PENGARUH PEMBERIAN AIR PERASAN JERUK LEMON

(Citrus limon) TERHADAP SEL PURKINJE PADA KORTEKS

SEREBELUM MENCIT PUTIH JANTAN (Mus musculus) YANG
DIPAPAR MONOSODIUM GLUTAMAT (MSG)

THE EFFECTIVENESS OF LEMON JUICE (Citrus limon) ON

PURKINJE CELL OF WHITE MALE MICE (Mus musculus)
CEREBELLAR CORTEX THAT EXPOSED BY MONOSODIUM
GLUTAMATE (MSG)

KARYA TULIS ILMIAH

Diajukan Sebagai Syarat Untuk Mengikuti Sidang Karya Tulis Ilmiah

Program Studi Akademik Pendidikan Dokter

Oleh
I GUSTI AYU NOVITA AFSARI
115170026

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SWADAYA GUNUNG JATI
CIREBON
2019
 PENGARUH PEMBERIAN AIR PERASAN JERUK LEMON
(Citrus limon) TERHADAP SEL PURKINJE PADA KORTEKS
SEREBELUM MENCIT PUTIH JANTAN (Mus musculus) YANG
DIPAPAR MONOSODIUM GLUTAMAT (MSG)

THE EFFECTIVENESS OF LEMON JUICE (Citrus limon) ON

PURKINJE CELL OF WHITE MALE MICE (Mus musculus)
CEREBELLAR CORTEX THAT EXPOSED BY MONOSODIUM
GLUTAMATE (MSG)

KARYA TULIS ILMIAH

Diajukan Sebagai Syarat Untuk Mengikuti Sidang Karya Tulis Ilmiah

Program Studi Akademik Pendidikan Dokter

Oleh
I GUSTI AYU NOVITA AFSARI
115170026

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SWADAYA GUNUNG JATI
CIREBON
2019

i
 LEMBAR PENGESAHAN KARYA TULIS ILMIAH

PENGARUH PEMBERIAN AIR PERASAN JERUK LEMON

(Citrus limon) TERHADAP SEL PURKINJE PADA KORTEKS
SEREBELUM MENCIT PUTIH JANTAN (Mus musculus)
YANG DIPAPAR MONOSODIUM GLUTAMAT

Disusun oleh
I GUSTI AYU NOVITA AFSARI 115170026

Telah disetujui,

Cirebon, Maret 2019

Pembimbing 1 Pembimbing 2

(Hikmah Fitriani, S.Si.M.Si.Med) (dr. Triono Adi S, Sp.OG,M.Med.,M.Phil)

ii
 PERNYATAAN KEASLIAN
Yang bertanda tangan di bawah ini, saya:

Nama : I Gusti Ayu Novita Afsari

NPM : 115170026

Alamat : Br. Tambak Sari Kapal, Mengwi, Badung, Bali

Dengan ini menyatakan bahwa :

1. Karya tulis saya ini adalah penelitian lanjutan yang diajukan untuk mendapatkan
gelar akademik sarjana FK Unswagati.
2. Karya tulis ini adalah murni gagasan, rumusan, dan penelitian saya sendiri, tanpa
bantuan pihak lain, kecuali arahan Komisi Proposal dan Pembimbing.
3. Dalam karya tulis ini tidak terdapat karya atau pendapat yang telah ditulis atau
dipublikasikan orang lain kecuali secara tertulis dengan jelas dicantumkan sebagai
acuan dalam naskah dengan disebutkan nama pengarang dan dicantumkan dalam
Daftar Pustaka.
4. Pernyataan ini saya buat dengan sesungguhnya dan apabila di kemudian hari
terdapat penyimpangan dan ketidakbenaran dalam pernyataan ini, maka saya
bersedia menerima sanksi akademik berupa pencabutan gelar yang telah diperoleh
karena karya ini, serta sanksi lainnya sesuai dengan norma yang berlaku di
Unswagati.

Cirebon, Maret 2019

Yang membuat menyatakan,

I Gusti Ayu Novita Afsari

NPM. 115170026

iii
 KATA PENGANTAR

Puji syukur saya panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat
dan rahmat-Nya saya dapat menyelesaikan tugas proposal ini. Penulisan karya tulis
ilmiah ini dilakukan untuk memenuhis salah satu syarat untuk kelulusan di Fakultas
Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon. Saya menyadari sangatlah
sulit bagi saya untuk menyelesaikan karya tulis ilmiah ini tanpa bantuan dan
bimbingan dari berbagai pihak. Bersama ini saya sampaikan terima kasih yang
sebesar-besarnya serta penghargaan yang setinggi-tingginya kepada:

1. Dr. Mukarto Siswoyo, Drs., M, Si. selaku Rektor Universitas Swadaya

Gunung Jati Cirebon atas kesempatan yang telah diberikan untuk menimba
ilmu di Universitas Swadaya Gunung Jati.
2. Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon, Catur
Setiya Sulistiana, dr. M.Med.Ed yang telah memberikan sarana dan prasarana
kepada kami sehingga saya dapat menyelesaikan karya tulis ilmiah ini dengan
baik dan lancar.
3. Hikmah Fitriani, S.Si.M.Si.Med selaku dosen pembimbing pertama yang telah
menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk membimbing saya dalam
penyusunan karya tulis ilmiah ini.
4. dr. Triono Adi Suroso, Sp.OG,M.Med.,M.Phil selaku dosen pembimbing
kedua yang telah menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk membimbing
saya dalam penyusunan karya tulis ilmiah ini.
5. Ayah saya Gusti Ngurah Wiratha, Ibu saya Juriah dan kakak-kakak saya Vina,
Devi, dan dr Nita yang senantiasa memberikan dukungan moral maupun
material. Terimakasih atas semua doa-doanya, perhatian, kasih sayang yang
senantiasa diberikan kepada saya.
6. Para sahabat Rike, Dewi, Lulu, Ken, Indira, Nury, Syahid yang selalu
memberi dukungan dalam menyelesaikan karya tulis ilmiah ini.

iv
 7. Serta pihak lain yang tidak mungkin disebutkan satu-persatu atas bantuannya
secara langsung sehingga karya tulis ilmiah ini dapat terselesaikan dengan
baik.

Akhir kata, saya berharap Tuhan Yang Maha Esa berkenan membalas kebaikan
semua pihak yang telah membantu. Semoga karya tulis ilmiah ini dapat bermanfaat
bagi kita semua.

Cirebon, Maret 2019

Penulis

v
 DAFTAR ISI

COVER DALAM ....................................................................................................... i

LEMBAR PENGESAHAN KARYA TULIS ILMIAH .......................................... ii

PERNYATAAN KEASLIAN ................................................................................... iii

KATA PENGANTAR ............................................................................................... iv

DAFTAR ISI .............................................................................................................. vi

DAFTAR TABEL ...................................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ................................................................................................. xi

DAFTAR SINGKATAN .......................................................................................... xii

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................... xiii

ABSTRAK ............................................................................................................... xiv

ABSTRACT .............................................................................................................. xv

BAB I PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang ............................................................................................... 1

1.2. Rumusan Masalah ........................................................................................... 4

1.3. Tujuan Penelitian ............................................................................................ 4

1.3.1.Tujuan Umum ....................................................................................... 4

1.3.2.Tujuan Khusus ...................................................................................... 4

1.4. Manfaat Penelitian ......................................................................................... 5

1.4.1.Manfaat untuk Ilmu Pengetahuan .............................................................. 5

1.4.2. Manfaat untuk Pelayanan Kesehatan ........................................................ 5

1.4.3. Manfaat untuk Masyarakat ........................................................................ 5

vi
 1.4.4. Manfaat untuk Peneliti ............................................................................... 5

1.5. Orsinilitas Penelitian ..................................................................................... 6

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Landasan Teori

2.1.1. Jeruk Lemon (Citrus limon)

2.1.1.1. Deskripsi Jeruk Lemon .............................................................. 10

2.1.1.2. Taksonomi Jeruk Lemon ............................................................ 10

2.1.1.3. Kandungan Buah Jeruk Lemon .................................................. 11

2.1.1.4. Efek Antioksidan Buah Jeruk Lemon ......................................... 13

2.1.2. Serebelum

2.1.2.1. Anatomi Serebelum ..................................................................... 15

2.1.2.2. Struktur Mikroskopis Serebelum ................................................. 15

2.1.3. Histologis Sel Purkinje ......................................................................... 17

2.1.4 Monosodium Glutamat (MSG)

2.1.4.1. Definisi MSG................................................................................ 18

2.1.4.2 Metabolisme MSG Dalam Tubuh.................................................. 19

2.1.4.3 Mekanisme Eksitotoksik MSG terhadap Otak .............................. 20

2.2 Kerangka Teori ............................................................................................ 22

2.3 Kerangka Konsep ........................................................................................ 23

2.4 Hipotesis ...................................................................................................... 23

vii
BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Ruang Lingkup penelitian .................................................................................. 24

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................................................ 24

3.3 Jenis Data dan Rancangan Penelitian ................................................................24

3.4 Populasi dan sampel .................................................................................... 24

3.4.1. Populasi Target .................................................................................. 24

3.4.2. Populasi Terjangkau........................................................................... 24

3.4.3. Sampel Penelitian............................................................................... 25

3.4.4. Cara Sampling .................................................................................... 25

3.4.5. Besar Sampel ..................................................................................... 26

3.5 Variabel Penelitian ...................................................................................... 26

3.7.1. Variabel Bebas (independent) ................................................................. 26

3.7.2. Variabel Terikat (dependent) ................................................................... 26

3.6 Definisi Operasional .................................................................................... 27

3.7 Cara Pengumpulan Data .............................................................................. 28

3.7.1 Alat dan Bahan .................................................................................... 28

3.7.2 Prosedur Penelitian ............................................................................. 29

3.8 Alur Penelitian ............................................................................................. 34

3.9 Pengolahan Data dan Analisis Data ...................................................................35

3.10 Etika Penelitian............................................................................................ 35

3.11 Jadwal Penelitian .......................................................................................... 36

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian ............................................................................................. 37

viii
 4.1.1 Deskripsi Penelitian ................................................................................. 37

4.1.2 Hasil Pengamatan Mikroskopis Sel Purkinje Pada Korteks Serebelum

dengan Pembesaran 100x dan 400x ........................................................ 38

4.1.3 Hasil Analisis Uji Statistik Jumlah Sel Purkinje Pada Korteks Serebelum
................................................................................................................. 41

4.2 Pembahasan ................................................................................................... 44

4.3 Keterbatasan Penelitian ................................................................................. 46

BAB V SIMPULAN DAN SARAN

5.1 Simpulan ....................................................................................................... 47

5.2 Saran ............................................................................................................. 47

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................... 48

LAMPIRAN .............................................................................................................. 53

ix
 DAFTAR TABEL

Tabel 1 Orisinalitas Penelitian .................................................................................... 6

Tabel 2 Definisi Operasional ..................................................................................... 27
Tabel 3 Alat-Alat Penelitian ...................................................................................... 28
Tabel 4 Bahan-bahan Penelitian ................................................................................ 28
Tabel 5 Jadwal Penelitian .......................................................................................... 36
Tabel 6 Hasil rata-rata jumlah sel purkinje pada korteks serebelum dari masing-
masing kelompok perlakuan ........................................................................ 40
Tabel 7 Hasil Uji Normalitas Jumlah Sel Purkinje. .................................................. 41
Tabel 8. Uji One Way Anova ..................................................................................... 42
Tabel 9.Uji Homogenitas Levene Test ...................................................................... 42
Tabel 10. Perbedaan Jumlah Sel Purkinje Antara Kelompok ................................... 43

x
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Buah Jeruk Lemon20 .......................................................................... 11

Gambar 2. Korteks serebelum1 ............................................................................ 17
Gambar 3. Rumus Kimia MSG2 .......................................................................... 19
Gambar 4. Kerangka Teori .................................................................................. 22
Gambar 5. Kerangka Konsep............................................................................... 23
Gambar 6. Alur Penelitian ................................................................................... 34
Gambar 7. Gambaran Mikroskopis Sel Purkinje Perbesaran 100x dan 400x....... 39

xi
 DAFTAR SINGKATAN

MSG : Monosodium Glutamat

IHS : Information Handling Services
Riskesdas : Riset Kesehatan Dasar
FDA : Food Drug Administration
WHO : World Health Organization
ADI : Acceptable Daily Intake
GABA : Gamma-aminobutyric acid
DPPH : 1,1-diphenyl-2-picrylhyrazil
MMP-1 : Matrix Metaloproteinase-1
UVB : Ultraviolet B
SSP : Sistem Saraf Pusat
GRAS : Generally Recognized as Safe
FASEB : Federation of American Societies for Experimental Biology
IC50 : Inhibition Concentration 50%
AMPA : α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionate
NMDA : N-methyl-D-aspartate

xii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Ethical Clearance ............................................................................... 53

