama yang ditemukan adalah agenesis ginjal dan
hidronefrosis ureter, mirip dengan temuan di antara manusia. Tidak ada data yang sesuai dalam literatur
untuk perbandingan. Kehadiran malformasi ini mengambil perhatian khusus, karena mereka adalah
penyebab morbiditas dan mortalitas yang besar pada manusia.

Conclusion

Model yang dideskripsikan terbukti mudah diimplementasikan dan menyajikan hasil yang
memungkinkan pemanfaatannya untuk mempelajari anomali anorektal dan malformasi yang terkait.