;Mycobacterium tuberculosis

Tujuan

Setelah menyelesaikan praktikum ini, diharapkan mahasiswa sudah mampu:

a. Mengenal bentuk dan sifat tahan asam dari M. tuberculosa.

b. Dapat menjelaskan perbedaan gambaran mikroskopis dari preparat sputum

yang belum dan yang sudah dikonsentrasi.

Disediakan

Preparat Pewarnaan Ziehl-Neelsen dari sputum yang belum dikonsentrasi yang

telah dikonsentrasi dibawah mikroskop.

Kerjakan

Lihatlah di bawah mikroskop kedua preparat tersebut. Perhatikan dan bandingkan

apa yang saudara lihat di bawah mikroskop.

Hasil pengamatan

Hasil pengamatan Sputum biasa Sputum konsentrasi

Sel-sel lekosit/lpk ………………….. …………………..

Basil tahan asam

jumlah ………………….. …………………..
cara berkelompok ………………….. …………………..

Bakteri lain ………………….. …………………..

Gambar
1. Mengenal Medium Spesifik untuk Isolasi Mycobacterium tuberculosis
dan Melihat Bentuk Koloninya.

Tujuan

Setelah menyelesaikan praktikum ini, diharapkan mahasiswa sudah mampu:

a. Mengenal salah satu medium yang dipakai untuk isolasi M. tuberculosa,

b. Dapat menjelaskan morfologi M. Tuberculosa di atas medium Lowenstein-

Jensen.

Disediakan

Biakan Mycobactreium tuberculosa pada medium Lowenstein-Jensen.

Dikerjakan

Perhatikan medium dan koloni yang tumbuh di atasnya:

Catat penampilan medium (warna dan bentuk) serta bentuk, warna koloni yang
tumbuh pada medium tersebut dan catat.

Hasil Pengamatan

Hasil pengamatan koloni Gambar

Bentuk ……………………………….

Tepi ………………………………….

Permukaan ……………………………

Warna …………………………………

2
2. Melihat Preparat Sputum dengan Pewarnaan Gram

Tujuan

Setelah menyelesaikan praktikum ini, diharapkan mahasiswa sudah mampu:

 Menyebutkan bakteri-bakteri yang bsia ditemukan pada sputum penderita

dengan infeksi saluran respirasi,

 Menjelaskan morfologi, cara berkelompok dan sifat pewarnaan bakteri

yang bisa dilihat pada spautum penderita dnegan infeksi saluran respirasi.

Disediakan

Satu preparat sputum dengan pewarnaan Gram di bawah mikroskop.

Dikerjakan

Perhatikan dan catat hasil pengamatan saudara pada preparat sputum dengan Gram .

Hasil Pengamatan

Yang Diamati Gambar

Sel-sel lekosit/lpk …………………..

Warna : Inti ……………………

sitoplasma …………………….
…………………….
Jumlah
Bakteri 1
Morfologi …………………..
Cara berkelompok …………………..

Sifat Gram …………………..

3
 Bakteri 2

Morfologi …………………..
Cara berkelompok …………………..
Sifat Gram …………………..

Bakteri 2

Morfologi …………………..
Cara berkelompok …………………..
Sifat Gram …………………..

Catatan :

..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................

..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................
..........................................................................................................................................

4
 Klebsiella pneumoniae
Disediakan
1. Satu seri yang terdiri dari preparat Gram dan biakan dari Klebsiella pneumonia, pada
lempeng agar McConkey dan lempeng agar Brain Heart Infusion dan tes-tes biokimia.

2. Daftar reaksi biokimia dari basil-basil Enterobacteriaceae

Hasil pengamatan
a. Gambaran Mikroskopis

Klebsiella pneumoniae

a. Gambaran koloni pada McConkey & Brain Heart Infusion Agar:

Klebsiella pneumoniae
Ciri-ciri Koloni
BHIA McConkey
Bentuk
Tepi
Permukaan
Kejernihan
Elevasi
Warna
Gambar

5
d. Hasil Tes-tes Biokimia

TES BIOKIMIA Interpretasi

Reaksi TSI: Slant
Butt
H2S
Gas
SIM: Produksi Indol
H2S
Motility
Tes Methyo Red

Tes Voges Proskauer

Tes Citrat
Tes Urea
Penylalanine diaminase
Lysine decarboxylase
Arginine dehydrolase
Ornitine decarboxylase
Peragian: Glukosa : asam
Gas
Laktose
Sukrose
Maltose
Tes Oksidase
Tes katalase

6
 REAKSI BIOKIMIA BASIL-BASIL NEGATIF-GRAM

Enterobacter agglomerans

Pseudomonas aeruginosa
Providensia alkalifaciens
Klebsiella pneumoniae

Alkaligenes faecalis
Providencia stuartii
Proteus mirabilis

Salmonella typhi
Proteus vulgaris

Shigella flexneri
Escherichia coli

Vibrio cholerae
REAKSI
BIOKIMIA

Slant As As As As Alk Alk Alk Alk Alk Alk Alk As

TSI Butt As As As As As As As As As N N As
H2S - - + + + - - - - - - -
Gas + + ± + -+ - -+ -+ -+ + + -
Indol + - + - - - -+ + +
SIM H2S - - + + + - - - - - - -
Motility + - + + + - -+ + + + +
M R + -+ + + + + -+ + + - -
V P - + - - - - + - -
C I t r a t - + -+ + -+ - D + + ±
U r e a - + + + - - D - - -
Phenylalanin
- - + + - - -+ + +
diaminase
Lysine
+ + - - + - - - - - -
decarboxylase
Arginin
+ - + -
dihydrolase
Ornithine
+ - - + + -+ - - - +
decarboxylase
Glukosa-
+ + + + + + + + + - +
peragian
KH
+ + ± + - - -+ - - -
Gas
Laktose + + - - - - D + + - -+ -
Sucrose + - - - - - +
Mannitol + - - + - +
Oksidase - - - - - - - - - + +
Katalase - - - - + - - - - - -

7
 Mycobacterium tuberculosis
Features:

1. slender, often slightly curved, rods

2. aerobic, non-motile, non-spore forming

8
 3. acid fail to wash the stain out Æ acid fast bacilli

Characteristics :

1. live in weeks in dry condition

9
 2. no endotoxins, no exotoxins

3. hematogenic spread

4. grows slowly (24-32 hr)

5. non specific clinical manifestation

6. aerob, organ predilection - lung

7. wide spectrum of replication: dormant

Transmission

1. airborne human to human transmission by droplet nuclei

2. adult pulmonary TB: cough, sneeze, speak, or sing

3. droplet nuclei : contain 2-3 bacilli, small size (1-5m) keep in the air for long period

TB droplet nuclei

10