Lampiran 2. Surat Kesbangpol Cirebon ................................................................. 54
Lampiran 3. Surat Kesbangpol Yogyakarta ........................................................... 55
Lampiran 4. Surat Penelitian .................................................................................. 56
Lampiran 5. Surat Laboratorium Biomedis FK Unswagati ................................... 57
Lampiran 6. Hasil Perhitungan Rerata Jumlah Sel Purkinje .................................. 59
Lampiran 7. Uji Analisa Statistik Jumlah Sel Purkinje .......................................... 60
Lampiran 8. Dokumentasi Pelaksanaan Penelitian ................................................ 65
Lampiran 9. Biodata Peneliti .................................................................................. 70

xiii
 PENGARUH PEMBERIAN AIR PERASAN JERUK LEMON (Citrus limon)
TERHADAP SEL PURKINJE PADA KORTEKS SEREBELUM MENCIT
PUTIH JANTAN (Mus musculus) YANG DIPAPAR MONOSODIUM
GLUTAMAT (MSG)
I Gusti Ayu Novita Afsari*, Hikmah Fitriani**, Triono Adi Suroso**

*Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati

**Dosen Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati
Corresponding author email: novitachingu24@gmail.com

ABSTRAK

Latar Belakang: Monosodium glutamat (MSG) merupakan bumbu penyedap yang

sering digunakan masyarakat untuk meningkatkan cita rasa makanan. Berdasarkan
hasil Riskesdas 2013 perilaku konsumsi makanan berisiko pada penduduk umur ≥10
tahun paling banyak konsumsi bumbu penyedap (77,3%). Konsumsi MSG berlebih
memicu pembentukan radikal bebas yang dapat memberikan efek negatif terhadap sel
purkinje pada korteks serebelum. Buah lemon merupakan tanaman yang memiliki
manfaat sebagai antioksidan alami karena mengandung senyawa seperti flavonoid
vitamin C, dan kandungan zat lainnya.
Tujuan: Untuk mengetahui pengaruh pemberian air perasan jeruk lemon (Citrus
limon) terhadap jumlah sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan (Mus
musculus) yang dipapar monosodium glutamat.
Metode: Penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan rancangan post test
only control group design. Subjek penelitian ini merupakan 30 ekor mencit putih
jantan dikelompokkan secara random menjadi 5 kelompok yaitu: Kontrol normal
(KN), kontrol negatif (K-), kelompok dosis I (KD I), kelompok dosis II (KD II),
kelompok dosis III (KD III). Setiap kelompok dipapar MSG dosis 4mg/grBB kecuali
pada KN. Setelah pemaparan MSG Kelompok KDI, KDII, dan KDIII diberikan air
perasan jeruk lemon dengan dosis 3,33ml/kgBB, 6,67ml/kgBB, dan 13,33 ml/kgBB.
Hasil penelitian dianalisis dengan uji One Way ANOVA kemudian dilanjutkan dengan
uji Post hoc Bonferroni.
Hasil: Terdapat pengaruh pemberian air perasan jeruk lemon (Citrus limon) dengan
dosis 3,33 ml/kgBB, 6,67 ml/kgBB dan 13,33 ml/kgBB terhadap peningkatan jumlah
sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan yang dipapar MSG (p = 0,009)
Kesimpulan: Air perasan jeruk lemon (Citrus limon) dosis 13,33 ml/kgBB
merupakan dosis yang paling berpengaruh sebagai antioksidan untuk menghambat
kematian sel purkinje pada korteks serebelum dengan rata-rata tertinggi yaitu 17,5 sel
Kata Kunci: Citrus limon, sel purkinje, monosodium glutamate (MSG)

xiv
1
 THE EFFECTIVENESS OF LEMON JUICE (Citrus limon) ON PURKINJE
CELL OF WHITE MALE MICE (Mus musculus) CEREBELLAR CORTEX
THAT EXPOSED BY MONOSODIUM GLUTAMATE (MSG)
I Gusti Ayu Novita Afsari*, Hikmah Fitriani**, Triono Adi Suroso**

*Student of Medical Faculty Swadaya Gunung Jati University, Cirebon, Indonesia

**Lecture of Medical Faculty Swadaya Gunung Jati University, Cirebon, Indonesia
Corresponding author email: novitachingu24@gmail.com

ABSTRACT
Background: Monosodium glutamate (MSG) is a flavoring ingredient that is often
used by people to improve food taste. Based on the results of the 2013 Riskesdas, the
risk of food consumption behavior in the population aged ≥10 years most consumed
flavorings (77.3%). Consumption of excess MSG triggers the formation of free
radicals which can have a negative effect on purkinje cells in the cerebellar cortex.
Lemon fruit is a plant that has benefits as a natural antioxidant because it contains
compounds such as vitamin C, flavonoids, and other substances.
Objective: To determine the effect of lemon juice (Citrus limon) on the number of
purkinje cells in the cerebellum cortex of white male mice (Mus musculus) that
exposed by monosodium glutamate.
Method: This study was an experimental study with a post test only control group
design. The subjects of this study were 30 white male mice grouped randomly into 5
groups: Normal control (KN), negative control (K-), group dose I (KD I), group dose
II (KD II), dose group III (KD III) . Each group was exposed by 4 mg / grBB dose of
MSG except KN. After exposure of MSG KD I, KD II, and KD III were given lemon
juice with doses of 3.33ml / kgBW, 6.67ml / kgBW, and 13.33 ml / kgBW. The
results of the study were analyzed by One Way ANOVA then followed by the
Bonferroni Post hoc test.
Results: There is an effect of giving lemon juice (Citrus limon) with doses of 3.33
ml / kgBW, 6.67 ml / kgBW and 13.33 ml / kgBW to increased the number of
purkinje cells of the cerebellar cortex of white male mice that exposed by MSG (p =
0,009)
Conclusion: Lemon juice (Citrus limon) dose of 13.33 ml / kgBB is the most
effective dose as an antioxidant to inhibit the death of purkinje cells in the cerebellar
cortex with the highest average of 17.5 cells
Keyword: Citrus limon, purkinje cell, monosodium glutamate (MSG)

1
xv
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Manusia dalam kehidupan sehari-hari membutuhkan makanan dan
minuman untuk bertahan hidup. Makanan yang dikonsumsi biasanya dijual baik
dalam bentuk kemasan maupun siap konsumsi. Masyarakat sering menambahkan
zat aditif penyedap rasa yang dikenal dengan MSG (Monosodium glutamat) untuk
meningkatkan cita rasa makanan. Berbagai merk dagang MSG telah dikenal
dimasyarakat secara luas seperti Ajinomoto, Vetsin, Micin, Sasa, Miwon dan
sebagainya (1)
Monosodium glutamat (MSG) merupakan penguat rasa yang
penggunaannya cukup luas di masyarakat, mulai dari produk makanan ringan
hingga masakan olahan. Luasnya penggunaan MSG seringkali tidak disertai
dengan pencantuman kadarnya pada kemasan, bahkan penggunaan MSG untuk
konsumsi rumah tangga tidak memiliki takaran yang jelas. Berdasarkan laporan
Information Handling Services (IHS), di tahun 2014 Asia menempati peringkat
pertama baik dalam produksi, ekspor, dan konsumsi MSG. Indonesia menempati
peringkat kedua terbesar pengekspor MSG di dunia sebanyak 16% dari total
ekspor MSG di dunia. Tidak hanya dalam hal ekspor, Asia juga menempati
peringkat pertama dalam urusan konsumsi MSG. Di tahun 2014 tercatat Asia
mengambil porsi sebanyak 88,1% dari total keseluruhan konsumsi MSG di dunia,
Cina menempati urutan pertama (sebanyak 55%), kemudian diikuti oleh
Indonesia, Vietnam, Thailand(2). Berdasarkan hasil Riskesdas 2013 perilaku
konsumsi makanan berisiko pada penduduk umur ≥10 tahun paling banyak
konsumsi bumbu penyedap (77,3%), diikuti makanan dan minuman manis
(53,1%), dan makanan berlemak (40,7%)(3).
Meskipun diperkenankan sebagai penyedap masakan, penggunaan MSG
berlebihan dapat mengakibatkan rasa pusing dan mual. Gejala itu disebut Chinese

1
 2

Restaurant Syndrome. Laporan masyarakat ke Food Drug Administration (FDA),

2% dari seluruh pengguna MSG mengalami masalah kesehatan, sehingga WHO
menetapkan ADI (Acceptable Daily Intake) untuk manusia sebesar 120 mg/kgBB
atau jika MSG dikonsumsi oleh seseorang yang tidak toleransi dengan jumlah
lebih dari 3gr/hari akan dapat menimbulkan efek yang merugikan bagi
kesehatan(4).
Komposisi senyawa MSG adalah 78% glutamat, 12% natrium dan 10%
air. MSG bila larut di dalam air ataupun saliva akan berdisosiasi menjadi garam
bebas dan bentuk anion dari asam glutamat (glutamat)(5). Glutamat juga
diproduksi oleh tubuh manusia dan akan berikatan dengan asam amino lainnya
untuk membentuk struktur protein(6). Glutamat yang diproduksi oleh neuron
didalam tubuh manusia berperan sebagai neurotransmitter. Glutamat diketahui
merupakan neurotransmitter eksitatorik utama yang terdapat di SSP pada mamalia
dan terlibat dalam berbagai aspek fungsi dari otak normal termasuk fungsi
kognisi, pembelajaran dan memori(7).
Akumulasi glutamat dalam jumlah yang sangat melimpah di celah sinaps
(celah antara sel saraf), disebutkan akan dapat bersifat eksitotoksik bagi otak(8).
Akumulasi glutamat ini menyebabkan terjadinya overstimulasi reseptor glutamat,
neuron dan otak secara keseluruhan. Overstimulasi dari reseptor glutamat akan
dapat menginisiasi berbagai kaskade yang berpotensi untuk menginduksi
terjadinya kerusakan dan kematian sel. Hal ini merupakan konsekuensi dari
konsentrasi ion kalsium yang berlebihan di intrasel, sehingga terjadi disfungsi
dari mitokondria yang menyebabkan terbentuknya radikal bebas, aktivasi jalur
caspase dan degradasi protein-protein intrasel(9).
Efek eksitotoksik MSG memungkinkan menjadi penyebab munculnya
efek negatif pada serebelum yang berperan penting dalam pengaturan aktivitas
dan koordinasi motorik. Neuron korteks serebelum, terdiri atas lima tipe sel yaitu
: sel Golgi, sel Purkinje, sel basket, sel granulla, dan sel stellata. Sel Purkinje
memiliki peranan fungsional yang utama dalam pengaturan koordinasi motorik,
 3

selain karena jumlahnya yang paling banyak pada tubuh manusia, sel ini juga
menjadi pusat penjalaran sinyal di korteks serebelum(10).
Jurnal Neurochemistry International melaporkan bahwa pemberian MSG
sebanyak 4 mg/g berat badan ke bayi tikus menimbulkan neurodegenerasi berupa
jumlah neuron lebih sedikit dan rami dendrit (jaringan antar sel syaraf otak) lebih
renggang, sementara bila disuntikkan kepada tikus dewasa, dosis yang sama
menimbulkan gangguan pada neuron dan daya ingat. Pada pembedahan ternyata
terjadi kerusakan pada nucleus arkuatus di hypothalamus(8). Pada penelitian
Eweka et al (2007) pemberian MSG pada tikus secara histologi menunjukkan
adanya kerusakan dan kematian sel Purkinje serebelum yang menyebabkan
terjadinya perubahan fungsi koordinasi motoric(11).
Tubuh manusia menghasilkan antioksidan (antioksidan endogen) untuk
melawan radikal-radikal bebas dan molekul berbahaya lainnya yang ada di dalam
tubuh termasuk MSG, namun jika radikal bebas dan molekul berbahaya lainnya
tersebut terdapat dalam jumlah yang berlebihan maka tubuh memerlukan
antioksidan dari luar tubuh (antioksidan eksogen) untuk melawannya.
Antioksidan eksogen dapat berasal dari berbagai macam bahan yang terdapat di
alam, salah satunya pada buah lemon(12).
Buah lemon merupakan tanaman yang memiliki manfaat sebagai
antioksidan alami karena memiliki kandungan vitamin C, asam sitrat, minyak
atsiri, bioflavonoid, polifenol, kumarin, flavonoid, dan minyak-minyak volatil
pada kulitnya seperti limonen (±70%), α-terpinen, α-pinen, β-pinen, serta
kumarin, dan polifenol. Kandungan vitamin C (asam L-askorbat) pada buah
lemon merupakan antioksidan intrasel dan ekstrasel yang paling penting bagi
tubuh. Pada penelitian Rezandi (2000) pemberian vitamin C dapat menurunkan
jumlah neuron yang rusak pada pada otak mencit yang diinduksi monosodium
glutamat. Hal ini menunjukan bahwa pemberian MSG dan vitamin C berpengaruh
terhadap gambaran histologi otak mencit(13). Penelitian Krisnawan et al (2017)
 4

mengenai pengujian potensi antioksidan pada buah lemon lokal dan impor
mendapatkan hasil pengujian secara kualitatif ekstrak kulit dan perasan daging
buah lemon lokal dan impor, diketahui memiliki aktivitas antioksidan dengan
menghasilkan peredaman DPPH yang ditandai dengan berkurangnya intensitas
warna ungu(12). Penelitian Anshori Ahmad (2017) mengenai pemberian ekstrak
kulit jeruk lemon secara oral mampu meningkatkan jumlah kolagen dan
menurunkan ekspresi MMP-1 pada tikus putih jantan galur Wistar (Rattus
norvegicus) yang dipajan sinar UVB(14).
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan sebelumnya maka penelitian
ini akan mengkaji tentang pengaruh pemberian air perasan jeruk lemon (Citrus
limon) terhadap sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan (Mus
musculus) yang dipapar monosodium glutamat

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, maka rumusan masalah
dalam penelitian ini adalah: Apakah pemberian air perasan jeruk lemon (Citrus
limon) berpengaruh terhadap jumlah sel purkinje korteks serebelum mencit putih
jantan (Mus musculus) yang dipapar monosodium glutamat?

