Anda di halaman 1dari 2

Abstract

Penerapan teknik hyphenated HPLC dari LC-MS, LC-NMR dan pelarut-eliminasi LC-IR
ditunjukkan oleh identifikasi produk degradasi antibiotik sefalosporin generasi ketiga,
cefpodoxime proxetil, dalam keadaan padat, formulasi obat dan larutan. Berat molekul dan
informasi fragmen diperoleh dengan LC-MS, dan informasi struktural terperinci dikonfirmasi
oleh LC-NMR. Informasi tentang gugus fungsi karboksil yang diperoleh dengan pelarut-
eliminasi LC-IR berguna untuk konfirmasi hidrolisis ester. Produk degradasi berhasil
diidentifikasi tanpa proses isolasi atau pemurnian yang rumit.

Analisis HPLC
Pemisahan tersebut dilakukan dengan kolom analitik untuk kromatografi fase terbalik, RP8
Symmetry Shield, ukuran partikel 3,5􏰀m, diameter dalam 3,9mm dan panjang 15cm
(Waters, Milford, MA, USA), dan campuran air. , asetonitril dan asam format (700: 300: 0,5,
v / v / v) sebagai fase gerak. Kolom dijaga pada suhu konstan 40◦C, dan fase gerak dikirim
pada laju aliran 1,0 ml min − 1. Aliquot 10 􏰀l larutan sampel disuntikkan ke dalam sistem dan
deteksi dilakukan pada UV 250 nm.

Analisis LC – MS
Sistem LC-MS yang dilengkapi dengan sumber ionisasi electrospray digunakan dan
dioperasikan dalam mode positif. Tegangan kapasitor ditetapkan pada 4,5 kV. Nitrogen
disediakan untuk gas selubung pada tekanan 70 psi dan gas tambahan pada laju aliran 40
unit acak. Kapiler yang dipanaskan dipertahankan pada suhu 200 ◦C. Untuk penentuan MS /
MS, argon digunakan sebagai gas tumbukan, dan medan magnet sel gas disesuaikan hingga
2 mT. Pemisahan HPLC dilakukan dalam kondisi yang sama seperti yang digunakan untuk uji
HPLC, kecuali untuk ukuran kolom dan laju aliran fase gerak. Kolom analitik, RP8 Symmetry
Shield, 3,5 inm dalam ukuran partikel, diameter dalam 2,1 mm dan panjang 15 cm, dan
campuran air, asetonitril dan asam format (700: 300: 0,5, v / v / v) sebagai fase gerak
dengan laju alir 0,2 ml − 1 digunakan. Alikuot 2 solutionl dari larutan sampel menjadi
sasaran analisis.

Analisis LC – NMR
Sistem NMR terhubung ke sistem HPLC, dan HPLC dioperasikan menggunakan fase gerak
yang dibuat dengan pelarut terdeuterasi D2 O, CD3 CN dan asam format dalam
perbandingan 700: 300: 0,5 (v / v / v) dan analitik kolom, RP8 Symmetry Shield, ukuran
partikel 3,5 􏰀m, diameter dalam 3,9 mm, dan panjang 15 cm. Konsentrasi larutan sampel
ditingkatkan menjadi 1,0 mg ml-1 dan volume injeksi antara 50 dan 100l digunakan.
Spektrum 1 H NMR direkam dalam mode berhenti-aliran pada suhu konstan

Anda mungkin juga menyukai