1.3 Tujuan penelitian

1.3.1 Tujuan Umum
Untuk mengetahui pengaruh pemberian air perasan jeruk lemon (Citrus
limon) terhadap jumlah sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan
(Mus musculus) yang dipapar monosodium glutamat.
1.3.2 Tujuan Khusus
1. Untuk mengetahui pengaruh pemberian air perasan jeruk lemon
dengan dosis 3,33 ml/kgBB, 6,67 ml/kgBB, dan 13,33 ml/kgBB
terhadap jumlah sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan
yang dipapar monosodium glutamat.
 5

2. Untuk mengetahui dosis paling berpengaruh air perasan jeruk lemon

terhadap jumlah sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan
yang dipapar monosodium glutamat.

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Manfaat untuk ilmu pengetahuan
Hasil penelitian ini diharapkan dapat menambah ilmu pengetahuan
mengenai pengaruh pemberian air perasan jeruk lemon sebagai
antioksidan radikal bebas dan pengaruh paparan monosodium glutamat
terhadap sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan.
1.4.2 Manfaat untuk pelayanan kesehatan
Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah
mengenai efek antioksidan air perasan jeruk lemon dan pengaruh
monosodium glutamat terhadap sel purkinje korteks serebelum.
1.4.3 Manfaat untuk masyarakat
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan pengetahuan kepada
masyarakat tentang efek MSG terhadap otak dan manfaat air perasan jeruk
lemon untuk menangkal radikal bebas.
1.4.4 Manfaat untuk peneliti
Dapat mengembangkan kemampuan di bidang penelitian serta mengasah
kemampuan analisis penelitian.
 6

1.5 Orisinalitas penelitian

Tabel 1 Orisinalitas Penelitian
No Nama Judul Penelitian Desain Hasil Penelitian
Peneliti Penelitian
1. Aminuddin The effects of black Subjek penelitian Telah ditemukan bahwa
M,Partadire garlic (Allium menggunakan 25 jumlah sel Purkinje
dja G, Sari sativum L) ethanol ekor tikus putih serebelum dari semua
DCR extract on the jantan usia 4-5 kelompok yang diberi
(15)
(2015) estimated total minggu dan ekstrak bawang hitam
number of Purkinje dibagi dalam 5 secara signifikan lebih
cells and motor kelompok. tinggi daripada
coordination of male kelompok yang diberi
adolescent Wistar MSG saja. Tidak ada
rats treated with perubahan dalam fungsi
monosodium koordinasi motorik yang
glutamate diamati sebagai akibat
dari MSG
2 Dani Pengaruh Pemberian 24 ekor tikus Kelompok tikus dengan
Prastiwi Monosodium Wistar usia 4-5 paparan MSG 3,5
(2015)(16) Glutamat terhadap minggu, berat mg/grBB mengalami
Koordinasi Motorik badan 100-150 penurunan jumlah sel
dan Jumlah Sel gr, terbagi dalam Purkinje cerebellum dan
Purkinje Cerebellum 4 kelompok. gangguan koordinasi
Tikus Wistar (Rattus motorik yang lebih
norvegicus) Jantan banyak dibandingkan
Remaja dengan kelompok lain.
Terdapat hubungan yang
bermakna antara
koordinasi motorik dan
jumlah sel Purkinje
cerebellum tikus Wistar
 7

(Rattus norvegicus)
jantan remaja.
3. Zulfiani, Pengaruh Pemberian Penelitian ini Kerusakan mikro pada
Syafruddin Vitamin C dan E menggunakan ginjal menunjukkan
Ilyas dan terhadap Gambaran rancangan acak perbedaan yang
Salomo Histologis Ginjal lengkap yang signifikan antara
Hutahaean Mencit (Mus terdiri dari 6 kelompok kontrol dan
(2013)(17) musculus L.) yang perlakuan dan 5 perawatan. Pada P1,
Dipajankan ulangan kerusakan tubulus
Monosodium proksimal adalah
Glutamat (MSG) 69,95% ± 5 dan pada P4
adalah 47,22% ± 3.
Kombinasi vitamin C
dan E dapat mengurangi
efek MSG pada ginjal.
4. Ahmad M. Pemberian oral Jenis penelitian Pemberian ekstrak kulit
Anshori, ekstrak kulit buah ialah buah lemon per oral
Anak A. G. lemon (Citrus limon) eksperimental dapat menurunkan
P. menghambat murni dengan ekspresi MMP-1 dan
Wiraguna, peningkatan ekspresi post test only meningkatkan jumlah
Wimpie MMP-1 dan control group kolagen pada tikus putih
Pangkahila penurunan jumlah design. jantan galur Wistar
(2017)(14) kolagen pada tikus (Rattus norvegicus) yang
putih galur wistar dipajan sinar UVB.
jantan (Rattus
norvegicus) yang
dipajan sinar UV B
 8

5. Yohanes Daya Analgesik Sari Uji penelitian Sari buah jeruk lemon
Adi Wijaya Buah Jeruk Lemon eksperimental mempunyai daya
(2008)(18) (Citrus limon (L) murni dengan analgesik. Presentasi
Burm. F.) pada rancangan acak proteksi terhadap geliat
Mencit Putih Betina. pola searah. dosis 2; 3,33; 6,67;
13,33; 26,67 ml/kgBB
berturut-turut adalah
60,91%; 51,77%;
70,55%; 69,03%;
74,11%.

Perbedaan penelitian dengan yang terdahulu adalah

1. Pada penelitian Aminudin (2015) variabel bebas penelitian tersebut merupakan
ekstrak etanol bawang hitam (Allium sativum L) sedangkan pada penelitian ini
menggunakan air perasan jeruk lemon (Citrus limon) . Variabel terikat pada
penelitian Aminudin adalah jumlah sel purkinje dan koordinasi motorik tikus
Wistar sedangkan pada penelitian ini variabel terikat jumlah sel purkinje
korteks serebelum mencit putih jantan.
2. Pada penelitian Dani Prastiwi (2015) variabel bebas penelitian tersebut
merupakan monosodium glutamat sedangkan pada penelitian ini menggunakan
air perasan jeruk lemon. Variabel terikat pada penelitan Dani Prastiwi
merupakan koordinasi motorik dan jumlah sel purkinje serebelum tikus Wistar
jantan remaja, sedangkan variabel terikat pada penelitian ini hanya meneliti
jumlah sel purkinje korteks serebri mencit putih jantan.
3. Pada penelitian Zulfiani dkk (2013) meneliti tentang pengaruh pemberian
vitamin C dan E terhadap gambaran histologis ginjal mencit (Mus musculus L)
sedangkan pada penelitian ini meneliti tentang pengaruh air perasan jeruk
lemon terhadap sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan.
 9

4. Pada penelitian Ahmad M dkk (2017) meneliti tentang pengaruh pemberian

oral ekstrak kulit buah lemon terhadap menghambat peningkatan ekspresi
MMP-1 dan penurunan jumlah kolagen tikus putih sedangkan penelitian ini
meneliti tentang pengaruh air perasan jeruk lemon terhadap sel purkinje
korteks serebelum mencit putih jantan.
5. Pada penelitian Yohanes (2008) meneliti tentang daya analgetik sari buah
jeruk lemon pada mencit putih betina sedangkan penelitian ini meneliti tentang
pengaruh pemberian air perasan jeruk lemon terhadap sel purkinje korteks
serebelum mencit putih jantan yang dipapar MSG
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Landasan teori

2.1.1 Jeruk Lemon (Citrus limon)
2.1.1.1 Deskripsi Jeruk Lemon
Jeruk lemon berasal dari Cina dan Himalaya. Jeruk lemon
memiliki pohon yang kecil dengan tinggi sekitar 2-3 m. Daunnya
berbentuk bulat telur, bunganya tumbuh di ketiak daun. Buahnya
bertangkai pendek dengan bentuk bulat telur atau lonjong yang ujungnya
mengecil seperti pentil, daging buahnya berwarna kuning muda, harum
dan rasanya masam. Bila masak, kulit buahnya berwarna kuning terang
sampai oranye, berbintik-bintik seperti kulit jeruk pada umumnya. Jeruk
lemon berukuran kecil, diameter 7-15 cm, daging buahnya terbagi 8-10
segmen.(19)

2.1.1.2 Taksonomi Jeruk Lemon (Citrus limon)(20)

Kingdom : Plantae
Sub Kingdom : Tracheobionta
Super Divisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida-Dicotyledons
Sub Kelas : Rosidae
Ordo : Sapindales
Famili : Rutaceae
Genus : Citrus
Spesies : Citrus limon burm f

10
 11

Gambar 1: Buah Jeruk Lemon(20)

2.1.1.3 Kandungan buah jeruk lemon

Citrus limon mengandung sejumlah asam sitrat (3,7%), minyak
atsiri (2,5%) yang mengandung 70% d-limonele. Citrus limon juga
mengandung potasium 145 mg per 100 g lemon, bioflavonoids, dan
vitamin c 40-50 mg per 100 g. Citrus limon adalah salah satu heatlh-
promoting fruits karena kaya akan phenolic compounds, vitamins,
minerals, dietary fiber, essensial oils, dan carotenoids. Kemampuan
heatlh-promoting Citrus limon berhubungan dengan kandungan vitamin C
dan flavonoids sebagai antioksidan alami.
a. Phenolic Compounds
Flavonoids adalah phenolic compounds yang paling banyak
ditemukan pada buah Citrus limon, 90% dari keseluruhan
komposisinya. Flavonoids tersusun dari hesperidin, eriocitrin, rutin,
quersertin terutama pada jus buah, dan biji buah, naringin, narirutin,
 12

diomin pada kulit buah, kaempferol, dan myrelcetin pada jus dan kulit
buah(21).
b. Vitamin
Jeruk lemon (Citrus limon) adalah sumber vitamin bagi tubuh
terutama vitamin C, yang merupakan kandungan terbanyak pada buah
ini. Vitamin lain seperti vitamin A, B-group (B1, B2, B3, B6, dan B9)
terkandung dalam jumlah kecil pada buah jeruk lemon(21)
c. Mineral
Potasium adalah mineral utama pada jeruk lemon. Potasium
penting dalam menjaga keseimbangan asam-basa pada tubuh dan
berperan dalam transmisi impuls dari syaraf menuju otot. Kalsium,
magnesium, dan fosfor terkandung dalam buah jeruk lemon dalam
jumlah yang kecil, mineral lain seperti tembaga, besi, dan mangan
terkandung dalam trace level/sangat kecil(21)
d. Dietary Fiber
Jeruk lemon terutama tersusun dari non-starch polysaccharides
(NSP). Yang dapat terklasifikasi menjadi: soluble dietary fiber (SDF)
dan insoluble dietary fiber (IDF). Rasio SDF dan IDF yang baik dalam
makanan adalah 1:2. Lemon peel terutama tersusun oleh pectin
merupakan sumber serat yang baik bagi tubuh. Kebutuhan serat tubuh
per hari yang baik adalah 25-30 g/hari. Satu buah jeruk lemon dapat
memenuhi kebutuhan serat harian tubuh(21)
e. Essensial oils
Essensial oil adalah zat aromatik dan mudah menguap yang
terdapat pada berbagai bagian tumbuhan seperti (bunga, pucuk daun,
biji, daun, ranting, batang, herb, buah, dan akar). Komposisi utama
essensial oil jeruk lemon adalah d-lemonele (45-75%), Linalool
(0,015%), dan aldehyde-citral (trace level). Linalool dan aldehyde-
citral merupakan zat aromatik yang paling potent pada jeruk lemon.(21)
 13

f. Asam sitrat
Asam sitrat adalah asam organik yang paling banyak terdapat
pada jeruk lemon. Kandungan asam sitrat pada jeruk lemon adalah 5-6
g/100ml. Asam sitrat bermanfaat bagi orang yang sering kelelahan
karena mengurangi perasaan lelah dan bermanfaat untuk terapi
urolithiasis kalsium, dengan mengurangi proses kristalisasi kalsium
pada urin(21).
g. Karotenoid
Jeruk lemon kaya akan karotenoid yang bermanfaat sebagai
photo-oxi damage protection. Jeruk lemon yang telah matang
mengandung β-cryptoxanthin sebagai carotenoids utama yang
disimpan pada flavedo dan juice sacs(21).

2.1.1.4 Efek Antioksidan Buah Jeruk Lemon

Penelitian yang dilakukan oleh Annindya (2018) mengenai
perbedaan potensi antioksidan buah jeruk lemon dan jeruk nipis dengan
metode DPPH menunjukkan hasil pada jeruk lemon (Citrus limon) dan
jeruk nipis (Citrus aurantiifolia) diperoleh nilai IC50 pada jeruk lemon
(C.limon) 49,593μg/ml dan pada jeruk nipis 49,589 μg/ml. Uji ini
menggunakan radikal DPPH (2,2 difenil-1- pikrilhidrazil) dimana
senyawa antioksidan akan bereaksi dengan radikal DPPH melalui
mekanisme donasi atom hidrogen dan menyebabkan peluruhan warna
DPPH dari ungu menjadi kuning yang diukur pada panjang gelombang
517 nm. Parameter dari metode DPPH ini adalah nilai inhibition
concentration 50% (IC50) atau konsentrasi yang dapat meredam aktivitas
radikal bebas sebesar 50%. Suatu senyawa dikatakan memiliki aktivitas
antioksidan kelompok sangat kuat bila nilai IC50 kurang dari 50 ppm,
kelompok kuat IC50 antara 50-100 ppm, kelompok sedang jika nilai IC50
101-150 ppm, dan kelompok lemah jika nilai IC50 antara 150-200 ppm.
 14

Berdasarkan hasil tersebut menunjukkan bahwa jeruk lemon memiliki

aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 sebesar 49,593μg/ml.
Aktivitas antioksidan yang sangat kuat ini diduga dipengaruhi senyawa
fenol, senyawaan triterpena pentasiklik, vitamin C, zat warna seperti
klorofil, senyawaan sulfur, ataupun nitrogen yang dapat berperan sebagai
zat antioksidan(22)
Senyawa fenol adalah senyawa yang memiliki cincin aromatik
dengan satu atau lebih gugus hidroksil yang terikat pada atom karbon dari
cincin aromatik tersebut. Gugus hidroksil dalam fenolik berkontribusi
secara langsung terhadap aktivitas antioksidan dan memainkan peranan
penting dalam penangkapan radikal bebas karena gugus hidroksil dari
senyawa fenolik dapat mendonorkan atom hydrogen sehingga dapat
menstabilkan senyawa radikal bebas.(22)
Buah lemon juga mengandung flavonoid yang merupakan suatu
antioksidan golongan fenol yang banyak ditemukan di sayuran, buah-
buahan, kulit pohon, akar, bunga, teh, dan wine. Konstribusi flavonoid
untuk sistem pertahanan antioksidan sangat besar mengingat total asupan
harian flavonoid dapat berkisar 50-800 mg. Flavonoid bisa mencegah
kerusakan yang disebabkan oleh radikal bebas dengan beberapa cara,
salah satunya ialah memusnahkan radikal bebas secara langsung.
Flavonoid dioksidasi oleh radikal bebas, menghasilkan radikal yang lebih
stabil dan kurang reaktif. Flavonoid dapat menstabilkan senyawa oksigen
reaktif melalui reaksi dengan susunan reaktif dari radikal tersebut(14).
 15

2.1.2 Serebelum
2.1.2.1 Anatomi Serebelum
Serebelum terletak di fossa cranii posterior dan bagian
superiornya ditutupi oleh tentorium serebeli. Serebelum merupakan
bagian terbesar otak belakang dan terletak posterior dari ventriculus
quartus, pons, dan medulla oblongata. Serebelum berbentuk agak
lonjong dan menyempit pada bagian tengahnya, serta terdiri dari dua
hemispherium serebeli yang dihubungkan oleh bagian tengah yang
sempit yaitu vermis. Serebelum berhubungan dengan aspek posterior
batang otak melalui tiga berkas serabut saraf yang simetris, disebut
pedunculus cerebellaris posterior, medius, dan inferior(23).
Serebelum terbagi menjadi tiga lobus utama: lobus anterior,
lobus medius, dan lobus flocculonodularis. Lobus anterior dapat dilihat
pada permukaan superior serebelum dan dipisahkan dari lobus medius
oleh sebuah fisura yang berbentu huruf V, disebut fissure prima. Lobus
medius (kadang-kadang disebut lobus posterior) yang merupakan
bagian serebelum paling besar, terletak diantara fisura prima dan fissure
uvulonodularis. Lobus flocculonodularis terletak di posterior fisura
uvulonodularis. Fissura horizontalis yang dalam ditemukan disepanjang
pinggir serebelum dan memisahkan permukaan superior dari
permukaan inferior, tidak mempunyai arti morfologis atau fungsional
yang penting(23).

2.1.2.2 Struktur Mikroskopis Serebelum

Korteks serebelum dapat diumpamakan sebagai sebuah
lembaran besar yang berlipat lipat dan terletak pada bidang koronal
atau tranversal. Setiap lipatan atau folium terdiri dari substansia alba di
bagian dalam yang ditutupi oleh substansia grisea di bagian luarnya.
Potongan yang dibuat melalui serebelum yang sejajar dengan bidang
 16

median membagi folia menjadi bagian-bagian yang bagus untuk

dipelajari, dan bentuk potongan permukaan yang bercabang-cabang ,
disebut arbor vitae. Substansia grisea korteks di seluruh serebelum
memiliki struktur yang sama. Substansia terbagi menjadi tiga lapisan
yaitu(23):
a. Stratum granulosum yang terdiri dari sel granula kecil dengan
nukleus terpulas gelap dan sedikit sitoplasma. Di stratum
granulosum tersebar sel golgi tipe II yang lebih besar dengan
nucleus vesicular khas dan sitoplasma lebih banyak. Diseluruh
stratum granulosum terdapat ruang kosong kecil yang tersebar acak
yaitu glomeruli. Bagian ini hanya mengandung kompleks sinaps(24).
b. Stratum purkinjese dengan nukleus dan nukleolus yang mencolok
tersusun dalam satu deretan diantara stratum moleculare dan
stratum granulosum(24).
c. Stratum moleculare mengandung neuron corbiforme (basket cell)
yang tersebar dengan akson tidak bermielin yang biasanya berjalan
horizontal(24).
 17

Gambar 2 : Korteks serebelum(24)

2.1.3 Histologis Sel Purkinje

Sel purkinje secara (fungsi) khas tersusun oleh satu baris pada
pertautan antara lapisan molekular dan lapisan granular. Badan selnya besar,
berbentuk labu, menjulurkan satu atau lebih dendrit tebal yang melintasi
lapisan molekular dan granular sampai permukaan, sambil bercabang-cabang
disepanjang jalannya. Akson halus keluar dari dasar sel purkinje, melintasi
lapisan granular dan memperoleh selubung saat memasuki substansi alba(24)
Sel purkinje terletak pada lapisan ganglionare korteks serebelum yang
mempunyai fungsi untuk melakukan koordinasi yang mengatur gerakan
volunter pada setiap fungsi motoric(25). Input yang membentuk sinaps pada sel
 18

purkinje yang bersifat eksitatorik ada 2 yaitu sinaps serabut parallel-purkinje

dan sinaps serabut climbing-purkinje. Pada sinaps serabut parallel-purkinje,
serabut parallel melepaskan glutamate sebagai transmitternya. Terdapat 2
jenis potensial sinaps yang terjadi yaitu melalui reseptor AMPA dan mGluR1.
AMPA memediasi excitatory postsynaptic potensials (EPSPs) yang cepat dan
dapat dibangkitkan langsung dari impuls setiap sel granul. Sedangkan
mGluR1 memediasi EPSPs lambat dan dapat diobservasi hanya dengan
kejang singkat dari serabut parallel. Sedangkan sinap serabut climbing-
purkinje melalui transmitter glutamate menyebabkan EPSPs yang besar dan
terjadi lonjakan Ca2+ pada sel purkinje.(26)

2.1.4 Monosodium Glutamat (MSG)

2.1.4.1 Definisi MSG
Monosodium glutamate (MSG) adalah garam natrium dari
asam glutamate. Monosodium glutamate dihasilkan melalui berbagai
macam proses, yaitu proses ekstraksi dari bahan asalnya, proses
fermentasi, proses sintesis secara enzimatik, dan proses sintesis secara
kimia. Glutamat adalah asam amino alami yang ditemukan hampir
pada semua makanan, terutama makanan dengan kandungan protein
tinggi seperti produk susu, daging dan ikan, dan sayuran. Glutamat
bebas dalam makanan sehari-hari umumnya rendah, sehingga untuk
memperkuat cita rasa perlu adanya tambahan bumbu-bumbu yang
kaya kandungan glutamat bebas. Glutamat bebas tersebut bereaksi
dengan ion natrium membentuk garam MSG. Diketahui komposisi
senyawa MSG adalah 78% glutamat, 12% natrium dan 10% air(4).
 19

Gambar 3: Rumus Kimia MSG(4)

2.1.4.2 Metabolisme MSG Dalam Tubuh

Monosodium glutamat merupakan zat yang bila dilarutkan
didalam air atau saat melarut pada saliva dirongga mulut akan
terdisosiasi menjadi natrium yang bertindak sebagai kation serta
glutamat sebagai anion. Glutamat akan membuka channel Ca2+ pada
neuron yang terdapat taste bud sehingga memungkinkan Ca2+ masuk
ke dalam sel dan menimbulkan depolarisasi reseptor dan potensial aksi
yang sampai ke otak lalu diterjemahkan sebagai rasa lezat(27).
Glutamat juga diproduksi oleh tubuh manusia dan akan
berikatan dengan asam amino lainnya untuk membentuk struktur
protein. Glutamat yang diproduksi oleh neuron didalam tubuh manusia
berperan sebagai neurotransmitter. Glutamat diketahui merupakan
neurotransmitter eksitatorik utama yang terdapat di SSP pada mamalia
dan terlibat dalam berbagai aspek fungsi dari otak normal termasuk
fungsi kognisi, pembelajaran dan memori(27).
Prekursor dari neurotransmitter ini adalah glukosa, glutamin
dan atau α-ketoglutarat. Telah diketahui pula bahwa terdapat proses
uptake oleh sel glia dan neuron yang berlangsung secara aktif. Proses
 20

uptake ini akan menghentikan efek eksitatorik dari glutamat yang

dilepaskan dicelah sinaps. Sekali dilepaskan, glutamat akan dapat
bekerja pada berbagai jenis reseptor yang terdapat baik di neuron
pascasinaps, maupun di neuron presinaps(28).
Terdapat dua kelompok utama reseptor glutamat yaitu reseptor
ionotropik dan reseptor metabotropik. Reseptor ionotropik yaitu :
AMPA dan reseptor NMDA. Reseptor AMPA memediasi transmisi
sinaps eksitatorik yang berhubungan dengan voltage-independent
channels yang akan mendepolarisasi neuron melalui arus influx dari
ion-ion terutama ion Natrium. Aktivasi reseptor NMDA memberikan
efek berupa terjadinya peningkatan influx ion kalsium yang
berlangsung dalam waktu yang relatif lebih lambat namun berlangsung
lebih lama(28). Reseptor metabotropik merupakan reseptor terkait
protein G yang terdiri dari 3 kelompok yaitu : kelompok pertama
(mGluR1a,b,c dan mGluR5a,b), kelompok kedua (mGluR2,3) dan
kelompok ketiga mGluR4,6,7,8. (8)

2.1.4.3 Mekanisme Eksitotoksik MSG terhadap otak

Food and Drug Administration (FDA) menggolongkan MSG
sebagai bahan tambahan makanan generally recognized as safe
(GRAS). Federation of American Societies for Experimental Biology
(FASEB) dan World Health Organization (WHO) menyatakan MSG
aman sebagai bahan tambahan makanan. Meskipun demikian, FDA
telah menerima laporan gejala seperti nyeri kepala dan mual setelah
mengonsumsi makanan yang mengandung MSG(29). Nyeri kepala
akibat MSG diduga berhubungan dengan efek cedera sel-sel neuron di
otak, karena nosiseptor di otak sedikit, maka otak tidak
mengekspresikan nyeri. Nyeri kepala yang dihasilkan adalah akibat
inflamasi sel neuron yang meningkatkan tekanan intracranial(30).
 21

Konsumsi MSG berlebih dan konsumsi dalam jangka waktu

yang lama akan meyebabkan akumulasi glutamat dalam jumlah yang
sangat melimpah di celah sinaps (celah antara sel saraf), hal tersebut
dapat bersifat eksitotoksik bagi otak(8,31). Akumulasi glutamat terjadi
terutama pada area otak seperti korteks serebri, striatum, hipokampus,
hipotalamus, thalamus, serebelum, sistem penglihatan dan sistem
pendengaran(31). Mekanisme terjadinya eksitotoksisitas terjadi akibat
overstimulasi dari reseptor glutamat yang menginisiasi berbagai
kaskade yang berpotensi untuk menginduksi terjadinya kerusakan dan
kematian sel. Aktivasi reseptor NMDA oleh glutamat, menyebabkan
influks ion kalsium (Ca2+) dalam jumlah besar. Pada kondisi
patologis, berlebihnya influx ion calsium di intrasel, menyebabkan
terjadinya disfungsi dari mitokondria sehingga terbentuk radikal
bebas, aktivasi jalur caspase dan degradasi protein-protein intrasel(27).
 22

2.2 Kerangka Teori

Dosis MSG Air perasan jeruk lemon

(Citrus limon)

Dosis 4 mg/grBB Dosis 3,33 ml/kgBB

Dosis 6,67 ml/kgBB
Dosis 13,33 ml/kgBB

Jumlah Sel Purkinje

korteks serebelum

Gambar 4: Kerangka Teori

2.3 Kerangka Konsep

variabel bebas variabel terikat

Dosis Air perasan jeruk Jumlah sel purkinje

lemon (Citrus limon)
korteks serebelum

Gambar 5: Kerangka Konsep

 23

2.4 Hipotesis
1. Terdapat pengaruh air perasan jeruk lemon (Citrus limon) terhadap jumlah sel
purkinje korteks serebelum mencit putih jantan yang dipapar MSG.
2. Dosis air perasan jeruk lemon (Citrus limon) 13,33 ml/kgBB dosis paling
berpengaruh terhadap jumlah sel purkinje korteks serebelum mencit putih
jantan yang dipapar MSG.
 BAB III
METODE PENELITIAN

3.1 Ruang Lingkup Penelitian

Penelitian ini termasuk dalam ruang lingkup bidang Ilmu Histologi dan
Patologi Anatomi.

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Pangan dan Gizi Pusat Antar
Universitas (PAU) Universitas Gajah Mada (UGM) Yogyakarta, Laboratorium
Patologi Anatomi Universitas Gadjah Mada (UGM), Laboratorium Patologi
Anatomi Universitas Swadaya Gunung Jati (Unswagati) selama delapan bulan
dari bulan Agustus 2018- Maret 2019.

3.3 Jenis dan Rancangan Penelitian

Penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan rancangan post test
only control group design dengan menggunakan hewan percobaan sebagai
subjek penelitian.

3.4 Populasi dan sampel

3.4.1 Populasi Target
Populasi target penelitian ini adalah hewan percobaan mencit putih
jantan (Mus musculus).
3.4.2 Populasi Terjangkau.
Populasi terjangkau penelitian ini adalah mencit putih jantan (Mus
musculus) yang dipapar Monosodium Glutamat (MSG), serta
memenuhi kriteria inklusi.

24
 25

3.4.3 Sampel Penelitian

3.4.3.1 Kriteria Inklusi
a) Berat 20-40 gram
b) Jenis kelamin jantan.
c) Usia 2,5 - 3 bulan
d) Kondisi sehat yaitu aktif, mempunyai aktivitas normal dan
tidak cacat
3.4.3.2 Kriteria Eksklusi
Mencit putih jantan yang mengalami diare.
3.4.3.3 Dropout
Mencit mati saat perlakuan.
3.4.4 Cara Sampling
Penelitian ini menggunakan 5 kelompok, yaitu 2 kelompok kontrol dan
3 kelompok perlakuan dilakukan secara Simple random sampling, yaitu
pengelompokan dilakukan secara random.Kelompok penelitian ini
terdiri dari:
1. Kelompok 1 sebagai kelompok kontrol normal yaitu mencit putih
jantan (Mus musculus) yang tidak dipapar MSG dan diberi aquades
serta pakan standar
2. Kelompok 2 sebagai kelompok kontrol negatif yaitu mencit putih
jantan (Mus musculus) yang telah dipapar MSG dengan dosis 4
mg/grBB kemudian diberikan aquades dan pakan standar.
3. Kelompok 3 sebagai kelompok dosis I yaitu mencit putih jantan
(Mus musculus) yang telah dipapar MSG dengan dosis 4 mg/grBB
kemudian diberikan aquades, pakan standar dan air perasan jeruk
lemon dengan dosis 3,33 ml/kgBB.
4. Kelompok 4 sebagai kelompok dosis II yaitu mencit putih jantan
(Mus musculus) yang telah dipapar MSG dengan dosis 4 mg/grBB
 26

kemudian diberikan aquades, pakan standar dan air perasan jeruk

lemon dengan dosis 6,67 ml/kgBB
5. Kelompok 5 sebagai kelompok dosis III yaitu mencit putih jantan
(Mus musculus) yang telah dipapar MSG dengan dosis 4 mg/grBB
kemudian diberikan aquades, pakan standar dan air perasan jeruk
lemon dengan dosis 13,33 ml/kgBB
3.4.5 Besar Sampel.
Kelompok sampel dibagi menjadi 5 kelompok. Besarnya sampel
tiap kelompok ditentukan dengan rumus Federer. Bila dihitung sebagai
berikut:

(n-1)(t-1) ≥ 15 n = Jumlah sampel

(n-1)(5-1) ≥ 15 t = Jumlah kelompok
4n-4 ≥ 15
4n ≥ 19
n ≥ 4,75
Jadi jumlah sampel yang digunakan tiap kelompok adalah 5 ekor
mencit putih jantan (n>4,75). Untuk menghindari terjadinya drop out
maka sampel ditambah 10% untuk setiap kelompok dan total besar
sampel penelitian adalah 30 ekor mencit putih jantan.

3.5 Variabel Penelitian

3.5.1 Variabel Bebas (Independent)
Variabel bebas pada penelitian ini adalah dosis air perasan jeruk
lemon (Citrus limon).
3.5.2 Variabel Terikat (Dependent)
Variabel terikat pada penelitian ini adalah jumlah sel purkinje
korteks serebelum mencit putih jantan.
 27

3.6 Definisi Operasional

Tabel 2 Definisi Operasional
No Variabel Definisi Operasional Alat Ukur Hasil Ukur Skala
1 Variabel bebas: Jeruk lemon yang Timbangan Dosis I: 3,33 Nominal
Dosis air perasan diperas menggunkan ml/kgBB
jeruk lemon alat perasan jeruk, Dosis II: 6,67
(Citrus limon) setelah itu disaring ml/kgBB
kemudian ditimbang Dosis III:
sesuai dosis dan 13,33
diberikan melalui ml/kgBB
sonde/oral.
2 Variabel terikat: Intepretasi sel Hand Jumlah sel Rasio
Jumlah sel purkinje didapatkan counter purkinje per
purkinje korteks dengan menghitung lapang
serebelum mencit jumlah sel pada pandang
putih jantan. preparat korteks
serebelum mencit
putih jantan dengan
pembesaran 400x
dari 5 lapang
pandang
menggunakan
mikroskop cahaya.
 28

3.7 Cara Pengumpulan Data

3.7.1 Bahan dan Alat
3.7.1.1 Alat
Tabel 3 Alat-Alat Penelitian
Alat
Alat
Alat Pembuatan Alat Pengamatan
pemberian
perasan Preparat Preparat Histologi
oral
Histopatologi
a)penyaring a) sonde a) Gelas objek. a) Mikroskop
makanan lambung b) Gelas cahaya
b) alat penutup. binokular.
pemeras c) Rotary b) Optilab.
jeruk microtome. c) Mikrometer
d) Disposable objektif..
knife d) Hand counter
e.) Water bath.

3.7.1.2 Bahan
Tabel 4 Bahan-bahan Penelitian
Bahan
Pembuatan
Bahan Penelitian
Preparat
Histopatologi
a) Hewan coba berupa a) Formalin 10%
mencit putih jantan b) Alkohol 70 %
(Mus musculus). c) Alkohol 80 %
b) Pakan standar dan d) Alkohol 96 %
minum. e) Xylol
c) air perasan jeruk f) Paraffin.
lemon. g) Hematoxylin
d) Monosodium Eosin (HE)
Glutamat
e) Aquades.
 29

3.7.2 Prosedur Penelitian

1) Pengumpulan Sampel jeruk lemon dan monosodium Glutamat
a. Jeruk lemon
Jeruk lemon segar didapatkan dari distributor PT. Setra
Sari. Jeruk lemon yang dijadikan sampel adalah lemon yang
segar, matang, tidak terserang hama dan penyakit, serta
pencemar lainnya. Lemon yang sudah matang akan berubah
warna dari hijau menjadi kuning, beratnya sekitar 50 – 80
gram dan diameternya 5-8 cm. Sampel jeruk lemon kemudian
dibawa ke Laboratorium biologi UNNES (Universitas Negeri
Semarang) di Semarang untuk diidentifikasi dan di
determinasi.
b. Monosodium Glutamat
Monosodium Glutamat (MSG) murni yang didapatkan
dari Laboratorium Pangan dan Gizi Pusat Antar Universitas
(PAU) Universitas Gajah Mada (UGM) Yogyakarta
2) Pembuatan air perasan buah jeruk lemon dan pelarutan MSG
a. Jeruk lemon
Jeruk lemon dibersihkan dengan air mengalir hingga
bersih, kemudian ditiriskan. Selanjutnya jeruk lemon
dipotong menjadi 2 bagian. Air perasan buah jeruk lemon
diperoleh dari pemerasan buah jeruk lemon menggunakan
alat pemeras jeruk yang telah disterilkan dan dipisahkan
bijinya.
b. Pelarutan MSG
Berdasarkan referensi dosis MSG yang diberikan untuk
setiap mencit yaitu 4 mg/grBB(4) kemudian dilarutkan dalam
0,2 ml/grBB akuades dan diberikan 1 kali dalam sehari
 30

3) Pengadaptasian Mencit.
Sebelum dilakukan perlakuan kepada semua mencit
laboratorium, terlebih dahulu mencit diadaptasikan dengan
lingkungan Laboratorium Pangan dan Gizi Pusat Antar Universitas
(PAU) Universitas Gajah Mada (UGM) Yogyakarta selama tujuh
hari kemudian dilanjutkan dengan prosedur penelitian berikutnya.
4) Pemberian Monosodium Glutamat dan Air perasan jeruk lemon
a. Pemberian Monosodium Glutamat
Mencit putih jantan dipisahkan secara random menjadi
5 kelompok masing-masing terdiri dari 6 mencit. Selanjutnya
mencit akan diberikan perlakuan dengan pemberian MSG dosis
4 mg/grBB masing-masing kelompok kecuali pada kelompok
kontrol normal. Pemberian MSG dilakukan dengan cara
menyonde mencit, yaitu satu kali sehari, selama 2 minggu.
Sebagai pembanding digunakan kontrol normal yaitu tikus
yang tidak diberi MSG.
b. Pemberian Air perasan jeruk lemon
Setelah dilakukan pemaparan MSG selama 2 minggu,
selanjutnya mencit putih jantan diberi perlakuan yaitu
pemberian air perasan jeruk lemon secara oral selama 2
minggu. Kecuali pada kelompok kontrol normal dan negatif
yang hanya diberi pakan standard an aquades.
Kelompok dosis I (KDI) diberikan air perasan jeruk
lemon dosis 3,33 ml/kgBB secara oral, (KDII) diberikan air
perasan jeruk lemon dosis 6,67 ml/kgBB secara oral, dan
(KDIII) diberikan air perasan jeruk lemon dosis 13,33
ml/kgBB secara oral.
 31

5) Prosedur Pembuatan Preparat Histopatologi

Pada hari ke- 29, mencit putih jantan kemudian diterminasi
dengan metode dislokasi servikal kemudian dilakukan nekropsi
untuk mengambil sampel organ serebelum. Serebelum ditimbang
berat basahnya dan dimasukkan dalam larutan Formalin 10%
selama 24 jam kemudian disimpan dalam tabung organ,
kemudiaan sediaan tersebut dibuat menjadi preparat histopatologi,
di bagian Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas
Gajah Mada (UGM) Yogyakarta sebagai berikut ;
a. Fiksasi
Fiksasi ini dilakukan dengan cara merendam organ
serebelum di dalam larutan formalin 10% dengan pH berkisar
antara 6.5 - 7.5. Fiksasi ini dilakukan ± 24 jam.
b. Washing
Setelah kurang lebih 24 jam difiksasi kemudian
dilakukan washing (pencucian) menggunakan alkohol 70%
yang diganti berkali-kali hingga larutan fiksasi pada organ
hilang.
c. Dehidrasi
Dehidrasi menggunakan alkohol bertingkat dari
persentase rendah ke persentase tinggi (70%, 80%, 96%)
masing-masing 2 x 15 menit. Hal ini dilakukan untuk menjaga
agar tidak terjadi perubahan tiba-tiba pada sel dan jaringan.
d. Clearing
Clearing menggunakan xylol dengan membenamkan
organ pada larutan tersebut selama 2 x 15 menit.
 32

e. Impregnasi
Setelah jaringan di clearing, dilakukan impregnansi
dengan paraffin selama ± 1 jam yang dimasukkan ke dalam
oven.
f. Embedding
Setelah dilakukan impregnasi, organ tersebut
dimasukan ke dalam lempengan blok yang berisi parafin cair.
Setelah itu didinginkan pada mesin pendingin
g. Cutting
Dilakukan pemotongan kasar dan dilanjutkan dengan
pemotongan halus dengan ketebalan 4-5 mikron. Setelah
pemotongan dipilih lembaran jaringan yang paling baik,
diapungkan pada air dan dihilangkan kerutannya. Lembaran
jaringan tersebut dipindahkan ke dalam water bath selama
beberapa detik sampai mengembang sempurna. Dengan
gerakan menyendok, lembaran jaringan diambil dengan slide
bersih dan ditempatkan di tengah atau pada sepertiga atas atau
bawah, dicegah jangan sampai ada gelembung udara di bawah
jaringan.
h. Staining
Setelah jaringan melekat sempurna, dilakukan
pewarnaan dengan menggunakan pewarna Hematoxylin Eosin
(HE).
i. Mounting
Slide kemudian ditetesi dengan entelan dan ditutup
dengan cover glass
 33

6) Pengamatan Preparat Histopatologi

Preparat histopatologi diamati menggunakan mikroskop
cahaya binokuler dengan perbesaran 400x dengan alat bantu
optilab dan hand counter. Jumlah sel purkinje dihitung dalam 5
lapang pandang setiap preparatnya pada tiap-tiap kelompok
perlakuan.
 34

3.8 Alur Penelitian

30 ekor mencit

Randomsasi

Masa adaptasi subjek penelitian (7 hari)

Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok dosis

kontrol kontrol (-) dosis I (KD I) dosis II (KD II) III (KD III)
normal

Tidak dipapar Pemaparan MSG 4 mg/grBB + pakan standar + aquades

MSG

Hari ke-15

Kelompok Kelompok KD I: Pakan KD II: Pakan KD III: Pakan

kontrol kontrol (-): standar + standar + standar +
normal: Pakan Pakan aquades + Air aquades + Air aquades + Air
standar + standar + perasan lemon perasan lemon perasan lemon
aquades dosis 3,33 dosis 6,67 dosis 13,33
aquades
ml/kgBB ml/kgBB ml/kgBB

Perlakuan selama 14 hari

Hari ke- 29

Pembuatan preparat histopatologis

Pemeriksaan preparat histopatologis

Gambar 6: Alur Penelitian

 35

3.9 Analisis Data

Analisis data yang dilakukan pertama kali setelah pengamatan adalah uji
normalitas dengan uji Shapiro-Wilk karena sampel yang digunakan untuk
penelitian ini berjumlah 30 ekor mencit putih jantan (<50), bila didapatkan
distribusi data yang normal maka uji bisa dilanjutkan dengan uji beda
parametrik multivariat One Way ANOVA kemudian dilanjutkan dengan uji
homogenitas Levene Test dan uji Post hoc Bonferroni untuk mengetahui
kelompok-kelompok mana saja yang berbeda, namun jika pada uji normalitas
didapatkan data tidak berdistribusi normal maka uji yang dilakukan adalah uji
beda non-parametrik multivariat yaitu Kruskal-Wallis. True confidences uji ini
adalah 95%, sehingga jika p < 0,05 maka dapat disimpulkan terdapat pengaruh
yang bermakna.

3.10 Etika Penelitian

Penelitian ini telah mendapatkan ethical clearance No.65/EC/FK/XI/2018
dari Komite Etik Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati.
Seluruh hewan coba dirawat sesuai standar pemeliharaan binatang. Seluruh
tindakan yang bersifat invasif termasuk terminasi hewan coba dilakukan dalam
anestesi. Hal yang perlu dilaksanakan sesuai dengan animal ethics antara lain
perawatan dalam kandang, pemberian makan dan minum (ad libitum), aliran
udara dalam ruang kandang, perlakuan saat penelitian, menghilangkan rasa
sakit, pengambilan unit analisis penelitian dan tikus diterminasi dengan metode
dislokasi servikal setelah selesai penelitian.
3.10.1 Dislokasi Hewan
Hewan coba yang selesai digunakan segera di musnahkan sesuai etik
hewan percobaan yang semestinya. Cara terbaik untuk memusnahkan hewan
coba adalah teknik cervical dislocation dengan menggunakan alat-alat yang
tersedia, amat praktis dilakukan pada mencit. Dilakukan dengan cara
memisahkan tengkorak dan otak dari sumsum tulang belakang. Teknik untuk
 36

melakukan metode ini ialah dengan memberikan tekanan ke bagian posterior

tulang belakang. Bila sumsum tulang belakang terpisah dari otak, refleks kedip
menghilang, rangsangan rasa sakit menghilang(32,33).

3.11 Jadwal Penelitian

Tabel 5. Jadwal Penelitian
Waktu Penelitian
Kegiatan
Penelitian 08/ 09/ 10/ 11/ 12/ 01/ 02/ 03/
2018 2018 2018 2018 2018 2019 2019 2019
Penyusunan
Proposal
Perijinan
Proposal
Menyiapkan
Alat &
Bahan
Pelaksanaan
Penelitian
Pengadaptasian
Sampel
Pemberian
Perlakuan
Hasil
Penelitian
Penyusunan
KTI
 37

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

4.1.1 Deskripsi Penelitian
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan rancangan Post-
test Only Control Group Design yang menggunakan hewan percobaan mencit
putih jantan (Mus musculus) sebagai subjek penelitian. Hewan percobaan
diperoleh dan diberi perlakuan di Laboratorium Pangan dan Gizi PAU
Universitas Gajah Mada Yogyakarta. Pembuatan preparat histopatologi
dilakukan di Laboratorium Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas
Gajah Mada, sedangkan pembacaan preparat dilakukan di Laboratorium
Patologi Anatomi Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon.
Jumlah sampel yang digunakan adalah 30 ekor mencit putih jantan. 30
ekor mencit putih jantan (Mus musculus) dibagi menjadi 5 kelompok, yaitu
kelompok kontrol normal yang tidak diberi perlakuan, kelompok kontrol
negatif diberikan MSG 4 mg/grBB secara oral, kemudian kelompok dosis I
yang diberikan air perasan jeruk lemon dengan dosis 3,33 ml/kgBB, kelompok
dosis II yang diberikan air perasan jeruk lemon dengan dosis 6,67 ml/kgBB,
dan kelompok dosis III yang diberikan air perasan jeruk lemon dengan dosis
13,33 ml/kgBB.
Sebelum diberi perlakuan sesuai kelompok, subjek penelitian
diadaptasi selama 7 hari. Perlakuan kepada subjek penelitian dilakukan selama
28 hari dan pada hari ke – 29 subjek penelitian diterminasi dan organ serebelum
diambil untuk pembuatan preparat histopatologis. Pembacaan dan pengamatan
preparat menggunakan mikroskop binokuler dengan pembesaran 100x dan
400x.

37
 38

4.1.2 Hasil Pengamatan Mikroskopis Sel Purkinje pada Korteks Serebelum

dengan Pembesaran 100x dan 400x.

A B
a a

C D

Gambar 7. Gambaran Mikroskopis Sel Purkinje Perbesaran 400x

Keterangan : (A) Kelompok kontrol normal ; (B) Kelompok kontrol negatif. (C)
Kelompok dosis I perbesaran; (D) Kelompok dosis II; (E) Kelompok dosis III .
Tanda panah merupakan sel purkinje korteks serebelum. Pewarnaan HE.
 39

Tabel 6. Hasil rata-rata jumlah sel purkinje pada korteks serebelum dari
masing-masing kelompok perlakuan
Rerata Jumlah Sel
Kelompok Minimum Maksimum
Purkinje ± SD
Kontrol normal 13,90 ± 2,10 10,20 16,40
Kontrol negatif 12,76 ± 2,54 8,40 15,00
Dosis I 14,10 ± 1,41 12,00 16,00
Dosis II 16,73 ± 3,76 13,40 24,00
Dosis III 17,50 ± 1,20 16,00 19,40

Berdasarkan Tabel 6. didapatkan hasil bahwa dari 5 kelompok yang

terdiri dari kelompok kontrol normal , kontrol negatif yang diberi MSG 4
mg/grBB, kelompok dosis I yang diberi air perasan jeruk lemon dosis 3,33
ml/kgBB, kelompok dosis II yang diberi air perasan jeruk lemon dosis
6,67 ml/kgBB dan kelompok dosis III yang diberi air perasan jeruk lemon
dosis 13,33 ml/kgBB diketahui bahwa kelompok dosis III memiliki jumlah
rerata sel purkinje terbanyak yaitu sebesar 17,5 sel, diikuti dengan
kelompok dosis II sejumlah 16,73 sel, kemudian kelompok dosis I dengan
jumlah rerata 14,1 sel, kontrol normal menempati urutan selanjutnya
dengan jumlah rata-rata 13,9 sel dan terakhir kontrol negatif dengan rerata
jumlah sel purkinje 12,76 sel.

4.1.3 Hasil Analisa Uji Statistik Jumlah Sel Purkinje Pada Korteks
Serebelum
4.1.3.1 Uji Normalitas Jumlah Sel Purkinje Pada Korteks Serebelum
Data hasil jumlah sel purkinje diuji normalitasnya pada setiap
kelompok dengan menggunakan uji normalitas Shapirowilk. Data
terdistribusi normal apabila nilai signifikan diatas 0,05 (p > 0,05).
 40

Tabel 7. Hasil Uji Normalitas Jumlah Sel Purkinje.

Kelompok N Nilai p Keterangan
Kontrol Normal 6 0,602 Normal
Kontrol Negatif 6 0,297 Normal
Dosis I 6 0,897 Normal
Dosis II 6 0,055 Normal
Dosis III 6 0,571 Normal

Berdasarkan data penelitian pada Tabel 7. yang diuji melalui uji

Shapiro-wilk untuk jumlah sel purkinje menunjukkan bahwa semua data
terdistribusi normal, yakni nilai p> 0,05. Dengan demikian dapat
dilanjutkan uji homogenitas untuk mengetahui apakah varians berasal dari
populasi yang bersifat homogen atau tidak.
4.1.3.2 Uji Homogenitas
Berdasarkan uji homogenitas dengan Levene Test diperoleh nilai
signifikansi sebesar 0,366 >α (α = 0,05). Dengan demikian berarti data
penelitian berasal dari populasi yang homogen. Dari hasil uji normalitas
dan homogenitas dapat disimpulkan bahwa persyaratan melakukan uji
hipotesis penelitian menggunakan uji Anova telah terpenuhi.
4.1.3.3 Uji One Way Anova
Berdasarkan Uji One Way Anova, didapatkan nilai signifikan
0,009 atau <0,05 artinya paling tidak terdapat dua kelompok yang
mempunyai perbedaan rerata jumlah sel purkinje yang berbeda bermakna.
Untuk mengetahui perbedaan jumlah sel purkinje antara kelompok maka
dilanjutkan uji Post Hoc
 41

4.1.3.4 Uji Post Hoc Bonferroni

Tabel 10. Perbedaan Jumlah Sel Purkinje Antara Kelompok
Perbedaan
Kelompok Sig
Rerata
Kontrol Normal Kontrol Negatif 1,1 1,00
Dosis I -0,2 1,00
Dosis II -2,8 0,504
Dosis III -3,6 0,15
Kontrol Negatif Kontrol Normal -1,1 1,00
Dosis I -1,3 1,00
Dosis II -3,9 0,081
Dosis III -4,7* 0,021
Dosis I Kontrol Normal 0,2 1,00
Kontrol Negatif 1,3 1,00
Dosis II -2,6 0,676
Dosis III -3,4 0,208
Dosis II Kontrol Normal 2,8 0,504
Kontrol Negatif 3,9 0,081
Dosis I 2,6 0,676
Dosis III -0,7 1,00
Dosis III Kontrol Normal 3,6 0,15
Kontrol Negatif 4,7* 0,021
Dosis I 3,4 0,208
Dosis II 0,7 1,00

Berdasarkan analisis post hoc Bonferroni menunjukan terdapat

perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol negatif dan kelompok
dosis III, karena nilai p = 0,021 (p< 0,05).
 42

4.2 Pembahasan
4.2.1 Jumlah Sel Purkinje Pada Mencit Yang Diberi Air Perasan Jeruk Lemon
dan Mencit Yang Diberi Monosodium Glutamat (MSG)
Penelitian ini diperoleh bahwa rerata jumlah sel purkinje terendah
terdapat pada kelompok kontrol negatif dibandingkan dengan kelompok
kontrol normal, kelompok dosis I, kelompok dosis II, dan kelompok dosis III
dengan jumlah rerata sel berturut-turut sebanyak 13,9 sel, 14,1 sel, 16,73 sel,
dan 17,5 sel sedangkan pada kelompok kontrol negatif sebanyak 12,76 sel. Uji
statistik menunjukkan bahwa pemberian air perasan jeruk lemon dosis 3,33
ml/kgBB, 6,67ml/kgBB, dan 13,33 ml/kgBB berpengaruh secara signifikan
terhadap jumlah sel purkinje korteks serebelum mencit putih jantan yang
dipapar MSG dengan nilai p<0,05.
Penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Dani Prastiwi et al (2015)
menunjukkan bahwa pemberian MSG dosis 3.5 mg/gBB dapat mengurangi
jumlah sel purkinje pada korteks serebelum(16). Penelitian tentang efek MSG
terhadap kerusakan sel juga dilakukan oleh Onaolapo et al (2016) yang
menunjukkan bahwa pemberian MSG menyebabkan kerusakan sel saraf
secara histologis pada organ serebri, serebelum dan hipocampus. MSG
mempunyai komponen utama glutamat yang mungkin menjadi penyebab
perbedaan rerata jumlah sel purkinje pada kelompok kontrol negatif dengan
kelompok kontrol normal, kelompok dosis I, kelompok dosis II, dan
kelompok dosis III(34,35).
Monosodium glutamat (MSG) merupakan salah satu bahan aditif
sintetis yang banyak digunakan oleh manusia sebagai penyedap rasa pada
makanan. Penggunaan MSG dalam jumlah yang berlebihan dapat
mengakibatkan terjadinya stres oksidatif(35). Asam glutamat bebas yang
dihasilkan akibat konsumsi MSG sebagian akan terikat di usus dan selebihnya
akan dilepaskan kedalam darah. Asam glutamat bebas ini akan menyebar ke
seluruh tubuh, termasuk akan menembus sawar darah-otak (blood-brain
 43

barrier) melalui organ circumventricular di otak dan terikat pada reseptornya.

Selain itu peran dari glutamate transporter yang terdapat di membran kapiler
sawar darah otak membantu penyerapan glutamat ke otak(16,27).
Sel purkinje menerima 2 input glutamanergik yaitu dari climbing fiber
dan parallel fiber hal tersebut yang menjadikan sel purkinje rentan terhadap
eksotoksisistas glutamat. Akumulasi berlebih glutamat dalam celah sinap
tersebut menyebabkan overstimulasi dari reseptor A-amino-3-hydroxy-5-
methyl-4-isoxazolepropionate (AMPA) dan metabotropic glutamate receptors.
Overstimulasi reseptor glutamat tersebut menyebabkan peningkatan influx ion
kalsium (Ca2+) ke dalam sel. Hal tersebut dapat menyebabkan disfungsi
mitokondria yang menyebabkan terbentuknya radikal bebas. Terbentuknya
radikal bebas tersebut dapat memicu terjadinya kematian sel(16,27).
4.2.2 Dosis Air Perasan Jeruk Lemon Yang Paling Berpengaruh Terhadap
Jumlah Sel Purkinje Pada Korteks Serebelum
Berdasarkan hasil penelitian ini didapatkan perbedaan jumlah rerata
sel purkinje sebesar 4,73 sel antara kelompok kontrol negatif dan kelompok
dosis III yaitu kelompok yang diberi air perasan jeruk lemon dosis
13,33ml/KgBB. Perbedaan rerata sel tersebut berbeda secara signifikan
dengan nilai p<0,05. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian air
perasan jeruk lemon dosis 13,33 ml/kgBB dapat memberikan efek antioksidan
untuk mencegah terjadinya kematian sel purkinje akibat paparan monosodium
glutamat (MSG)
Penelitian sebelumnya oleh Anshori Ahmad et al (2017) menunjukkan
bahwa ekstrak kulit buah lemon memiliki aktivitas antioksidan dan mencegah
stress oksidatif pada kulit akibat paparan sinar UV B(14). Penelitian serupa
tentang efek antioksidan buah lemon oleh Zhou Tong et al (2017)(36)
menunjukkan bahwa jus lemon mempunyai efek hepatoprotektif untuk
melindungi sel hepar dari radikal bebas akibat konsumsi alkohol. Buah lemon
sangat bermanfaat untuk tubuh manusia. Buah lemon sangat kaya akan
 44

vitamin C (asam L-askorbat) yaitu antioksidan intrasel dan ekstrasel yang

paling penting bagi tubuh(14). Vitamin C yang terkandung dalam buah lemon
dapat mengurangi perosiksidasi lipid, menghambat produksi spesies oksigen
reaktif, mencegah disfungsi mitokondria dan fragmentasi DNA, serta
mengurangi neurotoksisitas, apoptosis dan kematian neuron(37).
Selain vitamin C buah lemon juga mengandung Flavonoids yang
paling banyak ditemukan pada buah lemon, 90% dari keseluruhan
komposisinya(21). Komponen flavanoid seperti eriocitrin dan hesperidin pada
jeruk lemon memiliki efektivitas antioksidan yang lebih kuat dari senyawa
flavonoid jeruk lainnya, dan juga eriocitrin berfungsi untuk melindungi sel
terhadap stres oksidatif dengan menangkal radikal bebas dan mencegah
pembentukan superoksida dan hidroperoksida. Selain itu eriocitrin dan
hesperidin dapat meningkatkan konsentrasi enzim antioksidan, seperti katalase
(CAT) dan glutathione (GSH). Selain itu, jus lemon diketahui bertindak
sebagai antioksidan kuat karena mengandung asam sitrat, vitamin E, dan
lemonades. Semua unsur biologis pada buah lemon yang disebutkan
sebelumnya telah terbukti berfungsi sebagai antioksidan untuk mencegah
kematian sel dan kerusakan jaringan oleh radikal bebas(38).
CARI KEMAMPUAN SEL PURKINJE UNTUK MEREGENERASI
DAN EFEK LEMON TERHADAP REGENERASI SEL PURKINJE.!!!!
4.3 Keterbatasan Penelitian
Penelitian ini tidak dilakukan penghitungan jumlah sel purkinje pada
kelompok kontrol negatif setelah pemaparan monosodium glutamat (MSG)
selama 14 hari. Penelitian ini tidak dilakukan pengujian terhadap bahan aktif,
sehingga tidak diketahui kadar bahan aktif yang memberikan efek yang
diinginkan.
 47

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan
1. Air perasan jeruk lemon (Citrus limon) dosis 3,33 ml/kgBB, 6,67 ml/kgBB,
dan 13,33 ml/kgBB berpengaruh terhadap lebih banyaknya jumlah sel
purkinje pada korteks serebelum mencit putih jantan yang dipapar MSG (p =
0,009).
2. Air perasan jeruk lemon (Citrus limon) dosis 13,33 ml/kgBB merupakan dosis
yang paling berpengaruh terhadap lebih banyaknya jumlah sel purkinje pada
korteks serebelum mencit putih jantan yang dipapar MSG dengan rerata
jumlah sel purkinje paling tinggi diantara dosis lainnya yaitu sebesar 17,5 sel
(p = 0,021).

5.2 Saran
1. Perlu dilakukan penghitungan jumlah sel purkinje pada kelompok kontrol
negatif setelah 14 hari pemaparan MSG.
2. Perlu dilakukan penelitian lanjutan untuk mengetahui pengaruh zat aktif
murni yang terdapat dalam air perasan jeruk lemon.

47
 48

DAFTAR PUSTAKA

1. Rochimiwati SN, Sukmawati, Budiman. Pengetahuan Penggunaan

Monosodium Glutamate (MSG) Ibu Rumah Tangga. 2016; 22 :28-32.
[diunduh 8 Agustus 2018]. Tersedia dari :
http://mediagizipangan.org/pengetahuan-penggunaan-monosodium-glutamate-
msg-ibu-rumah-tangga/
2. IHS (Information Handling Services). Chemical Economics handbook:
monosodium glutamate (MSG); 2015. [diakses 8 Agustus 2018]. Tersedia dari:
https://www.ihs.com/products/monosodium-glutamate-chemical-economics
handbook.html.
3. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. Riset Kesehatan Dasar
(RISKESDAS) 2013. [diunduh 14 Agustus 2018]. Tersedia dari:
http://www.depkes.go.id/resources/download/general/Hasil%20Riskesdas%20
2013.pdf
4. Yonata A, Iswara I. Efek Toksik Konsumsi Monosodium Glutamate. 2016.
[diunduh 7 Agustus 2018]. Tersedia dari:
http://juke.kedokteran.unila.ac.id/index.php/majority/article/view/1044
5. Onaolapo OJ. Acute Low Dose Monosodium Glutamate Retards Novelty
Induced Behaviours in Male Swiss Albino Mice. J Neuroscience and
Behavioral Health. 2011;3(4):51-56. [diakses 15 Oktober 2018]. Tersedia dari:
https://academicjournals.org/journal/JNBH/article-stat/945BE684730
6. Settiawati FSN. Dampak Penggunaan Monosodium Glutamat (MSG) terhadap
Kesehatan Lingkungan. ORBITH. 2008;4(3):453-459.
7. DU S. Human Physiology an Integrated Approach. 5th ed. San Fransisco:
Pearson Benjamin Cummings; 2010.
8. Ardyanto TD. MSG dan Kesehatan : Sejarah, Efek dan Kontroversinya. MSG
dan Kesehat Sejarah, Efek dan Kontroversinya. 2004;1:52-56. [diunduh 8
Agustus 2018]. Tersedia dari:
 49

https://eprints.uns.ac.id/713/1/MSG_dan_Kesehatan_Sejarah%2C_Efek_dan_
Kontroversinya.pdf
9. Erdmann NB, Whitney NP. Potentiation of Excitotoxicity in HIV-1 Associated
Dementia and The Significance of Glutaminase. Clin Neurosci Res Elsevier.
2006;6(5):132-142.[diunduh 15 Oktober 2018]. Tersedia dari:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1832112/
10. Guyton & Hall J. Text Book of Medical Physiology. 12th ed. Saunders
Philadelphia. 2011.
11. Eweka A, Iniabohs FO. Histological Studies Of The Effects Of Monosodium
Glutamate On The Cerebellum Of Adult Wistar Rats. 2007;5(2):1-5.[diunduh
28 Agustus 2018]. Tersedia dari: https://print.ispub.com/api/0/ispub-
article/11727
12. Krisnawan AH, Budiono R, Sari DR, Salim W. Potensi Antioksidan Ekstrak
Kulit dan Perasan Daging Buah Lemon (Citrus limon) Lokal dan Impor. Pros
SEMNASTAN. 2018;0(0):30-34. [diunduh 14 Agustus 2018]. Tersedia dari:
https://jurnal.umj.ac.id/index.php/semnastan/article/view/2255
13. Aziztama R. The Influence of The Granting of Vitamin C Against Histologic
Previev of Brain Adult Male Mice’s (Mus musculus L) That Induced
Monosodium Glutamate. 2012. [diunduh 14 Agustus 2018]. Tersedia dari:
http://digilib.unila.ac.id/9732/
14. Anshori AM, Wiraguna AAGP, Penyakit D. Pemberian Oral Ekstrak Kulit
Buah Lemon (Citrus limon) Menghambat Peningkatan Ekspresi MMP-1
(Matrix Metaloproteinase-1) dan Penurunan Jumlah Kolagen Pada Tikus Putih
Galur Wistar Jantan (Rattus norvegicus) yang Dipajan Sinar UV-B. 2017;5:3-
7. [diunduh 14 Agustus 2018]. Tersedia dari:
https://www.neliti.com/publications/68325/pemberian-oral-ekstrak-kulit-
buah-lemon-citrus-limon-menghambat-peningkatan-eksp
15. Aminuddin M, Partadiredja G SD. The Effects of Black Garlic (Allium
 50

sativum L.) Ethanol Extract on The Estimated Total Number of Purkinje Cells
and Motor Coordination of Male Adolescent Wistar Rats Treated with
Monosodium Glutamate. Anat Sci Int. 2015;90(2):75-81. [diakses 15 Oktober
2018]. Tersedia dari: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24737450
16. Prastiwi D. Pengaruh Pemberian Monosodium Glutamat terhadap Koordinasi
Motorik dan Jumlah Sel Purkinje Cerebellum Tikus Wistar (Rattus norvegicus)
Jantan Remaja. 2015. [diakses 15 Oktober 2018]. Tersedia dari:
http://etd.repository.ugm.ac.id/index.php?mod=penelitian_detail&sub=Peneliti
anDetail&act=view&typ=html&buku_id=75494&obyek_id=4.
17. Zulfiani, Syafruddin I, Salomo H. Pengaruh Pemberian Vitamin C dan E
Terhadap Histologis Ginjal Mencit (Mus musculus L.) yang di Pajankan
Monosodium Glutamat (MSG). Saintia Biol. 2013;1:2-7. [diunduh 26 Agustus
2018]. Tersedia dari:
http://jurnal.usu.ac.id/index.php/sbiologi/article/view/1307.
18. Yohanes Adi Wijaya. Daya Analgesik Sari Buah Jeruk Lemon (Citrus limon
(L) Burm. F. pada Mencit Putih Betina. 2008.
19. Budiana NS. Buah Ajaib Tumpas Penyakit. Jakarta: Penebar Swadaya; 2013.
20. Manners GD. Citrus limonoids: analysis, bioactivity, and biomedical
prospects. J Agric Food Chem. 2007;55(21):8285-8294.[diakses 15 Oktober
2018]. Tersedia dari: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17892257
21. Monila GE, Perles RD, Monero DA VC. Natural Bioactive Compounds of
Citrus limon for Food and Health. J Pharm Biomed Anal. 2010;51(11):327-
345. [diakses 15 Oktober 2018]. Tersedia dari:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19748198
22. Anindya NP, Atik Ki LB. Screening Fitokimia, Aktivitas Antioksidan dan
Antimikroba pada Buah Jeruk Lemon (Citrus limon) dan Jeruk Nipis (Citrus
aurantiifolia). J Ilm Ibnu Sina. 2018;3(1):64-76. [diunduh 15 Agustus 2018].
Tersedia dari: http://jiis.akfar-isfibjm.ac.id/index.php/JIIS/article/view/126
23. Snell R. Neuroanatomi Klinik. 7th ed. Jakarta: EGC; 2015.
 51

24. Eroschenko V. Atlas Histologi DiFiore Dengan Korelasi Fungsional. 11th ed.
Jakarta: EGC; 2014.
25. Llinas, R. & Negrello MN. Cerebellum. Scholarpedia. 2015;10(1):4606.
26. Ito M. Cerebellum : The Brain for An Implicit Self. Pearson Educ New Jersey.
2012.
27. Razali R. Monosodium Glutamat (MSG) dan Efek Neurotoksisitasnya Pada
Sistem Saraf Pusat. 2015:159-168. [diunduh 8 Agustus 2018]. Tersedia dari:
conference.unsyiah.ac.id/TIFK/1/paper/view/779/74.
28. Garattini S. International Symposium on Glutamate : Keynote Presentation
Glutamic Acid , Twenty Years Later 1. 2018;:901-909.
29. He K, Du S, Xun P, Sharma S WH. Consumption of Monosodium Glutamat in
relation to incidence of overweight in Chinese adults : China Health and
Nutrition Survey (CHNS). Am J Clin Nutr. 2011;93(6):1328-1336. [diakses 15
Oktober 2018]. Tersedia dari:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21471280
30. Husarova V, Ostatnikova D. Monosodium Glutamate Toxic Effects and Their
Implications for Human Intake: A Review. JMED Res. 2013;2013:1-12.
doi:10.5171/2013.608765. [diakses 8 Agustus 2018]. Tersedia dari:
https://www.feingold.org
31. Halomoan S, Hesanto M DP. Pengaruh Pemberian Monosodium Glutamat
peroral terhadap Degenerasi Neuron Piramidal CA1 Hipokampus pada Tikus
Wistar. Medica Hosp. 2013;2(1):50-53. [diunduh 15 Agustus 2018]. Tersedia
dari: https://medicahospitalia.rskariadi.co.id/index.php/mh/article/view/67
32. Ridwan E. Etika Pemanfaatan Hewan Percobaan dalam Penelitian Kesehatan. J
indon Med Assoc. 2013;3:112-116. [diakses 16 Oktober 2018]. Tersedia dari:
http://docshare01.docshare.tips/files/30994/309947046.pdf
33. Leary, S., Underwood, W., Anthony, R., & Cartner S. AVMA Guidelines for
the Euthanasia of Animals: 2013 Edition. Am Vet Med Assoc. 2013.
doi:https://doi.org/10.1016/B978-012088449-0.50009-1. [diunduh 16 Oktober
 52

2018]. Tersedia dari:

https://www.avma.org/KB/Policies/Documents/euthanasia.pdf
34. Onalopo OJ, Onalopo AY, Akanmu MA, Gbola O. Evidence of Alterations in
Brain Structure and Antioxidant Status Following 'Low Dose' Monosodium
Glutamate Ingestion. Pathophysiology.2016;23(3):147-156.
35. Anindita R, Soeprobowati TR, Suprapti NH. Potensi Teh Hijau (Camelia Sinensis
L.) Dalam Perbaikan Fungsi Hepar Pada Mencit Yang Diinduksi Monosodium
Glutamat (MSG). Buletin Anatomi dan Fisiologi.2011;20(2): 15-23
36. Zhou T, Zhang Y, Xu D, et al. Protective Effects of Lemon Juice on Alcohol-
Induced Liver Injury in Mice. Biomed Research International. 2017:1-8
37. Ataie A,Shadifar M, Ataee R. Review Paper: Polyphenolic Antioxidant and
Neural regeneration. Basic Clin Neurosci. 2016;7(2): 81-90
38. Quita SM. Evaluation of lemon fruit extract as an antioxidant agent against
histopathological changes induced by cyclophosphamide in the testes of albino
mice. Electron physician. 2016;8(1): 1824-1831. doi: 10.19082/1824
 53

LAMPIRAN 1

ETHICAL CLEARANCE
 54

LAMPIRAN 2

SURAT KESBANGPOL CIREBON

 55

LAMPIRAN 3
SURAT KESBANGPOL YOGYAKARTA
 56

LAMPIRAN 4

SURAT PENELITIAN
 57

LAMPIRAN 5

SURAT LABORATORIUM BIOMEDIS FK UNSWAGATI

58
 59

LAMPIRAN 6
 60

HASIL PERHITUNGAN RERATA JUMLAH SEL PURKINJE

No. Total
No Kelompok Preparat Lapang Pandang Rerata Rerata
1 2 3 4 5
1 Kontrol Normal 1 11 16 18 14 16 15 13,9
2 13 14 18 13 15 14,6
3 6 9 10 11 15 10,2
4 17 12 10 7 20 13,2
5 8 19 16 14 13 14
6 15 14 19 18 16 16,4
2 kontrol Negatif 1 10 12 13 9 13 11,4 12,76
2 12 15 12 17 19 15
3 13 10 15 18 19 15
4 12 12 10 15 15 12,8
5 7 8 22 11 22 14
6 7 10 10 6 9 8,4
3 Dosis I 1 11 8 10 12 19 12 14,1
(3,33 ml/kgBB) 2 12 13 12 15 28 16
3 14 16 14 12 15 14,2
4 16 12 13 21 11 14,6
5 12 11 13 11 18 13
6 10 14 18 20 12 14,8
4 Dosis II 1 35 20 13 29 23 24 16,73
(6,67 ml/kgBB) 2 20 11 14 14 20 15,8
3 16 12 17 18 10 14,6
4 16 30 13 14 12 17
5 19 13 15 14 17 15,6
6 16 11 12 8 20 13,4
5 Dosis III 1 18 18 21 18 14 17,8 17,5
(13,33ml/kgBB) 2 22 19 13 12 14 16
3 20 23 17 21 16 19,4
4 18 20 14 16 14 16,4
5 15 19 20 13 21 17,6
6 18 20 14 17 20 17,8
LAMPIRAN 7
 61

UJI ANALISA STATISTIK JUMLAH SEL PURKINJE

Case Processing Summary

lemonjuice Cases

Valid Missing Total

N Percent N Percent N Percent

normalcontrol 6 100,0% 0 0,0% 6 100,0%

negativcontrol 6 100,0% 0 0,0% 6 100,0%

cellofpurkinje Dose I 6 100,0% 0 0,0% 6 100,0%

Dose II 6 100,0% 0 0,0% 6 100,0%

Dose III 6 100,0% 0 0,0% 6 100,0%

Descriptives

Lemonjuice Statistic Std. Error

Mean 13,9000 ,85907

95% Confidence Interval for Lower Bound 11,6917

Mean Upper Bound 16,1083

5% Trimmed Mean 13,9667

Median 14,3000

Variance 4,428

normalcontrol Std. Deviation 2,10428

Minimum 10,20
cellofpurkinje
Maximum 16,40

Range 6,20

Interquartile Range 2,90

Skewness -1,085 ,845

Kurtosis 1,905 1,741

Mean 12,7667 1,03976

negativcontrol 95% Confidence Interval for Lower Bound 10,0939

Mean Upper Bound 15,4395
 62

5% Trimmed Mean 12,8852

Median 13,4000

Variance 6,487

Std. Deviation 2,54689

Minimum 8,40

Maximum 15,00

Range 6,60

Interquartile Range 4,35

Skewness -1,120 ,845

Kurtosis ,723 1,741

Mean 14,1000 ,57677

95% Confidence Interval for Lower Bound 12,6174

Mean Upper Bound 15,5826

5% Trimmed Mean 14,1111

Median 14,4000

Variance 1,996

Dose I Std. Deviation 1,41280

Minimum 12,00

Maximum 16,00

Range 4,00

Interquartile Range 2,35

Skewness -,347 ,845

Kurtosis -,233 1,741

Mean 16,7333 1,53507

95% Confidence Interval for Lower Bound 12,7873

Mean Upper Bound 20,6794

5% Trimmed Mean 16,5148

Dose II Median 15,7000

Variance 14,139

Std. Deviation 3,76014

Minimum 13,40

Maximum 24,00
 63

Range 10,60

Interquartile Range 4,45

Skewness 1,889 ,845

Kurtosis 4,027 1,741

Mean 17,5000 ,49193

95% Confidence Interval for Lower Bound 16,2354

Mean Upper Bound 18,7646

5% Trimmed Mean 17,4778

Median 17,7000

Variance 1,452

Dose III Std. Deviation 1,20499

Minimum 16,00

Maximum 19,40

Range 3,40

Interquartile Range 1,90

Skewness ,379 ,845

Kurtosis ,249 1,741

Tests of Normality

lemonjuice Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

normalcontrol ,203 6 ,200* ,933 6 ,602

negativcontrol ,190 6 ,200* ,886 6 ,297

cellofpurkinje Dose I ,195 6 ,200* ,971 6 ,897

Dose II ,305 6 ,085 ,797 6 ,055

Dose III ,235 6 ,200* ,929 6 ,571

*. This is a lower bound of the true significance.

a. Lilliefors Significance Correction
 64

Test of Homogeneity of Variances

Cellofpurkinje

Levene Statistic df1 df2 Sig.

1,128 4 25 ,366

ANOVA
Cellofpurkinje

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 97,573 4 24,393 4,279 ,009
Within Groups 142,507 25 5,700
Total 240,080 29

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons
Dependent Variable: cellofpurkinje

(I) lemonjuice (J) lemonjuice Mean Difference Std. Error Sig. 95% Confidence Interval
(I-J) Lower Bound Upper Bound

negativcontrol 1,13333 1,37844 1,000 -3,1098 5,3764

Dose I -,20000 1,37844 1,000 -4,4431 4,0431

Normalcontrol
B Dose II -2,83333 1,37844 ,504 -7,0764 1,4098
o Dose III -3,60000 1,37844 ,150 -7,8431 ,6431
n normalcontrol -1,13333 1,37844 1,000 -5,3764 3,1098
f
Dose I -1,33333 1,37844 1,000 -5,5764 2,9098
eNegativcontrol
Dose II -3,96667 1,37844 ,081 -8,2098 ,2764
r
Dose III -4,73333* 1,37844 ,021 -8,9764 -,4902
r
o normalcontrol ,20000 1,37844 1,000 -4,0431 4,4431

n negativcontrol 1,33333 1,37844 1,000 -2,9098 5,5764

Dose I
i Dose II -2,63333 1,37844 ,676 -6,8764 1,6098

Dose III -3,40000 1,37844 ,208 -7,6431 ,8431

Dose II normalcontrol 2,83333 1,37844 ,504 -1,4098 7,0764
 65

negativcontrol 3,96667 1,37844 ,081 -,2764 8,2098

Dose I 2,63333 1,37844 ,676 -1,6098 6,8764

Dose III -,76667 1,37844 1,000 -5,0098 3,4764

normalcontrol 3,60000 1,37844 ,150 -,6431 7,8431

negativcontrol 4,73333* 1,37844 ,021 ,4902 8,9764

Dose III
Dose I 3,40000 1,37844 ,208 -,8431 7,6431

Dose II ,76667 1,37844 1,000 -3,4764 5,0098

negativcontrol 1,13333 1,34874 ,996 -3,7240 5,9907

Dose I -,20000 1,03473 1,000 -4,0357 3,6357

Normalcontrol
Dose II -2,83333 1,75910 ,795 -9,5904 3,9237

Dose III -3,60000 ,98995 ,065 -7,3844 ,1844

normalcontrol -1,13333 1,34874 ,996 -5,9907 3,7240

Dose I -1,33333 1,18902 ,970 -5,9091 3,2424

Negativcontrol
Dose II -3,96667 1,85406 ,472 -10,8290 2,8956
T Dose III -4,73333* 1,15027 ,042 -9,3131 -,1535
a
normalcontrol ,20000 1,03473 1,000 -3,6357 4,0357
m
negativcontrol 1,33333 1,18902 ,970 -3,2424 5,9091
hDose I
Dose II -2,63333 1,63985 ,818 -9,4754 4,2087
a
Dose III -3,40000* ,75807 ,012 -6,1224 -,6776
n
e normalcontrol 2,83333 1,75910 ,795 -3,9237 9,5904

negativcontrol 3,96667 1,85406 ,472 -2,8956 10,8290

Dose II
Dose I 2,63333 1,63985 ,818 -4,2087 9,4754
Dose III -,76667 1,61197 1,000 -7,6823 6,1489

normalcontrol 3,60000 ,98995 ,065 -,1844 7,3844

negativcontrol 4,73333* 1,15027 ,042 ,1535 9,3131

Dose III
Dose I 3,40000* ,75807 ,012 ,6776 6,1224

Dose II ,76667 1,61197 1,000 -6,1489 7,6823

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

 66

LAMPIRAN 8

DOKUMENTASI PELAKSANAAN PENELITIAN

A. Proses Adaptasi Subjek Penelitian

 67

B. Pemberian Pakan Untuk Subjek Penelitian

 68

C. Proses Pembedahan Subjek Penelitian

D. Sampel Organ Otak Subjek Penelitian

 69

E. Preparat Organ Serebelum

 70

F. Pengamatan Preparat
 71

LAMPIRAN 9
BIODATA PENELITI

Nama Lengkap : I Gusti Ayu Novita Afsari

Jenis Kelamin : Perempuan
Tempat Tanggal Lahir: Denpasar, 24 Januari 1997
NIM : 115170026
Fakultas : Pendidikan Dokter
Agama : Hindu
No. Hp : 085738701140
Email : novitachingu24@gmail.com
Alamat Asal : Br. Tambak Sari Kapal Mengwi, Badung, Bali
Alamat Sekarang : Jl. Binawan IV Kecamatan Kesambi Kelurahan Sunyaragi
Kota Cirebon
Riwayat Pendidikan : TK Kumarasthana Kapal
SDN 2 KAPAL
SMPN 2 MENGWI
SMAN 1 DENPASAR
72